载脂蛋白(a)基因结构与功能研究

脂蛋白(a)[Lp(a)]是一种低密度脂蛋白(LDL)样的脂蛋白。LDL样脂蛋白是致动脉粥样硬化的主要危险因素。LDL样脂蛋白与Lp(a)不同之处就在于前者比后者多个载脂蛋白(a)[apo(a)]。apo(a)基因结构与血纤维蛋白溶酶原同源。apo(a)与血纤维蛋白溶酶原活性竞争可以说明一些与Lp(a)有关的病理生理学问题。现已识别6个高度相关的基因,至少在重叠的基因组克隆附近发现4个相关基因。目前正着于研究apo(a)基因表达的调节,人类apo(a)基因插入到转基因鼠,此基因导致了转基因鼠动脉损害。     

载脂蛋白（a）的遗传学研究进展

脂蛋白（ａ）（Ｌｐ（ａ））是动脉粥样硬化的独立危险因子，它由载脂蛋白（ａ）（ａｐｏ（ａ））与ＬＤＬ中的ａｐｏＢ１００以二硫键连接而成。ａｐｏ（ａ）的结构与血浆纤溶酶原高度同源，其基因定位于６ｑ２６－２７，亦与纤溶酶原基因紧邻。ａｐｏ（ａ）受单一位点的至少１９个等位基因所控制，呈常染色体共显性遗传。它存在表型多态性，包括密度多态性和大小多态性，至少有１１种不同大小的ａｐｏ（ａ）蛋白。多态性的根本原因     

汉族人群载脂蛋白(a)五核苷酸重复序列基因多态性对血脂水平的影响

目的:了解健康湖北汉族人群载脂蛋白(a)五核苷酸重复序列(pentanucleotiderepeat,PNR)基因多态性并分析其对血清脂质的影响。方法:随机选取153例健康湖北汉族受试者,测定其血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),载脂蛋白AI(apoAⅠ)、载脂蛋白B(apoB)及脂蛋白(a)的浓度,并采用PCR-SSCP的方法检测载脂蛋白(a)PNR基因多态性,计算各等位基因的分布频率。结果:我国汉族人群apo(a)PNR等位基因频率分布与欧美人群有显著性差异,apo(a)PNR(TTTTA)5等位基因与高Lp(a)水平相关,apo(a)PNR等位基因变异对TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoAI和ApoB无明显影响。结论:本研究获得了湖北健康汉族人群的血脂及apo(a)PNR等位基因分布的资料,apo(a)PNR(TTTTA)5等位基因与汉族人群高Lp(a)水平有关。     

人组织型纤溶酶原激活剂及其生理性抑制剂的结构与功能

一、人组织型纤溶酶原激活剂的结构和功能 人组织型纤溶酶原激活剂(Tissueplasminogen Activator,t-PA)由527个氨基酸组成,分子量约为67000,属丝氨酸类蛋白水解酶。它能使纤溶酶原(Plasminogen,Plg)变成纤溶酶(plasmin,plm),后者促使水不溶性纤维蛋白(Fibrin,Fb)水     

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂的基因结构与功能

在纤溶反应体系中,Ⅰ型纤溶酶原抑制剂(PAI-1)是组织型纤溶酶原激活剂和U型纤溶酶原激活物(PA)的生理性抑制剂。PAI-1通过与t-PA的结合形成复合物使其失活,从而调节t-PA的活性,本文着重介绍了PAI-1的基因结构及其功能,以及与t-PA之间的关系。     

纤溶酶原激活剂抑制物(PAI)研究新进展

纤溶酶原激活剂(plasminogen activator,PA)激活纤溶酶原生成纤溶酶是纤溶过程的中心环节。纤溶酶原激活剂抑制物(plasminogen activator inhibitor,PAI)特异性地抑制PA(t-PA及u-PA)活性,其作用迅速,又称为快速作用抑制物。PAI在体内分布很广,对纤溶活性起着决定性作用,某些栓塞病患者血浆PAI活性显著升高,因此     

