唾液腺粘液表皮样癌组织P-gp单克隆抗体JSB-1及GST-π抗体的检测

目的　探讨唾液腺粘液表皮样癌耐药性产生的机制 ,以便有针对性地采取逆转措施提高综合治疗中化疗的效果。方法　选取四川大学华西口腔医院口腔颌面外科 1995～ 2 0 0 0年 4 0例术前未经任何治疗的唾液腺粘液表皮样癌标本 ,采用免疫组化ABC法 ,进行P_gp单克隆抗体JSB_1的检测 ,同时对其中 10例进行了GST_π的检测。结果　JSB_1表达阳性率为 6 7 5 % (2 7 4 0 ) ,与分化程度相关 ,高分化组和中分化组均高于低分化组 (P <0 0 5 ) ,高分化组和中分化组之间无统计学差异 (P >0 0 5 )。GST_π表达阳性率为 90 % (9 10 )。两种抗体的表达在唾液腺粘液表皮样癌组织中的表达无统计学差异 ,亦无相关性。结论　JSB_1及GST_π与唾液腺粘液表皮样癌产生耐药的机制有关 ,为开展其耐药性的研究提供了靶标。     

抑癌基因PTEN、p27及Ki-67在涎腺粘液表皮样癌中的表达

目的　检测抑癌基因PTEN、p2 7及Ki 6 7在涎腺粘液表皮样癌中的表达 ,并探讨其意义。方法　采用免疫组织化学SP法对 31例涎腺粘液表皮样癌的PTEN、p2 7和Ki 6 7表达进行检测 ,并作统计学分析。结果　PTEN、p2 7表达在高分化组粘液表皮样癌的阳性率分别为 88 89%、94 4 4 % ,低分化组分别为 5 3 85 %、4 6 15 % ;Ki 6 7增殖指数在高、低分化组间分别为 (5 18± 2 97) %、(10 38± 3 6 5 ) % ,三者在高低分化组间均有统计学差异 (P <0 0 5 ) ;PTEN和p2 7的表达呈正相关 (rs=0 4 4 5 ,P <0 0 5 ) ,p2 7和Ki 6 7的表达呈负相关 (rs=- 0 4 2 3,P <0 0 5 )。结论　涎腺粘液表皮样癌中 ,PTEN、p2 7和Ki 6 7的表达水平与其组织分化程度有关     

增殖细胞核抗原和Bcl-2蛋白在粘液表皮样癌中的表达及其意义

目的：探讨PCNA、Bcl-2蛋白在粘液表皮样癌中的表达及其相互联系。方法：对33例手术切除的粘液表皮样癌组织标本进行免疫组化染色，结果：24例粘液表皮样癌均显示PCNA阳性，低分化组的PCNA表达较高分化组高（P＜0．05）。Bcl-2为弱阳性表达，高分化组的Bcl-2表达较低分化组高，二组之间的Bcl-2阳性表达水平差异显著性（P＜0．05）。XFYW：PCNA与Bcl-2无明显关系。     

唾液腺黏液表皮样癌组织中分化抑制因子-1和血小板反应蛋白-1的表达

目的探讨不同恶性程度的唾液腺黏液表皮样癌组织中分化抑制因子- 1（Id- 1）、血小板反应蛋白- 1（TSP- 1）的表达情况及相互关系。方法以不同恶性程度的唾液腺黏液表皮样癌和正常唾液腺组织为材料,采用免疫组化SP法检测正常唾液腺组织以及高分化、中分化和低分化黏液表皮样癌组织中Id- 1、TSP- 1基因的表达情况。结果Id- 1和TSP- 1在正常唾液腺中的阳性表达率明显低于在黏液表皮样癌组织中的阳性表达率（P值分别为0.000和0.013）。在中分化和低分化黏液表皮样癌组织中Id- 1的蛋白表达率明显高于高分化黏液表皮样癌（P值分别为0.001和0.002）,而Id- 1在中分化和低分化黏液表皮样癌组织中的蛋白表达率差异无统计学意义（P>0.05）。在低分化黏液表皮样癌组织中TSP- 1的蛋白表达率明显低于高分化黏液表皮样癌（P=0.014）,而TSP- 1在中分化和低分化黏液表皮样癌组织中的蛋白表达率差异无统计学意义（P>0.05）,在中分化和高分化黏液表皮样癌组织中的蛋白表达率差异无统计学意义（P>0.05）。TSP- 1的表达与Id- 1呈负相关（r=- 0.394,P=0.002）。结论TSP- 1的表达可能抑制黏液表皮样癌的发生,而Id- 1的表达则可能促进黏液表皮样癌的发生,二者之间呈负相关。     

