新型抗高血压药物盐酸埃他卡林对小动脉的选择性扩张作用及其药理学机制

目的 :研究新型抗高血压药物盐酸埃他卡林(Ipt)对小动脉的作用特性及其药理学机制。方法 :采用大鼠尾动脉螺旋状血管条和主动脉离体血管环两种组织 ,对比观察盐酸埃他卡林对大、小动脉扩张作用的药理学特性 ,并且利用膜片钳技术观察盐酸埃他卡林对大鼠尾动脉平滑肌细胞钾电流的影响。结果 :Ipt在 1 0 - 7～ 1 0 - 3 mol·L- 1范围内对KCl预致收缩的大鼠尾动脉血管条产生剂量依赖性舒张反应 ,且具有部分内皮依赖性 ,但对主动脉离体血管环无明显的舒张反应 ,该作用在高血压状态时显著增强 ,能被ATP敏感性钾通道特异性阻断剂格列苯脲阻断 ,并且对大鼠尾动脉平滑肌细胞的钾电流具有显著增强作用。结论 :盐酸埃他卡林具有选择性舒张小动脉作用 ,具有ATP敏感性钾通道开放剂的主要药理学特征     

两种不同结构类型的钾通道开放剂埃他卡林和吡那地尔联合用药降压作用的特征

目的 :观察两种不同种类的钾通道开放剂(potassiumchannelopeners ,KCOs)埃他卡林 (iptakal im ,Ipt)和吡那地尔 (pinacidil ,Pin)联用降压作用的特征。方法 :用无创性套尾法观察药物对清醒大鼠血压和心率的影响。结果 :Pin在 2 .0和 4 .0mg·kg-1剂量下 ,可剂量依赖性降低清醒大鼠的血压 ,加快其心率。Ipt在 2 .0 ,4 .0和 8.0mg·kg-1剂量下 ,可剂量依赖性降低血压 ,但不影响心率。Ipt(2 .0～8.0mg·kg-1)与Pin(4 .0mg·kg-1)合用时 ,其降压作用产生协同效应 ,但加快心率的作用与Pin相同。结论 :Ipt和Pin降压特点不同 ,二者联用的降压作用增强。     

盐酸埃他卡林对血管内皮细胞分泌功能的影响

目的 :研究新型抗高血压药物盐酸埃他卡林(Ipt)对血管内皮细胞分泌功能的影响。方法 :采用灌流消化法分离小牛主动脉内皮细胞 (BAEC) ,观察Ipt对BAEC分泌内皮素 1(ET 1)、前列环素 (PGI2 )和一氧化氮 (NO)的影响 ,同时观察Ipt对培养的BAEC胞浆游离Ca2 浓度的影响。结果 :在Ipt浓度为 10 -6mol·L-1及以上时 ,能够剂量依赖性地抑制培养的BAEC合成分泌ET 1,并在Ipt 10 -5mol·L-1及以上时促进NO的合成分泌 ,同时在Ipt浓度为10 -4mol·L-1及以上时 ,显著地增高BAEC胞浆游离Ca2 浓度。结论 :Ipt通过抑制内皮细胞合成分泌ET 1和促进NO的合成分泌 ,从而使ET和NO的平衡状态得到改善 ;尚能增加内皮细胞 [Ca2 ]i,有利于内皮细胞合成NO增加 ,从而增强内皮介导的舒血管效应。     

盐酸埃他卡林对缺氧诱导神经细胞凋亡的影响

目的 :探讨盐酸埃他卡林 (Ipt)对缺氧诱导的大鼠皮质神经细胞凋亡的影响。方法 :用电镜和流式细胞分析技术 ,检测原代培养的大鼠皮质神经细胞凋亡 ;应用免疫组化法 ,观察凋亡相关蛋白Bcl 2、Bax表达的改变。结果 :Ipt 10 μmol·L-1可减轻缺氧诱导的细胞染色质浓缩现象 ,逆转缺氧诱导的Bcl 2表达的下调 ,对Bax表达无显著影响 ;Ipt(0 .1～10 μmol·L-1)能剂量依赖性地降低凋亡细胞百分率 ,以 10 μmol·L-1浓度组效果最好 ,其作用可被ATP敏感性钾通道特异性阻断剂格列本脲 (Gli)所拮抗。结论 :Ipt对缺氧诱导的神经细胞凋亡有明显的抑制作用 ,其作用机制与ATP敏感性钾通道、Bcl 2表达相关。     

