东方旱麦草胚状体诱导和无性繁殖体系的建立

通过对东方早麦草无菌种子脱分化培养、继代培养、再分化培养的研究．建立了东方早麦草无性快速繁殖体系。结果表明：(1)2，4-D2．0mg／l KT0．2mg／l 肌醇100mg／l的MS培养基能促进东方早麦草幼芽脱分化；(2)2，4-D1．0mg／l KTO．3mg／l 肌醇100mg／l 天冬素150mg／l并以麦芽糖代替蔗糖的MS培养基能促进东方早麦草胚性愈伤组织、胚状体的产生；(3)胚状体在NAA0．1mg／l 大量元素110％的MS培养基上萌发生根．此体系为东方早麦草快速繁殖提供了一条新途径．     

始兴石斛的无菌播种及快速繁殖

以始兴石斛种子为外植体,研究了NAA、6-BA、IBA、蔗糖以及活性炭(AC)等对种子无菌萌发及快速繁殖的影响。结果表明:适合种子萌发的培养基是MS+6-BA1.5mg.L-1+NAA 0.6mg.L-1+AC0.1%,萌发率可达100%;适合原球茎增殖的培养基是MS+6-BA0.8mg.L-1+NAA0.3mg.L-1+蔗糖4.5%,增殖系数为7.75倍;适合分化的培养基是MS+6-BA2.5mg.L-1+NAA0.5mg.L-1+AC0.03%,分化率为92%;适合生根的培养基是1/2MS+IBA0.5mg.L-1+AC0.05%,生根率为95.3%;以苔藓和树皮作为基质,试管苗移栽成活率可达93%以上。     

新疆紫草外植体组织培养和植株再生

新疆紫草[Arnebia euchroma (Rovle) Johnston]嫩芽和幼叶切段在含有不同激素组合的琼脂培养基上产生了愈伤组织,其中在MSB+0.4mg/L NAA+0.2mg/L 2.4—D+1.0mg/L KT中愈伤组织诱导率较高,达82.2％.这些愈伤组织经过继代,生长很快。转入分化培养基后,愈伤组织表面产生了很多不定芽和少量胚状体。不定芽经扶壮,诱导生根,生长成完整植株并移栽成活。     

蝴蝶兰的快速繁殖和规模化栽培技术研究

以蝴蝶兰的花梗、幼叶、茎尖和根尖为外植体,对影响原球茎发生、增殖、分化、炼苗和规模化栽培等外部因子进行了系统研究.试验结果表明:幼叶与茎尖是蝴蝶兰原球茎诱导的较佳外植体;1/2 MS+3 mg/L 6 BA+10%椰子汁+3%蔗糖是蝴蝶兰原球茎增殖的理想培养基;1/2 MS+0.1mg/L NAA+2%蔗糖+15%椰子汁是原球茎分化的适宜培养基;活性炭可促进生根壮苗.     

瓯柑愈伤组织的玻璃化法超低温保存研究

采用玻璃化法对瓯柑愈伤组织进行超低温保存研究.瓯柑愈伤组织在含5%二甲亚砜(DMSO)的MS培养基上预培养5 d,室温下60%PVS2预处理20 min,然后用100%PVS2于0℃处理40 min,投入液氮(LN)保存,24h后在40℃水浴中迅速化冻,再用1.2 mol/L蔗糖培养液洗涤3次.用氯化三苯四氯唑(TTC)法检测,其存活率可达85.62%.冻后的愈伤组织转移到MS+6-BA 0.5 mg/L继代培养基上,在黑暗中培养生长,存活率可达76.32%.分析讨论了瓯柑愈伤组织玻璃化法超低温保存中存在的一些问题及意义,并对其前景进行了展望.     

基于均匀设计优化深山草莓花瓣离体培养及植株再生体系

应用均匀设计法对深山草莓花瓣诱导愈伤组织和愈伤组织再分化芽苗的主要因子和水平进行了探讨.结果表明,深山草莓花瓣愈伤组织诱导的适宜培养基为LS+TDZ 2.06 mg.L-1+2,4-D 0.60 mg.L-1,诱导率为98%;愈伤组织再分化芽苗的适宜培养基为1/2 LS+TDZ 2.30 mg.L-1+NAA 0.10 mg.L-1+KT1.30 mg.L-1,分化率为96.3%.炼苗移栽后观察植株的形态、花、果及生长等特征,以筛选具有优良性状的株系.     

