肿瘤相关成纤维细胞外泌体调控PI3K/AKT/mTOR信号通路影响肺癌细胞的生长和转移

目的探究肿瘤相关成纤维细胞外泌体对肺癌细胞生长和转移的影响及机制。方法取肺癌患者的癌组织和癌旁组织分离肿瘤相关成纤维细胞(Cancer-associated fibroblasts,CAFs)和成纤维细胞(Normal Fibroblasts,NFs),免疫荧光和Western blot鉴定CAFs和NFs中α-SMA、FSP-1、FAP、Vimentin表达,差速离心法提取CAFs和NFs细胞外泌体,利用透射电镜和Western blot鉴定外泌体,将外泌体与肺癌细胞A549共孵育后检测细胞增殖、迁移、侵袭、细胞凋亡水平,Western blot检测PI3K/AKT/mTOR信号通路激活水平。结果α-SMA、FSP-1、FAP、Vimentin高表达于CAFs;透射电镜和Western blot鉴定外泌体符合其特征;与PBS组相比,与CAFs外泌体共孵育组A549细胞增殖、迁移、侵袭能力显著增加(P<0.001),细胞凋亡水平显著降低(P<0.001),PI3K、AKT、mTOR磷酸化水平显著增加,而与NFs外泌体共孵育后细胞增殖、迁移、侵袭以及凋亡水平无显著变化,PI3K、AKT、mTOR磷酸化水平无显著变化。结论肿瘤相关成纤维细胞外泌体能够通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路,而促进肺癌细胞的生长和转移。     

肿瘤相关成纤维细胞对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制研究

[目的]观察肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)对胃癌HGC-27细胞侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。[方法]取胃癌患者癌组织及癌旁正常胃黏膜组织分别分离培养CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),建立胃癌HGC-27细胞与CAFs或NFs共培养体系,CCK-8比色法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞侵袭能力的改变,免疫印迹法检测细胞上皮间质转化(EMT)标志物[E-钙粘素(E-cadherin)蛋白、波形蛋白(Vimentin)和纤维连接蛋白(Fibronectin)蛋白]、MMP-9、STAT3、p-STAT3蛋白表达的改变。[结果]胃癌HGC-27细胞与CAFs共培养后其增殖和侵袭能力均较HGC-27细胞单独培养组或与NFs共培养组显著增强,且E-cadherin蛋白表达明显下调,同时Vimentin、Fibronectin蛋白的表达明显上调,MMP-9蛋白表达上调;STAT3总量未发生变化,p-STAT3表达上调。[结论]CAFs可促进胃癌细胞的侵袭能力,其机制可能是通过激活STAT3通路进而促进细胞EMT。     

肿瘤相关成纤维细胞对大肠癌LoVo细胞增殖和侵袭能力的影响

目的观察肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)对大肠癌LoVo细胞增殖和侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法从6例大肠癌患者癌组织及癌旁正常结肠黏膜组织分别分离培养CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),并鉴定CAFs,建立大肠癌LoVo细胞与CAFs或NFs共培养体系,CCK-8比色法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞侵袭能力的改变,免疫印迹法(Western blotting)检测细胞COX-2、MMP-9蛋白表达的改变,ELISA法检测细胞上清液中前列腺素E_2(PGE_2)的含量。结果成功分离CAFs,CAFs中成纤维细胞活化蛋白(fibroblast-activated protein,FAP)与平滑肌激动蛋白-α(α-smooth-muscle actin,α-SMA)表达较NFs细胞的表达量显著增加;LoVo细胞与CAFs共培养后其增殖和侵袭能力均较LoVo细胞单独培养或与NFs共培养组显著增强,且COX-2和MMP-9蛋白表达明显升高,细胞上清液中PGE_2含量显著增加。结论 CAFs可促进大肠癌细胞的增殖、提高其侵袭能力,其机制可能是通过上调大肠癌细胞COX-2表达和PGE_2含量。但CAFs如何调控大肠癌细胞COX-2/PGE_2表达有待进一步探讨。     

