Xpert 技术对痰液和纤支镜洗液标本中结核分枝杆菌检测价值

目的 评价GeneXpert MTB/RIF（Xpert）技术在肺结核病实验室诊断中的应用价值。方法 收集2018年1月—12月苏州市第五人民医院收治的疑似肺结核患者标本566份,其中痰标本421份,纤支镜洗液145份,分别采用Xpert 法、荧光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法、结核培养法进行检测,收集数据,分析比较Xpert 技术在检测结核分枝杆菌时的敏感度和特异度,并与结核培养结果做比较,评价Xpert技术的检测效能。结果 对痰标本的检测,Xpert 技术、荧光定量PCR法、痰涂片法、结核培养法检测的阳性率分别为36.8%、24.0%、19.0%、32.1%;对纤支镜洗液标本的检测,四种检测方法的阳性率分别为54.5%、33.1%、12.4%、41.4%,可见Xpert 技术的阳性检出率明显高于其他三种检测方法。以培养法作为金标准,Xpert 方法检测痰标本的敏感性和特异性分别为77.0%和82.2%,阳性预测值和阴性预测值分别为67.1%和88.3%,符合率为80.5%,Kappa值为0.57。Xpert 方法检测纤支镜洗液标本的敏感性和特异性分别为93.3%和72.9%,阳性预测值和阴性预测值分别为70.9%和93.9%,符合率为81.4%,Kappa值为0.633。结论 Xpert 技术在检测结核分枝杆菌时具有较高的敏感性和特异性,能显著提高结核病的诊断效率,在肺结核的早期诊断、早期治疗等方面具有较高的临床应用价值。     

Xpert MTB/RIF对初治涂阴肺结核支气管肺泡灌洗液检测的研究

目的 探讨Xpert MTB/RIF检测支气管肺泡灌洗液对初治涂阴肺结核的早期快速诊断价值。方法 对南通市第六人民医院2015年6月—2018年1月连续三次痰涂片阴性的疑似初治肺结核住院患者332例,在抗结核治疗前行支气管镜检查,收集支气管肺泡灌洗液（Bronchoalveolar lavage fluid,BALF）,行结核分枝杆菌涂片、BACTEC MGIT960快速培养及Xpert MTB/RIF检测,比较三种方法的阳性率,并分别以培养阳性及临床诊断为标准,计算Xpert MTB/RIF诊断涂阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结果 共有279例初治涂阴肺结核和53例非肺结核患者入组,279例初治涂阴肺结核的BALF检测结核分枝杆菌涂片、BACTEC MGIT960快速培养及Xpert MTB/RIF阳性率分别为2.51%、25.81%及50.90%,Xpert MTB/RIF阳性率明显高于涂片法及培养法,差异有统计学意义。以MGIT960培养阳性为标准,Xpert MTB/RIF诊断初治涂阴肺结核的敏感度为98.61%（71/72),特异度为100%（53/53）;阳性预测值为100.00%（71/71）,阴性预测值98.15%（53/54)。以临床诊断为标准,Xpert MTB/RIF诊断初治涂阴肺结核的敏感度为50.9%（142/279),特异度为100%（53/53）。阳性预测值为100%（142/142）,阴性预测值27.89%（53/190)。以DST 结果为金标准,Xpert MTB/RIF 检测利福平耐药的敏感度、特异度分别为 87.5％,98.44％,Xpert MTB/RIF与 DST两种方法检测利福平耐药的一致率达到 97.22％。且检测完成时间仅需2 h。结论 BALF中Xpert MTB/RIF检测敏感度、特异度均较高且能判断是否对利福平耐药,对初治涂阴肺结核有较大的早期快速诊断价值。     

Xpert MTB/RIF试验检测结核分枝杆菌及其耐药性研究

目的 探讨利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(Xpert MTB/RIF)在检测结核分枝杆菌(M.tubercutosis,MTB)及其利福平耐药性方面的应用价值.方法 收集151例疑似结核患者标本,分别进行液体变色培养基培养、涂片镜检、传统比例法药敏试验以及Xpert MTB/RIF试验检测,分析Xpert MTB/RIF试验检测MTB及其耐药性的敏感度和特异度.结果 以液体变色培养基培养试验作为金标准,Xpert MTB/RIF试验检测MTB的敏感度和特异度分别为75.8％(25/33)和79.7％(94/118),两者一致性好(K=0.472).以传统比例法药敏试验为金标准,Xpert MTB/RIF试验检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为80.0％(4/5)和89.3％(25/28),两者一致性好(K=o.595).结论 Xpert MTB/RIF试验检测MTB及其耐药性具有较高的灵敏度和特异度.     

