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相似文献
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1.
c-erbB-2、p53、bcl-2和nm23-H1在肺癌中的表达   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的:探讨cerbB2、p53、bcl2和nm23H1基因在肺癌发生发展过程中的作用。方法:用免疫组化ABC法对原发性肺癌组织中4种基因的表达和突变进行检测。结果:58例肺癌中,31例(5345%)p53过度表达,18例(3103%)bcl2过度表达。cerbB2与nm23H1在10例小细胞肺癌(SCLC)中未见表达。而在48例非小细胞肺癌(NSCLCs)中两者过度表达率均为50%。cerbB2与nm23H1表达呈正相关(P<005)。腺癌nm23H1的表达明显高于鳞癌(P<005)。p53、bcl2蛋白表达在肺癌分化程度中呈负相关(P<005)。nm23H1、p53和bcl2的表达与患者的生存率有关(P<005)。结论:cerbB2、p53、bcl2和nm23H1基因蛋白产物的检测对肺癌患者的诊治和预后评估有积极意义。  相似文献   

2.
目的:探讨bcl2 和p53 蛋白的表达与端粒酶活性的相关性及其与 H C C 发生的关系。方法:利用端粒酶原位标记法显示端粒酶活性,采用 S P 法免疫组化技术检测bcl2 和p53 蛋白。结果:端粒酶在 H C C 中的阳性率(917 % ) 显著高于癌旁肝组织(583 % )( P< 005) ,端粒酶活性强度与 H C C 分化程度无关( P> 005) ;癌组织中bcl2 和p53 蛋白的阳性率均高于癌旁组织( P< 001) ; H C C 和癌旁组织中端粒酶活性程度随bcl2 蛋白表达增强而升高,并呈明显正相关,但与p53 蛋白表达强度无明显相关性。结论:bcl2 蛋白的过度表达可能是端粒酶激活的重要途径之一,bcl2 蛋白过度表达可能通过激活端粒酶使肝细胞恶性转化导致 H C C 发生,而p53 基因突变可能对端粒酶的激活无直接影响。  相似文献   

3.
bcl-2、p53蛋白及PCNA表达与横纹肌肉瘤临床病理相关性研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:研究横纹肌肉瘤(RMS)中bcl-2、p53、PCNA表达与其临床病理的相关性。方法:对50例(随访41例)横纹肌肉瘤进行免疫组化ABC法标记。结果:bcl-2、p53基因蛋白和PCNA,发现bcl-2、p53、PCNA阳性表达率分别为28%、72%、70%,其阳性表达与年龄、性别及不同组织类型的RMS无关(P>0.05)。但与分化程度有关,p53、PCNA在低分化RMS阳性率分别为85%、95%,显著高于高分化RMS42.8%和14.3%(P<0.05),随访存活1年以内的p53、PCNA阳性率均为86.7%,亦明显高于存活超过3年以上的阳性率33.3%和41.7%(P<0.05)。而bcl-2在低分化RMS阳性20%显著低于高分化71.4%(P<0.05),随访存活1年以内的阳性率13.4%明显低于存活超过3年以上的41.4%(P<0.05)。p53与bcl-2阳性表达呈明显负相关,p53阳性率越高,而bcl-2阳性率越低。结论:PCNA、p53、bcl-2蛋白表达能比较准确地反映RMS的生物学特性,p53、bcl-2可作为肿瘤预后显著相关的有效指标。  相似文献   

4.
p53、ras p21、c-erbB-2和nm23在肺癌组织中的表达   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的:探讨癌基因与肺癌临床病理特征及预后的关系。方法:应用免疫组化SP法对58 例肺癌行p53、rasp21、cerbB2和nm23 的检测。结果:癌组织中阳性反应检出率分别为46-6% 、24-1 % 、50-0 % 和53-4 % ,腺癌和差分化癌ras p21 、cerbB2表达高于鳞癌和分化好的癌( P< 0-05) ,术后长期生存患者rasp21 、cerbB2 表达低于短期死亡患者(P< 0-05 ,P< 0-01),吸烟患者ras p21 表达高于不吸烟患者(P< 0-05) ,淋巴结癌转移阴性组nm23 表达高于淋巴结癌转移阳性组( P< 0-01),p53 与ras p21、cerbB2 阳性表达具有协同性( P< 0-05) 。结论:肺癌发生发展和转移与rasp21 、cerbB2 的激活和p53 、nm23 的失活密切相关,部分基因的改变存在协同性,ras p21 基因的激活与吸烟有关,ras p21、cerbB2 的检测对判断肺癌预后有价值。  相似文献   