胃癌成纤维细胞中HAS2对胃癌细胞转移的影响

目的探讨胃癌成纤维细胞中透明质酸合成酶(HAS2)对胃癌细胞转移的影响。方法从手术切除的胃癌组织及癌旁正常组织中分别分离及培养胃成纤维细胞(CAFs)及正常成纤维细胞(NFs)。蛋白质免疫印迹(Western blot)及免疫荧光染色检测CAFs与NFs中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及HAS2的表达。利用siRNA下调CAFs中HAS2的表达,Western blot及免疫荧光染色检测CAFs中HAS2的表达,细胞迁移(Transwell)及划痕闭合实验检测胃癌细胞SGC7901的侵袭及迁移能力,Western blot检测SGC7901细胞上皮-间质转化相关蛋白E-cadherin、vimentin及N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达。结果α-SMA与HAS2在CAFs中高表达,vimentin在CAFs与NFs中均表达,而E-cadherin在CAFs与NFs中不表达。与si-NC组相比,si-HAS2组CAFs中HAS2表达降低,SGC7901细胞的侵袭及迁移能力降低,SGC7901细胞中上皮-间质转化相关蛋白E-cadherin表达升高,而Vimentin及N-cadherin表达降低。结论下调胃癌CAFs中HAS2的表达,可抑制胃癌细胞的侵袭、迁移及上皮-间质转化。     

肿瘤相关成纤维细胞在胆管癌中作用的研究进展

胆管癌（CCA）是一种具有高度异质性和侵袭性的恶性肿瘤。肿瘤微环境是指肿瘤细胞存在的周围微环境，主要由肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）、肿瘤相关巨噬细胞、肿瘤浸润淋巴细胞、内皮细胞和细胞外基质组成。作为肿瘤微环境的重要组成部分，CAFs可通过多因子、多途径与CCA细胞相互作用，从而促进CCA细胞增殖、侵袭、迁移以及免疫逃逸和化疗耐药。此外，CAFs基因组较肿瘤细胞稳定，不易出现抗原改变和治疗耐受。因此，靶向CAFs的治疗策略在CCA中具有较大潜力。但由于CAFs缺乏特异性并存在功能异质性，目前尚无精准针对CAFs的靶向治疗方案。未来需更深入地了解CAFs的作用机制，从而为CCA的精准治疗提供新的思路。     

肿瘤相关成纤维细胞在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌(colorectal cancer, CRC)在世界各国都是高发性疾病.肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)是肿瘤微环境(tumormicroenvironment, TME)中的重要成分,在CRC的发生发展过程中起了重要作用. CAFs通过分泌多种细胞因子及外泌体、激活多种相关信号通路促进CRC的侵袭、转移、代谢和耐药、免疫抑制等,也可作为CRC的预后标志物及治疗靶点.因此,研究CAFs在CRC中所扮演的角色及具体的作用机制有重要意义,以期为CRC的治疗提供新的方向.本文就CAFs在CRC发生发展中的多种调控机制及治疗进行综述,介绍CAFs在调节结直肠癌细胞的侵袭、转移、代谢和耐药、免疫抑制中的作用.     

肿瘤相关成纤维细胞对大肠癌LoVo细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响

目的观察肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)对大肠癌LoVo细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响,并探讨其可能的作用机制。方法取大肠癌患者癌组织及癌旁正常结肠黏膜组织分别分离培养CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),建立大肠癌LoVo细胞与CAFs或NFs共培养体系,奥沙利铂处理后CCK-8比色法检测LoVo细胞存活率,PI/Annexin V双染法检测细胞凋亡率;免疫印迹法(Western blotting)检测共培养体系中大肠癌细胞COX-2、上皮间质转化(EMT)相关蛋白(E-cadherin、Vimentin、Fibronectin)表达的改变,ELISA法检测共培养体系中细胞上清液中前列腺素E_2(PGE_2)含量。结果 CAFs可提高奥沙利铂处理后LoVo细胞存活率,并降低细胞凋亡率;LoVo细胞与CAFs共培养后,细胞COX-2蛋白表达上调,细胞上清液中PGE_2含量显著增加,且细胞EMT标志物蛋白E-cadherin表达降低,Vimentin、Fibronectin蛋白表达上调。结论 CAFs可降低大肠癌LoVo细胞对奥沙利铂的敏感性,其机制可能是通过上调大肠癌细胞COX-2表达和PGE_2合成,继而诱导EMT。     