结核分枝杆菌/利福平耐药基因联合结核感染T细胞斑点检测在耐药结核性胸膜炎中的应用价值

目的 探讨结核分枝杆菌/利福平耐药基因检测（Xpert MTB/RIF）联合结核感染T细胞斑点检测（T-SPOT.TB）对耐药性结核性胸膜炎诊断及治疗的价值。方法 选取2014年1月至2019年12月河北省胸科医院收治的62例结核性胸膜炎患者为结核性胸膜炎组,选择同期来河北省胸科医院院救治的非结核性胸膜炎患者60例为对照组。分析比较两组一般资料,留取两组胸腔积液样本进行Xpert MTB/RIF、T-SPOT.TB、结核菌培养+药敏等检测,胸腔积液结核菌培养阳性作为诊断结核性胸膜炎的金标准。结果 Xpert MTB/RIF、T-SPOT.TB、两种方法并联检测结核性胸膜炎的灵敏度分别为79.0%、88.7%、96.8%,特异度分别为90.0%、81.7%、95.0%,均明显高于ADA及抗酸染色诊断的敏感度及特异度,差异有统计学意义（P均<0.05）。以结核菌药敏检测为金标准,Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度为89.47%,两者一致性较好（Kappa=0.900）。结论 Xpert MTB/RIF联合T-SPOT.TB检测提高了结核性胸膜炎诊断的敏感度和特异度,降低误诊率,同时Xpert MTB/RIF可快速检测出胸水中耐利福平的结核分枝杆菌感染,有利于耐药结核性胸膜炎的早期诊断及治疗。     

五种检测方法在艾滋病合并结核双重感染诊断中的价值

目的探讨抗酸染色涂片法(AFS)、MGIT960液体培养法、结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测体系[(GeneXpert MTB/RIF)X检测法(Xpert MTB/RIF)]、结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)及结核抗体(TB-Ab)方法在艾滋病合并结核诊断中的价值。方法对67例艾滋病合并结核患者分别进行AFS、MGIT960液体培养、Xpert MTB/RIF检测、T-SPOT.TB及TB-Ab检测。结果 AFS、MGIT960液体培养、Xpert MTB/RIF、T-SPOT.TB和TB-Ab 5种检测方法的阳性检出率分别为34.5%、59.7%、65.7%、74.6%和25.4%。以MGIT960液体培养为标准,Xpert MTB/RIF和T-SPOT.TB的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值以及Kappa值分别为95.0%、81.5%、88.4%、91.7%、0.78和87.5%、44.4%、70.0%、70.6%、0.34。以液体药敏为标准,Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度为88.9%,特异度为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为96.7%,Kappa值为0.92。结论 Xpert MTB/RIF与其他4种方法相比具有简便快速、敏感性高、特异性强等优势,是临床艾滋病合并结核双重感染快速诊断的有效方法。     

利福平耐药结核分枝杆菌实时荧光定量核酸扩增检测技术在肺结核中的诊断探讨

目的研究分析在肺结核以及利福平耐药的诊断中采用利福平耐药结核分枝杆菌实时荧光定量核算扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)的临床诊断价值。方法选取2017年1月至2018年1月我院收治的130例疑似肺结核及可疑耐药结核的病患,收集病患的痰液标本,采用液体培养、抗酸染色涂片、Xpert MTB/RIF进行检测,将临床最终诊断结果作为金标准,分析对比三种检验方法检测结核分枝杆菌的特异度以及敏感度;以液体培养结果作为金标准,分析Xpert MTB/RIF对利福平耐药的检测特异度及敏感度。结果以临床最终诊断结果作为金标准,XpertMTB/RIF检验结核分枝杆菌的敏感度与液体培养相比,差异无统计学意义(P0.05),而Xpert MTB/RIF检验结核分枝杆菌的敏感度明显高于抗酸染色涂片(P0.05);以液体培养结果作为金标准,Xpert MTB/RIF诊断利福平耐药的敏感度为92.3%,特异度为98.6%。结论在肺结核以及利福平耐药的诊断中采用Xpert MTB/RIF,可对结核分枝杆菌以及利福平耐药性进行准确、快速的检测,且有着较高的诊断敏感度,临床应用价值较高,值得推广。     