金边瑞香茎尖脱毒及快繁技术

报道了金边瑞香顶芽在MS 0.05 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA培养基中预培养20 d,再在34 ℃(11 h) 23 ℃(13 h)的昼夜温度交替下处理30 d后,剥离0.2～0.3 mm大小的茎尖在MS 0.1 mg/L6-BA 0.1 mg/LNAA培养基中的诱导成活率为80.0%,并获得脱毒苗.继代和增殖培养基为MS 0.5～1.0 mg/L6-BA 0.1 mg/LNAA,增殖系数4.1.试管苗在适宜培养条件下平均生根率为82.6%,在珍珠岩:泥炭=2:1基质中生根苗移栽成活率达到96.46%.     

温泉瓶尔小草离体培养及种质试管保存培养基的筛选

以温泉瓶尔小草新生幼叶为外植体,应用均匀设计法筛选其最适宜的离体培养和种质试管保存各阶段培养基.结果表明,最适合愈伤组织诱导的培养基为WPM＋ZT0.50 mg·L-1＋2,4-D1.90 mg·L-1,诱导率为96.5%;芽苗分化的培养基为WPM＋ZT1.70 mg·L-1＋NAA0.10 mg·L-1,分化率为99.0%;生根培养基为1/4MS＋IAA0.05 mg·L-1＋IBA0.03 mg·L-1,生根率达97.8%以上;试管保存培养基为WPM＋KT1.10 mg·L-1＋根皮苷3.20 mg·L-1,通过24个月的保存,芽苗生长率仅在6.5%以下.试验结果证明,成功建立了温泉瓶尔小草离体培养体系,常温条件下利用延缓生长的方法在试管内保存温泉瓶尔小草种质是可行的.     

丁酸钠预培养对水稻花药绿苗形成的影响

对水稻花药进行了丁酸钠预培养的试验,结果表明:2mM丁酸钠24小时的预处理,可以促进小孢子的均等分裂,增加多核花粉的比例,并影响愈伤组织诱导率和愈伤组织的分化绿苗潜力,对愈伤组织分化绿苗的促进作用尤其显著。丁酸钠对愈伤组织诱导的作用,与介质的pH的值有关,pH7.0的培养基的诱导率低于pH5.8,但对分化有利。 文章讨论了丁酸钠促进愈防组织分化的可能原因,以及丁酸钠影响愈伤组织诱导和促进分化之间关系。     

基于均匀设计法优化长白舌唇兰和凹舌兰的高效快繁体系

以长白舌唇兰和凹舌兰的茎尖为外植体,应用均匀设计法筛选最适合于原球茎和类原球茎诱导及类原球茎萌发为完整植株的培养基.结果表明,最适合长白舌唇兰原球茎和类原球茎诱导的培养基为N6+TDZ0.05 mg.L-1+NAA0.01 mg.L-1+KT0.50 mg.L-1,诱导率为92.5%;最适合凹舌兰原球茎和类原球茎诱导的培养基为N6+TDZ0.05 mg.L-1+KT0.50 mg.L-1,诱导率为98%;长白舌唇兰类原球茎萌发为完整植株的最佳培养基为N6+IAA0.01 mg.L-1,萌发率为96%;凹舌兰类原球茎萌发为完整植株的最佳培养基为N6+IAA0.01 mg.L-1+GA30.01 mg.L-1,萌发率为94.5%.以类原球茎的切片为材料进行类原球茎快繁的结果表明,在30～40 d的一个培养周期内,增殖倍数达100以上,成功建立了两种兰的高效快繁体系.同时对不同阶段培养材料的形态结构及超微结构的观察证明了两种兰的类原球茎发生发育过程.     

