mTOR/p70S6K信号通路在慢性牙周炎患者T细胞中的表达及活化

目的:通过研究严重程度不同的牙周炎患者外周血T细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、核糖体蛋白S6激酶(p70S6 kinase,p70S6K)基因和蛋白表达以及p70S6K磷酸化水平,探讨mTOR/p70S6K信号转导通路在牙周炎中的作用。方法:随机选择受试者并分为四组:健康对照组(A组)20例,轻度牙周炎组(B组)20例,中度牙周炎组(C组)20例,重度牙周炎组(D组)20例,采用Western blot及RT-PCR法检测每组患者外周血T细胞中mTOR、p70S6K基因及蛋白表达以及p70S6K磷酸化水平。结果:RT-PCR检测结果 mTOR、p70S6K基因表达量C组、D组均显著高于A组及B组(P0.05);Western blot检测结果显示,mTOR、p70S6K蛋白表达及p70S6K磷酸化水平在C组、D组均显著高于A组及B组(P0.05)。结论:中重度牙周炎组患者T细胞中mTOR信号异常活化,mTOR/p70S6K信号通路可能在慢性牙周炎病程进展中发挥重要作用。     

CMV感染激活mTOR/p70S6K信号通路促进脑梗死患者颈动脉粥样硬化的机制

目的 分析巨细胞病毒(CMV)感染激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/70 kDa核糖体蛋白S6激酶(mTOR/p70S6K)信号通路促进脑梗死患者颈动脉粥样硬化形成和发展的机制。方法 选取2017年7月-2020年7月青岛市中医医院神经内科收治的脑梗死患者行颈动脉内膜剥脱术后的颈动脉粥样硬化斑块标本80例为研究组，另选择同期性别、年龄匹配的40例正常颈内动脉标本为对照组。统计不同病变支数的脑梗死患者各指标。结果研究组CMV DNA阳性率高于对照组(P<0.05),CMV DNA阳性者的血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平高于CMV DNA阴性者，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于CMV DNA阴性者(P<0.05),CMV DNA阳性者颈动脉内膜中层厚度(IMT)较CMV DNA阴性者增厚(P<0.05);研究组组织mTOR mRNA、p70S6K mRNA表达水平均高于对照组(P<0.05);研究组中CMV DNA阳性者的mTOR mRNA、p70S6K mRNA表达水平高于CMV DNA阴性者(P<0.05);研究组中，单支病变者CMV DNA及mTOR mRNA、p70S6K mRNA低于多支病变者(P<0.05)。结论 CMV可能通过激活mTOR/p70S6K信号通路促进脑梗死患者颈动脉粥样硬化形成与发展。     

脑源性神经营养因子通过PI3K/Akt/mTOR信号途径对胚鼠缺氧神经元的保护作用

目的 探讨脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对缺氧(oxygen deprivation,OD)神经元的保护作用是否与激活自噬有关,其信号通路是否通过PI3K/Akt/mTOR途径。方法 1)建立胚鼠神经元OD损伤模型;CCK-8法观察不同浓度BDNF对OD神经元细胞活性的影响;2)检测OD神经元1,3,5 h自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达,情况观察BDNF对OD神经元的保护作用是否与自噬有关;3)检测p-Akt,p-mTOR,p-p70S6K以及LC3II的表达,对比BDNF与自噬激活剂雷帕霉素(mammalian target of rapamycin,Rapamycin)对Akt/mTOR/p70S6K的影响,以及自噬被3-MA抑制后,BDNF对Akt/mTOR/p70S6K的影响。结果 1)50 μg/L BDNF可对OD神经元起保护作用(P<0.05),100 μg/L BDNF效应次之;2)BDNF和/或Rapamycin在下调p-Akt/p-mTOR/p-p70S6K表达的同时可上调LC3II的表达;当3-MA抑制自噬后,BDNF对LC3II的上调作用被抑制。结论 BDNF通过PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号途径激活自噬,发挥对OD神经元的保护作用。     

miR-135b对HCT116结肠癌细胞周期的调控作用及机制研究

目的探讨miR-135b对HCT116结肠癌细胞周期的调控作用及机制研究。方法 HCT116细胞分为正常组、miR-135b NC组及miR-135b inhibitor组,MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、CyclinE、细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclee dependemt kinases 2,CDK2)、p27表达及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)、p70核糖体蛋白S6激酶(p70 ribosomal protein S6 kinase, p70S6K)磷酸化水平。结果与正常组及miR-135b NC组比较,miR-135b inhibitor组中miR-135b表达量下调,细胞活力降低,细胞早期及晚期凋亡率提高,细胞周期阻滞于G_1期,CyclinE、CDK2、p-mTOR及p-p70S6K表达量下调,CyclinD1、p27表达量上调,差异均有统计学意义(P0.05)。结论下调miR-135b可使HCT116结肠癌细胞周期发生阻滞,与抑制mTOR/p70S6K信号通路有关。     

