胃泌素释放肽在炎性疾病中的作用

背景 胃泌素释放肽(gastrin-releasing peptide,GRP)是一种神经肽,属于铃蟾肽类(bombesin,BB),表达于多种组织(胃肠系统、呼吸系统、神经系统、内分泌腺以及骨骼肌等).胃泌素释放肽受体(gastrin-releasing peptide receptor,GRPR)属于G蛋白耦联受体(G protein coupled receptors,GPCRs).近年来,GRP在炎症性疾病中的作用备受关注,研究显示RC-3095作为GRPR特异性拮抗剂具有抗炎作用.目的 探讨GRP在炎性疾病中的作用及其研究现状.内容 主要从脓毒症、关节炎、胃肠炎、眼葡萄膜炎等炎性疾病着手,对GRP在炎症疾病中的作用进行归纳总结.趋向 GRP-GRPR将有可能成为炎性疾病的潜在治疗靶点,并有望实现从基础研究到临床应用的转化.     

胃泌素释放肽对肝癌细胞MHCC97H迁移的作用

目的:探讨胃泌素释放肽(GRP)对高转移人肝癌细胞MHCC97H迁移和上皮间质转化(EMT)的作用。方法:利用外源性的GRP刺激MHCC97H细胞,细胞三维培养观察细胞形态的变化,Westernblot检测EMT标志蛋白E-cadherin和vimentin的表达,Transwell迁移分析检测肝癌细胞的迁移数量的变化。结果:与对照组相比较,GRP刺激的人高转移肝癌细胞MHCC97H向间叶细胞的形态转变,使上皮细胞表型标记物E-cadherin蛋白表达下降,间叶细胞表型标记物vimentin蛋白表达升高,细胞迁移数量明显增多。其作用能被GRP受体阻滞剂PD176252所减弱。结论:GRP能够诱导人高转移肝癌细胞MHCC97H发生EMT,促进肝癌细胞的迁移,该作用是通过GRP结合GRPR实现的。     

脊髓胃泌素释放肽系统调控雄性性功能的研究进展

雄性大鼠上腰段(L3～L4)脊髓神经元投射到下腰段(L5～L6)脊髓时,释放胃泌素释放肽(GRP)至调节雄性性反射的神经元胞体或自主中枢,与GRP受体(GRPR)结合,进而发挥特定的功能。脊髓GRP系统受雄激素调节,大量研究表明,GRP在大鼠勃起及射精过程中发挥着重要作用,当给予GRPR激动剂治疗时,可恢复去势雄性大鼠的勃起及射精功能。因而,GRP系统可能成为勃起功能障碍或射精功能障碍的潜在治疗靶点。本文就脊髓GRP系统在调控雄性性功能方面的研究作一综述。     

葡萄糖调节蛋白78在肝癌中的研究进展

葡萄糖调节蛋白78(GRP78)是内质网应激(ERS)相关的重要分子伴侣,在机体正常肝脏组织中几乎不表达,而在肝癌组织中呈高表达状态,这有利于肝癌的增殖及耐药性的产生,并影响肝癌的侵袭与转移.因此,以GRP78为靶点的基因干扰技术,有望成为肝癌基因治疗的新途径.     

胃泌素释放肽受体分子影像探针用于乳腺癌诊疗研究进展

分子影像探针因其能精准靶向肿瘤而成为国内外研究热点之一,其中纳米颗粒和肿瘤靶向肽在肿瘤成像与药物递送治疗肿瘤中具有重要作用。胃泌素释放肽受体(GRPR)在乳腺癌中呈高表达,研制自组装分子探针靶向乳腺癌细胞,可通过X线、MRI、PET/CT等成像方式诊断乳腺癌,亦可用于放射治疗、化学治疗及光热治疗等。本文就基于GRPR的分子影像探针用于乳腺癌诊疗进展进行综述。     

