营养和非营养复合型酶制剂菌株的选育及在酱油和食醋酿造中的应用

黑曲霉（Aspergillus niger van tieghem）是黑曲霉群中具有重要应用前景的菌株。而黑曲霉1号是诱变黑曲霉6号得到的1株产纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶等酶活较高的菌株。对黑曲霉1号的一般生物学特性及培养特征进行了研究,并对其主要酶系——蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶和果胶酶进行了酶系分析、活性测定和最佳产酶条件的分析,为酱油和食醋酿造的应用实验打下了基础。     

β-葡聚糖酶产酶培养基的优化

通过对黑曲霉(QYW-01A06)产β-葡聚糖酶培养基的研究,得出其最佳培养基配方为(/100mL):大麦粉4.0g,玉米浆1.0g,(NH4)2SO40.3g,NaNO30.2g,MgSO40.02g,FeSO4·7H2O0.01g,CaCO30.5g;在最佳培养基条件下进行摇瓶培养(80mL培养基/500mL三角瓶),每毫升发酵液酶活力达5252u,酶活力是初始培养基的2.6倍。     

β-葡聚糖酶高产菌株的分离筛选及其新菌种初步鉴定

根据刚果红与β-1，3-1，4-葡聚糖紧密结合而保持红色的特征，采用改进的方法筛选β-葡聚糖酶高产霉菌。从牛的瘤胃中筛选出产酶活力高的17株霉菌中获得一株高产β-葡聚糖酶的曲霉，在摇瓶条件下产酶活力达2269u／ml。经初步鉴定，该菌株为局限曲霉。     

突变黑曲霉高产β-葡萄糖苷酶的培养基优化

对实验室筛选出产β- 葡萄糖苷酶的黑曲霉进行辐射诱变处理得到高产酶突变菌株,同时采用单因素和正交实验对黑曲霉产酶培养基进行优化研究.结果表明:经过X射线辐射诱变的黑曲霉产的β- 葡萄糖苷酶活力提高了18.86 U/mL.该菌株最适宜产酶的培养基为(质量分数%): 麸皮与玉米粉(1∶1)1.5、 (NH 4 ) 2 SO 4 0.15、 KH 2 PO 4 0.2、吐温80 0.1,所得酶活力最大可达到59.86 U/mL.     

营养和非营养复合型酶制剂菌株的选育及在酱油和食醋酿造中的应用

黑曲霉（Aspergillus niger van tieghem），是黑曲霉群中具有重要应用前景的菌株。而黑曲霉1号是本实验室工作人员诱变黑曲霉6号得到的一株产纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶等酶活较高的菌株。本实验对黑曲霉1号的一般生物学特性及培养特征进行了研究，并对其主要酶系——蛋白酶、糖化酶、纤维素酶、木浆糖酶、β-葡浆糖酶和果胶酶进行了酶系分析、活性测定和最佳产酶条件的分析，为在酱油和食醋酿造应用试验打下基础。     

黑曲酶β-葡聚糖酶菌株诱变选育研究

以黑曲霉(Aspergillusniger)FH1为出发菌株,采用物理与化学相结合的方法,诱变选育出一株β-葡聚糖酶活性较高的菌株FH12。对该菌株进行摇瓶发酵条件的实验,酶活比出发菌株提高2.23倍。     

黑曲霉HS-5高产β-葡聚糖酶培养基配方的优化

采用Plackett-Burman(PB)试验和Box-Behnken(BB)试验对黑曲霉(Aspergillus niger)HS-5高产β-葡聚糖酶培养基进行优化。首先,采用PB设计从影响黑曲霉HS-5产酶培养基的11个因素中筛选出大麦粉、酵母膏、硝酸铵3个显著影响因素,再通过BB试验对显著因素进行优化。由此得到黑曲霉HS-5发酵产酶的最佳培养基组成为大麦粉3.9%、酵母膏2.1%、硝酸铵0.15%。在此优化条件下,β-葡聚糖酶活力为18.82 U/mL,与预测值18.96 U/mL基本上吻合。     

高产β-甘露聚糖酶黑曲霉菌株的分离与鉴定

该研究以采集的河南南阳魔芋种植土壤样品为试验材料,通过富集培养、测定产β-甘露聚糖酶酶活力,分离筛选高产β-甘露聚糖酶的菌株,并通过形态观察、内转录间隔区（ITS）基因和β-微管蛋白基因BenA序列分析对其进行菌种鉴定。结果表明,筛选得到一株高产β-甘露聚糖酶真菌菌株HKS016,其β-甘露聚糖酶酶活力为2.67 U/mL,该菌株被鉴定为黑曲霉（Aspergillus niger）,保藏于中国普通微生物学菌种保藏中心（CGMCC）,保藏编号为CGMCC No.22413。     

