直肠癌切缘黏膜组织p53基因370位点甲基化的表达

目的 检测直肠癌下切缘中黏膜p53基因K370位点甲基化表达,探讨“分子界定”的临床意义,评估p53基因370位点甲基化与安全切缘的关系.方法 选取2000年1月至2007年7月在武汉大学人民医院外科确诊并接受直肠癌前切除术治疗的直肠癌患者197例,术后1～3年吻合口复发的46例,未复发151例,同时取20例正常直肠黏膜标本作为阴性对照.根据复发的情况,分为复发组、未复发组以及对照组.用免疫组织化学法检测p53蛋白表达应用免疫组织化学技术检测切缘组织中p53蛋白的表达.用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)技术,检测切缘组织中p53基因K370位点甲基化,并通过Pearson统计学方法分析两者的相关性.同时统计各组患者年龄、性别、肿瘤大小、临床分期等差异是否有统计学意义.结果 复发组、未复发组及对照组织切缘标本p53蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).所有46例复发组中有41例发生甲基化,甲基化率为89.1％,未复发组(12/115例)和对照组出现低甲基化和未发现甲基化,两组间差异有统计学意义(P＜0.01).复发组K370位点甲基化率高于未复发组.K370的甲基化率在肿瘤直径和距肛缘距离以及TNM分期方面差异有统计学意义(P＜0.01),但是,在患者年龄、性别方面差异无统计学意义(P＞0.05).结论 p53基因的K370位点甲基化可以作为安全切缘指标和预测局部复发、远处转移和生存率的预后指标的标准,准确评估K370位点甲基化有利于合理选择安全切缘.     

survivin和p53表达水平对直肠癌分级和预后影响分析

目的探讨survivin和p53表达水平对直肠癌分级和预后影响分析。方法选取2010年1月到2015年10月住院治疗的经组织病理确诊的直肠癌患者83例,比较患者不同病理分化程度、TNM分期、DUKEs临床分期的survivin和p53阳性表达率的差异;以及不同survivin和p53表达结果的生存时间分析。用SPSS16.0软件进行统计分析数据,survivin和p53阳性表达率用(%)表示,采用卡方检验;二者阳性表达率与直肠癌不同分期的相关性分析用Spearman法;不同survivin和p53表达结果的生存时间分析用kaplan-Meier法,P0.05表示差异具有统计学意义。结果 83例患者中survivin表达阳性49例,阴性34例,阳性率为59.04%;p53表达阳性57例,阴性26例,阳性率为68.67%。survivin和p53在病理分化程度高、TNM分期高的患者中阳性表达率较高,病理分化程度、TNM分期与survivin和p53表达阳性率呈正相关。survivin阳性表达的患者5年随访期中位生存时间44个月显著的低于survivin阴性表达的患者的48个月(log-rankχ~2=10.955,P=0.001);p53阳性表达的患者5年随访期中位生存时间42个月显著低于p53阴性表达的患者的46个月(log-rankχ~2=6.128,P=0.013)。结论 survivin和p53的阳性表达与直肠癌分级和生存时间密切相关。     

膀胱癌p53蛋白核蓄积的临床意义

为探讨不同病理分期膀胱癌p53蛋白核蓄积与肿瘤恶性进展的关系．采用免疫组织化学方法检测122例获随访结果的膀胱癌患者的p53表达，用多变量相关分析，Logistic回归分析和Kaplan-Meier法分析。发现p53蛋白核反应与肿瘤临床病理分期及淋巴结转移呈正相关(P=0.003)；Kaplan—Meier生存分析显示肿瘤局限于膀胱内(P1，P2和P3a)，p53蛋白阳性染色者复发率显著高于阴性者，5年生存率明显低于阴性者。本研究证明p53蛋白核蓄积表示肿瘤呈恶性进展，病人预后较差。     