纤溶酶原激活物抑制因子-1蛋白分子的结构与功能

纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)是组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和尿型纤溶酶原激活物(u-PA)的特异性抑制剂。对PAI-1分子的结构与功能的认识,有助于了解PAI-1发挥抑制 作用的机理。本文综述了近年来对PAI-1蛋白分子结构与功能研究的进展,介绍了PAI-1分子中一些区域的作用以及影响PAI-1抑制活性的一些因子。     

人纤溶酶原结构和功能研究进展

人纤溶酶原(plasminogen,Plg)是纤溶系统的主要成分,与体内多种生理、病理过程密切相关。本文综述Plg基因及其编码的蛋白质的结构与功能,由此进一步阐述其临床意义。     

新型组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体的克隆及表达

组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)是以丝氨酸为活性中心的蛋白酶。它激活纤溶酶原成为纤溶酶,这依赖于纤维蛋白,它不能单独激活循环血流中的纤溶酶原。由于其对纤维蛋白有很高的亲和力,故血栓形成时,它能特异地和血栓中的纤维蛋白结合,纤溶酶也通过其赖氨酸残基与纤维蛋白结合,形成三元复合物。这样的机理决定了t-PA可选择性地溶解血栓中的纤维蛋白,而对血流中的纤维蛋白原、凝固因子等没有破坏作用。但由于t-PA在体内的半衰期甚短(约5分钟),且在血浆中已被纤溶酶原激活抑制剂抑制,故临床上溶栓时需大剂量连续用药,不仅费用昂贵而且有引起系统性纤溶系统出血的危险。因此设计半衰期延长,且亲和力不变甚至提高的t-     

高血压病各期纤溶活性变化的意义

进一步探讨高血压病各期纤溶活性变化的临床意义 ,为早期防治寻找依据。方法用发色底物法测定血浆纤溶酶原激活物抑制物(PAI)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及纤溶酶原(PLG)的含量。结果①高血压病Ⅱ期、急性脑梗塞及脑出血各项指标均与正常组比较有明显差异(P<0.001) ,急性脑出血、脑梗塞较高血压病Ⅱ期t-PA、PAI有明显差异(P<0.01);②脑卒中各组纤溶活性均无明显差异(P>0.05) ;③合并冠心病者与单纯高血压病Ⅱ期比较 ,t -PA、PAI有明显差异(P<0.01)。结论高血压病各期存在纤溶功能的失衡 ,提示早期干预治疗的重要性。测定血浆PAI、t-PA ,有利于判断高血压病的严重程度、疗效、预后     

冠状动脉粥样硬化性心脏病患者载脂蛋白(a)五核苷酸重复序列基因多态性的初步研究

目的　探讨载脂蛋白 (a) [apolipoprotein(a) ,apo(a) ]五核苷酸重复序列 (pentanucleotiderepeats,PNR)基因多态性与中国汉族人冠状动脉粥样硬化性心脏病 (简称冠心病 )发病的关系。方法　应用聚合酶链反应结合聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色 ,对 15 3名中国汉族正常人和 16 5例冠心病患者apo(a) PNR基因多态性进行了分析。结果　冠心病组 apo(a) PNR(TTTTA) 5/8基因型频率 (0 .188)和(TTTTA) 5等位基因频率 (0 .115 )显著高于正常对照组 (0 .0 39,0 .0 2 6 ) ,差异有显著性 (P <0 .0 1,P<0 .0 5 )。结论　apo(a) PNR基因多态性与人群易患冠心病有关 ,可能在一定程度上参与了冠心病的发生和发展过程。     

人组织型纤溶酶原激活剂分子生物学研究的进展

人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)是丝氨酸类蛋白水解酶,因它能特异地与纤维蛋白结合并受其激活,故被认为是一种高效的溶栓剂。本文结合作者的工作综述了近几年国内外在基因、蛋白质水平对t-PA进行研究的进展,深入讨论了t-PA分子结构与功能的关系,提出进行t-PA蛋白质工程以及利用抗体进行t-PA导向溶栓的可行性.     

