关于酶促反应速度与酶反应的初速度的教学

酶促反应速度是酶促反应动力学中的一个基本概念。一定条件下 ,酶催化反应的活力大小要由该反应条件下酶促反应速度来反映和确定 :酶促反应速度越小 ,酶活力越小 ;反之 ,酶促反应速度越大 ,酶活力也越大。在研究底物浓度、酶浓度、温度、ｐＨ、激活剂、抑制剂等因素对酶活力的影响时 ,都必须测定酶促反应的速度。为了排除实验中存在的一些干扰 ,一个酶的酶促反应的速度要在酶促反应进行的初期测定 ,即测定所谓的酶促反应的初速度。在教学过程中 ,学生不易弄清楚酶促反应速度与酶促反应的初速度之间的关系。我们发现 :当一般地问起酶反应速度…     

关于酶促反应速度与酶促反应的初速度的教学

酶促反应速度是酶促反应动力学中的一个基本概念。一定条件下，酶催化反应的活力大小要由该反应条件下酶促反应速度来反映和确定：酶促反应速度越小，酶活力越小；反之，酶促反应速度越大，酶活力也越大。在研究底物浓度、酶浓度、温度、pH、激活剂、抑制剂等因素对酶活力的影响时，都必须测定酶促反应的速度。为了排除实验中存在的一些干扰，一个酶的酶促反应的速度要在酶促反应进行的初期测定，即测定所谓的酶促反应的初速度。在教学过程中，学生不易弄清楚酶促反应速度与酶促反应的初速度之间的关系。我们发现：当一般地问起酶反应速度在何时测定时，绝大多数学生都会回答在酶促反应的初期；而当问起酶促反应动力学中的v-[S]曲线(图1)上的酶促反应初速度在哪里和为什么时，却有相当一些学生指出在曲线的原点处做切线，切线的斜率就是；有的则指出是与1/2vmax相应的位置的速度值；个别的则指出是与vmax相应的位置的速度值。只有极少数学生指出曲线上的每一点相应的速度值都是酶促反应初速度所在。实际上，正确的答案应为曲线上的每一点相应的速度值均为该底物浓度[S]处的酶促反应初速度值。     

元宝枫叶蛋白酶的动力学特征

酶促动力学是研究酶促反应的速度及各种因素如底物浓度、酶浓度、抑制剂、激活剂、温度、pH等对酶促反应速度影响的科学,是酶学研究中重要的内容。在一定条件下,酶促反应都有其特定的动力学参数,如Km值（米氏常数）和Vmax值（最大反应速率）等。Km是反映酶动力学性质的重要特征性常数,对某一酶促反应而言,在一定条件下都有特定的Km值,可以用来鉴别酶。Km值还可以判断酶的专一性和天然底物,     

超声对酶的影响

超声对酶的影响与超声的强度和介质的性质有关。适宜的超声可提高酶促反应速度,较低强度的超声可提高酶的活性,而较高强度的超声会降低酶促反应速度甚至使酶失活。介质性质不同时,超声对酶活力的促进效果与稳定性不同。非极性介质中酶对于超声的抗性要优于水溶液。在较低强度的超声作用下,超声增加了底物的传质作用,并可导致酶分子的构象发生变化。     

外磁场对小麦过氧化物酶酶促反应动力学的影响

采用初速度法研究了外磁场对小麦过氧化物酶(POD)酶促反应动力学的影响。发现外磁场可使POD酶促反应体系时间进程加快,反应速度提高。进一步研究表明,外磁场使反应体系的动力学参数发生了变化。     

低共熔溶剂对酶的影响及应用研究*

低共熔溶剂是由一定化学计量比的氢键受体和氢键供体组合而成的新型绿色溶剂,具有成本低、易制备、环境友好等特点,可以作为普通有机溶剂和离子液体的替代溶剂。酶作为生物催化剂时反应条件温和,对反应底物专一性高,并且具有极高的催化效率和反应速度。酶促反应通常发生在水溶液体系,但近年来发现在低共熔溶剂中酶促反应也能有效进行。综述酶与低共熔溶剂共同作用的机理以及低共熔溶剂在酶促反应中的应用,展望未来的研究方向,为酶促反应体系的进一步开发奠定理论基础。     

有机相中超声辐照对脂肪酶活性的影响

酶在有机相中的催化作用是８０年代以来酶工程学研究的热点之一．虽然酶在有机相中的催化反应有许多优点［１］,但在工业生产上的应用却很有限,这主要是有机相中的酶促反应速度太慢,反应周期太长之故．１９９１年Ｖｕｌｆｓｏｎ等报道了超声辐照对有机相中枯草蛋白酶催...     

