产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和催产克雷伯菌的耐药性分析

随着第三代头孢菌素在临床上的大量使用 ,产超广谱β -内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ)的菌株已愈来愈多 ,给临床感染性疾病的治疗带来一定困难。为了解本地ＥＳＢＬｓ菌株的分布和耐药情况 ,作者对本院近一年来分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和催产克雷伯菌进行了ＥＳＢＬｓ的检测和药敏分析 ,现报道如下。1　材料与方法1.1　菌株来源　 2 0 0 0年 3月至 2 0 0 1年 3月从本院门诊和病房患者标本中分离出来的 96株大肠埃希菌、5 9株肺炎克雷伯菌和 32株催产克雷伯菌。1.2　药敏分析　头孢他啶 (ＣＡＺ) 30 μｇ/片 ;ＣＡＺ30 μｇ/片 /克拉维酸 (ｃ…     

超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌对19种抗生素的耐药性

为了解产超广谱β内酰胺酶(ＥＳＢＬｓ)大肠埃希菌耐药特征,以期为临床合理选择抗生素和有效控制产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌感染提供依据,我们测定了40株产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌对19种抗生素的敏感性,并将产ＥＳＢＬｓ和不产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌的耐药性进行对比分析,报告如下。一、材料与方法1菌株:受试大肠埃希菌共82株,其中40株产ＥＳＢＬｓ,42株ＥＳＢＬｓ阴性,均为临床分离株。质控菌株:大肠埃希菌ＡＴＣＣ25922;产ＴＥＭ3酶和ＴＥＭ1酶Ｅｃｏｌｉ分别作为ＥＳＢＬｓ阳性和ＥＳＢＬｓ阴性对照菌,由美国Ｊａｃｏｂｙ教授惠赠。2ＭＨ琼脂和…     

环丙沙星耐药的产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌gyrA基因突变研究

环丙沙星耐药的产超广谱 β内酰胺酶大肠埃希菌(ＥＳＢＬｓ Ｅｃｏ)喹诺酮作用靶位酶ｇｙｒＡ基因变化状况鲜有报道。为了解环丙沙星耐药的ＥＳＢＬｓ Ｅｃｏ菌ｇｙｒＡ基因突变存在与否 ,我们对 11株临床分离的ＥＳＢＬｓ Ｅｃｏ菌进行了ｇｙｒＡ基因喹诺酮耐药决定区 (ＱＲＤＲ)聚合酶链反应 (ＰＣＲ)测序分析。1.菌株来源 :ＴＥＭ2 型Ｅｃｏ菌 (Ｅｃｏ .ｊ5 3ＲＰ4)由上海第二医科大学瑞金医院倪语星教授惠赠 (经检测该菌为环丙沙星敏感菌 )。环丙沙星耐药的ＥＳＢＬｓ Ｅｃｏ菌为 2 0 0 0年 12月～ 2 0 0 1年 4月临床分离株 ,均参照美国…     

2种超广谱β—内酰胺酶测定方法与确诊试验的比较

随着对质粒介导的超广谱 β 内酰胺酶 (ＥＳ ＢＬｓ)研究的深入 ,人们认识到检测ＥＳＢＬｓ的重要性 ,但这些产ＥＳＢＬｓ菌株往往不能用常规药物敏感试验来区别 ,以至于延误了临床治疗 ,或造成地区的流行。ＥＳＢＬｓ检测分筛选和确诊 2个层次。我们通过双纸片协同试验、Ｅ ｔｅｓｔ和纸片确诊试验对ＥＳＢＬｓ的测定作一探讨。材料和方法一、材料1 .菌株　从我院 1 998年临床标本中分离出的 1 2 5株大肠埃希菌和肺炎克雷白菌中用ＭｉｃｒｏＳｃａｎ筛选出 (头孢泊肟ＭＩＣ≥ 2 μｇ/ｍｌ)ＥＳＢＬｓ初筛阳性株 5 5株 ;大肠埃希菌ＡＴＣＣ …     

66株阴沟肠杆菌超广谱β—内酰胺酶的检测

我们从 6 6株阴沟肠杆菌检出产超广谱 β 内酰胺酶 (ＥＳ ＢＬ) 8株 ,并对头孢噻肟、泰能等 8种抗生素作药敏试验 ,报告如下。1　材料与方法1.1　菌株　 6 6株阴沟肠杆菌从我院临床送检的 875份标本中分离得到 ,常规分离按《全国临床检验操作规程》 ,采用ＡＰＩ2 0Ｅ系统手工法鉴定。1.2　药敏纸片　头孢他啶 (ＣＡＺ) ,头孢他啶 /棒酸 ;头孢噻肟(ＣＴＸ) ,头孢噻肟 /棒酸 ,泰能安灭菌均为Ｏｘｏｉｄ产品。质控菌株ＡＴＣＣ 2 5 92 2大肠埃希菌及ＡＴＣＣ 70 0 6 0 3肺炎克雷伯菌。1.3　方法　药敏试验Ｋ Ｂ法。ＥＳＢＬ的检测程序为纸片扩…     