p16和nm23基因在唾液腺肿瘤中表达的研究

目的　探讨p16和nm23基因在唾液腺良、恶性肿瘤中的表达情况及与唾液腺肿瘤发生之间的关系。方法　用免疫组织化学SABC法检测39例正常唾液腺和唾液腺肿瘤存档石蜡标本中P16蛋白和nm23蛋白的表达。结果　P16和nm23蛋白阳性表达主要见于细胞浆及细胞核,呈棕黄色。在正常唾液腺中,二者阳性表达率均为100% (4/4)。在良性和恶性唾液腺肿瘤中,P16蛋白阳性表达率分别为76·9%(10/13)和40·9%(9/22),良恶性之间P16蛋白表达差异有统计学意义(P<0·05);nm23蛋白阳性率分别为84·6%(11/13)和45·5%(10/22),良恶性之间亦有统计学意义(P<0·05)。唾液腺肿瘤中P16与nm23表达之间无相关性。结论　p16和nm23基因在唾液腺肿瘤发生中可能分别起着不同的重要作用,其表达下降可能有利于唾液腺恶性肿瘤的形成。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子表达与唾液腺肿瘤侵袭性的关系

目的:检测唾液腺肿瘤组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)的表达和定位,探讨其与唾液腺肿瘤侵袭性生物学行为的关系。方法:采用免疫组织化学方法,检测9例唾液腺正常组织、28例多形性腺瘤(PA)、25例黏液表皮样癌(MC)、33例腺样囊性癌(ACC)中EMMPRIN的表达和定位。采用SPSS10.0软件包进行多个样本率间的χ2检验或确切概率分析。结果:EMMPRIN在正常唾液腺组织、多形性腺瘤、黏液表皮样癌、腺样囊性癌的表达阳性率分别为11.11%、53.71%、84.00%和90.91%(P<0.05)。在正常唾液腺组织的表达主要见于导管上皮细胞的细胞膜;EMMPRIN蛋白在多形性腺瘤、黏液表皮样癌、腺样囊性癌的表达见于肿瘤细胞的胞膜或胞质。腺样囊性癌嗜神经现象组中,EMMPRIN表达的阳性率高于无嗜神经现象组,但差异无统计学意义。结论:EMMPRIN的表达与唾液腺肿瘤侵袭性生物学行为密切相关。     

影响唾液腺粘液表皮样癌患者术后生存的临床病理因素分析

目的　探讨影响唾液腺粘液表皮样癌患者术后生存的临床病理因素。方法　回顾经首次手术治疗且有完整随访资料的唾液腺粘液表皮样癌患者 70例的临床资料 ,对各项指标采用乘积限法 (Kaplan-Meier)估计各时点的生存率 ,同时进行序检验 (Logranktest)各组间差异 ,最后进入Cox比例风险模型 (CoxRegression)做多因素分析。全部资料通过SPSS软件完成。结果　 70例唾液腺粘液表皮样癌患者 ,术后 3、5、1 0年生存率分别为 90 6 6 %、88 85 %、86 6 3%。肿瘤直径小于等于 4cm、术前区域淋巴结无转移、临床处于早期 (Ⅰ、Ⅱ期 )、高分化、术后无复发和转移的患者生存期明显长于肿瘤直径大于 4cm、术前区域淋巴结有转移、临床晚期 (Ⅲ、Ⅳ期 )、低分化、术后出现复发及转移的患者。结论　TNM分类、临床分期、分化程度以及术后有无复发和转移是影响唾液腺粘液表皮样癌患者术后生存的重要因素.     