盐酸埃他卡林对麻醉正常血压犬血流动力学的影响

目的:评价盐酸埃他卡林(iptakalim hydrochloride,Ipt)对麻醉正常血压犬血流动力学的影响。方法:Ipt设置0.125,0.25,0.5mg·kg~(-1)三个剂量组,以吡那地尔(pinacidil,Pin)为阳性对照药,生理氯化钠溶液为阴性对照,观察麻醉正常血压犬血流动力学的变化。结果:Ipt0.125,0.25,0.5mg·kg~(-1)静脉注射可轻度降低血压,平均动脉压(MAP)分别下降0.80,1.07和1.33kPa,收缩压(SBP)与舒张压(DBP)下降幅度基本相当。与Pin相比,Ipt降压起效较慢,但作用平稳。Ipt0.125和0.25mg·kg~(-1)静注在降低血压的同时,对心率、心脏收缩、舒张和泵血功能无明显影响,对心脑血流量也无明显影响;对总外周阻力和心电图均无显著影响,但Ipt0.25和0.5mg·kg~(-1)对心脏泵血功能有轻微抑制作用。Pin加快心率且明显抑制心脏舒张功能。结论:Ipt对戊巴比妥钠麻醉正常血压狗有轻度的降低血压作用,对心脏泵血功能有轻微抑制作用。     

雌酚酮衍生物EA303对家兔离体血管平滑肌的舒张作用

目的研究雌酚酮衍生物EA303对家兔离体血管平滑肌的作用及其机制。方法家兔离体主动脉条为标本,观察EA303对去甲肾上腺素(NE)、高钾液(KCl)引起的主动脉条收缩的影响;对氯化钙(CaCl2)累积收缩量效曲线的影响,并与维拉帕米(Ver)累积收缩量效曲线相比较。通过对比钾通道阻断剂格列苯脲孵育前后EA303对KCl、NE的舒张量效曲线,研究EA303对ATP敏感性钾通道的作用。结果 EA303(3×10-5～10-3mol·L-1可以剂量依赖性地抑制NE、KCl引起的兔主动脉条的收缩;EA303(10-5mol·L-1)使CaCl2累积收缩量效曲线呈剂量依赖性右移,这与Ver(10-7mol·L-1)进行孵育的结果十分相似;加入格列苯脲(10-5mol·L-1)孵育,EA303舒张KCl、NE引起收缩的量效曲线发生与未孵育相比变化明显,格列苯脲抑制了EA303对KCl、NE引起的舒张作用。结论 EA303具有舒张家兔离体血管平滑肌的作用,其作用机制与阻断钾通道和以抑制内钙释放的方式阻断钙通道有关。     

雌酚酮衍生物EA303对家兔离体降结肠平滑肌的舒张作用研究

目的探讨雌酚酮衍生物（EA303）对家兔离体降结肠平滑肌的舒张作用及其机制。方法以家兔离体降结肠平滑肌为标本,观察EA303对家兔离体降结肠平滑肌的影响及可能的作用机制。结果EA303（10-5~10-4mol.L-1）可以剂量依赖性降低家兔离体降结肠平滑肌自发性收缩的张力和振幅 加入格列苯脲（10-5mol.L-1）孵育后,分别由BaCl2、KCl引起收缩的EA303的舒张量效曲线均发生明显变化,EA303的舒张作用被抑制 EA303（10-6、3×10-6mol.L-1）或维拉帕米（10-7mol.L-1）都使CaCl2累积收缩量效曲线呈剂量依赖性右移,最大反应降低且对ACh引起的第Ⅰ、第Ⅱ时相的收缩有明显影响。结论EA303舒张结肠平滑肌作用与ATP-敏感性钾通道开放有关 其舒张作用与维拉帕米相似,可阻断电压依赖性钙通道和抑制细胞内钙释放。     