5.
大肠癌和腺瘤中的细胞凋亡及其调控基因表达   总被引:21,自引:1,他引:21  
目的通过观察结、直肠腺癌和腺瘤中的细胞凋亡及其调控基因p53、bcl-2的表达状态,探讨细胞凋亡及其调控基因在大肠上皮恶性转化进程的不同阶段中的作用。方法利用DNA缺口末端标记技术和p53、bcl-2蛋白免疫组化染色,原位观察32例大肠绒毛状腺瘤和33例大肠乳头状腺癌中的凋亡细胞和p53、bcl-2蛋白阳性表达细胞的密度与分布,以15例非肿瘤大肠粘膜做为对照。结果腺瘤和腺癌中的凋亡细胞密度均显著高于非肿瘤粘膜(P<0.01);腺瘤高于腺癌(P<0.01)。p53和bcl-2蛋白的表达率和表达强度,腺癌和腺瘤高于非肿瘤粘膜(P<0.01),腺癌的表达强度也高于腺瘤(P<0.05)。腺瘤中bcl-2蛋白表达阳性组的凋亡细胞密度显著低于bcl-2阴性组(P<0.01)。结论细胞凋亡调控异常在大肠癌发病中可能起重要作用。bcl-2蛋白在腺瘤和腺癌中均可抑制细胞凋亡,而突变型p53蛋白可能仅在腺癌中起抑制细胞凋亡的作用。  相似文献   

6.
目的:了解Fas 抗原及bcl2 蛋白在甲状腺肿瘤组织中表达的意义。方法:用流式细胞技术对14 例乳头状甲状腺癌,16例甲状腺腺瘤及32 例结节性甲状腺肿组织中Fas 抗原和bcl2 蛋白的表达进行检测。结果:上述3 组织中均测到Fas 抗原和bcl2 蛋白。3 种组织中Fas 抗原和bcl2 蛋白表达没有统计学差异(F=2.78,P>0.05;F=2.56,P>0.05)。乳头状甲状腺癌组织Fas 抗原表达与bcl2 蛋白表达有明显相关性(r=0.646,P<0.05),其他两种组织中Fas 抗原与bcl2 表达均无相关性( P>0-05)。结论:上述3 种组织中均有Fas 抗原和bcl2 蛋白的表达,均参与了甲状腺肿瘤组织中细胞凋亡的调节。细胞凋亡异常与乳头状甲状腺癌的发生有密切关系。  相似文献   

7.
目的:探讨bcl-2和p53蛋白的表达与端粒酶活性的相关性及其与HCC发生的关系。方法:利用端粒酶原位标记法显示端粒酶活性,采用S-P法免疫组化技术的检测bcl-2和p53蛋白。结果:端粒酶在HCC中的阳性率(91.7%)显著高于癌旁肝组织(58.3%)(P〈0.05),端粒酶活性强度与HCC分化程度无关(P〉0.05);癌组织中bcl-2和p53蛋白的阳性率均高于癌旁组织(P〈0.01);HCC  相似文献   

8.
目的:检测甲状腺髓样癌内凋亡细胞、bcl-2、p53和Ki-67,探讨其与患者的预后关系。方法:在21例甲状腺髓样癌内,用DNA末端标记方法检测凋亡细胞和用免疫组织化学技术检测bcl-2、p53及Ki-67的表达。结果:在21例甲状腺髓样癌标本中,凋亡细胞bcl-2、p53和Ki-67的检出率分别为81%,100%,62%和71%。bcl-2阳性物质位于肿瘤细胞的胞浆内,少数病例则位于膜上。p53蛋白阳性主要位于胞核内,少数病例也同时见于胞浆内。Ki-67抗原主要位于肿瘤细胞核内。本研究结果表明,bcl-2和肿瘤细胞凋亡之间有密切关系(P<0.01)。bcl-2阳性细胞检出率较高的病例,凋亡细胞检出率则较低;反之,凋亡细胞检出率则较高。p53和Ki-67阳性细胞检出率和细胞凋亡无相关性(P>0.05)。结论:bcl-2具有抑制细胞凋亡的作用。上述各因素检测结果与患者存活率无统计学意义。bcl-2肿瘤蛋白在甲状腺髓样癌中高表达,可作为该肿瘤的一个新的标记物,对预后的判断可能也有一定的意义  相似文献   