甘草素对人脐静脉内皮细胞血管生成的作用及其机制探讨

目的研究甘草素(liquirigenin,LQ)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成的作用及其分子机制。方法采用四甲基氮唑兰MTT比色法检测甘草素对HUVEC细胞增殖的影响;划痕试验观察甘草素对细胞迁移的影响;蛋白质印迹法分析甘草素对血管生成相关蛋白和通路的影响。结果甘草素可抑制HUVEC细胞增殖,75μmol/L时,存活率为76.8%;甘草素可降低HUVEC细胞的迁移能力,随剂量浓度增加,细胞迁移能力减弱;甘草素可阻断磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/p70S6激酶(PI3K/AKT/p70S6K)信号通路,并下调血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)蛋白的表达。结论甘草素抑制人脐静脉内皮细胞增殖和迁移,并可经PI3K/AKT/p70S6K信号通路介导抑制血管生成靶向因子VEGF和HIF-1α的表达。     

槐定碱通过PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导自噬抑制胰腺癌细胞增殖

目的 探讨槐定碱对胰腺癌细胞增殖及自噬的影响,并分析其机制。方法 MTT法分析Sw1990细胞增殖, MDC染色法检测细胞自噬水平,western blot检测细胞自噬相关蛋白、PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达水平,运用自噬抑制剂（3 - MA）研究自噬对细胞增殖的影响;裸鼠成瘤实验检测体内胰腺癌细胞增殖情况,并分析瘤组织中LC3 II、p - mTOR蛋白水平。结果 槐定碱抑制胰腺癌Sw1990细胞的增长,促进自噬小泡的形成,上调LC3 II/ LC3 I、Beclin - 1水平,下调p - PI3K、p - AKT、p - mTOR水平（P＜0.05）;与槐定碱40 μmol/L组比较,槐定碱40 μmol/L + 3 - MA 5 μmol/L组细胞抑制率升高,LC3 II/ LC3 I降低,p - mTOR蛋白水平升高（P＜0.05）; 40 mg/kg槐定碱下调裸鼠瘤体体积、瘤体质量,上调LC3 II/ LC3 I水平,下调p - mTOR蛋白水平（P＜0.05）。结论 槐定碱能抑制Sw1990细胞增殖,与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路影响自噬有关。     

PI3K/AKT/mTOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞中的相互作用机制

目的探讨磷脂酰肌醇3–激酶/蛋白激酶B/哺乳动物靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)两条信号通路对胃癌细胞功能的影响及相互作用机制。方法使用PI3K抑制剂LY294002、mTOR抑制剂AZD8055、MEK抑制剂AZD6244单独或联合作用于胃癌MGC-803细胞。应用CCK8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;蛋白印迹法(Western blot)检测通路关键蛋白的表达。结果联合使用LY294002(25μmol/L)与AZD6244(125μmol/L)、AZD8055(0.1μmol/L)与AZD6244(125μmol/L)能够显著抑制胃癌MGC-803细胞的增殖活性,且联用组比单独作用组具有更强的抑制效果(P 0.05);联用组诱导细胞凋亡数量和阻滞于G0/G1期的MGC-803细胞数量增多,高于单独作用组(P 0.05)。与LY294002、AZD8055和AZD6244单独作用相比,LY294002与AZD6244、AZD8055与AZD6244联用组MGC803细胞p-AKT、p-P70S6K和p-ERK1/2蛋白表达明显受到抑制(P 0.05)。结论 PI3K/AKT/mTOR和MAPK/ERK两条信号通路在胃癌MGC-803细胞的生长中具有协同调控作用,对于两条信号通路的多靶点抑制能够更加明显的抑制癌细胞生长。     