水稻花药培养简化培养基的研究

一、马铃薯取代 N_6培养基全部成分,与蔗糖、2,4-D 相配合,作为简化第一培养基,诱导效果一般低于 N_6,但在适宜条件下,可以提高。薯液浓度在10—30%范围内均有效,以20—25%较好。四个供试马铃薯品种、三种储存条件以及发芽马铃薯均能诱导水稻花粉去分化,但在诱导效果上有一定差异。补加铁盐有良好作用。二、水稻乳熟期谷浆与 N_6大量元素、铁、蔗糖与2,4-D 相配合,取代了 N_6的四种微量元素和四种有机成分,可以作为简化第一培养基。在多数情况下,谷浆培养基的诱导率低于N_6,而分化率高于 N_6.在适宜条件下,谷浆诱导效果可以超过 N_6.谷浆浓度在0.5—7%的范围内均能诱导愈伤组织。其中以浓度2%的效果较好。粳稻与秈稻的不同品种的谷浆都有诱导作用,但效果大小有所差别。在乳熟期范围内,不论发育早期、中期或后期的谷浆效果相近。用人工研磨、组织捣碎器提取以及高压灭菌低温储存等方法制作的谷浆均可应用。三、水稻乳熟期谷浆与 N_6大量元素、铁与蔗糖相配合,取代 N_6的四种微量元素、四种有机物质与两种植物激素,可以作为简化第二培养基,分化率与 N_6大致相近或较高。谷浆浓度0.5%—4%范围内似乎浓度愈高,分化效果愈好,初步探索了谷浆品种的效果。     

铁皮石斛叶肉原生质体的分离与培养研究

对铁皮石斛无菌试管苗叶片原生质体的游离及培养条件进行了研究.结果表明原生质体分离的适宜酶液配比是0.5%Pectinase和1.0%Cellulase Onozuka R-10,渗透压调节剂的浓度为0.5 mol/L,以蔗糖作为渗透压调节剂优于甘露醇和葡萄糖,质壁分离处理后的叶片原生质体产量提高了16.6%,存活率提高了14.2%.培养在1/10 MS附加2 mg/LNAA+0.5 mg/L6-BA和多种有机成分培养基上的铁皮石斛无菌苗叶片原生质体,3～5 d后开始第一次分裂,30 d后长成胚性细胞团.弱光照(150 1x)和稍低的温度((21±0.5)℃)适于原生质体的培养.     

建兰组织培养及根状茎增殖的动力学

以建兰品种小桃红根状茎为外植体,研究植物生长调节剂对根状茎增殖、分化和生根的影响,以及根状茎的增殖对培养基中营养物质消耗的变化规律。结果表明,根状茎增殖的最佳培养基是MS+6-BA 0.5mg·L-1+蔗糖30g·L-1,根状茎生长速度为7.33;根状茎分化的最佳培养基是MS+NAA 0.6mg·L-1+TDZ 1.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1,分化率为93.10%;生根的最佳培养基是1/2MS+NAA 1.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1+AC 0.05%,生根率为96.3%。根状茎增殖的生长量变化呈S型曲线,与细胞培养不同,各时期界限并不是很明显。培养基中碳源、氮源和磷酸盐的消耗曲线与根状茎的生长曲线基本一致。pH由于根状茎先消耗碱性盐(铵态氮)而下降,后利用硝态氮而上升。更多还原     

彩色棉再生体系影响因子及抗病基因NP-1转化的研究

选用彩色棉优良品种(棕色)：新彩1号、新彩2号，以下胚轴和子叶作为外植体，确立了5～6日苗龄的彩色棉下胚轴是较好的愈伤组织诱导外植体，不同激素组合及浓度对愈伤组织的诱导有重要作用，2，4—D是愈伤组织诱导中重要的激素，在附加有0．1mol／L2，4—D 0．1mol／LKT的MSB培养基上，诱导形成的愈伤组织质地疏松、生长旺盛，有利于分化为胚性愈伤，比较了不同糖源在愈伤组织诱导中的效应，在蔗糖和葡萄糖为糖源的培养基中，愈伤组织诱导率均为100％，但葡萄糖更有利于愈伤组织的形成和生长，蔗糖的诱导效果次之；麦芽糖和乳糖对愈伤组织的诱导效应不及蔗糖和葡萄糖；甘露醇作为糖源则抑制了愈伤组织的诱导和生长，在胚性愈伤组织的诱导培养中，KNO3加倍和NH4NO3减半的组合利于胚性愈伤组织的发生，在根癌农杆菌介导的抗病基因兔防御素NP—1转化过程中。外植体经农杆菌浸染10min，共培养48h较为合适，在添加头孢霉素500mg／L、卡那霉素50mg／L的培养基中筛选抗性愈伤组织。     

天目铁木愈伤组织和芽苗诱导技术

以天目铁木嫩茎尖为外植体,应用均匀设计法筛选其基部愈伤组织诱导和愈伤组织再分化芽苗的最适合培养基.结果表明,最适合的嫩茎尖基部愈伤组织诱导培养基为1/2DR+TDZ 2.30 mg·L^-1+2,4-D 0.55 mg·L^-1,诱导率为93.5%;愈伤组织芽苗再分化培养基为1/2DR+TDZ 3.30 mg·L^-1+KT 0.70 mg·L^-1,分化率达99.8%以上. 成功建立了天目铁木嫩茎尖离体诱导愈伤组织和芽苗再分化体系,且再生芽苗与野生植株染色体数目相同.     