大鼠肺动脉和主动脉成纤维细胞的原代培养及生物学行为研究

目的 建立大鼠肺动脉和主动脉外膜成纤维细胞的体外分离、培养及鉴定的方法,并对其细胞形态和成纤维细胞转化成肌成纤维细胞的特征进行观察.方法 通过精分肺动脉和主动脉,剥取外膜,用10％的胎牛血清低糖DMEM培养基诱导细胞爬出生长.倒置显微镜下观察成纤维细胞形态,并对细胞进行免疫荧光鉴定.通过对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的观察确定传代细胞是否转化为肌成纤维细胞.结果 成纤维细胞能够迅速从剥取的外膜中爬出生长,波形蛋白细胞免疫荧光染色为阳性.主动脉成纤维细胞和肺动脉成纤维细胞形态差别大,前者为铺路石状,后者呈细长梭形.2种成纤维细胞经传代皆能转化为肌成纤维细胞,免疫荧光染色可见α-SMA大量表达,前者包围着细胞核呈条索状非定向分布,后者平行于细胞长轴呈细丝状表达.结论 该方法所获得的成纤维细胞纯度高,可在体外稳定培养.本研究首次发现了肺动脉和主动脉成纤维细胞形态学及生物行为上的差别,为细胞水平研究主动脉和肺动脉血管重塑,胶原沉积等相同或不同的病理机制提供了充足可靠的靶细胞模型.     

肿瘤相关成纤维细胞在肝细胞癌中的作用及机制

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是原发性肝癌最常见的病理类型，病死率高，发病机制复杂，缺乏有效的治疗方案。肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)是肿瘤微环境(tumor microenvironment, TME)中具有不同细胞来源、表型的活化成纤维细胞，与肿瘤细胞串扰，影响肿瘤的生长和侵袭。CAFs通过分泌多种生长因子和细胞因子，促进细胞外基质重塑、促进HCC的血管生成和血管生成拟态(vasculogenic mimicry, VM)、抑制HCC微环境中的肿瘤免疫、代谢重编程等生物学活动，进而参与HCC细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭、血管生成、免疫逃逸等，促使HCC的发生发展。探索CAFs与HCC发生发展机制，预测HCC患者的生存率，CAFs将有可能作为HCC治疗的潜在靶点，对于研究新的小分子靶向药物具有重要意义。本文就近年来关于CAFs的起源、异质性，及其在HCC中发生发展的作用机制，以及展望CAFs将可能作为HCC潜在治疗靶点等作一综述。     

支架蛋白RACK1小干扰RNA抑制卵巢癌细胞CAOV3的增殖、迁移和侵袭

目的观察支架蛋白RACK1小干扰RNA(siRNA)对卵巢癌CAOV3细胞增殖、迁移和侵袭的影响和基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达变化。方法体外培养CAOV3细胞,实验分scramble siRNA组和RACK1 siRNA组;Lipofectamine 2000转染CAOV3细胞,Western印迹检测RACK1的干涉效能;MTT法测定CAOV3细胞的增殖率;划痕实验和transwell迁移和侵袭实验研究RACK1对细胞体外增殖、迁移和侵袭运动能力的影响;Western印迹检测CAOV3细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达。结果与scramble siRNA组比较,RACK1 siRNA组RACK1的蛋白表达水平降低,明显抑制CAOV3细胞的增殖、迁移和侵袭,降低MMP-2和MMP-9蛋白表达。结论下调RACK1表达可抑制卵巢癌细胞CAOV3的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与改变MMP-2和MMP-9蛋白表达相关。     

