乳杆菌A2代谢产物对人舌鳞癌细胞系Cal-27凋亡的诱导

目的:观察乳杆菌A2代谢产物LM1和LM2对人口腔舌鳞癌细胞系Cal-27细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:将乳杆菌A2经复原乳清培养基培养制备相应的代谢产物1(LM1),除去代谢产物中的钙离子得到产物2(LM2);用MTT法和流式细胞仪检测口腔舌鳞状细胞癌的细胞凋亡的情况;琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段的变化。结果:乳杆菌A2代谢产物LM1和LM2作用Cal-27细胞48 h时,最大抑制率分别为(39.9±1.56)%和(30.5±6.85)%;Annexinv-FITC/PI染色法检测LM2(8 mg/mL)培养40、44 h时,细胞早期凋亡率分别为19.93%和21.42%;琼脂糖凝胶电泳LM2(8 mg/mL)培养54 h时,在250⁷50 bp之间显现出典型的"梯"状DNA条带。结论:LM1和LM2能抑制口腔舌鳞癌细胞Cal-27的增殖,呈剂量依赖性关系,LM2能够诱导细胞凋亡。     

甘草苷调控PI3K/Akt/m-TOR信号通路对口腔鳞状细胞癌细胞及裸鼠移植瘤小鼠的作用研究

目的:目的探讨甘草苷(Liquiritin,LIQ)对人口腔鳞状细胞癌细胞(OSCCs)的增殖抑制、凋亡诱导作用和分子机制并通过裸鼠模型进行验证。方法:CCK-8检测LIQ对口腔鳞状细胞癌细胞的增殖抑制作用;流式细胞术及TUNEL实验检测凋亡情况;Western blot检测蛋白表达变化;构建裸鼠瘤模型,连续给药20 d,绘制肿瘤生长曲线,并计算抑瘤率。结果:LIQ可以抑制口腔鳞状细胞癌细胞增殖及裸鼠瘤体积增长,并诱导细胞凋亡;LIQ抑制PI3K/Akt/m-TOR信号通路的过度激活。结论:LIQ能够在体内外对口腔鳞状细胞癌产生抗癌效果,其机制可能是通过抑制PI3K/AKT/m-TOR信号通路的过度激活。     

口腔鳞状细胞癌脂肪酸代谢的初步研究

目的 观察舌鳞状细胞癌细胞株TCA—83脂肪酸代谢特点,探讨利用脂肪酸合成途径进行抗癌治疗的可能性。方法 采用放射性同位素标记方法和液体闪烁测量方法观察TCA—83细胞和正常人牙龈成纤维细胞[~3H]掺入细胞总脂质的量,通过MTT法观察脂肪酸合酶抑制剂—浅蓝菌素对TCA-83细胞的细胞毒性作用。结果 ①TCA-83细胞和正常人牙龈成纤维细胞[~3H]掺入细胞总脂质的量分别为68±12.7cpm/2×10~5细胞和13±4.2cpm/2×10~5细胞,差异有显著性(P=0.011)。②浅蓝菌素在浓度为2.5μg/ml时,对正常人牙龈成纤维细胞的细胞毒性较小,但对TCA—83细胞仍有明显的毒性。结论 脂肪酸合成活性增高是口腔鳞状细胞癌重要的生化特征,浅蓝菌素对口腔鳞状细胞癌有选择性的细胞毒作用。本研究为通过脂肪酸合成途径来控制肿瘤细胞生长提供了参考。     

化疗药诱导颊癌细胞凋亡的原位组织学研究

目的 :探讨化疗药诱导颊癌细胞凋亡及其相关机制。方法 :选择临床行术前化疗患者的颊癌组织进行原位DNA末端标记 (TUNEL法 )显示凋亡细胞以及免疫组化SP法检测Fas蛋白的表达。结果 :凋亡细胞及凋亡小体散在分布于颊癌组织中 ,化疗后颊癌凋亡细胞发生率增加 ,凋亡指数 (AI)均值为 0 .91,明显高于化疗前AI( 0 .38) (P <0 .0 1) ;与化疗前相比 ,化疗后颊癌细胞Fas表达强度增加 (P <0 .0 1)。结论 :细胞凋亡途径可能是化疗药杀灭颊癌细胞的重要机制 ,Fas系统在化疗药诱导颊癌细胞凋亡发生中发挥关键性作用。由此 ,应用凋亡诱导分子FasL有可能成为一种新的抗癌方法。     