川芎嗪注射液对离体豚鼠气管平滑肌作用机制探讨

目的 :研究川芎嗪对离体豚鼠气管平滑肌的作用及机制。方法 :取豚鼠气管制成气管片 ,用体外实验方法分别记录川芎嗪对豚鼠气管平滑肌的作用以及在钙通道和不同受体阻断剂孵育的条件下对豚鼠气管平滑肌的作用的变化。结果 :川芎嗪对离体豚鼠气管平滑肌有明显的舒张作用 (P <0 .0 1) ,呈剂量依赖性 (10 -5.5～ 10 -3 mol·L-1) ,其作用可以被普萘洛尔 (心得安 )所拮抗 ;其与硝苯地平有协同舒张气管平滑肌的作用 ;M受体阻滞剂阿托品对川芎嗪的作用无明显影响。结论 :川芎嗪对离体豚鼠气管平滑肌有明显的舒张作用 ,其机制很可能是通过作用于气管平滑肌上的 β2 受体 ,抑制细胞外Ca2 的内流而导致气管平滑肌的舒张。     

糖基化终产物对培养大鼠主动脉平滑肌细胞二酰基甘油的影响

目的:研究糖基化终产物(AGEP)对主动脉平滑肌细胞信号转导环节之一二酰基甘油(Dia)的影响和维生素E、氨基胍对Dia水平的干预作用.方法:采用放射酶标记、薄层层析、放射自显影技术测定细胞中Dia含量.结果:AGEP-BSA孵育的平滑肌细胞Dia水平在15 s和10min出现两个峰值,对照组和AGEP-BSA 50,11,200 mg·L~(-1)作用SMC的Dia水平分别为(220 ±15)pmol~(-1),(328±15)pmol·L~(-1),(662±33)pmol·L~(-1)和(940±43)pmol·L~(-1). Dia水平也随AGEP-BSA糖基化的程度和修饰BSA的糖浓度增加而增高.维生素E和氨基胍可明显减弱AGEP刺激平滑肌细胞Dia水平升高的效应.结论:AGEP-BSA能升高培养的大鼠血管平滑肌细胞中的Dia水平,维生素E和氨基胍能明显抑制这一效应.     

盐酸埃他卡林对动脉平滑肌ATP敏感性钾通道与其开放剂[3H]P1075特异性结合与解离动力学过程的影响

目的 :研究盐酸埃他卡林 (iptakalimhydrochlo ride ,Ipt)对 [3 H]P10 75与血管平滑肌ATP敏感性钾通道 (ATP sensitivepotassiumchannel ,KATP)结合和解离动力学过程的影响。方法 :KATP开放剂 [3 H]P10 75与大鼠去内皮主动脉平滑肌特异性结合与解离的动力学试验。结果 :Ipt预先与主动脉平滑肌孵育后 ,[3 H]10 75的结合速率减慢 ,结合幅度降低 ,平衡结合常数KA 降为对照组的 2 8.3% (P <0 .0 1) ;结合[3 H]P10 75的解离速率增快 ,解离幅度增加 ,平衡解离常数KD 则较对照组增加 3.5 3倍 (P <0 .0 1)。在相同条件下 ,KATP 开放剂吡那地尔 (pinacidil ,Pin)的作用与之相似 ,KA值降为对照组的 35 % (P <0 .0 1) ,KD 值较对照组增加 2 .88倍 (P <0 .0 1)。结论 :Ipt与KATP开放剂Pin的作用相似 ,两者均可变构调节KATP,抑制其与开放剂的结合过程 ,促进其解离过程。     

血管平滑肌ATP敏感性钾通道研究进展

ATP敏感性钾通道 (KATP)广泛存在于各类细胞和组织中 ,是药物作用的重要靶点。KATP是由内向整流钾通道Kir和磺酰脲类受体SUR亚基组成。与血管舒缩特性密切相关的是SUR2B/Kir6 1,电导值小 ,对ATP的抑制作用不敏感 ,需要有NDP才能被开放 ,故这类血管平滑肌KATP又被称为NDP依赖性钾通道。内源性和外源性的很多因子引起的血管舒缩反应与血管平滑肌上的KATP有关 ,此信号途径与PKA、PKC等磷酸化激酶有密切联系。不同血管对钾通道开放剂(potassiumchannelopeners,KCO)的反应有差异 ,KCO对血管的选择性作用机制仍不明确。本文就血管平滑肌KATP的分子结构、电生理、药理学特征、信号转导途径和KCO对血管的选择性作用进行综述     