切除修复交叉互补基因1表达对进展期胃癌新辅助化疗及预后的影响

目的 探讨切除修复交叉互补基因1( excision repair cross complement 1,ERCC1)的表达对进展期胃癌辅助化疗及预后的影响.方法 进展期胃癌患者共88例,分为新辅助组45例,手术组43例.新辅助组行2个疗程XELOX方案新辅助化疗,再行标准胃癌根治术,术后再行4个疗程的XELOX方案化疗;手术组行标准胃癌根治术,术后行6个疗程的XELOX方案化疗.对2组均随访3年,观察疗效及3年无复发生存率.结果 新辅助组和手术组患者ERCC1阳性表达率分别为49％和44％.新辅助组45例患者化疗有效率为49％,ERCC1阴性表达患者对化疗敏感(P＜0.05).ERCC1阴性表达患者3年无复发生存率为64％,显著高于阳性表达患者的30％,两者相比差异有统计学意义,P＜0.05;手术组ERCC1阴性表达患者3年无复发生存率为79％,显著高于阳性表达患者的38％,两者相比差异有统计学意义,P＜0.05.COX回归模型分析结果显示ERCC1表达与3年无病生存率密切相关,P ＜0.05.结论 ERCC1的表达与进展期胃癌患者的化疗敏感性及预后有关,可用于其预后及化疗敏感性的预测.     

乳腺癌p53，ki-67和bcl-2的表达与新辅助化疗的关系

目的 研究乳腺癌p53,ki-67和bcl-2基因蛋白表达与新辅助化疗临床效果的关系,以寻找指导治疗、判断预后的生物学指标.方法 采用免疫组化SABC法测定118例可手术的乳腺癌标本的p53,ki-67和bcl-2的蛋白表达,并分析其与新辅助化疗疗效的关系.结果 术前辅助化疗有效率为68.6%.p5 3表达阳性,化疗效果差（P＜0.05）;而ki-67阳性表达者有效率明显高于ki-67不表达者（P＜0.05）;bcl-2表达与疗效无明显关系.p53蛋白阳性表达者bcl-2表达下降.p53与ki-67蛋白表达有明显关系.结论 p53和ki-67蛋白表达可作为指导新辅助化疗及预后判断的分子生物学指标.     

p53,pgp检测对进展期大肠肿瘤患者化疗及预后的影响

目的:了解p53,pgp相关性及其对进展期大肠肿瘤患者化疗及预后的影响.方法:38例进展期大肠肿瘤患者标本,通过免疫组化技术检测p53,pgp表达情况,所有患者均经密切随访.结果:38例患者中,p53表达阳性23例,阴性15例,pgp 表达阳性23例,阴性15例,pgp表达阳性18例,阴性20例,二者均阳性者10例,将患者分为化疗组及对照组后发现,化 组p53,pgp阳性率明显高于对照组,且二者均阳性者,局部复发率或转移率可达73.33%(11/15),明显高于二者均阴性者(16.7%,2/12);结论:p53,pgp有一定相关性,二者均阳性表达者临床预后差,且pgp的表达与临床化疗亦有一定关系.     

TOPⅡ联合Ki-67和p53表达对局部晚期乳腺癌化疗敏感性的预测分析

目的探讨TOPⅡ联合p53和Ki-67的表达对局部晚期乳腺癌化疗敏感性的预测价值。方法采用免疫组化方法检测90例乳腺癌患者不同分子分型的TOPⅡ、p53和Ki-67的表达状况,比较不同TOPⅡ、p53及Ki-67表达状况患者接受新辅助化疗的疗效差异。结果 Ki-67表达阳性率在HER2过表达型、Basal-like型、腺腔A型和腺腔B型之间的差异具有统计学意义(χ2=38.877,P=0.000),其中HER2过表达型和Basal-like型高于腺腔A型和腺腔B型;TOPⅡ及p53的表达表达阳性率在4种分子分型间的差异无统计学意义(χ2=7.105,P=0.069;χ2=7.105,P=0.069)。TOPⅡ和Ki-67表达阳性者的新辅助化疗疗效优于表达阴性者χ2=18.28,P=0.000;χ2=6.64,P=0.009;而p53的表达状况与新辅助化疗的敏感性无关。结论 HER2过表达型和Basal-like型乳腺癌患者对新辅助化疗敏感,疗效好;TOPⅡ表达阳性并Ki-67表达阳性可作为乳腺癌临床化疗患者敏感性生物学指标。     