microRNA-10a抑制结肠癌肝转移肿瘤相关成纤维细胞活性的研究

目的探讨microRNA-10a(miR-10a)对肝脏微环境中肿瘤相关成纤维细胞(TAFs)的增殖、迁移以及促炎性因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素1(IL-1)βmRNA表达水平的影响。方法收集同一结肠癌患者癌旁正常肝组织和转移至肝脏的病灶组织,采用组织块法建立原代人肝正常成纤维细胞(NFs)和原代TAFs。通过形态学观察和细胞免疫荧光染色对NFs和TAFs进行鉴定,并通过流式细胞术鉴定二者的纯度。用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NFs和TAFs中miR-10a的表达水平,并在低表达miR-10a的细胞中过表达miR-10a。随后采用CCK-8实验、划痕实验和RT-qPCR分别检测miR-10a对该细胞增殖、迁移能力以及IL-6、IL-8、IL-1βmRNA表达水平的影响。结果细胞免疫荧光染色显示人细胞角蛋白18(CK-18)在NFs和TAFs中均不表达;成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1)在两细胞中均表达;α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在NFs中弱表达,在TAFs中强表达。流式细胞术显示NFs与TAFs中α-SMA阳性率为95.0%和95.3%。miR-10a在TAFs的表达水平为NFs的0.65倍(P<0.01)。过表达miR-10a后TAFs在第3、4和5天增殖能力显著低于同时期的阴性对照组细胞(P<0.05,P<0.05,P<0.01);TAFs的迁移能力在24 h和48 h分别较阴性对照组降低25%和15%(P<0.01,P<0.05),TAFs中IL-6、IL-8、IL-1β的表达水平分别较阴性对照组降低54%、27%和42%(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。结论miR-10a在TAFs中呈低表达,miR-10a过表达抑制了TAFs的增殖和迁移,并降低炎性因子IL-6、IL-8、IL-1βmRNA的表达,这可能是TAFs抑制肝脏形成转移灶的重要因素。     

垂体腺瘤VEGF和bFGF的表达及相关性研究

目的 研究血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在垂体腺瘤中的表达及其相关性,探讨它们与垂体腺瘤侵袭性生长的关系.方法 垂体腺瘤组织标本55例,其中侵袭性者30例,非侵袭性者25例.运用HE染色方法在光镜下观察垂体腺瘤组织的细胞形态、结构及排列方式,并用免疫组化法检测标本中VEGE和bFGF的表达情况.结果 侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤组织的病理特点在HE染色光镜下不易区分;VEGF和bFGF在侵袭性垂体腺瘤中的表达明显高于在非侵袭性垂体腺瘤(P<0.05),在侵袭性垂体腺瘤中两者的表达存在正相关关系(r=0.508,P<0.05).结论 VEGF和bFGF的过度表达与垂体腺瘤的侵袭性生长有密切的关系,两者具有协同作用,可以反映垂体腺瘤的生物学行为.     

KGF对人卵巢癌CAOV3细胞增殖及其ERK活性的影响

目的观察角质细胞生长因子（KGF）对人卵巢癌CAOV3细胞增殖及其细胞外调节信号激酶（ERK）活性的影响。方法体外培养CAOV3细胞，MTT比色法测定不同浓度KGF对该细胞增殖的影响；免疫沉淀法纯化蛋白，ERK1／2试剂盒测定ERK活性；Western—Blot测定ERK蛋白（p-ERK）。结果KGF能显著促进CAOV3细胞增殖，增强其ERK活性及p-ERK表达。结论KGF可以促使人卵巢癌CAOV3细胞的增殖，其机制与增强ERK活性及p-ERK表达有关。     

人肛瘘管壁成纤维细胞的体外分离培养和鉴定

通过组织块法分离并原代培养人肛瘘管壁组织，用胰蛋白酶和乙二胺四乙酸（EDTA）消化成纤维细胞、上皮细胞，获得更加纯化的成纤维细胞；以DMEM培养液为基础培养蒸，添加胎牛血清（体积分数10％）、青霉素（100U／L）和硫酸链霉素（100U／L），置37℃、5％CO2培养箱中培养。倒置相差显微镜和细胞爬片HE染色。观察成纤维细胞形态结构，并对培养成纤维细胞行角蛋白、波形蛋白免疫细胞化学鉴定．结果分离后的成纤维细胞在第4～12h于体外快速贴壁，第2～4天进入对数期生长、增殖期。细胞起源鉴定波形蛋白免疫细胞化学染色为阳性，角蛋白免疫细胞化学染色为阴性。提示该方法所获得的肛瘘管壁成纤维细胞可在体外稳定培养，不含有杂质细胞。可为在细胞分子水平上研究肛瘘瘘管愈合的机制提供可靠的细胞模型。     