简介美国NCCLS药敏试验法规(1999年1月版)的变动部分

１９９９年１月美国临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）出版的《药敏试验实施标准;第９次信息补充》（Ｍ１００Ｓ９）文件［１］对当前在临床上有重要意义的耐药菌株的检测做了许多的补充和修改。如新版本对于产超广谱β内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）株的检测、耐苯唑西林的凝固酶阴性的葡萄球菌（ＭＲＳＣｏＮ）的检测,进行了修改;增添幽门螺杆菌的药敏试验的操作规程和判定标准;补充肠球菌药敏试验的注意事项;补充几种新药的判定标准。１关于肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌中ＥＳＢＬ株的检测方法：新版本中修改要点包括…     

154株耐甲氧西林葡萄球菌对利福平及其他抗菌药物敏感性分析

为了了解利福平对耐甲氧西林葡萄球菌 (ＭＲＳ)的抗菌作用 ,对我院 2 0 0 1年 5月至 12月从临床分离的 15 4株ＭＲＳ ,采用Ｋ Ｂ纸片扩散法对利福平进行了药敏试验 ,并与其他 8种抗菌药物的敏感性作了比较 ,报告如下。1　材料与方法1 1　培养基　Ｍ櫣ｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ琼脂 (Ｏｘｏｉｄ)。1 2　药敏纸片　苯唑西林、利福平、万古霉素、复方新诺明、环丙沙星、庆大霉素、红霉素、四环素、头孢噻吩和青霉素 (均为Ｏｘｏｉｄ) ,用金黄色葡萄球菌 (ＡＴＣＣ 2 5 92 3 )作质控。1 3　菌株　 15 4株ＭＲＳ分离自住院及门诊病人的血液、胸水…     

超广谱β—内酰胺酶的两种实验室检测方法比较

医院实验室多数采用双纸片协同试验检测超广谱 β -内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ) ,而ＮＣＣＬＳ推荐双纸片增效试验为ＥＳＢＬｓ的确证试验。我们根据ＮＣＣＬＳ推荐的纸片扩散法筛出可疑产ＥＳＢＬｓ的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 ,再用双纸片协同试验与双纸片增效试验方法进行测试 ,结果分析如下。1　材料与方法1 1　菌株　我院 1999年 10月～ 2 0 0 0年 1月从临床各类标本中分离鉴定出的Ｅ ｃｏｌｉ(大肠埃希菌 )和Ｋ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ(肺炎克雷伯菌 ) ,根据ＮＣＣＬＳ 1999年版推荐的纸片扩散法 ,头孢噻肟 (ＣＴＸ)≤ 2 7ｍｍ、头孢他啶 (Ｃ…     

耐甲氧西林金葡菌:五种选择培养基的评价

以往 ,公共健康实验服务机构已公布了检测耐甲氧西林金葡菌 (ＭＲＳＡ)培养基的检测速度和敏感性的调查。推荐使用含苯甲异口恶唑青霉素的甘露醇盐琼脂 (ＯＭＳＡＯ) ,在耐环丙沙星菌株流行的地区加用含环丙沙星的Ｂａｉｒｄ Ｐａｒｋｅｒ培养基(ＢＰＣ)。另三种分离金葡菌或ＭＲＳＡ的替代培养基尚需评价。第一种培养基———ＭＭＳＡＯ ,与甘露醇盐琼脂不同 ,降低了氯化钠浓度以允许对盐敏感的金葡菌生长。加入苯甲异恶唑青霉素 ( 2ｍｇ/Ｌ)以增加对ＭＲＳＡ的选择性。第二种培养基———ＣＨＲＡＣ源于一种新的产色培养基 :ＣＨＲＯＭａ…     