植物新陈代谢(2)

(续 2 0 0 3年第 38卷第 7期第 4 5页 )3　能力训练3.1　实验设计 ,不仅有助于学生掌握基本概念和原理 ,更有助于学生掌握科学的研究方法 ,培养学生的创造性思维 ,培养学生应用所学知识综合解决问题的能力 ,是培养学生综合素质的有效手段。例题 1:设计一个实验 ,验证缺硼会影响油菜的结实率。 (答案 :略 )例题 2 :设计一个实验测定洋葱表皮细胞细胞液的质量分数 ?(利用质壁分离实验原理可测定细胞的质量分数 ,答案 :略 )3.2　研究影响酶作用因素实验方法　　研究某一因素对酶促反应速度的影响时 ,应在保持其他因素不变的情况下 ,单独改变研…     

有机磷水解酶的挖掘、改造及应用

有机磷化合物是一类广泛用作杀虫剂、增塑剂、阻燃剂的有毒化学品,由于难以降解而在农产品、水体和土壤中逐渐累积,容易引发严重的食品安全和环境污染问题。有机磷的酶促降解具有反应速度高和绿色环保等优点,是当前的研究热点。本文综述了近年来在有机磷水解酶的挖掘、改造及应用方面的研究进展,提出了进一步发展所面临的挑战和未来的研究方向,旨在为有机磷化合物的生物降解研究提供参考。     

限制性核酸内切酶Bsp 63I特性的研究

Ⅱ型限制性核酸内切酶的发现和应用,革命性地推动了分子生物学和遗传工程的发展。不管从酶本身的理论研究或从工具酶的应用研究方面来说,都必须首先确定酶促反应系统的最适条件以及各种因素对酶活性的影响,但是目前关于这类酶促反应条件的确定,多数是根据定性实验和经验,很少是根据定量实验作动力学描述。     

漂白前后塔拉纤维剩余物的酶动力学分析

对塔拉纤维剩余物和漂白塔拉纤维剩余物的酶动力学进行了研究,采用Lineweaver-Burk双倒数法对底物样品浓度倒数和酶促反应速度倒数作图构建米氏方程,通过计算两种底物的K_m值,即塔拉纤维剩余物K_m为12.73 mg·mL^-1,漂白塔拉纤维剩余物K_m为192 mg·mL^-1,表明塔拉纤维剩余物比漂白后的塔拉纤维剩余物更适合做纤维素酶的酶解底物;红外光谱图分析表明漂白塔拉纤维剩余物中木质素成分含量明显降低。     

酶促反应中的化学平衡改变

一般教科书中认为酶促反应不能改变其本身化学平衡的方向和限度。但酶学研究表明:酶促反应中的化学平衡可以从热力学或动力学角度发生改变,相关酶促反应的内部化学平衡理论和天然产物酶促选择性合成实例业已广泛报道,在教学与科研中应予重视,这对深入认识酶催化的本质、指导药物化学等研究具有重要意义。     

对"探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作用"实验的一些尝试

新版高中《生物》教材中 ,实验 6 :“探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作用”中用的淀粉酶是α-淀粉酶。α-淀粉酶因一般的小城镇购买有一定的困难 ,我们尝试用唾液中的淀粉酶和多酶片中的胰淀粉酶做该实验 ,其效果相当明显。1　用唾液中的淀粉酶替代 ︿-淀粉酶 ,增设一支对照实验试管基本方法是 :1)收集唾液后 ,取 1m L唾液注入小烧杯中 ,加入 2 m L蒸馏水 ,振荡小烧杯使之混合均匀 ,制成稀释的唾液。唾液稀释量少些 ,含唾液淀粉酶量就多 ,酶促反应速度就快。 2 )取 3支洁净的试管 ,编号为1、2、3。 3)在 1号、2号试管中各注入 2 m L质量分…     

打浆中木聚糖酶处理对未漂硫酸盐桉木浆打浆性能的影响

为了提高Streptomyces griseorubens LH-3木聚糖酶的酶促打浆效果,我们分别研究了在打浆前和打浆中添加酶的酶促打浆工艺。打浆前加酶处理未漂硫酸盐桉木浆,酶剂量达到20 IU/g dry pulp时,打浆度增幅达到最大值,打浆度提高16.2%。打浆前酶处理未漂硫酸盐桉木浆,打浆至560SR打浆度,与对照实验比节约打浆能耗约12.5%。打浆中酶处理未漂硫酸盐桉木浆,酶剂量达到30 IU/g dry pulp时,打浆度增幅达到最大值,打浆度提高25.5%。打浆中LH-3木聚糖酶处理未漂硫酸盐桉木浆,打浆至570SR打浆度,与对照实验比节约打浆能耗约18.8%。实验表明,Streptomyces griseorubens LH-3木聚糖酶酶促打浆能有效提高纸浆的打浆性能,明显降低打浆能耗,同时发现在打浆中加酶比在打浆前加酶会取得更好的打浆效果,开发了一种高效的酶促打浆工艺。     