9.
乳腺癌中凋亡与细胞增殖及Rb、bcl-2、c-myc蛋白表达的关系   总被引:15,自引:3,他引:12  
目的:了解人乳腺癌中凋亡与细胞增殖的关系,以及与相关基因蛋白表达的关系及其预后意义。方法:用免疫组化LSAB法检测了90例乳腺标本(包括13例良性乳腺病变和77例乳腺癌)中Rb、bcl2和cmyc的蛋白表达;并计数了癌组织中的凋亡指数(AI,TUNEL法)和有丝分裂指数(MI)。结果:AI与MI呈显著的正相关(r=081,P<001);AI、MI和Rb蛋白表达与肿瘤大小和组织学分级有关,AI、MI低和bcl2的高表达与5年生存率有关,cmyc的表达仅与组织学等级有关(P<005);Rb表达与AI、MI均有关(P<001),而bcl2的表达仅与AI有关(P<005)。结论:乳腺癌中凋亡与细胞增殖和bcl2表达有关,提示凋亡在具有不同生长潜能的亚群的克隆性选择中发挥重要作用。Rb与凋亡的关系提示细胞凋亡与细胞周期有关。  相似文献   

10.
胶质瘤p53、bcl-2、MDM2表达与细胞增殖和凋亡的关系   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:研究胶质瘤中p53 、bcl2 、MDM2 表达与细胞增殖和凋亡的关系。方法:对48 例胶质瘤用免疫组化法检测p53、bcl2、MDM2 蛋白表达;以Ki67 标记指数和AgNOR 计数检测其增殖活性;用TUNEL 法检测细胞凋亡。结果:p53、bcl2、MDM2 蛋白表达阳性率分别为47-9 % 、35-8 % 及12-5 % ,细胞增殖活性随肿瘤p53 、bcl2、MDM2 表达水平增高而增高,细胞凋亡则相反。结论:p53、bcl2、MDM2 蛋白过表达与细胞增殖失控、凋亡抑制关系密切,在胶质瘤恶性进展中起重要作用。  相似文献   

11.
目的 探讨RAS蛋白在胶质瘤中的表达及其对人脑胶质瘤细胞生长的影响.方法 用免疫组化染色法检测RAS蛋白在正常脑组织及各级别胶质瘤组织中的表达水平,并采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法和流式细胞技术检测降低RAS活性后U251细胞的增殖和凋亡情况;用Western印迹法检测ERK和AKT信号通路.结果 胶质瘤组织中RAS的表达随胶质瘤恶性程度增高而增强.抑制RAS 蛋白活性后,RAS信号通路的下游分子ERK和AKT蛋白磷酸化水平降低;U251胶质瘤细胞生长受抑制,细胞生长阻滞在G1期且凋亡增加.结论 RAS蛋白在胶质瘤中高表达,抑制其活性可下调ERK和AKT 信号通路,进而调控细胞的生长.  相似文献   

12.
目的 观察人乳腺癌组织、癌旁相对正常乳腺组织中凋亡调节蛋白FasL,Fas、P53的表达,探讨FasL,Fas及P53与乳腺癌发生发展的关系。方法 收集手术切除的人乳腺癌组织和癌周相对正常乳腺组织,用免疫组织化学方法对21例乳腺癌标本进行检测。结果 乳腺癌组织中Fas蛋白表达的阳性率明显低于癌周正常乳腺组织(P〈0.01),有淋巴结转移者明显低于无淋巴结转移者(P〈0.05)。乳腺癌组织中FasL、P53蛋白表达的阳性率均明显高于癌周正常乳腺组织(P〈0.01),有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者(P〈0.05)。结论 乳腺癌组织中Fas/FasL表达异常使肿瘤逃脱机体自身免疫攻击,促使肿瘤的发生发展,对预测乳腺癌的预后有重要参考价值。突变型P53在乳腺癌中过表达,可能抑制肿瘤凋亡的发生,促进肿瘤生长。  相似文献   