四种检测方法在结核病诊断中的比较

目的 比较分析MGIT960液体培养法、结核/非结核分枝杆菌核酸检测(PCR-荧光探针法)、Xpert MTB/RIF和直接涂片镜检在结核病诊断中的应用。方法 收集我院2019年5～12月临床上疑似为结核病患者的各类标本。将疑似结核病患者2天内所有的标本混匀后进行直接涂片镜检,然后平均分装为3份,进行MGIT960液体培养、PCR-荧光探针法和Xpert MTB/RIF。结果 2019年5～12月间总共收集了我院710份疑似结核病患者的各类标本。直接涂片镜检、PCR-荧光探针法、MGIT960液体培养和Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌的阳性率分别为12.0%、18.7%、21.4%和24.8%。以临床诊断作为参考标准时,直接涂片法、PCR-荧光探针法、MGIT960液体培养和Xpert MTB/RIF检出结核分枝杆菌的灵敏度分别为40.2%、60.3%、78.4%和70.1%,而特异度分别为98.6%、96.9%、100.0%和92.2%,且四种方法组间比较均具有统计学差异。结论 四种临床检测方法在结核病诊断中各有优缺点,联合应用可以更好的诊断、治疗和监测结核病。     

不同类型标本中GeneXpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌及其利福平耐药性的分析

目的 分析比较不同类型标本中GeneXpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌及其利福平耐药性的效能,评价GeneXpert MTB/RIF在肺及肺外结核诊断中的应用价值。方法 以2019年1月1日—2020年12月31日西安市胸科医院7 687例BACTEC MGIT 960培养（简称“960液体培养”）阳性的标本为研究对象。以960液体培养为金标准,评价GeneXpert MTB/RIF在不同类型标本中检测结核分枝杆菌效能;以微孔板法药敏试验为金标准,评价GeneXpert MTB/RIF在不同类型标本中检测利福平耐药性的效能。结果 GeneXpert MTB/RIF在痰标本、肺泡灌洗液、浆膜腔积液、脓液及组织中检测出结核分枝杆菌的阳性率分别为：75.1%（653/869）、82.1%(1 093/1 332)、57.3%(110/192)、80.0%(60/75)、77.3%（34/44）,差异具有统计学意义（χ²=64.100,P<0.001）;以微孔板法药敏试验为金标准,GeneXpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌利福平耐药性的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别为：95.3%、95.2%、74.9%、99.3%、0.81;以微孔板法药敏试验为金标准,在痰标本、肺泡灌洗液、浆膜腔积液、脓液及组织标本中GeneXpert MTB/RIF检测利福平耐药性的灵敏度、特异度、Kappa值分别为：94.6%、95.1%、0.83;95.1%、95.2%、0.78;100%、97.3%、0.89;100%、92.3%、0.73;100%、90.9%、0.86。结论 GeneXpert MTB/RIF在痰标本、肺泡灌洗液、浆膜腔积液、脓液及组织标本中检测结核分枝杆菌均有较高的灵敏度,可作为检测结核分枝杆菌的有效方法;GeneXpert MTB/RIF在痰标本、肺泡灌洗液、浆膜腔积液（包含胸水、腹水、脑脊液）、脓液及组织标本中检测结核分枝杆菌利福平耐药性准确度较高。     

活动性肺结核诊断中应用支气管肺泡灌洗液Xpert法检测的临床价值

目的 探讨活动性肺结核诊断中应用支气管肺泡灌洗液利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术（Xpert MTB/RIF试验）的临床价值。方法 回顾性分析2019年9月至2022年10月河南省济源市人民医院收治的78例肺结核患者的临床资料,对所有患者均进行支气管肺泡灌洗液及痰液标本Xpert法、直接涂片抗酸染色法、荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测、分枝杆菌培养鉴定药敏系统（BACTEC MGIT 960）培养法。对比4种检测方法检测78份电子支气管镜灌洗液的结果,以BACTEC MGIT 960培养作为诊断的金标准,分析涂片抗酸染色法、Xpert法、荧光定量PCR检测的诊断效能,对比Xpert法检测电子支气管镜灌洗液与痰液阳性率。结果 78例肺结核患者中,涂片抗酸染色法、BACTEC MGIT 960培养法、荧光定量PCR检测,以及Xpert法检测的阳性率分别为25.6%、51.3%、38.5%、57.7%,联合检测的阳性率为66.7%,BACTEC MGIT 960培养法、荧光定量PCR检测、Xpert法检测的阳性率均比涂片抗酸染色法高,且Xpert法检测的阳性率比荧光定量PCR检测的阳性率...     