Ki-67抗原和p53蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

目的 研究Ki-67抗原和p53蛋白在胃癌组织中的表达水平及其与胃癌生物学行为和预后的关系.方法 应用免疫组化方法检测232例胃癌组织中Ki-67抗原和p53蛋白的表达水平. 结果 Ki-67抗原和p53蛋白表达之间呈显著正相关（P＜0.001）.Ki-67抗原和p53蛋白表达水平与胃癌淋巴结转移均密切相关,而与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、组织类型、浸润深度、远处转移、pTNM分期无关.Ki-67抗原、p53蛋白表达阳性其3年生存率均显著低于表达阴性者（P=0.006,0.007）,且Ki-67-/p53- 组的胃癌患者3年生存率显著高于其他组（Ki-67-/p53＋,Ki-67＋/p53-,Ki-67＋/p53＋）（P=0.011,0.017,0.001）.多因素生存分析显示p53蛋白水平是独立的预后因素（P=0.002）. 结论 Ki-67抗原和p53蛋白表达与胃癌淋巴结转移及预后有关,p53蛋白水平是独立影响胃癌预后的重要参数;联合检测Ki-67抗原和p53蛋白时,只要任1项阳性即提示不良预后.     

乳腺癌ER、PR、p53、Her-2表达与新辅助化疗有效率的关系

目的探讨乳腺癌患者ER、PR、p53、Her-2的表达及其与新辅助化疗有效率的关系。方法采用免疫组化的方法检测178例乳腺癌新辅助化疗患者化疗前ER、PR、p53、Her-2的表达情况,观察新辅助化疗的效果。结果178例乳腺癌新辅助化疗病例中,ER、PR、p53阴性率、Her-2过度表达率分别为33.15、23.60%、60.67%、35.39%。ER(+)组与ER(-)组、PR(+)组与PR(-)组、p53(+)组与p53(-)组化疗有效率差异均有统计学意义(P<0.05),Her-2过度表达组与非过度表达组化疗有效率差异无统计学意义(P>0.05)。结论ER、PR、p53阴性的乳腺癌病人对化疗更敏感,化疗后获益更多,ER、PR、p53可作为乳腺癌新辅助化疗(TE或CET方案)敏感性的预测指标。     

Her-2阴性乳腺癌中激素受体、Ki-67、P53的表达与蒽环类新辅助化疗疗效的关系

目的探讨Her-2阴性乳腺癌中激素受体、Ki-67、P53的表达与蒽环类新辅助化疗疗效的关系。方法应用免疫组化法测定78例Her-2阴性乳腺浸润性导管癌蒽环类新辅助化疗前ER、PR、Ki-67、P53的表达。四个周期CEF或AC方案化疗后进行临床及病理疗效评价。结果激素受体双阳或单阳组与激素受体双阴组相比,临床总有效率及术后病理有效率有显著性差异(P0.05);Ki-67阳性组与Ki-67阴性组相比,临床总有效率无显著性差异(P0.05),术后病理有效率有显著性差异(P0.05);P53阳性组与P53阴性组相比,临床总有效率及术后病理有效率均未见显著性差异(P10.05)。结论激素受体阴性、Ki-67阳性对Her-2阴性乳腺癌患者蒽环类新辅助化疗的敏感性较高,激素受体状态、Ki-67可能成为判断Her-2阴性乳腺癌蒽环类新辅助化疗疗效的重要指标。     

P53和Ki-67基因表达与膀胱癌分级、分期相关性的大样本回顾性研究

目的探讨p53和Ki-67基因表达与膀胱癌病理分级和临床分期的关系。方法回顾性分析2013年1月至2015年1月在本院与天津医科大学第二医院收治的445例膀胱癌患者的临床资料,应用免疫组织化学染色的方法,对这些膀胱癌患者的病理切片进行p53和Ki-67免疫组化染色,并将p53和Ki-67基因的免疫组化表达强度结果与患者的病理分级和临床分期进行分析。结果在445例膀胱癌患者中,435例患者测得p53免疫组化指标,440例患者测得Ki-67免疫组化指标,Spearman秩相关分析表明,p53和Ki-67阳性程度越大,患者膀胱癌的病理分级、临床分期越高(P<0.05)。其中p53、Ki-67与病理分级的相关系数分别为0.298、0.181,与临床分期的相关系数分别为0.143、0.103,均呈正相关。结论 p53和Ki-67基因的表达强度与膀胱癌病理分级与临床分期密切相关,即阳性程度越大,病理分级、临床分期越高。     