55株阴沟肠杆菌产超广谱β—内酰胺酶情况及耐药分析

近年来 ,阴沟肠杆菌 (Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏａｃａｅ)已成为医院内感染的常见菌。本研究收集 1999年 3月～ 10月上海长海医院和长征医院分离的阴沟肠杆菌 5 5株 ,用双纸片协同扩散法检测超广谱 β 内酰胺酶 (ｅｘｔｅｎｄｅｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍｂｅｔａ ｌａｃ ｔａｍａｓｅｓ ,ＥＳＢＬｓ) ,用Ｋｉｒｂｙ Ｂａｕｅｒ法作药敏试验 ,以了解阴沟肠杆菌产ＥＳＢＬｓ及耐药情况 ,并指导临床用药。一、材料和方法1.材料　 (1)临床菌株 :1999年 3月～ 10月 ,由上海长海医院和长征医院提供从住院患者各种标本中分离的阴沟肠杆菌 5 5株。 …     

耐甲氧西林葡萄球菌的DNA 探针杂交检测

我们认为有效控制耐甲氧西林葡萄球菌(ＭＲＳ)感染的流行,准确的检测是关键,但常规药敏方法易受酸碱度、温度、盐浓度等因素的影响,结果不准确,主张从耐药基因型(ＭｅｃＡ基因)进行检测诊断[13],主要方法之一为ＤＮＡ探针杂交检测ＭｅｃＡ基因诊断ＭＲＳ。一、材料和方法1菌株来源:共39株菌,其中22株为本院实验室保留菌株,16株菌为最近从重症监护病房(ＩＣＵ)一次暴发流行中分离所得,另1株为质控菌(金葡菌ＡＴＣＣ25923)。2试剂:ＴＥａｓｙ载体,限制性内切酶ＥＣＯＲＩ,通用引物Ｔ7ＰｒｏｍｏｔｅｒＰｒｉｍｅｒ,ＤＮＡ探针标记试剂盒均为Ｐ…     

超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌大肠埃希菌耐药监测

肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌是产超广谱 β 内酰胺酶(ＥＳＢＬｓ)的代表菌种。本研究对上海地区 4家医院分离的930株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌做药敏监测 ,并用双纸片协同扩散法 (ＤＤＳ)检测ＥＳＢＬｓ,以了解上海部分地区肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产ＥＳＢＬｓ及耐药情况。一、材料与方法1.菌株来源 :1999年 3～ 10月上海长海医院、长征医院、肺科医院和华山医院 4家医院提供从住院患者的各种临床标本中分离出的肺炎克雷伯菌 5 99株 ,大肠埃希菌 331株。2 .抗生素纸片 :头孢呋新 (ＣＸＭ 30 μｇ)、头孢噻肟 (ＣＴＸ30 μｇ)、头孢他啶 (Ｃ…     

产超广谱β-内酰胺酶细菌对17种抗生素的耐药分析

开展产超广谱β内酰胺酶(ＥＳＢＬｓ)的细菌的检测,能帮助临床合理选择抗生素,提高疗效。我们对我院近年来分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行了ＥＳＢＬｓ的检测,并作了17种抗生素敏感试验。本文重点介绍ＥＳＢＬｓ阳性株的药敏情况。1　材料和方法11　菌株来源　1999年7月～     

阴沟肠杆菌高活性β内酰胺酶检测与相关耐药表型分析

阴沟肠杆菌是医院感染的重要病原菌。我们对我院临床分离的部分阴沟肠杆菌进行ＡｍｐＣ酶和超广谱 β内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ)的检测 ,并结合临床药敏试验 ,进行耐药表型及耐药机制分析 ,为合理使用药物提供参考依据。一、材料与方法1 菌株来源 :1 999年 1月至 2 0 0 1年 5月从住院患者各类标本中分离的阴沟肠杆菌 ,选择其中头孢西丁小于等于中介或 /和三代头孢 (头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟 )两种以上中介或耐药的 1 38株菌作为试验菌。大肠埃希菌ＡＴＣＣ2 592 2作为三维试验指示菌。试验质控株有肺炎克雷伯菌ＡＴＣＣ70 0 60 3(ＳＨＶ 1…     

超广谱β内酰胺酶的检测及耐药性

研究产超广谱 β内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ)细菌的检测及耐药性 ,对指导临床用药方面具有重要的意义。我们重点比较了3种ＥＳＢＬｓ的检测方法 ,分析了 37株产ＥＳＢＬｓ细菌的耐药性 ,报告如下。一、材料和方法1 菌株 :系 2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 1年 6月 ,从门诊和住院患者的尿、痰、脓等标本中分离。大肠埃希菌 2 32株 ;肺炎克雷伯菌 58株 ,产酸克雷伯菌 38株 ;阴沟肠杆菌 2 1株 ,产气肠杆菌 1 2株 ,板崎肠杆菌和聚团肠杆菌各 1株。质控菌株 :大肠埃希菌ＡＴＣＣ2 592 2 (阴性对照 ) ,肺炎克雷伯菌ＧＹ2 0 0 0 (阳性对照 ) ,均由杭州天和微生…     