13.
Procedures are described for the isolation in high yield of consistent, highly purified preparations of human C-reactive protein (CRP) and serum amyloid P component (SAP). CRP was obtained from malignant ascitic and pleural fluids by calcium-dependent affinity chromatography on pneumococcal C-polysaccharide covalently coupled to cyanogen bromide-activated Sepharose. It was then gel filtered on Ultrogel AcA44 (acrylamideagarose beads) in the presence of calcium ions, combining molecular sieve chromatography with removal of contaminating SAP by its affinity for agarose. Residual trace contaminants were removed by immunoabsorption with anti-normal human serum and anti-SAP antibodies insolubilised on Sepharose and/or by absorption with Sepharose-Con A to remove glycoproteins and Blue-Sepharose to remove albumin. After a final gel filtration step on Sephacryl S-300 35–44% of the initial CRP was recovered in pure from according to biochemical and immunochemical criteria. SAP was isolated from normal serum by calcium-dependent affinity chromatography on unsubstituted Sepharose beads, followed by solid-phase immunoabsorption of contaminants and finally gel filtration on Sephacryl S-300. At least 50% of the SAP in the starting material was recovered in pure form according to biochemical and immuunochemical criteria. Ready availability of such preparations facilitates biochemical, biophysical and particularly biological studies of these plasma proteins.  相似文献   

14.
蛋白质与蛋白质相互作用的研究进展   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
通过研究蛋白质与蛋白质的相互作用,人们能更好地注释蛋白质的功能,解码生命现象,特别是在新药物的设计上具有极大的实用价值,这是后基因组研究的重要任务之一。蛋白质结构的剖析、计算机分子模拟技术的发展和分子生物学技术更新为研究蛋白质间相互作用创造了各种有利条件。  相似文献   

15.
目的 检测上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和Snail蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达情况与乳腺癌病理特征的关系及其与浸润性导管癌预后的关系.方法 采用Envision免疫组织化学方法对89例乳腺浸润性导管癌组织中的上E-cadhenn,Vimentin和Snail蛋白表达情况进行检测并分析表达程度与临床病理特征之间的关系;统计分析采用卡方检验、Fisher精确概率法检验Spearman等级相关检验、配对计数资料检验、Kaplan-Meier法进行单因素生存分析,Cox比例风险模型进行生存的多因素分析.结果 E-cadherin、Vimentin和Snail蛋白在浸润性导管癌组织中的阳性表达率分别为、47.1%、53.9%和55.0%,三者呈负相关,(P=0.003);E-cadherin、Vimentin和Snail蛋白的表达与临床TNM分期有关(P <0.005).浸润性导管癌中Snail蛋白、Vimentin表达明显增高,Snail蛋白与淋巴结转移有关(P =0.029);Vimentin与淋巴结转移、雌激素状态有关(P =0.006,P<0.001);E-cadherin表达明显降低,与孕激素状态有关(P =0.030);分子分型结果显示,管腔A型、HER-2阳性型组的Vimentin、Snail蛋白阳性表达率低于基地细胞样型组(P =0.012),而E-cadherin表达率则高于基地细胞样型组(P =0.004).Cox分析发现,E-cadherin低表达和Vimentin的过度表达与患者总生存期(P =0.019、P=0.045)及患者无病生存期(P =0.032、P=0.024)显著相关,但Snail蛋白的表达与总生存期及无病生存期无相关性(P =0.879、P=0.835).结论 E-cadhern、Vimentin和Snail蛋白在乳腺浸润性导管癌的发生、发展、侵袭及转移中起重要作用,对认识乳腺癌的生物学特性以及对指导乳腺癌的诊疗及预后具有重要意义.  相似文献   

16.
《Research in microbiology》2016,167(8):655-668
Although chromosomal replication is an essential feature of the bacterial life cycle, the replication mechanism and involved molecular players have never been properly characterized in the Acetobacter genera. Thanks to whole-genome sequencing, the unknown replication proteins from Acetobacter pasteurianus and Acetobacter orleanensis, DnaA-like and DnaB-like, could be identified. Despite the low nucleotide or amino acid similarity to the respective orthologs from Escherichia coli, their involvement during replication regulation was corroborated by artificial microRNA. In the Acetobacter genome, a novel replication origin, oriAo, was detected with three 9-nucleotide-long DnaA boxes to which DnaA-like proteins bind actively. Bacterial two-hybrid systems and co-immunoprecipitation confirmed the homologous and heterologous interactions between DnaA-like and DnaB-like proteins with their E. coli orthologs. This communication is due to the conserved tryptophan at position 6 for E. coli or 25 for Acetobacter that unables DnaA-like proteins to form oligomeric protein structures after its substitution. Altogether, these results provide novel insights into the genome replication mechanism in Acetobacter.  相似文献   