细胞因子信号转导抑制因子1基因甲基化状态与胃癌幽门螺杆菌感染的关系

目的检测胃癌组织细胞因子信号转导抑制因子（SOCS-1）启动子区甲基化状态,初步探讨其甲基化状态与胃癌幽门螺杆菌（Hp）感染的关系。 方法选取2016年9月至2018年9月接受根治性手术的胃癌患者63例（胃癌组）,另选取同期行胃黏膜病理切片检查的胃黏膜息肉患者67例（对照组）,检测两组胃黏膜组织中SOCS-1基因甲基化状态,实时荧光定量PCR（RT-PCR）法及免疫印迹法检测病理组织SOCS-1 mRNA及蛋白表达水平,快速尿素酶试验检测Hp感染情况,分析胃癌组织SOCS-1甲基化与Hp感染相关性。 结果与对照组相比,胃癌组患者Hp感染阳性率升高（74.60% vs 11.94%,χ²=52.234,P<0.001）,SOCS-1启动子区CpG岛异常甲基化发生率升高（80.95% vs 5.97%,χ²=74.491,P<0.001）。Hp感染阳性胃癌患者的SOCS-1甲基化比例显著增高（95.74% vs 4.26%,χ²=26.261,P<0.001）,Hp感染阳性是SOCS-1甲基化的危险因素（OR=1.576,95% CI：1.126~2.205,P=0.035）。SOCS-1甲基化与胃癌分化程度低、TNM分期、淋巴结转移有关（χ²=11.530、9.380、11.581,均P<0.01）。与Hp感染阴性组相比,Hp感染阳性组SOCS-1 mRNA和蛋白表达量显著降低（P<0.05）。 结论Hp感染可能与SOCS-1 DNA启动子区甲基化密切相关,并通过影响SOCS-1甲基化促进胃癌发生、发展。     

胰腺癌外周血mdr1及其转录区域结合位点甲基化的检测和临床意义

目的：研究胰腺癌肿瘤组织及外周血有核细胞多药耐药基因1（mdr1）及其转录区域结合位点甲基化的表达及其相关性,探索适用于临床观察多药耐药性变化的有效手段。方法：应用免疫组织化学法和FQ-PCR技术、MSP方法分别检测胰腺癌肿瘤组织及其对应外周血标本中的mdr1的表达和转录区域结合位点甲基化程度,并通过Pearson统计学方法分析两者的相关性。结果：胰腺癌P-gp的表达与mdr1mRNA表达明显相关,并与mdr1基因转录区域结合位点甲基化程度显著相关。外周血中mdr1及其转录区域结合位点甲基化的表达与肿瘤组织中的表达存在显著相关性（P〈0.01）。结论：mdr1转录区域结合位点的甲基化与胰腺癌的多药耐药性密切相关;检测外周血mdr1及其甲基化的表达可动态监察胰腺癌病人化疗前后多药耐药性的变化,为临床治疗方案的决择提供依据。     

Prognostic variables in male breast cancer

The prognostic role of ploidy status, S phase fraction, estrogen and progesterone receptor status, and the expression of p53 and erbB-2 protein in male breast carcinoma (MBC) remains controversial. The primary objective of this study was to determine which of the common prognostic factors for female breast cancer predict prognosis in MBC. A secondary objective was to assess the impact of comorbid illnesses on survival. A retrospective review of demographic data, surgical treatment, pathological staging, adjuvant treatment and follow-up was completed for 16 patients with MBC (1 intraductal and 15 invasive). Formalin-fixed, paraffin-embedded tissue was processed for ploidy, S phase fraction, and immunohistochemical detection of estrogen and progesterone receptors plus expression of p53 and erbB-2 protein. Six of 15 patients with infiltrating ductal carcinoma are currently alive without evidence of disease and a median survival of 61 months. Nine patients died after a median survival of 52 months, with 6 patients having no evidence of recurrent breast cancer. Two of 3 deaths secondary to advanced breast cancer occurred in patients who initially presented with T4 lesions and were staged IIIB. Two of 15 tumors were erbB-2 positive, whereas only 1 tested weakly positive for p53 protein. We observed that MBCs express erbB-2 and p53 proteins infrequently. Neither ploidy status, S phase fraction, nor erbB-2/p53 status provided any apparent improvement in establishing prognosis beyond routine pathological staging. Advanced TNM stage was associated with diminished survival. The majority of MBCs express estrogen and progesterone receptors. Survivals in MBC were reduced in association with comorbid medical conditions.     