靶向短肽介导的肿瘤抑素活性T3片段对骨肉瘤的疗效

目的 探讨靶向短肽介导的肿瘤抑素(tumstatin)活性T3片段对骨肉瘤裸鼠皮下移植瘤的抑瘤效果.方法 人工合成肿瘤抑素活性T3片段并加载对骨肉瘤血管有靶向结合能力的7肽.在体外,通过细胞凋亡抑制(MTS)法、细胞迁移抑制实验检测该活性肽对人脐静脉血管内皮细胞的抑制作用.体内实验,选取裸鼠50只,制备荷骨肉瘤裸鼠模型,剔除瘤体较大或较小的裸鼠,将剩余荷瘤裸鼠分为4组,每组6只,分别给予T3肽、靶向-T3肽、化疗药物(CTX)及磷酸盐缓冲液(PBS)干预治疗.治疗完成后完全剥离肿瘤称重,并进行肿瘤组织免疫组化染色、裸鼠肺组织HE染色,以分析靶向-T3肽对骨肉瘤血管生成及侵袭力的抑制效果.结果 体外环境下,T3肽及靶向-T3肽均有效抑制人脐静脉血管内皮细胞的增殖.体内实验,靶向-T3肽组平均瘤重(1.104±0.247)g,其肿瘤抑制率为46.9%;T3肽组平均瘤重(1.484±0.369)g,其肿瘤抑制率为28.6%;各治疗组间肿瘤重量比较,差异有统计学意义(F＝16.353,P=0.000).病理切片免疫组化结果显示,靶向-T3肽能明显减少与肿瘤血管生长相关的血管内皮生长因子的表达,降低肿瘤的侵袭能力,其效果优于T3肽.结论 靶向短肽介导的肿瘤抑素活性T3片段具有较强的骨肉瘤抑制能力,能够有效地富集在骨肉瘤血管内皮,具有低毒高效的治疗作用.

Abstract：

Objective To observe the inhibitory effect of tumstatin related peptide T3 mediated by short peptide to osteosarcoma vascular. Methods Through MTS assay, wound healing assay, the inhibitory effect of targeting-T3 peptide and T3 peptide on the human umbilical veil endothelial cell was studied in vitro. After the preparation of 50 nude mice model bearing osteosarcoma, the nude mice bearing too large or too small tumors were eliminated and the left ones were divided into 4 groups (6 animals for each group: T3 peptide, targeting-T3 peptide, CTX, PBS) randomly. Through weight of tumor, histopathologicol slice and immunohistochemical methods. The inhibitory action of targeting-T3 peptide and T3 peptide on the neoge-netic vascular of osteosarcoma implanted in nude mouse was studied. Results In vitro, both T3 peptide and targeting-T3 peptide effectively inhibited the proliferation of human umbilical veil endothelial cell. In the experiment of vivo, the average weight of tumor of targeting-T3 peptide group was (1.104?.247) g, the average weight of the T3 peptide group was (1.484?.369) g. There was the statistical difference in tumor inhibition on the osteosarcoma betweent the targeting-T3 group and T3 group (F=16.353, P=0.000). The positive rate of vascular endothelial growth factor and metastasis in the lung in the targeting-T3 peptide group all descended than the T3 peptide group. Conclusion Because of the short peptide to osteosarcoma vascular, targeting-T3 peptide could significantly restrain the development of osteosarcoma. Coupling short peptide to T3 peptide increase the selective binding of T3 peptide to osteosarcoma vascular.     

葡萄糖调节蛋白78在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的 分析葡萄糖调节蛋白78（GRP78）在膀胱移行细胞癌（BTCC）组织中的表达及其与肿瘤进展的关系.方法 采用免疫组化方法分析37例膀胱移行细胞癌组织中GRP78的表达,并结合随访资料分析GRP78表达强度与肿瘤进展的关系.结果 GRP78在浸润性膀胱癌组织中的表达明显上调,但不同病理分级肿瘤组织中表达并无差异.GRP78高表达的患者无进展生存时间（PFS）明显下降,多因素分析显示GRP78是判断患者预后的独立预测因子.结论 GRP78可作为判断膀胱移行细胞癌患者预后的重要标志物.     

采用组织芯片技术分析胃癌组织中胃泌素和胃泌素释放肽的表达

目的研究胃癌组织中胃泌素(GAS)、胃泌素释放肽(GRP)的表达及其临床意义。方法采用组织芯片技术制作60例胃癌组织芯片,同时用生物素-链霉菌卵白素检测系统(SP)免疫组织化学方法检测胃癌组织芯片中GAS、GRP的表达。结果60例胃癌中GAS阳性率为30.0%;GRP阳性率为11.7%。中、低分化胃癌GAS、GRP阳性率高于高分化胃癌(P<0.05);印戒细胞癌GAS、GRP阳性率显著高于其他组织学类型胃癌(P<0.05);胃癌GAS、GRP阳性表达与淋巴结转移相关(P<0.05)。结论应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的,具有快速、方便、经济、准确的特点。     