Xpert MTB/RIF与传统方法在肺结核病诊断中的对比

目的 评价Xpert MTB/RIF在肺结核病诊断中的应用价值。方法 选取2016年1月—2018年5月陕西省结核病防治研究所和汉中市第二人民医院就诊的300例肺结核可疑症状者作为研究对象,同时应用痰涂片镜检、固体培养、比例法固体药敏试验、Xpert MTB/RIF对所有研究对象的同一份痰样本进行检测。计算并比较3种方法的阳性检出率。以临床诊断结果为标准,比较痰涂片镜检法、固体培养法和Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）的效能;以固体比例法药敏试验结果为标准,评价Xpert MTB/RIF检测利福平耐药性的效能。结果 在唾液痰标本中,Xpert MTB/RIF的阳性检出率为43.87%（43/98）,显著高于痰涂片镜检法的11.22%（11/98）和固体培养法的29.59%（29/98）,差异均有统计学意义（χ²=26.17,P<0.001;χ²=4.30,P=0.04）;在涂阴肺结核病患者中,Xpert MTB/RIF的阳性检出率为61.00%（61/100）,显著高于固体培养法的37.00%（37/100）,差异有统计学意义（χ²=11.53,P=0.001）。以临床诊断为标准,Xpert MTB/RIF的灵敏度和特异度分别为78.57%（154/196）、96.15%（100/104）,Kappa值为0.69。Xpert MTB/RIF的灵敏度显著高于痰涂片镜检法的48.97%（96/196）和固体培养法的63.27%（124/196）,差异均有统计学意义（χ²=37.15,P<0.001;χ²=11.13,P=0.001）。以固体比例法药敏试验结果为标准,Xpert MTB/RIF的灵敏度和特异度分别为78.26%（18/23）、98.12%（99/101）,Kappa值为0.80。结论 与传统方法相比Xpert MTB/RIF具有较高的灵敏度、特异度和阳性检出率,可用于肺结核病的早期快速诊断。     

Xpert MTB／RIF 系统快速检测结核分枝杆菌及利福平耐药性研究

目的：探讨 Xpert MTB/RIF 快速检测系统在结核病诊断及利福平耐药性检测中的价值。方法收集2012年12月－2013年12月在新疆医科大学第一附属医院和乌鲁木齐市胸科医院住院的疑似肺结核患者312例的痰液标本,同时进行涂片抗酸杆菌检查和用罗氏固体培养基进行结核杆菌培养,用比例法进行药物敏感性试验,并用 Xpert MTB/RIF 系统进行结核分枝杆菌 DNA 及利福平耐药性检测,结果312例痰液标本中,涂片和培养均阳性的124例患者 XpertMTB/RIF 检测的敏感度为94．3％（117/124）,涂片阴性而培养阳性者的敏感度为92．8％（26/28）,涂片阴性而符合临床标准者 XpertMTB/RIF 检测的敏感度为47．6％（10/21）,与培养结果比较, XpertMTB/RIF 检测的总敏感度为94．1％（143/152）;增加检测的次数（2次检测）可将灵敏度提高到98．7％％;对非结核病患者 XpertMTB/RIF 检测的特异度为99．3％（138/139）。与比例法相比,Xpert MTB/RIF 检测利福平耐药的灵敏度为90．9％（10/11）,特异度为99．3％（140/141）。除涂片阴性者外,Xpert MTB/RIF 半定量检测结果与涂片结果有较好的一致性。结论Xpert MTB/RIF 系统检测结核分枝杆菌及利福平耐药性具有较高的临床应用价值,且方法简便、快速。     

GeneXpert MTB/RIF在检测系统性自身免疫病合并肺结核患者中的应用

目的 评价GeneXpert MTB/RIF系统在诊断系统性自身免疫病（SAD）合并肺结核（MTB）患者中的应用价值。方法 对临床诊断和影像学检查确诊的350例系统性自身免疫病合并肺结核患者和50例系统性自身免疫病非结核对照组患者的痰标本进行GeneXpert MTB/RIF检测,评价GeneXpert MTB/RIF诊断性能,并与结核菌培养、T-SPOT法、抗酸涂片染色法等比较,判断优劣以及半定量检测结核菌的效能。以结核菌液体药敏法为标准,分析GeneXpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度和特异度。结果 GeneXpert MTB/RIF、结核菌培养、T-SPOT法、抗酸涂片染色法4种方法检测的灵敏度分别为95.14%、84.00%、89.71%和56.86%,特异度分别为100.00%,92.00%,84.00%,100.00%。GeneXpert MTB/RIF系统灵敏度与T-SPOT比较差异无统计学意义（χ² =4.21,P>0.05）,高于抗酸涂片染色法（χ² =36.60,P<0.05）。GeneXpert MTB/RIF检测利福平(RIF)耐药性的灵敏度为86.00%,特异度为90.56%。结论 GeneXpert MTB/RIF与传统的MGIT960液体培养、T-SPOT法和抗酸涂片染色法等联合,可显著提高合并肺结核系统性自身免疫病结核病的检出率。     