纤维素酶产生菌黑曲霉的选育及其产酶条件的研究

进行优良纤维素酶高产菌株的选育,并研究其发酵条件.以黑曲霉菌株S1为原始出发菌株进行紫外诱变,经过单因素实验和正交实验优化突变菌株的产酶条件.获得一株高产纤维素酶黑曲霉(Aspergillus niger)菌株S12,其最佳产酶条件为:在pH6.0、培养温度28℃、培养时间96 h条件下;秸秆粉2.5 g、麦麸2.5 g、1%(NH4)2SO410mL.在此条件下,滤纸酶活力为3.79 IU/mL,羧甲基纤维素酶活力19.06 IU/mL,β-葡萄糖苷酶活力47.33 IU/mL,其酶活分别是原始菌株的1.20倍、1.70倍和1.13倍.     

高产β-葡萄糖苷酶药用真菌菌株的筛选

从30个属61株药用真菌中筛选能高产β-葡萄糖苷酶的菌株,经α-纤维素平板法快速初筛和固体发酵复筛,采用对硝基酚-β-葡萄糖苷(pNPG)法对复筛菌株进行酶活测定.结果表明,菌株Schino-phyllum commune.01产β-葡萄糖苷酶能力最强,且其酶活在第9天时能达到39.03 IU/g,灵芝属(Ganoderma sp.)和香菇属(Lenttinus sp.)担子菌也存在产β-葡萄糖苷酶的能力,其余菌株产β-葡萄糖苷酶能力很低.     

拟青霉WPG-1的鉴定及固体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶条件的优化

从土壤中筛选出一株高产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的耐热真菌WPG-1,经过鉴定为拟青霉属(Paecilomyces sp.)。通过单因素试验优化拟青霉WPG-1固体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的发酵条件。结果表明,该菌株产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的最佳条件是:以燕麦粉为碳源,蛋白胨为氮源(氮素含量0.2%),初始水分含量70%,初始p H为自然,培养温度45℃为最佳产酶条件。在优化后的条件下培养5 d产β-1,3-1,4-葡聚糖酶水平高达1 324.49 U/g干基碳源。     

β-1,3-1,4-葡聚糖酶高产菌诱变选育及基因克隆表达

为获得β-1,3-1,4-葡聚糖酶高产菌株,以高地芽孢杆菌YC-9为出发菌株,通过亚硝基胍(nitrosoguanidine,NTG)和低能N+束诱变育种,筛选和选育得到两株突变株N-2-2和10-30s-3,发酵培养60 h,酶活力分别达到28.6 U/m L和36.1 U/m L,分别是出发菌株的2.36倍和2.98倍,与YC-9菌株相比,突变菌株菌体生长下降但发酵产酶量增加。进一步将β-1,3-1,4-葡聚糖酶克隆并在大肠杆菌中成功表达,经过30℃诱导6 h后,胞内酶活力达79.2 U/m L,为出发菌株的6.5倍。     

黄曲霉产胞外β-1 ,3-1 ,4-葡聚糖酶的发酵条件优化

研究发现一株高产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的黄曲霉菌株,优化了其产酶条件并考察了粗酶潜在的工业应用价值。依次采用单因素法和响应面分析法优化该菌发酵产酶条件,得到其优化产酶条件:麸皮19 g/L、磷酸氢二铵30g/L、吐温-60 21 g/L、NaCl 5 g/L、MgSO_4·7H_2O 0. 5 g/L、KH_2PO_40. 75 g/L、培养基初始pH值8. 0、培养温度38℃、培养时间6d。在此条件下,黄曲霉能够分泌的最高胞外β-1, 3-1,4-葡聚糖酶酶活达155.9 U/mL。水解研究发现,该酶能高效降解大麦粉和燕麦粉中的β-葡聚糖,并直接生成葡萄糖。这些结果表明,黄曲霉能高效分泌β-1,3-1,4-葡聚糖酶,且该酶具有较强的工业应用前景。     