葡萄糖调节蛋白78和94蛋白在直肠腺癌中的表达及其意义

目的探讨葡萄糖调节蛋白(GRP)78和GRP94蛋白在直肠腺癌的癌组织中的表达及其临床意义。方法收集直肠腺癌手术标本45例,常规石蜡包埋后切片,应用En Vision TM免疫组织化学法检测GRP78和GRP94蛋白在直肠腺癌的癌组织及相应癌旁组织中的表达水平。结果 1在45例直肠腺癌的癌组织中GRP78和GRP94蛋白表达阳性率明显高于其在对应的癌旁组织中的表达(GRP78:χ2=16.200,P0.001;GRP94:χ2=14.221,P0.001)。2 GRP78和GRP94蛋白在直肠腺癌的癌组织中的阳性表达均与病理分化类型、Dukes分期和淋巴结转移有关(P0.05),尚未发现GRP78和GRP94蛋白在直肠腺癌的癌组织中的阳性表达与患者性别、年龄、肿瘤大小等临床特征有关(P0.05)。3在24例GRP78蛋白表达阳性病例中,GRP94蛋白表达阳性者为18例,21例GRP78蛋白表达阴性病例中,GRP94蛋白表达阳性者为6例,两者在直肠腺癌中的表达呈正相关(rs=0.464,P0.01)。结论 GRP78和GRP94蛋白在直肠腺癌的癌组织中呈高表达,并与其转移和侵袭有关,可作为判断直肠腺癌恶性程度的有用指标。     

GRP78在肿瘤中的作用

葡萄糖调节蛋白78(GRP78)是热休克蛋白70家族的成员之一,在维持细胞内稳态方面发挥重要作用.GRP78在多种肿瘤组织中呈高表达状态,能够促进肿瘤细胞的增生、存活、转移及产生耐药性.抑制GRP78的表达可以增强抗肿瘤药物的作用,为肿瘤的治疗提供了一个可能的新途径.     

原发性胆囊癌中热休克蛋白(GRP78)的表达及意义

近年来的研究发现,热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)在多种肿瘤组织中高表达,提示与肿瘤的发生、发展有关.本文用免疫组织化学方法检测胆囊癌组织中热休克蛋白(GRP78)的表达情况,旨在为胆囊癌的临床诊治和预后判断提供有价值的理论帮助.     

CD117、C-erbB-2及表皮生长因子受体在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测原发性肝癌组织中CD117、C-erbB-2及表皮生长因子受体(EGFR)表达,探讨其在肝癌诊断和治疗中的意义.方法 经病理确诊的127例原发性肝癌患者,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中CD117、C-erbB-2及EGFR表达,分析其与肿瘤数目、直径、血管侵犯、组织分化及甲胎蛋白(AFP)水平关系.结果 CD117、C-erbB-2及EGFR阳性表达率分别为32.3%(41/127)、22.8%(29/127)和27.6%(35/127),CD117表达与肿瘤数目、直径和血管侵犯明显相关;C-erbB-2表达与肿瘤直径、血管侵犯和肿瘤分化明显相关;EGFR表达与肿瘤数目、AFP水平和肿瘤分化明显相关.结论 肝癌组织表达CD117、C-erbB-2及EGFR与肿瘤形态和生物学特性有关,对肝癌预后判断和靶向治疗具有一定指导意义.     

酪丝缬肽对人肝癌裸鼠移植瘤的抗血管生成作用及其机制

目的 探讨三肽化合物酪丝缬肽(YSV)对人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤的抑制作用及其抗血管生成机制.方法 建立人肝癌SMMC-7721裸鼠移植瘤模型,免疫组织化学法观察YSV对肿瘤组织中微血管密度(MVD)的影响;应用血管生成相关基因芯片分析YSV对肿瘤组织血管生成相关基因的影响;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)验证相关基因的表达情况,最后酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清中目的因子的含量.结果 YSV能显著抑制人肝癌SMMC-7721裸鼠移植瘤的生长,当给药剂量为320μg/kg·d~(-1)时效果最为显著,抑瘤率为60.66%.免疫组织化学法证实YSV能够降低肿瘤组织中微血管密度,YSV作用组MVD平均值36.0±11.6,对照组平均值为114.5±26.5.与生理盐水组比较,在113个候选基因中有18个基因下调2倍以上,其中血管内皮生长因子(VEGF)与白细胞介素(IL)-8基因下调最显著;RT-PCR法证实YSV能够抑制肿瘤组织中VEGF与IL-8在mRNA水平上的表达;ELISA亦证明YSV作用组血浆中因子VEGF及IL-8浓度降低.结论 YSV能显著抑制人肝癌SMMC-7721裸鼠移植瘤生长,通过抑制肿瘤组织中促血管生成因子的表达来发挥抗肿瘤活性.     