埃他卡林对脂多糖、油酸、二甘醇等所致肾脏损伤的影响

目的观察埃他卡林对脂多糖、油酸和二甘醇等不同因素所致肾脏损伤的影响。方法采用大鼠股静脉注射2%醋酸铅致敏后注射脂多糖1μg（1ml/kg）,4h造成内毒素休克肾损伤模型,大鼠左肾动脉注射油酸0.15ml/kg,24h造成油酸所致肾损伤模型,分别在造模前3d及1h,以埃他卡林1,3,9mg/（kg.d）灌胃给药;小鼠腹腔注射二甘醇10g/kg后,立即以埃他卡林1,3,9mg/（kg.d）灌胃给药6d,第7天造模成功。3种模型建立后,观察血清肌酐、尿素氮水平和肾脏形态学变化,评价肾脏功能。结果（1）内毒素性休克大鼠血清肌酐和尿素氮水平显著升高,组织病理显示有肾小球微血栓、肾小管上皮肿胀和管腔内蛋白管型形成。埃他卡林9mg/kg组能明显降低血清尿素氮和肌酐水平,改善上述病理变化。（2）左肾动脉注射油酸大鼠血清肌酐和尿素氮水平显著升高,组织病理显示肾小球内皮细胞坏死,球囊腔减小,肾小管间质充血且管腔内有蛋白管型形成。埃他卡林对油酸所致大鼠肾脏损伤无显著性改善作用。（3）二甘醇肾损伤小鼠血清肌酐水平显著性升高,埃他卡林9mg/kg组血清肌酐水平恢复至正常。结论埃他卡林不适合于脂多糖、油酸所致肾脏损伤的防治,埃他卡林可否用于二甘醇所致肾损伤的治疗值得进一步研究。     

Iptkalim inhibits cocaine challenge—induced enhancement of dopamine levels in nucleus accumbens and striatum of rats by up—regulating Kir6.1 and Kir6.2 mRNA expression

目的:研究钾通道开放剂埃他卡林对急慢性可卡因应用引起的伏隔核、纹状体和额叶皮层的多巴胺和谷氨酸水平变化的影响及其机制。方法:采用高效液相色谱与电化学检测、荧光检测联用的方法测定各脑区谷氨酸和多巴胺的含量;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)研究ATP敏感性钾通道亚单位Kir6.1、Kir6.2、SUR1和SUR2 mRNA表达的变化。结果:埃他卡林不影响急性可卡因应用引起纹状体和伏隔核中多巴胺和谷氨酸水平的增高(P>0.05),能够逆转激发剂量可卡因诱导的慢性成瘾大鼠纹状体和伏隔核的多巴胺含量增高(P<0.05),对激发后皮层和伏隔核谷氨酸水平增高有降低趋势但差异无显著性(P>0.05)。激发剂量可卡因能提高可卡因预处理组和埃他卡林预处理组纹状体和伏隔核的Kir6.1和Kir6.2 mRNA表达以及皮层的Kir6.2 mRNA表达,而且IPT预处理组的升高幅度显著高显著高于可卡因慢性处 理组。结论:埃他卡林通过上调Kir6.1和Kir6.2 mRNA表达抑制可卡因激发引起的纹状体和伏隔核的多巴胺水平的增高。     

吡那地尔对低氧低糖诱导神经细胞凋亡的抑制作用

目的　探讨ATP敏感性钾通道(K_ATP)开放剂吡那地尔(Pin)对低氧低糖再复氧诱导的大鼠皮质神经细胞凋亡的影响。方法　用电镜和流式细胞分析技术,检测原代培养的大鼠皮质神经细胞凋亡。结果　低氧低糖再复氧可诱导大鼠皮质神经细胞凋亡。Pin (10^-5,10^-6,10^-7mol·L^-1 ) 3个剂量组均能降低凋亡细胞百分率,以10^-5mol·L^-1 组效果最好。上述作用可被K_ATP特异性阻断剂格列苯脲(Gli)所拮抗。结论　Pin对低氧低糖再复氧诱导的大鼠皮质神经细胞凋亡有明显的抑制作用,提示KATP通道在调控细胞凋亡的过程中可能起着重要的作用。     