PAI-1启动子区4G/5G基因多态性、ACE插入/缺失多态性与脑卒中的相关性

目的 探讨纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)启动子区基因多态性和血管紧张素转换酶(ACE)插入/缺失多态性与脑卒中的关系.方法 PCR检测203例脑卒中患者和139名健康对照者PAI-1基因启动子区4G/5G多态性、ACE基因插入/缺失多态性,同时应用比色法测定血清ACE活性,发色底物法测定PAI-1活性.结果 脑...     

纤溶酶原激活物抑制剂-1与肥胖

纤 溶系统由纤溶酶原、纤溶酶原激活物 ( plasminogenac tivatorPA)和激活物特异性抑制剂 (plasminogenacti vatorinhibitorPAI)、纤溶酶及纤溶酶抑制物组成 ,其主要功能是通过纤溶酶溶解纤维蛋白而将其从循环系统中清除出去。PAI是纤溶系统活性主要的生理调节物 ,它在体内有多种形式 ,包括内皮细胞型 (PAI 1)、胎盘型 (PAI 2 )、尿型 (PAI 3)和连接蛋白酶 1(proteasenexin 1) ,其中PAI 1在纤溶活性调节中起着重要作用 ,它主要灭活组织型纤溶酶原激活物 (t PA)。PAI 1和t PA之间的平衡对维持纤溶系统正常功能十分重要。临床和流…     

人纤溶酶原kringle5功能区基因在大肠杆菌中克隆和表达

目的:构建含有人纤溶酶原kringle5功能区基因的表达质粒,了解在E.coli中表达情况。方法:采用基因工程技术将人纤溶酶原kringle5功能区基因插入载体PBV220E.coRI位点,再转化到E.coliTGI中,SDS-PAGE观察基因表达。结果:构建出表达质粒PBVK5,42℃诱导获得表达。结论:人纤溶酶原kringle5功能区基因表达产物以可溶性蛋白形式存在,表达量占菌体总蛋白9.8%。     

转染组织纤溶酶原激活物及内皮型一氧化氮合酶基因的内皮细胞和平滑肌细胞共同种植于人工血管对内膜增生的影响

背景：前期研究表明,双层细胞种植能有效提高内皮细胞保留率,将组织纤溶酶原激活物基因转染到内皮细胞中能提高其细胞溶解纤维蛋白的能力。 目的：采用双细胞种植及修饰内皮的组织纤溶酶原激活物基因提高内皮细胞保留率和抗栓能力,通过内皮型一氧化氮合酶基因调控平滑肌细胞的增殖,观察对小口径人工血管通畅率的影响。 方法：以4种不同组合细胞(内皮细胞+平滑肌细胞SMC,内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞,内皮细胞+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶,内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶)种植在PTFE管腔面。将新西兰大白兔随机分成4组,4种人工血管经旁路分别移植在4组兔的腹主动脉上。 结果与结论：移植后60 d,种植内皮细胞+平滑肌细胞组和内皮细胞+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶组内膜厚度无明显差异(P > 0.05)。与内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶组相比,未转染内皮型一氧化氮合酶组(内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞）内膜明显增厚(P < 0.05);未转染组织纤溶酶原激活物组(内皮细胞+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶)内膜较薄(P < 0.05)。提示组织纤溶酶原激活物基因转染可以促进血管内膜增生导致血管狭窄,但同时转入内皮型一氧化氮合酶基因可以抑制组织纤溶酶原激活物的促进平滑肌细胞增殖及内膜增生的作用。     