GRP78和GRP94表达与结直肠癌的侵袭及预后相关

目的 探讨结直肠癌组织中GRP78、GRP94的表达与患者临床病理参数及预后的关系.方法 应用免疫组织化学技术分析124例结直肠癌组织中GRP78、GRP94表达水平.免疫印迹法检测其蛋白表达水平验证免疫组化结果.将免疫组化检测结果与患者的临床病理特征及生存时间进行单因素及多因素回归统计学分析.结果 GRP78、GRP94阳性表达均定位于细胞质及少部分包膜,而临近的正常肠组织中少见阳性表达.免疫印迹法检测蛋白表达水平与免疫组化结果一致.单因素分析GRP78和GRP94蛋白表达在分化程度、分期、淋巴结转移及远处转移状态间差异有统计学意义.生存分析显示GRP78、GRP94蛋白高表达患者生存时间较低表达患者明显缩短,差异有统计学意义(P =0.025和P=0.010).多因素分析显示GRP94表达是结直肠癌的独立预后指标.结论 结直肠癌组织中GRP78、GRP94过表达可能与结直肠癌的发生、生长、侵袭、转移及预后相关,可认为是肿瘤进展和预后的客观指标.     

Survivin在肝癌中的表达及其与肝癌增殖活性的相关分析

目的研究survivin在肝细胞癌(HCC)中的表达及其与肝癌增殖活性的相关意义.方法应用免疫组织细胞化学技术检测31例肝细胞癌组织,8例肝硬化组织和4例正常肝组织中survivin及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平.结果正常肝组织和肝硬化组织中均无survivin表达,31例肝细胞癌组织中19例(61.3%)survivin表达阳性.与正常肝组织和肝硬化组织相比,survivin在肝癌组织中表达率显著升高(P＜0.001).低分化肝癌其survivin表达阳性率显著高于高分化肝癌.此外,survivin表达与肝癌增殖活性显著相关,survivin阳性肿瘤具有较高的增殖活性,其PCNA指数30.5%明显高于survivin表达阴性肿瘤15.8%(P＜0.05).结论 survivin在肝癌中呈现高表达,这种特异性表达与肝癌的低分化性和高增殖有关,可能涉及到肝癌的发生和进展.survivin基因有望成为肝癌诊断和治疗的新靶点.     

肝细胞癌中HBx的表达及其与肿瘤病理分级的关系

目的 检测乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)在肝细胞癌中的表达并探讨其与肝癌病理分级的关系.方法 用免疫组织化学法检测41例肝癌患者肿瘤组织中HBx蛋白的表达,与临床资料进行相关分析,并应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、PCR及Western blot法检测肝癌患者肿瘤组织及血清中HBx的表达.结果 肝癌组织中HBx的总体阳性检出率为27/41(65.85%),HBx+与HBx-者肿瘤组织低分化比例分别为11/27(40.74%)及2/14(14.29%),差异有统计学意义(P<0.01),且肿瘤组织低分化比例随HBx阳性表达程度的增加而增加,HBx强阳性表达者肿瘤组织低分化比例高达4/6(66.67%);RT-PCR对肿瘤组织HBx mRNA的检出率为10/16(62.50%),PCR对血清中HBx拷贝的检出率为1/7(14.29%),Western blot对血清中HBx蛋白的检出率则为6/7(85.71%).结论 肝癌肿瘤组织中HBx的表达与肿瘤的病理分级呈负相关,肿瘤组织低分化比例随HBx阳性表达程度的增加而增加.     

肝细胞癌中HBx的表达及其与肿瘤病理分级的关系

目的 检测乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)在肝细胞癌中的表达并探讨其与肝癌病理分级的关系.方法 用免疫组织化学法检测41例肝癌患者肿瘤组织中HBx蛋白的表达,与临床资料进行相关分析,并应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、PCR及Western blot法检测肝癌患者肿瘤组织及血清中HBx的表达.结果 肝癌组织中HBx的总体阳性检出率为27/41(65.85%),HBx+与HBx-者肿瘤组织低分化比例分别为11/27(40.74%)及2/14(14.29%),差异有统计学意义(P<0.01),且肿瘤组织低分化比例随HBx阳性表达程度的增加而增加,HBx强阳性表达者肿瘤组织低分化比例高达4/6(66.67%);RT-PCR对肿瘤组织HBx mRNA的检出率为10/16(62.50%),PCR对血清中HBx拷贝的检出率为1/7(14.29%),Western blot对血清中HBx蛋白的检出率则为6/7(85.71%).结论 肝癌肿瘤组织中HBx的表达与肿瘤的病理分级呈负相关,肿瘤组织低分化比例随HBx阳性表达程度的增加而增加.     