尼古丁对口腔鳞状细胞癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究尼古丁在口腔鳞状细胞癌细胞增殖和诱导凋亡中的作用,初步探讨尼古丁对口腔鳞状细胞癌发生的作用机制.方法 采用甲基噻唑基四唑法、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素及碘化丙啶双染法和2＇,7＇-二氯荧光黄双乙酸盐荧光探针法检测/不同浓度(0.1、1、10μmol/L)尼古丁作用相同时间(48 h)和相同浓度(1μmol/L)尼古丁作用不同时间(24、48、72 h),对口腔鳞状细胞癌SCC15细胞活力、细胞凋亡和细胞内活性氧含量的影响,以0μmol/L尼古丁为对照组;应用酶联免疫吸附测定、免疫荧光方法检测1 μmol/L尼古丁作用不同时间后口腔鳞状细胞癌SCC15细胞内核因子κB DNA结合活性及核因子κB表达变化.结果 不同浓度尼古丁处理SCC15细胞48 h,流式细胞术检测各组细胞内活性氧水平分别为(98.24±0.04)％、(98.50±0.06)％及(98.61±0.07)％,均较对照组[(96.01±0.58)％]显著增加(P=-0.000);同时各浓度尼古丁处理组细胞生长被促进,且呈浓度依赖性,0.1、1、10μmol/L尼占丁组细胞A值分别为2.19±0.08、2.20±0.11及2.38±0.08,均显著高于对照组(1.93 ±0.13)(P＜0.05).1μmol/L尼古丁处理组的SCC15细胞凋亡率显著高于对照组及0.1、10 μmol/L处理组(P-0.000).1μmol/L尼古丁作用于SCC15细胞72 h细胞生长被显著抑制,与对照组相比差异有统计学意义(P =0.022);1μmol/L尼古丁作用于SCC15细胞24 h后诱导SCC15细胞凋亡最显著且显著高于尼古丁作用48 h和72 h组(P=0.000),各组细胞核内代表DNA结合活性的A值分别为1.509、1 093、0.746,与对照组(A值为0.544)相比核因子κB DNA结合活性均有不同程度增高,提示核因子κB从胞质向胞核中转移,其中尼古丁作用24h活性最高.结论 尼古丁能促进口腔鳞状细胞癌SCC15细胞增殖并诱导少量细胞凋亡,可能是通过激活核转录因子核因子κB发挥作用.     

槟榔碱诱导体外培养的血管内皮细胞凋亡研究

了解槟榔碱 (Arecoline)对培养的人脐静脉内皮细胞 (HumanUmbilicalVeinEndothelialCells ,HU VECs)凋亡的影响。方法 :不同浓度的槟榔碱处理体外培养的HUVECs ,用Hoechst3 3 2 5 8染色 ,在荧光显微镜下观察凋亡细胞形态学改变并计算凋亡百分率 ,琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征性”梯状”条带。结果 :①槟榔碱能以时间和浓度依赖方式诱导培养的HUVECs发生凋亡 ,其细胞凋亡率较正常对照组明显增高 (P <0 .0 1)。② 90ug/ml槟榔碱诱导VEC凋亡的DNA片段琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA“梯状”条带。结论 :槟榔碱浓度和时间依赖性诱导HUVECs凋亡 ,VEC凋亡异常可能是口腔黏膜下纤维性变的重要发病机理之一     

口腔鳞状细胞癌Fas基因表达与细胞凋亡关系的研究

目的　探讨Fas基因mRNA及蛋白表达水平与人口腔鳞状细胞癌细胞凋亡的关系。方法　应用Northern 杂交、双参数流式术(TUNEL法)检测人口腔鳞状细胞癌中Fas mRNA及蛋白的表达,鳞癌细胞的细胞周期与凋亡水平。结果　5例正常口腔黏膜标本中均有Fas mRNA及蛋白的表达。在口腔鳞癌组织中,Fas mRNA及蛋白的表达与口腔鳞癌组织病理学分级有关(P<0·005),与口腔鳞癌组织分化程度和凋亡指数呈正相关。结论　口腔鳞癌中 Fas基因的表达与组织病理学分级及细胞凋亡之间关系密切。     

趋化因子SDF-1及其受体CXCR4对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨SDF-1/CXCR4生物轴对口腔鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响.方法 采用MTT法检测细胞的增殖能力.通过趋化实验观察细胞的侵袭迁移能力.结果 口腔鳞状细胞癌细胞在SDF-1作用下增殖反应明显增强,CXCR4抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖(P＜0.05).趋化实验显示SDF-1可诱导口腔鳞状细胞癌细胞发生明显迁移,经50μg/ml CXCR4抗体孵育后,SDF-1介导Tca8113细胞的这种侵袭能力明显减弱(P＜0.05).结论 CXCR 4/SDF-1受体配体系统可介导口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和迁移,在癌细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用.干扰SDF-1/CXCR4的相互作用有可能成为治疗口腔鳞状细胞癌的新方法.     