Xpert MTB/RIF和LPA对肺结核病诊断价值的比较

目的 评价Xpert MTB/RIF和线性探针技术（line probe assay, LPA）对肺结核病的诊断价值。方法 选取2016年1月—2018年3月陕西省结核病防治研究所和汉中市第二人民医院就诊的258例肺结核可疑症状者作为研究对象,应用痰涂片镜检法、固体培养法、Xpert MTB/RIF、LPA对所有研究对象的同一份痰样本进行检测,结合受试者工作特征 (receiver operation characteristic, ROC)曲线进行分析比较。分别以临床诊断和痰涂片镜检+固体培养结果为标准,比较Xpert MTB/RIF和LPA对肺结核病的诊断效能;以固体比例法药敏试验结果标准,比较Xpert MTB/RIF和LPA检测利福平耐药性的效能。结果 在涂阴培阴组中,Xpert MTB/RIF对结核分枝杆菌阳性检出率（20.00%）显著高于LPA阳性检出率（11.03%）,差异有统计学意义（P=0.04）。以临床诊断结果为金标准,Xpert MTB/RIF和LPA的ROC曲线下的面积（area under curve, AUC）分别为0.874、0.846,AUC差异无统计学意义。以痰涂片镜检法、固体培养法结果为标准,Xpert MTB/RIF和LPA的AUC分别为0.882、0.927,AUC差异有统计学意义（P=0.02）。以固体比例法药敏试验结果为标准,Xpert MTB/RIF和LPA检测利福平耐药性的AUC分别为0.889、0.909,AUC差异无统计学意义。结论 Xpert MTB/RIF和LPA对于肺结核病均具有较好的辅助诊断价值,Xpert MTB/RIF对于菌阴肺结核有更高的阳性检出率。     

Comparison of Two Molecular Assays For Detecting Smear Negative Pulmonary Tuberculosis

Objective To compare the performance of MTBDRplus V2 and Xpert MTB/RIF for detecting smear negative pulmonary tuberculosis (PTB).
Methods Clinical PTB suspects were enrolled consecutively in Anhui Chest Hospital and Xi’an Chest Hospital from January to December in 2014. The sputum samples of smear negative PTB suspects were collected and decontaminated. The sediment was used to conduct MTBDRplus V2, Xpert MTB/RIF and drug susceptibility test (DST). All the samples with discrepant drug susceptibility result between molecular methods and phenotypic method were confirmed by DNA sequencing.
Results A total of 1973 cases were enrolled in this study. The detection rates ofMycobacterium tuberculosiscomplex (MTBC) by MTBDRplus V2 and Xpert MTB/RIF were 27.67% and 27.98%, respectively. When setting MGIT culture result as a gold standard, the sensitivity and specificity of MTBDRplus V2 were 86.74% and 93.84%, and the sensitivity and specificity of Xpert MTB/RIF were 86.55% and 93.43%, respectively. For the detection of the resistance to rifampin, the sensitivity and specificity of MTBDRplus V2 were 94.34% and 96.62%, and the sensitivity and specificity of Xpert MTB/RIF were 88.68% and 95.96%, respectively. For the detection of the resistance to isoniazid, the sensitivity and specificity of MTBDRplus V2 were 77.38% and 98.02%, respectively.
Conclusion MTBDRplus V2 and Xpert MTB/RIF can be used to detect MTBC in smear negative samples with satisfactory performance.     

实时荧光核酸恒温扩增检测技术对痰标本中结核分枝杆菌的诊断价值*

目的 评估实时荧光核酸恒温扩增检测（SAT）技术对痰标本中结核分枝杆菌（MTB）的诊断价值。方法 收集确诊为活动性肺结核（PTB）的115例和无证据显示为活动性PTB的67例总计182例患者的痰液标本,采用集菌涂片法、罗氏培养法、PCR荧光探针法及Xpert MTB/RIF法及SAT法进行检测,分析对比检测结果。结果 SAT法检测PTB患者MTB的检出率为40.00%,与罗氏培养法的检出率（40.87%）比较,差异无统计学意义（P?>0.05）。以罗氏培养法为标准,SAT法敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为95.74%（95% CI：0.8975,0.10174）,98.53%（95% CI：95.59%,101.46%）,0.9783（95% CI：0.9345,0.1022）,0.9710（95% CI：0.9304,0.1012）和0.94。其中阳性预测值高于Xpert MTB/RIF法,各指标均优于PCR荧光探针法。ROC曲线结果显示SAT法AUC为0.936。结论 SAT法检测MTB敏感性、特异性和准确度较高,操作简单,检测周期短,其检测结果可以作为临床诊断参考。