吡那地尔对低氧低糖诱导神经细胞凋亡的抑制作用

目的　探讨ATP敏感性钾通道 (KATP)开放剂吡那地尔 (Pin)对低氧低糖再复氧诱导的大鼠皮质神经细胞凋亡的影响。方法　用电镜和流式细胞分析技术 ,检测原代培养的大鼠皮质神经细胞凋亡。结果　低氧低糖再复氧可诱导大鼠皮质神经细胞凋亡。Pin ( 10 - 5,10 - 6 ,10 - 7mol·L- 1 ) 3个剂量组均能降低凋亡细胞百分率 ,以 10 - 5mol·L- 1 组效果最好。上述作用可被KATP特异性阻断剂格列苯脲 (Gli)所拮抗。结论　Pin对低氧低糖再复氧诱导的大鼠皮质神经细胞凋亡有明显的抑制作用 ,提示KATP通道在调控细胞凋亡的过程中可能起着重要的作用。     

Vasorelaxing effects of flavonoids: investigation on the possible involvement of potassium channels

A flavonoid-rich diet has been associated with a lower incidence of cardiovascular diseases, probably because of the antioxidant and vasoactive properties of flavonoids. Indeed, many flavonoids show vasorelaxing properties, due to different and often not yet completely clarified mechanisms of action. Among them, the activation of vascular potassium channels has been indicated as a possible pathway, accounting, at least in part, for the vasodilatory action of some flavonoid derivatives, such as apigenin and dioclein. Therefore, this work aims at evaluating, on in vitro isolated rat aortic rings, the endothelium-independent vasorelaxing effects of a number of flavonoid derivatives, to identify a possible activation of calcium-activated and/or ATP-sensitive potassium channels and to indicate some possible structure–activity relationships. Among the several flavonoids submitted to the pharmacological assay, only baicalein and quercetagetin were almost completely ineffective, while quercetin, hesperidin, quercitrin and rhoifolin exhibited only a partial vasorelaxing effect. On the contrary, acacetin, apigenin, chrysin, hesperetin, luteolin, pinocembrin, 4-hydroxyflavanone, 5-hydroxyflavone, 5-methoxyflavone, 6-hydroxyflavanone and 7-hydroxyflavone, belonging to the chemical classes of flavones and flavanones, showed full vasorelaxing effects. The vasodilatory activity of hesperetin, luteolin, 5-hydroxyflavone and 7-hydroxyflavone were antagonised by tetraethylammonium chloride, indicating the possible involvement of calcium-activated potassium channels. Moreover, iberiotoxin clearly antagonised the effects of 5-hydroxyflavone, indicating the probable importance of a structural requirement (the hydroxy group in position 5) for a possible interaction with large-conductance, calcium-activated potassium channels. Finally, glibenclamide inhibited the vasorelaxing action of luteolin and 5-hydroxyflavone, suggesting that ATP-sensitive potassium channels may also be involved in their mechanism of action.     

线粒体KATP开放剂二氮嗪促进星形胶质细胞摄取谷氨酸

目的研究线粒体ATP敏感性钾通道(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel, mitoKATP)开放剂二氮嗪(diazoxide)对星形胶质细胞摄取谷氨酸(glutamate)的影响.方法取新生大鼠脑星形胶质细胞作原代培养,用液体闪烁计数仪测定[3H]-D,L-谷氨酸的摄入量判断细胞的谷氨酸摄取功能.结果二氮嗪呈浓度依赖性地促进星形胶质细胞摄取谷氨酸,且能抑制1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)对星形胶质细胞摄取谷氨酸的损伤作用;浓度在100μmol·L-1以上时,二氮嗪可完全逆转MPP+对星形胶质细胞摄取谷氨酸的抑制作用;二氮嗪的上述作用可被选择性mito KATP 阻断剂5-羟基癸酸 (5-hydroxydecanoate,5-HD)拮抗.结论二氮嗪通过开放mitoKATP增强星形胶质细胞谷氨酸转运体(glutamate transporters, GluTs)的功能.     