RNA干扰cAMP反应元件结合蛋白对碱性成纤维细胞生长因子诱导的人卵巢癌细胞Bcl-2表达的影响

目的探讨cA MP反应元件结合蛋白(CREB)是否介导碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)诱导的人卵巢癌CAOV3细胞Bcl-2的表达。方法分为①空白对照组,阴性对照组,siRNA CREB组。脂质体转染干扰序列72 h,RT-PCR、Western印迹检测CREB表达并鉴定转染最佳浓度。②对照组,b FGF组,b FGF+siRNA组。转染48 h后饥饿培养24 h。RT-PCR,Western印迹检测Bcl-2表达。倒置显微镜下观察细胞生长及形态改变,MTT法检测细胞增殖。结果①与两对照组相比,siRNA CREB明显抑制CREB mRNA及蛋白表达(P<0.01),100 nmol/L抑制效果最佳。②与对照组相比,b FGF组明显促进细胞生长,上调Bcl-2表达,b FGF+siRNA CREB组则部分抑制b FGF的作用(P<0.01)。结论 b FGF可能部分通过CREB调节人卵巢癌CAOV3细胞Bcl-2的表达,参与细胞的生存及增殖调控。     

蛋白激酶抑制剂B对卵巢癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响

目的 探讨蛋白激酶抑制剂(PKI)B低表达对卵巢癌A2780细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 用PKIB shRNA慢病毒载体和shRNA control慢病毒载体分别转染A2780细胞构建PKIB低表达A2780细胞株(PKIB shRNA)及其对照细胞株(NC),用CCK-8细胞增殖实验研究低表达PKIB对A2780细胞增殖、侵袭的影响,细胞划痕实验检测细胞迁移能力.结果 PKIB低表达可显著加强细胞增殖,促进卵巢癌细胞侵袭和迁移能力(P<0.05).结论 卵巢癌细胞的增殖和侵袭能力与PKIB表达相关,为卵巢癌治疗寻找新的基因靶位提供可靠理论依据.     

沉默GRP78基因对人卵巢癌SKOV3细胞侵袭力的抑制作用

目的 探讨RNA干涉技术(RNAi)沉默葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因对人卵巢癌SKOV3细胞侵袭力的影响,阐明GRP78基因沉默对SKOV3细胞侵袭力抑制作用的生物学机制.方法 设计并构建pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA重组质粒,脂质体介导转染至SKOV3细胞.RT-PCR和Western印迹法检测GRP78基因表达;RT-PCR检测MMP-2、MMP-9 mRNA表达;Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭力;Transwell小室迁移实验检测细胞迁移率.结果 RT-PCR及Western印迹检测转染GRP78 siRNA重组质粒SKOV3细胞GRP78基因表达抑制;RT-PCR结果显示与对照组相比转染GRP78 siRNA重组质粒SKOV3细胞MMP-2、MMP-9 mRNA表达降低;Transwell小室侵袭实验和迁移实验结果显示转染GRP78 siRNA重组质粒SKOV3细胞穿透细胞数(P＜0.05)和迁移率均明显降低(P＜0.05).结论 ①转染GRP78 siRNA重组质粒有效抑制SKOV3细胞GRP78基因表达;②抑制GRP78基因表达能降低SKOV3细胞的侵袭力和迁移力,有望为抑制卵巢癌转移基因治疗提供新的靶点.     