β-葡聚糖酶及在啤酒工业中的应用

本文主要阐述了β-葡聚糖、β-葡聚糖酶的性质。讨论了β-葡聚糖对啤酒感官指标的影响。着重论述了β-葡聚糖酶在啤酒工业中的应用。对利用改良的酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)菌株的应用前景做了探讨     

β-葡萄糖苷酶生产菌筛选及酶学特性

以黑曲霉(Aspergillus niger)AN为出发菌株,通过亚硝基胍(NTG)诱变方法获得了一株高产β-葡萄糖苷酶的突变株AN-17。该黑曲霉突变株AN-17在摇瓶中的β-葡萄糖苷酶酶活291 U/m L,且传代发酵稳定性良好。所产β-葡萄糖苷酶对葡萄糖有良好的耐受性,在葡萄糖含量18%条件下相对酶活为95%;且该酶耐酸耐热性良好,在p H3.0~6.5条件下处理1 h或75℃保温处理40 min后,相对酶活70%。     

泡盛曲霉液体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的条件优化

从土壤样品中筛选得到一株高产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的真菌,经鉴定为泡盛曲霉(Aspergillus awamori),命名为Aspergillus awamori CAU33。依次采用单因素试验和响应面分析法优化了其液体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的条件,得到该菌株产酶的最适条件为:玉米芯质量浓度55 g/L、大豆蛋白胨质量浓度25 g/L、曲拉通X-114质量浓度23 g/L、初始pH 4.5、培养温度35℃、培养时间6 d。在此条件下β-1,3-1,4-葡聚糖酶活力达到8 447 U/m L,为优化前的17.6倍。     

黑曲霉高产纤维素酶活突变株的筛选

对航空诱变的1株黑曲霉（Aspergillus niger）进行筛选,得到纤维素酶高产突变株ZM-8。以玉米秸秆粉为主要碳源,经固体发酵培养,测得其滤纸酶活力（FPA）为110．2U/g,纤维二糖水解酶活力（C1）为389．9U／g,葡聚糖内切酶活力（CMCase）为489．3U／g,β-葡萄糖苷酶活力（β-Glase）为1208．1U／g,比出发菌株分别提高了2．1倍、3．5倍、1．7倍和1．8倍。经过5次继代固体发酵实验,证明该菌株具有较好的产酶稳定性,为作物秸秆的降解奠定了基础。     

耐高温β-葡聚糖酶产生菌株的筛选及酶学性质的研究

从云南安宁温泉周围土壤中筛选到1株热稳定性能较好的β-葡聚糖酶产生菌W-9.其发酵条件及酶学特性为:发酵 72h,在pH6.0、70℃条件下,酶活性为82.64u/mL.分子生物学及其生理生化鉴定,该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).W-9产β-葡聚糖酶的酶学性质结果显示,其产β-葡聚糖酶的最适反应pH为6.0,最适反应温度为70℃,在70℃条件下保温时,酶活基本稳定.     

β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株筛选、鉴定及酶基因克隆和序列分析

目的:筛选和鉴定β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株并对酶基因进行克隆和序列分析。方法:利用透明圈法从食堂锅炉排水口污泥中分离筛选菌株,并采用形态和生理生化特征鉴定菌株。通过PCR方法扩增酶基因,将其克隆于T-载体,用Sanger双脱氧链终止法测定序列。结果:分离筛选的β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株呈长杆状、革兰氏染色可变、兼性厌氧、产芽孢(次端生、孢囊膨大)。生理生化试验结果表明:该菌株与浸麻芽孢杆菌(Bacillusmacerans)最为相近,命名为BacillusspA3。PCR扩增获得的酶基因全长734bp,其中开放阅读框架为717bp,编码238个氨基酸。经Blast分析,该序列与多粘芽孢杆菌(B.polymyxa)和浸麻类芽孢杆菌(B.macer-ans)相似性较高,分别为98%和82%。结论:成功分离了β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株BacillusspA3,酶基因序列与多粘芽孢杆菌和浸麻类芽孢杆菌有较高的同源性。     

α-葡萄糖苷酶高产菌株诱变选育的研究

α-葡萄糖苷酶是生产异麦芽低聚糖的关键酶.本文以α-葡萄糖苷酶产生菌黑曲霉M-1为出发菌株,经UV、UV-LiCl复合诱变和60Co 诱变选育,成功筛选出了一株遗传稳定性较好的高产菌株C-1,其产酶活力是出发菌株的2.7倍.有望将来应用于异麦芽低聚糖的生产中.