ATP敏感性钾通道开放剂埃他卡林对高原脱习服的影响

目的：观察长期口服埃他卡林对高原脱习服的影响。方法：该临床研究采用随机双盲安慰剂平行对照试验方法,随机分为埃他卡林试验组和安慰剂对照组,两组受试者分别为39例和17例。其中,受试者分别口服埃他卡林片（5mg／片,1次／日）或安慰剂（1片／日）,连续服用药物7个月,下山到3700m停留2d并停止服药,再返回到海拔1400m的平原地区,自返回平原的第2、4、6天,进行高原脱习服症状调查,随访受试者的高原脱习服症状并进行症状评分。结果：长期驻扎在5200～5380m高海拔地区的受试者,返回平原后第2、4、6天,分别有82．4％、52．9％、23．5％的人员产生显著的高原脱习服症状,长期口服埃他卡林,高原脱习服发生率分别为43．6％、30．8％、38．5％;安慰剂对照组返回平原后脱习服反应程度的评分,在第2、4、6天分别为（6．0±1．9）、（4．6土1．0）、（3．8±1．5）分,埃他卡林治疗组分别为（4．4±2．4）、（3．3±1．8）、（4．0±1．5）分,两组比较,在返回低海拔第2、4天,高原脱习服反应的发病率及发病程度均显著减少,第6天的数据两组之间差别无统计学意义。结论：高原地区长期口服埃他卡林可显著减轻高原脱习服的发病程度,降低高原脱习服的发生率,预防高原脱习服。     

Nicorandil ameliorates ischaemia-reperfusion injury in the rat kidney

BACKGROUND AND PURPOSE

Nicorandil, an ATP-sensitive potassium (K_ATP) channel opener and nitric oxide donor, is used in the treatment of angina and acute heart failure. Here we investigated the effects of two K_ATP channel openers, nicorandil and cromakalim on ischaemia reperfusion (I-R) injury in the kidney.

EXPERIMENTAL APPROACH

Right nephrectomy was performed in 8-week-old male Sprague-Dawley rats and they were then divided into six groups: control group; I-R, including 30 min of left renal ischaemia followed by 24 h of reperfusion; I-R groups plus nicorandil 3 or 10 mg·kg⁻¹ i.p.; and I-R groups plus cromakalim 100 or 300 µg·kg⁻¹ i.p. After reperfusion, renal function was estimated by serum creatinine (SCr), urinary albumin : creatinine ratio (ACR) and urinary β2-microglobulin (β2-MG). Levels of K_ATP channel subtypes were investigated by Western blot. Kidney sections were stained for 4-hydroxy-2-nonenal and 8-hydroxy-2′-deoxyguanosine.

KEY RESULTS

Renal I-R induced significant increases in SCr, ACR and β2-MG levels compared with the control animals. Treatment with K_ATP channel openers reduced urinary β2-MG levels, raised by I-R. Both K_IR6.1 and K_IR6.2 channels were expressed. Expression of K_IR6.2 channels in the I-R group was lower than in the control group, which was restored to normal by treatment with K_ATP channel openers. Histologically, severe acute tubular damage was observed in the I-R kidney and this damage was ameliorated by K_ATP channel openers, dose-dependently.

CONCLUSIONS AND IMPLICATIONS

ATP-sensitive potassium channel openers protected against proximal tubule damage after I-R injury. Nicorandil could represent a powerful additional component in the treatment of patients undergoing partial nephrectomy or renal transplantation.     

心房颤动患者心房组织ATP敏感性钾通道基因转录表达的研究

目的 探讨心房颤动患者心房组织ATP敏感性钾通道(Kir6.2)基因转录的变化。方法 35例风湿性心瓣膜病患者,心外科手术时被取右心耳组织。通过逆转录-聚合酶链反应,以三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)为内参照,测量心耳组织Kir6.2通道的mRNA表达量。结果 窦性心律组和阵发性房颤组心房组织Kit6.2的mRNA水平均显著高于慢性房颤组(P<0.05);而阵发性房颤组心房组织Kir6.2的mRNA又显著高于窦性心律组(P<0.05)。结论 Kir6.2通道转录水平的改变可能是相应ATP敏感性钾通道产生的内向整流钾电流(IKATP)重构的分子基础,Kir6.2基因转录改变可能是促进房颤发生和持续的因素之一。