岩黄连总碱对Tca8113细胞增殖和凋亡作用的影响

目的:观察岩黄连总碱对体外培养人舌鳞癌Tca8113细胞增殖抑制及诱导凋亡作用。方法:MTT法检测不同浓度的岩黄连总碱分别处理体外培养的Tca8113细胞24、48和72 h后的细胞增殖抑制情况,Hochest33258染色及DNA ladder检测细胞凋亡,并用脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL法)原位检测细胞凋亡及细胞凋亡率。结果:岩黄连总碱对Tca8113细胞增殖具有明显抑制作用(P<0.01),且呈现出一定的时间和浓度依赖性;Hochest33258检测发现岩黄连总碱作用48 h后可见凋亡细胞;DNA ladder检测可见凋亡特有的180～200 bp整数倍DNA条带;TUNEL结果显示岩黄连总碱处理组细胞凋亡率呈时间和浓度依赖性。结论:岩黄连总碱能抑制Tca8113细胞增殖,呈时间和浓度依赖性;同时能诱导Tca8113细胞凋亡,且诱导凋亡的作用也呈时间和浓度依赖性。     

Bcl-xL反义寡核苷酸与博莱霉素协同抑制鳞状细胞癌细胞增殖的研究

目的：研究bcl-xl反义寡核苷酸（ASODN）与博莱霉素（BLM）联用对口腔鳞状细胞癌细胞（Tca8113）增殖的影响及其作用机理。方法：设计合成bcl—xl的ASODN在脂质体的介导下转染Tca8113细胞,设无义寡核苷酸组（NSODN）和空白对照组进行比较。48h后博莱霉素作用于转染后的细胞。以荧光原位末端缺口标记法检测bcl-x1反义寡核苷酸与博莱霉素诱导癌细胞凋亡的作用机理,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：bcl-xl反义寡核苷酸与博莱霉素的作用机理为激活细胞的内源性核酸内切酶,使核小体内DNA断裂出现缺口,产生凋亡。ASODN组、BLM组和ASODN＋BLM组的凋亡率明显高于NSODN组和空白对照组（P〈0．05）。ASODN＋BLM组的凋亡率明显高于ASODN组和BLM组（P〈0．05）。结论：Bcl-xL反义寡核苷酸与博莱霉素能协同抑制口腔鳞状细胞癌细胞的增殖。     

替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节特征的锥形束CT研究

目的:采用锥形束CT(CBCT)研究替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节的影像学特征,探讨Ⅲ类功能状态下,颞下颌关节的生长、改建机制。方法:从就诊于昆明医科大学附属口腔医院正畸科的患者中选取符合纳入标准的替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者及骨性Ⅰ类错牙合患者各20名,使用NNT viewer 5.3图像处理软件进行三维重建及线距和角度的测量,并进行统计学分析。结果:替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者组和替牙期骨性Ⅰ类错牙合患者组对比结果为:矢状面双侧关节前间隙偏小、双侧关节上间隙偏小、双侧关节结节斜度偏小;冠状面双侧关节内间隙偏小,双侧关节上间隙偏小,双侧关节外间隙偏小,右侧髁状突角度偏小;横截面右侧髁状突前后径偏小。结论:替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节发育不充分,呈现髁状突,关节窝深度,关节结节斜度;冠状面关节内、外间隙均较小的特征。骨性Ⅲ类错牙合患者髁状突在关节窝中处于前置近关节窝顶位置。骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节影像学特征与其功能状态相适应。     

Oral cancer: molecular technologies for risk assessment and diagnosis

Purpose: The effective biomarkers related to diagnosis, metastasis, drug resistance and irradiation sensitivity of oral cancers will help the pathologist and oncologist to determine the molecular taxonomy diagnosis and design the individualization treatment for the patients with oral cancers.     

Stimulated whole saliva components in children with Down syndrome

The authors report on the components of stimulated whole saliva from children with Down syndrome—including pH, flow rate, sialic acid and protein concentrations, and amylase and peroxidase activity. Saliva samples were collected from 35 children aged 6–10 years. Of the participants, 17 had Down syndrome and 18 did not. To stimulate saliva production, the children chewed a piece of parafilm for 10 minutes before the sample was collected. Soon after collecting the saliva sample, the authors measured pH using a portable pH-meter. Sialic acid levels were determined with a thiobarbituric acid assay. Protein content was determined with Folin's phenol reagent. Amylase was assayed and the authors measured the maltose produced by the breakdown of starch and peroxidase using ortho-dianisidine.
No statistically significant difference was observed in levels of sialic acid (free and total) between the two groups. Protein concentration was about 36% higher in the group with Down syndrome. However, the salivary flow rate, pH, and amylase and peroxidase activities were lower among the children with Down syndrome.     