影响纳豆激酶酶促反应速度因素的研究

利用分光光度法对由纳豆菌发酵产生的纳豆激酶 (NK)进行了动力学性质的研究。以双倒数作图法 (L -B作图法 )求取Km。采用单因素试验法和正交试验法研究了底物浓度、酶浓度、温度、pH值对酶促反应速度的影响。结果表明该纳豆激酶的Km值为 3.4 98× 1 0 -6g·mL-1 ,当水解时间为 1 0min时 ,最适底物浓度为 1 6mg·mL-1 ,最适温度为 6 0℃ ,最适 pH为 8.0。     

抗坏血酸对酵母蔗糖酶的激活动力学研究

采用甲苯自溶法从鲜酵母中提取了蔗糖酶,并用乙醇分级及ＤＥＡＥ－纤维素柱层析进行了纯化,用ＰＡＧ凝胶电泳作了纯度鉴定,在ｐＨ５．０,３０℃条件下进行了酶反应,用双倒数作图法测出其Ｋｍ＝２．１×１０－２ｍｏｌ／Ｌ,Ｖｍａｘ＝０．２６（每分钟的光密度值）．在此系统中,加入不同浓度的抗坏血酸（Ｖｉｔ．Ｃ）,发现其具有激活作用并存在量效关系．双倒数作图显示：酶的表观Ｖｍａｘ（Ｖｐ）随抗坏血酸浓度的增加而增大,但其表观Ｋｍ（Ｋｐ）不变（Ｋｐ＝Ｋｍ）．经实验结果分析,推论出抗坏血酸激活作用的酶促反应方程式,并推导出反应速度公式     

人肠道菌对黄芩苷的生物转化

本研究利用体外培养人体肠道菌转化黄芩苷,探索转化方法及模型;用醇沉法提取了黄芩苷转化酶,即β-D-葡萄糖醛酸苷酶,并探讨了酶促影响因素;通过高效液相色谱检测产物黄芩素。经实验确定,黄芩苷转化培养液经超声波处理后,在转化液中有黄芩素检出。实验得知,转化酶为胞内酶,该酶的最适反应温度为55℃,最适pH为6.0,Ca2+、Mg2+和Cu2+对酶促反应具有促进作用,而Fe2+则具有抑制作用,Zn2+浓度在l mmol/L时起促进作用,在5 mmol/L时起抑制作用。     

产延胡索酸酶的皱褶假丝酵母固定化细胞

1．比较了用聚丙烯酰胺凝胶、琼脂凝胶和明胶三种包埋方法制备的固定化细胞的酶话力和回收率。其中以聚}呵烯酰胺凝胶包埋的细胞酶的表现活力和回收率最高,表现活力最高为723 7单位／克细胞,回收率最高为90％左右。 2. 比较了固定化细胞和自然细胞延胡索酸酶的一般性质：pH,温度和二价金槭离子对两者的酶促反应速度的影响。固定化细胞热稳定性比自然细胞好一些。Mn++,Mg++,Ca++和Fe++二价金属离子对两种细胞酶的热钝化均无保护作用。     

固定化谷氨酸棒杆菌T6—13细胞的酶学性质研究

比较研究了固定化谷氨酸棒杆菌细胞和自然细胞的谷氨酸脱氢酶、异拧檬酸脱氢酶,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的一些性质。最适pH、温度对二者酶促反应速度的影响基本相似;pH、热稳定性固定化细胞高于自然细胞;底物表观米氏常数谷氨酸脱氢酶,异柠檬酸脱氢酶有所增大,而葡萄糖-6-磷酸脱氢酶则有所下降;辅酶表观米氏常数均有所增大。这些是影响固定化细胞应用的主要因素。     

利用自制简易分光光度计定量探究影响蛋白酶活性的元素

描述了一种定量研究酶活性的实验装置和方案。用蛋白酶分解乳蛋白的反应代替原教材中的肝脏研磨液分解过氧化氢的反应，结合自制简易分光光度计，使定量研究酶促反应变得更简单可靠。在比色皿中测量酶与底物混合物的透光度随反应时间的变化曲线，实现蛋白酶活性的定量实时观察；定量研究相同时间、不同温度下酶与底物混合物的透光度变化，描述和交流温度对蛋白酶活性的影响。此外，探讨了进一步降低实验仪器成本的方案，以利于更多的学校进行操作和实施。