miR-150基于PI3K/Akt信号通路调控乳腺癌细胞生物学特性的研究

目的探讨miR-150在乳腺癌组织中的表达,明确miR-150通过PI3K/Akt信号通路对乳腺癌细胞的增殖和凋亡能力的影响。方法 RT-PCR检测miR-150在乳腺癌组织和癌旁组织中的表达,将miR-150 inhibitors和阴性对照转染至人乳腺癌细胞系MCF-7,以空脂质体作为对照,RT-PCR检测转染结果,转染后培养48 h,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡能力,蛋白免疫印迹法检测Cleaved caspase3、PI3K、AKT、p-AKT蛋白的表达。结果乳腺癌组织中miR-150的表达量显著高于癌旁组织(P0. 01);空白对照组和阴性对照组中miR-150的表达差异无统计学意义(P0. 05),miR-150-SiRNA组中miR-150的表达明显低于对照组(P0. 01);空白对照组和阴性对照组增殖率差异无统计学意义(P0. 05),而miR-150-SiRNA组细胞增殖率明显低于对照组(P0. 01);空白对照组和阴性对照组细胞凋亡率和Cleaved caspase3蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P0. 05),而miR-150-SiRNA组细胞凋亡率和Cleaved caspase3蛋白相对表达量均明显高于对照组(P0. 01); PI3K、p-AKT蛋白表达在空白对照组和阴性对照组间比较差异无统计学意义(P0. 05),miR-150-SiRNA组PI3K、pAKT蛋白表达显著低于对照组(P0. 01)。AKT蛋白在3组间比较差异无统计学意义(P0. 05)。在乳腺癌细胞中加入PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002,作用48 h,细胞增殖和凋亡结果与miR-150-SiRNA组一致。结论 miR-150在乳腺癌中高表达,干扰miR-150的表达能够显著抑制乳腺癌细胞系MCF-7的增殖,并通过上调Cleaved caspase来促进细胞凋亡,其调控作用可能与PI3K/AKT信号通路有关。     

Rapamycin抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路对胃癌MGC-803细胞影响

目的探讨rapamycin作用于胃癌细胞株MGC-803后对细胞生长影响及其作用机制。方法体外培养胃癌细胞株MGC-803,使用不同浓度rapamycin干预MGC-803细胞。采用MTT法检测细胞增殖变化;实时荧光定量PCR(QPCR)检测关键基因的表达;蛋白印迹法(WB)检测相关蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期及凋亡的变化。结果与对照组相比,rapamycin对胃癌MGC-803细胞的增殖活性有明显的抑制作用,呈现出剂量依赖性(P0.05)。Rapamycin显著抑制PI3K、AKT、m TOR、4EBP、P70S6K基因的m RNA表达,差异有统计学意义(P0.05);Rapamycin能抑制p-m TOR、p-P70S6K蛋白的表达;Rapamycin将细胞周期阻滞在G0/G1期,并诱导细胞凋亡(P0.05)。结论靶向m TOR抑制剂rapamycin可通过调控PI3K/AKT/m TOR信号通路进而调控胃癌细胞的生长。     

RNA干扰对卵巢癌细胞mTOR表达及细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨RNA干扰技术对人卵巢癌细胞SKOV3中mTOR的表达及对细胞增殖与凋亡的影响。方法:培养SKOV3细胞系,设计合成mTOR siRNA实验分4组:正常培养组:未转染的正常培养SKOV3细胞;空白对照组:转染空脂质体的SKOV3细胞;转染组:转染mTOR siRNA的SKOV3细胞;无义对照组:转染无义siRNA的SKOV3细胞。采用Western blot法检测各组细胞中的mTOR蛋白表达水平;应用MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:mTOR siRNA转染组SK-OV3细胞mTOR蛋白的表达显著低于各对照组(P<0.05);mTOR siRNA转染组SKOV3细胞增殖低于各对照组(P<0.05);mTOR siRNA转染组细胞凋亡率高于各对照组(P<0.05)。结论:mTOR siRNA对SKOV3细胞中mTOR蛋白的表达有明显的抑制作用,特异性阻断mTOR基因表达可显著抑制SKOV3细胞的增殖并促进其凋亡。     

胃平滑肌瘤3例报告

1　病例介绍例 1,女 ,30岁。 2日前 ,无明显诱因感上腹不适 ,恶心 ,呕吐 ,吐鲜血约 80 0ml,即输血 15 0 0ml,同时给予补液及止血等处理 ,疗效不佳 ,先后又呕吐 4次 ,共呕出暗红色血液约2 0 0 0ml,并带有血凝块。胃镜检查 :于胃底胃体交界入口处小弯侧见一约 1 2cm× 1 2cm大小的分叶状息肉样隆起 ,表面光滑 ,有一红色出血点 ,己停止出血 ,另见糜烂 3处。手术所见 :在胃小弯近贲门 4cm处扪及一个 7cm× 5cm× 4cm大小的肿物 ,有 1/ 3向腔外生长 ,质硬 ,表面光滑 ,近似分叶状 ,胃周围未见肿大淋巴结 ,肝、胆、胰、脾均无异常 ,将肿块切除。病…     