涎腺粘液表皮样癌中Caveolin-1、PCNA的表达及意义

目的：研究Caveolin-1、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）在涎腺粘液表皮样癌中的表达,分析二者的关系及其与肿瘤生物学行为间的关系。方法：采用SP免疫组化技术检测75例涎腺粘液表皮样癌标本及20例正常涎腺组织中Caveolin-1、PCNA的表达,并行统计学分析。结果：Caveolin-1在20例正常涎腺组织中均呈阳性表达。Caveolin--1表达下调与病程短、病理级别及临床分期的增高有关,短病程组和长病程组间（42．1％VS67．6％）、低分化和高分化组问（38．5％VS63．3％）、Ⅲ＋IV期和I＋Ⅱ期组间（33．3％VS64．7％）比较差异有统计学意义（P〈O．05）。PCNA随着病理级别和临床分期的增高阳性表达率升高,低分化和高分化组间（33．38土11．98VS20．12士10．13）、HI＋IV期和I＋Ⅱ期组间（29．45土12．89VS22．49士11．73）比较差异有统计学意义（P〈O．05）。Caveolin--1与PCNA的表达呈负相关（rs－0．28,P－0．017）。Caveolin--1表达降低及PCNA表达增高与肿瘤复发显著相关（P〈O．05）。结论：Caveolin-1的表达对粘液表皮样癌细胞增殖起抑制作用,Caveolin--1是影响粘液表皮样癌发生发展的重要因素之一。     

mTOR/eIF-4EBP1信号通路在粘液表皮样癌发生中的作用

目的 :研究mTOR/eIF -4EBP1信号通路的激活在粘液表皮样癌发生中的作用。方法 :用RT -PCR方法及Westen印迹分析测定粘液表皮样癌中mTOR和 4EBP1的表达。结果 :RT -PCR与Westen印迹分析的结果一致 :和正常组织相比 ,粘液表皮样癌中mTOR的表达明显增加 ,4EBP1的表达明显降低。结论 :口腔粘液表皮样癌中mTOR的表达增加和 4EBP1的表达明显降低可能是介导粘液表皮样暴发生的主要机制之一。     

涎腺粘液表皮样癌中P53基因表达的研究

目的 探讨Ｐ５３基因在涎腺粘液表皮样癌发生中的作用和意义。方法 采用免疫组织化学方法对４０例涎腺粘液表皮样癌中的表达进行观察。结果 低分化粘液表皮样癌过度表达Ｐ５３基因,阳性表达率为４２．１％,高分化粘液表皮样癌不表达Ｐ５３。经统计学分析表明,高、低分化肿瘤之间差异有显著性。结论 高、低分化的粘液表皮样癌发生时在癌基因激活方面存在差异。Ｐ５３基因突变可能在低分化粘液表皮样癌的发生中具有重要意义。Ｐ     

Dnmt1和Dnmt3b在唾液腺黏液表皮样癌中的表达及意义

目的： 探讨DNA 甲基转移酶（DNA methyltransferase, Dnmt）在唾液腺黏液表皮样癌（mucoepidermoid carcinoma,MEC）中的表达及意义。方法： 选取2010 年1 月—2013 年9 月间中国医科大学附属盛京医院口腔颌面外科手术切除的唾液腺术后的标本43例,正常唾液腺组织17例,应用免疫组织化学和蛋白免疫印迹（Western blot）方法检测正常组织及MEC组织中Dnmt1和Dnmt3b 的表达。采用SPSS22.0软件包对数据进行统计学分析。结果： Dnmt1在MEC组织中的阳性表达率为37.21%,与正常唾液腺组织的17.65%相比,差异无显著性（P>0.05）;Dnmt3b在MEC组织中的阳性表达率为83.72%,显著高于正常唾液腺组织的11.76%（P<0.01）;但两者的高表达与临床病理参数之间无显著相关性（P>0.05）。结论： Dnmt3b在唾液腺MEC 的发生中可能发挥一定作用。     

抑癌基因PTEN在涎腺癌组织中的表达

目的:研究PTEN在正常涎腺组织及涎腺癌中的表达及意义。方法:应用免疫组化S鄄P法分别检测8例正常涎腺组织,24例粘液表皮样癌,26例腺样囊性癌中PTEN蛋白的表达。结果:PTEN蛋白在正常涎腺组织及涎腺癌中表达率分别为87.5%、22%,差异有显著性意义(P﹤0.05)。PTEN在高、中分化组粘液表皮样癌高表达率为35.3%,低分化组为28.5%,差异无显著性意义(P>0.05)。腺样囊性癌中PTEN蛋白表达率低于粘液表皮样癌,差异有显著性意义(P﹤0.05)。结论:提示PTEN蛋白与涎腺癌的发生、发展密切相关,PTEN蛋白表达与涎腺癌组织类型有相关性,而与组织学分级无明显相关性。     