太空莲根状茎离体繁殖初代培养条件

以太空莲3号根状茎为实验材料,研究了培养基成分、培养基状态、取材部位和取材时间对其初代培养的影响。研究结果表明:(1)初代培养的最佳培养基为:下层为MS+0.5mg·L-1NAA(单位下同)+0.5GA3+1.56-BA+30.0Vc+0.1%活性碳的固体培养基,上层为3-4mm厚的MS+0.5NAA+0.5GA3+1.56-BA+30.0Vc的液体培养基;(2)顶芽培养明显优于侧芽,侧芽培养多为无效;(3)取材时间在10月-12月外植体处于休眠前期为佳,污染率低,诱导率高。     

拟南芥菜Arabidopsis thaliana(L)Heynh的无菌培养和组织培养研究

我们对拟南芥菜无菌培养的条件作了初步研究。在培养过程中,对它的光周期反应进行试验,观察到它在25±1℃和光强度约4000勒克斯白色熒光连续光照的培养条件下,平均可在19天内开花;而以同样光强度,12小时光照/12小时黑暗交替处理时,则需要32天才能开花。据统计,经前法处理的植株,平均每株结实73.07±42.67粒,而后者则达150.00±42.67粒。同时,我们曾切取了无菌培养植株的茎段、叶柄和叶片进行组织培养,发现上述三种组织的外植体均能在附加2,4-D(0.5—5.0毫克/升)或NAA(1.0—8.0毫克/升)与KT(6-糠基氨基嘌吟,0.2或0.5毫克/升)的B_5和MS培养基上诱导出愈伤组织;并分別从它们分化出完整的再生植株。     

重瓣红玫瑰组织培养中培养基和培养条件的筛选

为解决重瓣红玫瑰繁殖周期长,不能满足日益增长的市场需求.以山东平阴地区培育的一种重瓣玫瑰作为实验材料,利用其带腋芽茎段为外植体,进行腋芽初代培养、继代培养、无菌苗的生根及移栽,探索其诱导、增殖、生根的最佳培养基配比及培养条件.结果表明,重瓣红玫瑰诱导芽的最佳培养基配比为MS culture medium(MS)+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)1.5 mg·L~(-1)+萘乙酸(NAA)0.1 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+0.8%琼脂;芽增殖的最佳培养基配比为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 0.25 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+0.8%琼脂;最佳生根培养基为1/2MS+吲哚丁酸(IBA)1 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+0.8%琼脂+黑暗条件培养.     

切花百合组织培养的研究

在ＭＳ固体培养基上,研究了不同浓度的ＮＡＡ（萘乙酸）与６－ＢＡ（６－苄基腺嘌呤）配比对诱导切花百合小鳞茎的影响,培养２０d后统计,结果以ＭＳ＋６－ＢＡ０．５mg/Ｌ（单位不同）＋ＮＡＡ１．２的培养基上诱导率最高,达１００％;采用正交试验的方法,以其本培养基的种类、６－ＢＡ和ＮＡＡ的浓度为三因子,对小鳞茎进行液体振荡增殖培养,一个月后统计表明,最佳培养基为ＭＳ＋６－ＢＡＡ０．５,其增殖率为２６２５％。     

莴苣 (Lactuca sativa L) 髓组织的愈伤组织形成和植株再生的研究

本文研究了莴苣髓组织外植体愈伤组织的诱导形成和愈伤组织的器官分化.髓组织的外植体在含有2毫克/升NAA和2.5毫克/升KT的稍加改动的Miller培养基上只要6天时间,就可诱导产生出愈伤组织.并证明了莴苣髓组织的愈伤组织需要同时提供外源生长素和激动素才能正常增生.在愈伤组织的分化中,发现根的分化较为容易,而芽的分化则较为困难.它不但受激素的配比的影响,而且也受培养基的渗透压和离子浓度的影响.变换培养基类型有利于组织上芽的分化.从愈伤组织分化出的小苗能在试管里抽苔、开花.