体质强弱的三大元素

身体形态特征包括身高、体重、围度等。身高 身高是反映人体骨骼生长发育和人体纵向高度的主要形态指标。身高与体重、其他肢体长度及围、宽度指标的比例关系，可以反映人体匀称度和体型特点。体重 体重可以反映人体发育状况和人体充实度，而且可以间接地反映人体营养状况。体重过重，可出现不同程度的肥胖，而过度肥胖，又是引发许多心血管疾病的重要原因。体重过轻，则可作为营养不良或患有疾病的重要特征。因此，适宜的体重，对于人的健康和体质有重要的意义。围度 胸围可以表示胸廓大小和肌肉发育情况，是人体宽度和厚度最有代表性的…     

染料木黄酮对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用及其机制研究

目的观察染料木黄酮(genistein,GEN)对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,探讨GEN抑制3T3-L1细胞分化的作用及分子机制。方法用含1-甲基-3-异丁基黄嘌呤、地塞米松和胰岛素的培养液(MDI)诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,同时用GEN或p38抑制剂SB203580干预。作用6d后,用油红染色实验观察脂肪形成情况;检测细胞培养液中非酯化脂肪酸(NEFA)、甘油三酯(TG)的含量;用Western blotting技术检测细胞中脂肪酸合酶(FAS)的蛋白表达。用GEN预处理30min后,用胰岛素刺激3T3-L1细胞,检测磷酸化p38MAPK(p-p38)的蛋白表达。结果GEN可以有效抑制3T3-L1细胞的脂肪形成,降低培养液中NEFA、TG的含量。胰岛素刺激后,3T3-L1细胞中p-p38的表达迅速增强,并在5min时达到高峰,GEN可以有效降低p-p38的表达。GEN、SB203580均能降低FAS的蛋白表达。结论染料木黄酮能有效抑制3T3-L1前脂肪细胞的脂肪分化,其机制是通过p38途径对FAS的抑制发挥作用。     

三种器械矫正脊柱侧凸的疗效分析

目的分析Harrington,luque,C-D三种器械矫正脊柱侧凸的疗效。探讨术中,术后并发症的原因及防治措施。方法2000年2月～2006年10月共矫治各种原因所致的脊柱侧凸68例,平均年龄15.5岁。术前cobb’s角45°～120°,平均62°。Harrington系统矫治20例,luque(L+H)系统矫治32例,C-D系统矫治16例。结果术后平均矫正率62%,发生各种并发症16例。其中神经损伤1例,椎板椎弓骨折4例,肺部感染1例,脱钩3例,断棒2例,假关节1例,棒未端过长3例,伤口感染1例。结论根据脊柱侧凸的畸形程度,选择合适的内固定技术,把握好矫正率与安全性的尺度,减少并发症的发生。     

CONTROL OF 3-HYDROXY-3-METHYLGLUTARYL-COENZYME A REDUCTASE IN LIVER

Recent experiments stress the importance of 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase as a control point in sterol biosynthesis in mammalian cells. The activity of this enzyme varies inversely with cholesterol synthesis within the cell, as well as with cellular efflux and influx of cholesterol. A heat-labile inactivator also exists, which can account for rapid inactivation of the enzyme. The composition of free fatty acids reaching the liver also affects reductase activity and cholesterol synthesis, presumably by altering the need for cholesterol in the synthesis of lipoproteins.     

二十二碳六烯酸抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖的作用及其可能机制

目的探讨二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖的作用及其可能机制。方法 3T3-L1前脂肪细胞体外传代培养,四唑盐比色法(MTT法)检测DHA处理24、48、72h对细胞活力的影响,线粒体膜电位JC-1染色法检测DHA处理后,3T3-L1前脂肪细胞线粒体膜电位的改变,蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和p53水平。结果 MTT结果显示,DHA可剂量和时间依赖性降低3T3-L1前脂肪细胞的活力,抑制增殖;JC-1染色发现,DHA处理24h可明显降低3T3-L1前脂肪细胞线粒体膜电位;蛋白免疫印迹发现,DHA可明显升高3T3-L1前脂肪细胞p53蛋白表达、降低Bcl-2蛋白水平,而对Bax表达水平无影响。结论 DHA可能通过降低线粒体膜电位,上调p53表达、降低Bcl-2/Bax比值,从而抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖。     

3例小儿气囊导尿管拔管困难的处理

气囊导尿管在导尿和留置尿管的临床应用中具有操作简单,容易固定,不易脱落和减少漏尿等优点,因此尤其适用于小儿烧伤患者.随着气囊导尿管应用的增多,导尿管拔管困难的情况也时有发生,但小儿气囊导尿管拔管困难的处理少见报道,现将我科3例小儿气囊导尿管拔管困难的病例及处理报告如下.