黏液表皮样癌中β-连环素和细胞周期蛋白D1表达的相关性研究

目的检测黏液表皮样癌组织中β-连环素(catenin)和细胞周期蛋白(cyclin)D1的表达。方法采用免疫组化SP法检测30例黏液表皮样癌组织中β-catenin、cyclinD1的表达。结果β-catenin在正常涎腺组织中主要分布于涎腺导管上皮、腺泡上皮和肌上皮细胞。cyclinD1在正常涎腺组织中无表达。黏液表皮样癌组织β-catenin10例(33.3%)呈正常膜表达,20例(66.7%)β-catenin胞质和(或)胞核内异位表达;黏液表皮样癌组织中16例(53.3%)呈cyclinD1过度表达。β-catenin呈正常膜表达的10例中,2例(20.0%)呈现cyclinD1过度表达;而β-catenin呈异常表达的20例中,14例(70.0%)cyclinD1过度表达。黏液表皮样癌β-catenin的异常表达与cyclinD1的过度表达呈正相关性(P<0.05)。结论β-catenin的异常表达可能通过促使或激活cyclinD1的过度表达导致黏液表皮样癌的发生和发展。     

涎腺肿瘤组织TN－CmRNA和CDgmRNA的表达及其意义

目的：探讨Tenascin-C（TN－C）mRNA和CD9mRNA在涎腺肿瘤的表达及其对涎腺肿瘤鉴别诊断的价值。方法：采用原位杂交技术检测10例正常涎腺组织、25例多形性腺瘤（PA）、25例腺样囊性癌（ACC）、20例黏液表皮样癌（MEC）、10例腺泡细胞癌（ACCa）中TN-CmRNA和CD9mRNA的表达。结果：TN-CmRNA在正常涎腺组织中呈阴性表达;CD9mRNA在正常涎腺组织中的阳性率为100％;TN-CmRNA、CD9mRNA在4种涎腺肿瘤中均有表达,TN-CmRNA在多形性腺瘤中的阳性表达率显著高于腺样囊性癌和黏液表皮样癌,差异具有统计学意义,而在多形性腺瘤与腺泡细胞癌中的表达差异无统计学意义。CD9mRNA在多形性腺瘤中的阳性表达率高于腺样囊性癌,差异有统计学意义,而在多形性腺瘤和黏液表皮样癌、腺泡细胞癌中的表达差异无统计学意义;在多形性腺瘤中TN-CmRNA和CD9mRNA的表达呈正相关,在腺样囊性癌、黏液表皮样癌和腺泡细胞癌中TN—CmRNA和CD9mRNA的表达无相关性。结论：TN-CmRNA和CD9mRNA与涎腺肿瘤的发生有一定相关性,对涎腺肿瘤之间的鉴别诊断有一定意义。     

Expression of PLUNC family members in benign and malignant salivary gland tumours

Objectives: The aim of this study was to determine the expression of PLUNC proteins in benign and malignant salivary gland tumours and thus their potential use as diagnostic and / or prognostic tools. Materials and methods: A tissue microarray was assembled from 64 salivary gland tumours including adenoid cystic carcinoma, carcinoma ex‐pleomorphic adenoma, mucoepidermoid carcinoma, polymorphous low‐grade adenocarcinoma, pleomorphic adenoma, acinic cell carcinoma, myoepithelial carcinoma and papillary cystadenocarcinoma. Clinicopathological data were collected retrospectively and immunohistochemical analysis of three PLUNC proteins (SPLUNC1, SPLUNC2 and LPLUNC1) was performed. Immunoreactivity was assessed as positive or negative. Results: PLUNC expression was only found in mucoepidermoid carcinomas and papillary cystadenocarcinoma; all other tumours studied were negative. Mucin plugs, mucous and intermediate cells of mucoepidermoid carcinomas were positive for LPLUNC1 and SPLUNC2, but areas composed of epidermoid and clear cells were negative for all PLUNCs. Papillary cystadenocarcinoma was positive for all PLUNCs. No correlation was found with tumour grade or outcome. Conclusions: Intense expression of two PLUNC proteins in mucous cells and mucin plugs of mucoepidermoid carcinoma and papillary cystadenocarcinoma indicate that they could be used as additional diagnostic tools in some equivocal cases, but further studies are needed to understand the biological processes involved in PLUNC expression.     