柠檬精油对牙周致病菌抑制作用及其安全性初步研究

目的:探讨柠檬精油对牙周致病菌的体外抗菌活性及对细胞增殖的影响。方法:采用微量液体稀释法测定柠檬精油对Pg、Fn、Aa、Pi的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)及最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC);以较低浓度的MIC为标准稀释LEO作为实验组,采用MTT法测定柠檬精油对HUVECs的毒性作用,明确抑菌浓度下LEO的安全性。结果:柠檬精油对牙周主要致病菌均有抑菌作用,Pg、Fn、Aa、Pi的MIC分别是9.0 g/L、4.5 g/L、4.5 g/L、9.0 g/L,Aa、Fn的 MBC是9.0 g/L,Pg、Pi的MBC未测得。1/2MIC、1/20MIC浓度的LEO能够抑制人脐静脉内皮细胞的生长,而低于1/200MIC浓度的LEO则对人脐静脉内皮细胞的生长没有影响,其中1/200MIC浓度的LEO作用明显优于0.02%的CHX。结论:体外环境中,柠檬精油对牙周致病菌Pg、Fn、Aa、Pi具有抗菌活性,低浓度应用对机体相对安全。     

Computer-assisted planning for maxillofacial prosthodontic rehabilitation

Computerized tomography (CT) planning and the use of CT derived surgical templates for implant placement have shown promise for restoring function within months after surgical reconstruction of acquired post-oncologic defects.     

牙髓再生的研究现状

目前,根管治疗术在临床上已得到了广泛的应用并成功的保存了患牙,但其仍有许多术后并发症。随着组织工程技术在口腔领域的应用,构建一种组织工程化牙髓进行牙髓-牙本质复合体的再生治疗成为可能。近年来国内外已有很多关于牙髓再生的研究,并且已经取得了一定成果。本文将对目前国内外牙髓再生的研究进展现状作一综述。     

Ghlorhexidine as a root canal medicament for treating inflammatory lesions in the periodontal space

Abstract— The purpose of the present study was to investigate the therapeutic effect of intra-canal application of chlorhexidine on inflammatory root resorption. Dental pulps from monkey incisors were infected and resealed prior to extraction of the teeth. Root dentin was mechanically exposed and the teeth were replanted under aseptic conditions. After 4 weeks, the experimental teeth were dressed with chlorhexidine gel and resealed. Animals were sacrificed 4 weeks later, and their jaws prepared for histologic examination. Results showed that both marginal and apical periodontal inflammation and resorption were reduced in the chlorhexidine-treated teeth. It was concluded that the use of intra-canal chlorhexidine may be a useful adjunct in the treatment of inflammatory root resorption, but further human trials need to be undertaken before its clinical use can be recommended.     

Effect of Pingyangmycin on human venous malformation endothelial cells

Purpose: Venous malformations are common vascular anomalies with a propensity of the head and neck. Intralesional injection of Pingyangmycin (PYM, bleomycin A5 hydrochloride) is a widely used sclerotherapy method for the treatment of venous malformation.     

小鼠牙髓干细胞同种异体移植后体内免疫反应初探

目的:初步探究小鼠牙髓干细胞同种异体移植后的全身免疫反应。方法:牙髓干细胞分离获得自C57BL/6 小鼠牙髓组织,培养至第3 代,与纳米羟基磷灰石(n-HA)复合培养形成复合物,扫描电镜观察其生长黏附情况。40只4周龄的C57BL/6 小鼠随机分成两组。实验组将复合物移植入上背部皮下,对照组将纳米羟基磷灰石植入上背部皮下,术后均使用外科方法严密缝合创口。两组动物术后均观察4周、6周处死,分离脾脏,制成脾淋巴细胞悬液,流式细胞仪测定CD4⁺、CD8⁺的值。结果:牙髓干细胞在体外与纳米羟基磷灰石结合良好;免疫组化染色实验组4周、6周均可见牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)阳性表达;实验组与对照组相比,术后4周、6周CD4⁺/CD8⁺值均无明显差异。结论:牙髓干细胞同种异体移植后,尚不能够引起机体的免疫排斥反应,其在体内仍具有低免疫原性,有望成为组织工程同种异体种子细胞来源。