腺瘤性息肉病基因DNA甲基化在食管癌患者肿瘤组织及血浆中的表达

目的 探讨食管鳞癌患者肿瘤组织及外周血游离DNA中腺瘤性息肉病（APC）基因甲基化状态与临床病理特征的关系．以及外周血APC甲基化围手术期的动态变化。方法应用实时定量MSP技术检测76例食管鳞癌患者肿瘤组织、配对的癌旁正常组织以及术前1d、术中及术后7d外周血游离DNA中APC基因的甲基化状态。选取60名年龄性别配对的健康志愿者外周血浆DNA作对照。结果食管鳞癌患者肿瘤组织及外周血游离DNA中APC基因甲基化率分别44．74％（34／76）和42．11％（32／76）,明显高于癌旁组织及健康对照组[（6．58％（5／76）和1．67％（1／60）,均P=0．000]。APC基因甲基化率在外周血与肿瘤组织中具有良好的一致性,其ROC曲线Youden指数为0．849（P=0．000）。APC基因甲基化分别与患者病理分期、淋巴结转移、浸润深度及神经脉管浸润有关（P〈0．05）：家族肿瘤史是与外周血游离DNA中APC甲基化有关的独立因素（P〈0．05）。术前、术中、术后血浆中DNA甲基化发生率呈现先升后降的变化趋势。结论食管鳞癌患者外周血游离DNA中APC甲基化率可反映肿瘤进展状态．并随肿瘤实体的摘除而下降。     

WIF-1基因启动子区甲基化在胃癌组织中的检测

目的检测胃癌组织及正常胃黏膜组织中WIF-1基因启动子区甲基化情况,并结合临床病理资料,探讨WIF-1基因甲基化状态与胃癌发生、发展的相关性。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应（methylation—specinc PCR,MSP）检测30例胃癌组织、30例癌旁组织及10例正常胃黏膜组织中WIF-1基因启动子区甲基化情况。结果胃癌组织、癌旁组织及正常对照组WIF-1基因启动子甲基化阳性率分别为76．6％（23／30）、13．3％（4／30）和0．0％（0／10）,胃癌组织甲基化率明显高于后两组,差异有统计学意义（均P〈0．05）。胃癌组织中不同年龄、性别、分化程度的WIF-1基因甲基化阳性率差异均无统计学意义;有淋巴结转移组甲基化率（90％）高于无淋巴结转移组甲基化率（50％）,差异有统计学意义（P〈0．05）;而Ⅲ～Ⅳ期和Ⅰ～Ⅱ期胃癌组织中WIF-1基因甲基化阳性率分别为90．5％与44．4％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论WIF-1基因启动子区发生高甲基化导致其表达下调或缺失与胃癌的发生、发展以及临床病理特征有着密切的关系,通过MSP法检测胃癌组织及正常组织的甲基化率,为胃癌的早期诊断及综合治疗寻找新的靶点。     

胃癌患者门静脉血中p53和K-ras基因突变的检测及其临床意义

目的 检测胃癌患者门静脉血中p53和K-ras基因突变,探讨其与胃癌肝转移的关系.方法 应用PCR-SSCP技术检测62例胃癌手术患者门静脉血中p53和K-ras基因的突变率.结果 外周血和门静脉血中的p53和K-ras突变阳性率分别为8%、5%和39%、34%;有无肝转移p53和K-ras突变阳性率分别为92%、77%和24%、22%;剖腹后探查前或胃癌探查后门静脉血p53和K-ras突变阳性率分别为39%、34%和56%、63%,上述两组指标之间相比差异均有统计学意义（P＜0.05）,但与患者性别、年龄、肿瘤的分化程度之间无显著性相关（P＞0.05）.结论 门静脉血内微转移癌细胞的基因突变检测有助于判断胃癌临床分期,对预测胃癌肝内微小转移有一定的临床价值.     