Ⅱ型糖尿病患者血浆可溶性凝血酶调节蛋白的变化及临床意义

目的 评价血浆可溶性凝血酶调节蛋白与Ⅱ型糖尿病患者凝血和纤溶系统之间的关系。方法 我们检测了50例Ⅱ型糖尿病患者血浆中可溶性凝血酶调节蛋白、蛋白C(PC)(由凝血酶-TM复合物诱导产生的抗凝物质)、凝血酶原片段F1+2(一种凝血酶生成的直接标志物)、纤溶酶-α2-抗纤溶酶复合物(PAP)和D二聚体(DD)。结果 患者血浆中的sTM(P<0.01)、PAP(P<0.01)、PC(P<0.05)和F1+2(P<0.05)较50例正常对照组明显增高,糖尿病肾病患者的sTM和PAP升高更加显著。在糖尿病患者中,sTM与PC呈负相关(r=-0.50,P<0.001),而与PAP呈正相关(r=0.47,P=0.01)。结论 结果表明糖尿病患者的凝血和纤溶系统均是活化的,血浆中的可溶性凝血酶调节蛋白升高与糖尿病患者凝血和纤溶系统活化相关。     

代谢综合征患者纤溶活性与胰岛素抵抗的关系

目的:探讨代谢综合征患者血浆纤溶活性及与胰岛素抵抗的关系。方法:选择单纯代谢综合征患者36例,代谢综合征合并冠心病患者44例和健康人群对照20例。观察一般情况,并测定血浆纤溶酶原激活抑制物-1(PAI-1)和组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤维蛋白原(Fib)、空腹血糖(FBG)、空腹血胰岛素(Ins)和血脂等指标;计算胰岛素敏感指数(ISI)。结果:代谢综合征患者的ISI较正常对照组明显下降(P<0.05);血浆PAI-1、Fib等明显升高(P<0.05)。代谢综合征合并冠心病组PAI-1与Fib、Ins正相关,与ISI、高密度脂蛋白(HDL)负相关。结论:代谢综合征患者存在明显的胰岛素抵抗和纤溶活性异常,同时纤溶活性异常与胰岛素抵抗相关。     

纤溶酶原激活剂抑制物2型的结构与功能

纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)具纤溶抑制活性,是尿激酶(uPA)特异的抑制物。u-PA在肿瘤浸润与转移过程中起了十分关键的作用,PAI-2亦因此成为当今研究的热点。本文对PAI-2的基因结构、表达调控、蛋白质结构、功能及其作用机制等进行了综述。     

活血I号对深静脉血栓形成大鼠纤溶系统功能和静脉内皮结构的影响

背景:临床应用玄参、麦冬、当归、红花等组成的活血I号方能预防人工关节置换后下肢深静脉血栓。目的:为进一步阐明活血I号作用机制,观察其对下肢深静脉血栓形成大鼠纤溶系统功能和静脉内皮结构的影响。方法:采用结扎下腔静脉的方法制备大鼠深静脉血栓模型。分别给予不同剂量的活血I号,阳性对照药为脉络舒通颗粒,模型对照组给予生理盐水,并设立不结扎静脉的假手术组。手术后不同时间点测定大鼠深静脉血栓湿质量、血浆中组织型纤溶酶原活化剂和纤溶酶原活化剂抑制物水平的变化;电镜下观察大鼠结扎后下腔静脉内皮细胞形态组织学变化情况。结果与结论:与模型组对照组相比,活血I号各组均能显著降低大鼠血栓湿质量(P0.05或P0.01),升高大鼠血浆组织型纤溶酶原活化剂的含量(P0.05,P0.01);高剂量组于造模后1,3,6d,中剂量组于造模后3,6d,低剂量组于造模后3d,均可降低大鼠血浆纤溶酶原活化剂抑制物的水平(P0.05)。与模型对照组相比,低剂量组和高剂量组于造模第1,3天粗面内质网明显,线粒体呈凝聚态;第6天,胶原纤维开始增多。提示活血I号能有效抑制血栓的形成,保护血管内皮细胞,其作用机制与通过提高组织型纤溶酶原活化剂活性,抑制纤溶酶原活化剂的分泌及活性有关。