肝细胞癌中HBx的表达及其与肿瘤病理分级的关系

目的 检测乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)在肝细胞癌中的表达并探讨其与肝癌病理分级的关系.方法 用免疫组织化学法检测41例肝癌患者肿瘤组织中HBx蛋白的表达,与临床资料进行相关分析,并应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、PCR及Western blot法检测肝癌患者肿瘤组织及血清中HBx的表达.结果 肝癌组织中HBx的总体阳性检出率为27/41(65.85%),HBx+与HBx-者肿瘤组织低分化比例分别为11/27(40.74%)及2/14(14.29%),差异有统计学意义(P<0.01),且肿瘤组织低分化比例随HBx阳性表达程度的增加而增加,HBx强阳性表达者肿瘤组织低分化比例高达4/6(66.67%);RT-PCR对肿瘤组织HBx mRNA的检出率为10/16(62.50%),PCR对血清中HBx拷贝的检出率为1/7(14.29%),Western blot对血清中HBx蛋白的检出率则为6/7(85.71%).结论 肝癌肿瘤组织中HBx的表达与肿瘤的病理分级呈负相关,肿瘤组织低分化比例随HBx阳性表达程度的增加而增加.     

肝细胞肝癌中RhoA基因表达及其与肿瘤临床病理特征的关系

目的 研究RhoA基因在肝细胞肝癌中的表达及其与肝癌临床病理特征的关系.方法 应用实时荧光定量RT-PCR与Western blot同步检测64例肝细胞肝癌及对应癌旁组织中RhoA mRNA及蛋白的表达情况,分析RhoA基因的表达与肝细胞肝癌临床病理参数的关系.结果 肿瘤组织中RhoA mRNA的表达量明显高于癌旁组织(t=3.445,P=0.0006),RhoA mRNA肝癌中的表达水平与肿瘤病理分期密切相关,在门静脉受侵犯(t=2.667,P=0.009)、有微卫星灶(t=2.172,P=0.038)和pTNM分期较晚(Ⅲ和Ⅳ期,t=2.551,P=0.013)的患者中明显升高.Western blot结果显示肿瘤组织中RhoA蛋白的水平明显高于癌旁组织(t=3.532,P=0.0002),RhoA蛋白的含量在门静脉受侵犯(t=2.087,P=0.042)、有微卫星灶(t=2.254,P=0.031)和pTNM分期较晚(Ⅲ和Ⅳ期;t=2.812,P=0.007)的患者中明显升高.RhoA在肝癌组织中高表达,其表达量与肿瘤侵袭能力、门静脉癌栓以及肿瘤分期相关.结论 RhoA基因可能成为一种新的肿瘤标志物,用于判断良恶性、肿瘤转移能力和估计预后.     

甲基化结合域蛋白1调控内质网分子伴侣GRP78对胰腺癌侵袭转移的影响

目的 观察甲基化结合域蛋白1( MBD1)和葡萄糖调节蛋白78( GRP78)在胰腺癌侵袭转移中的作用.方法 检测毒胡萝卜素(Tg)处理后的BxPC-3细胞GRP78的表达及细胞迁移能力的变化;对MBD1-siRNA转染后的BxPC-3细胞MBD1和GRP78的表达、细胞侵袭能力的变化进行分析;免疫组织化学法检测40例胰腺癌组织和15例正常胰腺组织中MBD1和GRP78的表达.结果 Tg处理BxPC-3细胞后,GRP78表达明显上升,细胞的迁移能力增加;MBD1 -siRNA转染Bxpc-3细胞后,MBD1和GRP78的表达同时下降,细胞侵袭力减弱;MBD1和GRP78在胰腺癌中的表达明显高于正常胰腺组织(P＜0.05),两者的阳性表达呈正相关(r =0.594,P＜O.01),并均与淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 GRP78可能受到MBD1的甲基化调控,并与胰腺癌的侵袭转移有关.