Clinicopathologic significance of Her-2 and P53 expressions in gastric cancer

BackgroundTo detect the expression of HER-2 and P53 patients with gastric cancer and to analyze their correlation.MethodsA total of 249 gastric cancer patients with complete clinical data who received surgical treatment from China–Japan Union Hospital of Jilin University were selected. The expression of Her-2 and P53 were detected by immunohistochemistry using the streptavidin-biotin-peroxidase method. The correlations between HER-2 and P53 in gastric cancer were analyzed.ResultsThe positive rate of Her-2 and P53 expression was 37.3% (93/249) and 100% in all the specimens, respectively. The intensity of Her-2 expression was significantly different in patients with different degrees of gastric cancer cell differentiation (P = 0.012). Meanwhile, the expression of her-2 was closely related to whether the pathological type of gastric cancer was a signet-ring cell carcinoma (P = 0.022). Different percentage of positive P53 expression was closely related to the grade of tumor differentiation (P = 0.035) and positive Ki67 expression (P = 0.001). There was a significant positive correlation between HER-2 and P53 expression in gastric cancer (P = 0.003). These findings suggest that HER-2 and P53 have synergistic effects in gastric cancer.ConclusionHer-2 and P53 are important markers for invasion and metastasis of gastric cancer. Combined detection of P53 and Her-2 expression in gastric cancer tissue can be used to assess prognosis and screen cancer patients at high risk of metastasis.     

肝细胞癌患者血浆和癌组织中RASSF1A基因甲基化及临床意义

目的探讨肝细胞癌(hepatocellular carcimona,HCC)患者外周血浆和肿瘤组织中RASSF1A基因甲基化及其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR(MSP)检测36例HCC患者血浆及其对应癌组织中的RASSF1A基因启动子甲基化状态,并分析其与临床参数的关系。结果癌组织和外周血浆中RASSF1A基因甲基化率分别为83.3%(30/36)和61.1%(22/36),二者相关系数为r=0.561(P=0.0004)。外周血浆和肿瘤组织中RASSF1A基因甲基化率与患者性别、年龄、HBV/HCV感染、肝硬化、肿瘤大小、AFP水平、肿瘤病理分级及临床分期、有无癌栓及是否为复发病例等之间无统计学相关性。以AFP≥400 ug/L为阳性,本组病例AFP阳性率为44.4%;以AFP≥20 ug/L为阳性,本组病例阳性率为69.4%。全部患者中,血浆RASSF1A基因甲基化检出率为61.1%,AFP联合血浆RASSF1A基因甲基化检测HCC的检出率为75%(27/36)。结论 HCC患者血浆和肿瘤组织中RASSF1A基因甲基化率有良好的一致性。血浆DNA甲基化联合AFP检测对HCC早期诊断具有一定意义。癌组织和血浆中基因甲基化改变与各临床参数无相关性。     

胃癌术前内镜超声检查与肿瘤血管内皮生长因子表达的检测分析

目的探讨内镜超声检查(EUS)对胃癌术前诊断和分期的应用价值及其影像学改变与肿瘤转移相关基因表达的分子生物学基础。方法联合应用电子胃镜和超声内镜诊断胃癌63例,对比胃镜检查加活检与超声内镜对胃癌诊断的准确率,同时应用超声内镜对胃癌进行术前分期,并与病理分期及血管内皮生长因子(VEGF)表达进行比较。结果63例胃癌中胃镜加病理活检诊断的准确率是94%,超声内镜诊断的准确率是92%,胃镜联合超声内镜诊断的准确率是100%。超声内镜对胃癌侵犯深度判断的准确率为81%,其中T1期为78%、T2期为79%、T3期为82%、T4期为83%,对淋巴结转移的准确率为73%。VEGF蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为56%,其表达与EUS分期、淋巴结转移关系密切(P<0.05)。结论胃镜联合超声内镜诊断胃癌具有较高的准确率;胃癌术前内镜超声分期与术后病理有较高的一致性;VEGF蛋白表达与胃癌术前EUS分期呈正相关;EUS对胃癌的分期与分子生物学改变有关。