转化生长因子β1及Ki-67核抗原在涎腺黏液表皮样癌中的表达和意义

目的 研究转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Ki-67核抗原在涎腺黏液表皮样癌(mucoepidermoid carcinoma,MEC)中的表达和意义.方法 应用免疫组织化学SP法检测20例涎腺多形性腺瘤(pleomorphic adenoma,PA)、45例涎腺MEC(29例高分化、16例中低分化)组织中TGF-β1和Ki-67核抗原的表达.结果 涎腺MEC中TGF-β1(39/45)、Ki-67核抗原(43/45)的表达高于PA,差异有统计学意义(P＜0.05);TGF-β1在中低分化MEC中的表达(16/16)高于高分化MEC(23/29)及PA(12/20),差异有统计学意义(P＜0.05),而TGF-β1在高分化MEC(6/23)与PA(8/12)中的表达差异无统计学意义(P＞0.05);在MEC中Ki-67核抗原的表达随TGF-β1表达增强而上升(P＜0.05),二者呈显著正相关(r=0.55,＜0.001).结论 TGF-β1的高表达在涎腺MEC的分化及恶性增殖过程中可能起重要作用.

Abstract：

Objective To investigate the expression and significance of transforming growth factor-β1 (TGF-β1)and Ki-67 nuclear antigen in salivary gland mucoepidermoid carcinoma. Methods The expression of TGF-β1 and Ki-67 nuclear antigen in 20 cases of salivary gland pleomorphic adenoma and 45 cases of mucoepidermoid carcinoma were detected by the streptavidin-peroxidase immunohistochemical method. Results Expression of TGF-β1 (39/45) and Ki-67 nuclear antigen (43/45) in mucoepidermoid carcinoma was significantly higher than in pleomorphic adenoma ( P ＜ 0.05 ). TGF-β1 expression was significantly higher in moderately/poorly differentiated mucoepidermoid carcinoma ( 16/16 ) than that in well differentiated mucoepidermoid carcinoma (23/29) and pleomorphic adenoma (12/20) ( P ＜ 0.05 ), but not different between well differentiated mucoepidermoid carcinoma (6/23) and pleomorphic adenoma (8/12)(P ＞ 0.05 ). The expression of Ki-67 was increased with the increment of TGF-β1 expression in mucoepidermoid carcinoma (P ＜ 0.05 ). Conclusions The high expression of TGF-β1 may play an important role in cell differentiation and malignant proliferation of mucoepidermoid carcinoma.     

桩蛋白在涎腺黏液表皮样癌中的表达

目的:探讨桩蛋白(paxillin)在涎腺黏液表皮样癌中表达的意义。方法:采用HE染色方法筛选典型病例与免疫组织化学方法分析21例黏液表皮样癌中paxillin的表达。结果:paxillin在正常涎腺组织的基底膜、腺管部位有弱阳性表达,在黏液表皮样癌中有强阳性表达,其强弱程度与病理分级存在相关性(r=0.75,P<0.01),染色强度与染色面积评分之和与病理分级存在相关性(r=0.93,P<0.01),在肿瘤浸润前沿表达显著。结论:在涎腺黏液表皮样癌中paxillin表达强弱程度与病理分级密切联系,癌症浸润前沿表达情况可以为临床治疗提供参考。     

增殖细胞核抗原和Ki-67抗原在涎腺癌中的表达

目的:探讨细胞增殖核抗原和Ki-67抗原在不同类型涎腺癌中的表达及意义。方法:采用SABC和LSAB免疫组化法分别检测PCNA和Ki-67在17例粘液表皮样癌、12例腺样囊性癌、9例恶性多形性腺瘤中的表达和分布。结果:1)PCNA及Ki-67的增殖指数即PI值在粘液表皮样癌和腺样囊性癌的不同分级中表达不同,且有统计学意义(P<0.005)。2)恶性多形性腺瘤PCNA及Ki-67的PI值较高,与腺样囊性癌及粘液表皮样癌相比差异有统计学意义(P<0.001)。3)PCNA及Ki-67的表达水平与涎腺癌的生物学行为(复发和转移)明显相关。结论:涎腺癌中PCNA和Ki-67的表达水平与细胞分化有关,其PI值可作为粘液表皮样癌和腺样囊性癌的组织学分级的重要参数,也是诊断恶性多形性腺瘤的重要指标。PCNA和Ki-67的高表达预示着涎腺癌预后的不良。