碱性成纤维细胞生长因子在烟草烟雾诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的探讨烟草烟雾提取物对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及碱性成纤维细胞生长因子在其中的作用。方法按不同浓度烟草烟雾提取物(0、2.5%、5%、10%和20%)分为对照组、低浓度、中等浓度、高浓度和过高浓度烟草烟雾提取物组刺激血管平滑肌细胞,采用MTT法观察细胞增殖变化,免疫细胞化学法测定碱性成纤维细胞生长因子和增殖细胞核抗原蛋白的表达,同时用逆转录-聚合酶链反应法检测碱性成纤维细胞生长因子mRNA表达。用筛选出的最适烟草烟雾提取物浓度处理大鼠血管平滑肌细胞不同时间(0、4、8、12 h和24 h)后,检测碱性成纤维细胞生长因子mRNA及碱性成纤维细胞生长因子和增殖细胞核抗原蛋白的变化。用碱性成纤维细胞生长因子抗体和最适浓度烟草烟雾提取物干预血管平滑肌细胞24 h后检测细胞增殖及碱性成纤维细胞生长因子和增殖细胞核抗原蛋白表达的变化。结果 (1)与对照组相比,低浓度烟草烟雾提取物组(P0.05)和中浓度组血管平滑肌细胞增加明显(P0.01),而高浓度组和过高浓度组与对照组比较差异无显著性(P0.05)。碱性成纤维细胞生长因子mRNA、蛋白和增殖细胞核抗原蛋白在对照组中有少量表达,低浓度烟草烟雾提取物组表达增加(P0.01),中浓度烟草烟雾提取物组达到高峰,高浓度和过高浓度烟草烟雾提取物组仍高于对照组(P0.01)。(2)对照组(不加烟草烟雾提取物组即0 h组)血管平滑肌细胞中有少量碱性成纤维细胞生长因子mRNA、蛋白和增殖细胞核抗原蛋白表达。低浓度烟草烟雾提取物刺激4 h后细胞内碱性成纤维细胞生长因子mRNA、蛋白和增殖细胞核抗原蛋白表达增加(P0.01),碱性成纤维细胞生长因子mRNA于8 h达高峰;碱性成纤维细胞生长因子和增殖细胞核抗原蛋白于12 h达高峰。(3)碱性成纤维细胞生长因子抗体可显著抑制5%烟草烟雾提取物诱导的血管平滑肌细胞增殖和碱性成纤维细胞生长因子、增殖细胞核抗原蛋白表达增加。结论低浓度和中浓度烟草烟雾提取物对大鼠血管平滑肌细胞的促增殖作用逐渐增加;高浓度和过高浓度组时促增殖作用反而减弱。烟草烟雾提取物可能是通过增加碱性成纤维细胞生长因子的表达促进大鼠血管平滑肌细胞的增殖。     

CD147在单核-巨噬细胞促进成纤维细胞分泌活化基质金属蛋白酶中的作用及意义

目的 探讨cD147在单核-巨噬细胞(THP-1)诱导成纤维细胞(HFC)分泌基质金属蛋白酶(MMPs)过程中的作用及其在类风湿关节炎(RA)发病机制中的意义。方法 通过建立THP-1与HFC体外共培养模型，采用流式细胞术、明胶酶谱电泳分析法和侵袭小室法，观察THP-1细胞表面CD147的表达、THP-1与HFC共培养前后上清中MMPs的分泌与活化水平、侵袭力的变化。结果 THP-1细胞表面CD147呈现高表达：共培养后MMPs的产生以及侵袭力均明显增强：CD147拮抗肽AP-9对共培养后明胶酶的产生以及侵袭力均有明显的抑制作用。结论 单核-巨噬细胞通过CD147促进成纤维细胞MMPs分泌活化水平的提高及侵袭力的增强。提示CD147可能成为导致RA受损关节软骨、骨基质降解的重要因素之一。     

心钠素及内皮素对心肌细胞肥大及心脏成纤维细胞增殖的影响

目的观察心钠素(ANP)、内皮素-1(ET-1)对心肌细胞肥大和心脏成纤维细胞增殖的调节作用.方法采用体外乳鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞培养,一定浓度的 ET-1、ANP单独或联合作用细胞24 h,以3H-胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)、3H-亮氨酸(3H-Leu)掺入法测定细胞DNA、蛋白合成,Bradford法测细胞总蛋白含量,RT-PCR法测心肌细胞心钠素ANP mRNA的表达,评价ET-1、ANP对心肌细胞和成纤维细胞的作用.结果对于心肌细胞,ET-1显著促进3H-TdR、3H-Leu掺入,总蛋白含量增加,呈剂量依赖性,ANP mRNA表达明显增加;对于心脏成纤维细胞,ET-1促进3H-TdR、3H-Leu掺入,总蛋白含量增加,以上作用可被ANP明显抑制.结论ET-1促进ANP分泌的同时也促进心肌细胞肥大和心脏成纤维细胞增殖,ANP反之抑制ET-1的促心肌肥厚作用.