17.
目的在大肠杆菌中表达重组人IL-18(rhIL-18)及rhIL-18-绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白并测定其生物活性。方法构建原核表达质粒pET28a/hIL-18及pTrc99/hIL-18-GFP,并分别转化大肠杆菌BL21。用IPTG诱导重组蛋白的表达,超声裂菌上清中的rhIL-18用镍金属螯合层析柱进行纯化,rhIL-18-GFP用抗GFP亲和层析柱及SephacrylS-100分子筛柱纯化。以人的外周血单核淋巴细胞测定两重组蛋白的生物活性。结果表达的rhIL-18及rhIL-18-GFP均具有促进T细胞增殖,增强NK细胞细胞毒作用及诱导外周血单核淋巴细胞合成IFN-γ的能力,rhIL-18-GFP还具有GFP的绿色荧光特性,可对P815细胞进行标记。结论表达并纯化的rhIL-18及rhIL-18-GFP具有生物活性,可用于进一步的功能研究。  相似文献   

18.
The hemagglutinin-neuraminidase (HN) proteins of viruses in the Paramyxouirus genus have a short conserved sequence, G(A, S)EGR(I, L, V). The role of this sequence in the intracellular processing and function of the Newcastle disease virus HN protein was explored by site directed mutagenesis. Mutations in this region fall into two categories. One set of mutants (G398A, E400D, R402K, and a deletion removing amino acids 400–403) was defective in folding. These mutant proteins formed little or no mature, disulfide linked oligomer. They had few or no antigenic sites found on the mature protein and they were transported to the cell surface poorly or not at all. The second class of mutants (A399G, G401A, G401L) was minimally affected in folding and intracellular transport. When normalized to surface expression, this group of mutant proteins had wild type levels of attachment activity, neuraminidase activity, and fusion promotion activity. Thus mutations in this region directly affect intracellular processing but not the biological activities of the protein. This sequence may, therefore, be conserved in the HN proteins of Paramyxoviruses because it is critical to the folding of the molecule.  相似文献   

19.
目的 构建和表达小鼠精子蛋白Sp17与白介素5(IL-5)融合蛋白,并对其进行纯化和免疫原性鉴定.方法 采用PCR技术从质粒pGEM-1-IL-5中扩增IL-5基因片段,将其克隆至pET/Sp17原核表达载体中与Sp17基因融合,构建重组质粒pET/Sp17-IL-5,经酶切鉴定后转化大肠杆菌B121(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni2+-NTA Agarose 纯化,SDS-PAGE检测、N端测序及Western blot;重组蛋白Sp17.IL-5免疫小鼠后ELISA检测小鼠血清特异性抗体.结果 成功构建小鼠精子蛋白Sp17与IL-5融合蛋白的高效表达质粒pET/Sp17-IL-5,重组工程菌pET-28a(+)-sp17-IL-5/BL21经IPTG诱导目的蛋白表达率约28%,PAGE初步测定目的蛋白相对分子量(Mr)约39 000,纯化后蛋白纯度达91%,免疫后小鼠血清中检测到特异性抗体.结论 Sp17-IL-5蛋白经基因克隆获得了较高的表达量,并初步显示了较好的免疫活性,为新型Sp17避孕疫苗的研制奠定基础.  相似文献   

20.
目的:探讨Livin蛋白和FHIT蛋白在宫颈癌组织中的表达和意义。方法:用免疫组化sP法检测12例正常宫颈组织、56例宫颈癌组织中Livin蛋白和FHIT蛋白的表达情况,并结合临床病理资料进行分析。结果:Livin蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率明显高于正常宫颈组织,而FHIT蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率明显低于在正常宫颈组织,差异均有统计学意义(P〈0.05)。在宫颈癌组织中,Livin蛋白阳性表达率随临床分期、病理分级的升高而逐渐升高,有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者;而FHIT蛋白阳性表达率随临床分期、病理分级的升高而减低,有淋巴结转移者低于无淋巴结转移者,差异均有统计学意义(P〈0.01)。在宫颈癌组织中,Livin蛋白和FHIT蛋白表达呈负相关(P〈0.05)。结论:Livin蛋白和FHIT蛋白的异常表达可能在宫颈癌的发生、发展中有着重要的作用。联合检测二者在宫颈癌中的表达情况,可为宫颈癌的早期诊断、靶向治疗及预后判断提供重要的理论依据。  相似文献   

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