两种培养基分离A族链球菌的比较

为提高Ａ族链球菌 (ＧＡＳ)检出率 ,我们用选择性与普通培养基对 2 0 1份脓疱疮患儿脓液分泌物标本进行病原菌分离 ,结果报告如下。1 培养基 :普通培养基 :ＴＨＢ培养基 (Ｄｉｆｃｏ公司产品 ) ;选择性培养基 :在ＴＨＢ培养基基础上 ,加入结晶紫0 .15 μｇ/ｍｌ。2 菌种及标本来源 :(1)菌种 :标准ＧＡＳ菌种由俄罗斯圣彼得堡实验医学研究所提供 ,标准金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ2 92 13购自卫生部药品和生物制品检定所。 (2 )临床标本 :收集自 1999年 8～ 9月我院门诊确诊为脓疱疮的 2 0 1份患儿的脓液分泌物。结果 :用普通ＴＨＢ培养基分离Ｇ…     

超广谱β—内酰安酶最佳检测底物探讨

为了解本地区产超谱 β 内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ)的大肠埃希菌(Ｅｃｏ)和肺炎克雷伯菌 (Ｋｐｎ)的最佳检测底物及耐药性 ,以防止产ＥＳＢＬｓ株的区域性流行。我们对安徽省合肥市 4家医院临床标本中分离的Ｋｐｎ和ＥｃｏＥＳＢＬｓ的检测情况及耐药性进行了研究。一、材料与方法1 菌株来源 :收集 1999年 9月～ 2 0 0 0年 8月安徽省合肥市 4家医院 (安徽医科大学附属医院、安徽省立医院、解放军第 10 5医院、合肥市第一人民医院 )临床标本 (尿 15 7份、痰 31份、血液 14份、创面分泌物 12份、脓液 12份、胆汁 6份、引流液 5份、其他标本 18份 )…     

耐甲氧西林葡萄球菌耐药性观察

目的 研究葡萄球菌的感染及耐药性状况，指导临床用药。方法 ＡＰＩ－Ｓｔａｐｈ鉴定分离菌株，药敏试验应用Ｋ－Ｂ法、最低抑菌浓度（ＭＩＣ）法、琼脂筛选法及ｍｅｃＡ基因聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测耐甲氧西林葡萄球菌（ＭＲＳ）；并分别了ＭＲＳ、甲氧西林敏感葡萄球菌（ＭＳＳ）对青霉素等１３种抗生素的耐药率（Ｋ－Ｂ法）；分析了病人住院时间、抗生素使用与ＭＲＳ分离率间的关系。结果 ３０１株葡萄球菌中，耐甲西林金黄     

超广谱β—内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的 了解超广谱β内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）细菌的检测及耐一的情况,以利于对ＥＳＢＬｓ的监控和治疗。方法 用ＮＣＣＬＳ推荐的初筛和确证实验及双纸片协同实验、Ｅ －ｔｅｓｔ、 Ｖｉｔｅｋ３２型全自动分析系统药敏检测卡ＧＮＳ－ＮＴ对１６０株大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌进行ＥＳＢＬｓ的鉴定,并检测确证ＥＳＢＬｓ阳性菌株的药敏情况。结果 共检出ＥＬＳＬｓ菌株３３株,双纸片协同实验、Ｅ－ｔｅｓｔ、ＧＮＳ－ＮＧ三者     

问题解答

问 :苯唑西林对凝固酶阴性葡萄球菌药敏试验ＮＣＣＬＳ判断标准修改后的含义是什么 ?答 :1999年版ＮＣＣＬＳ药敏标准单独列出了苯唑西林对凝固酶阴性葡萄球菌 (ＣＮＳ)的分界点 ,规定苯唑西林ＭＩＣ≤0 .2 5 μｇ/ｍｌ、抑菌环≥ 18ｍｍ为敏感 ;ＭＩＣ≥ 0 .5 μｇ/ｍｌ、抑菌环直径≤ 17ｍｍ为耐药。此修改纯粹是以检出含ｍｅｃＡ基因ＣＮＳ为目的 ,与苯唑西林药动学无关。问 :为什么说用硝噻吩纸片检测革兰阴性杆菌 β内酰胺酶不可靠 ?答 :革兰阴性杆菌产生的 β内酰胺酶存在于细胞壁和细胞膜、细胞壁和外膜之间的间隙中 ,并不分泌到菌细…