离子交换树脂分离纯化谷胱甘肽的研究

研究001×7阳离子交换树脂分离纯化谷胱甘肽的工艺条件,考察了001×7阳离子交换树脂对GSH的静态吸附量,以及洗脱时,洗脱液,洗脱浓度,洗脱流速等对分离纯化产品GSH的影响。确定其工艺流程;最适上柱pH为2．5,洗脱液NaC1溶液最适洗脱浓度为1．2％,洗脱流速为2．0ml／min;收集洗脱液,用紫外分光光度法检测其GSH的浓度,回收率为75％,纯度相对提高60％。     

离子交换树脂提取发酵液中聚-ε-赖氨酸的研究

对离子交换树脂提取分离发酵液中聚-ε-赖氨酸(ε-PL)的工艺条件进行研究,确立的最佳提取条件为使用弱酸性阳离子交换树脂D152,上柱液pH8.5,以盐酸作为洗脱剂,洗脱剂浓度为0.1mol/L,洗脱速度为1.0mL/min。在优化条件下,ε-PL平均提取得率为82%,产品纯度达到了80%以上。     

阳离子交换树脂分离纤维低聚糖的研究

首次采用工业用001×7阳离子交换树脂对纤维低聚糖的分离进行了研究，探讨了进样浓度、树脂柱长度和洗脱荆对分离效果的影响。研究结果表明，低的进样浓度不能提高分离效果；短的树脂柱只能把葡萄糖从混合纤维低聚糖中分离出来，而长的树脂柱能分离出葡萄糖和纤维二糖；20％乙醇作洗脱剂时。纤维三糖也能被分离出来；纤维四糖、纤维五糖和纤维六糖总是同时被洗脱出来。为进一步工业化分离纯化纤维低聚糖奠定了理论基础。     

离子交换法纯化氨基葡萄糖

以重组大肠杆菌的发酵液为原料,用离子交换法分离提取发酵液中的氨基葡萄糖。研究了阳离子交换树脂001×8吸附氨基葡萄糖的影响因素和动力学性质。确定最优工艺条件为:缓冲液pH=2.2,温度30℃,洗脱液0.7mol/L的硫酸铵溶液。层析柱Ф1 cm×10 cm,填料6 mL,进样量192 mL,进样流速3.19 BV/h(即每小时流过样品的体积为填充树脂床容积的3.19倍),洗脱流速3.8 BV/h,在此工艺条件下,吸附率达到95%,洗脱率达到98.35%。     

大孔吸附树脂分离纯化桂花总黄酮工艺条件研究

目的:研究大孔吸附树脂分离纯化桂花总黄酮工艺条件,为桂花总黄酮的工业化生产提供实验依据。方法:以贵州产桂花为原料,以桂花总黄酮吸附量及回收率等为考察指标,选用AB-8型大孔吸附树脂对桂花总黄酮进行分离纯化,分别采用静态试验、动态试验等考察AB-8型大孔树脂对桂花总黄酮的分离纯化最佳工艺条件及效果。结果:pH值、洗脱剂、温度、上柱液浓度、径高比、流速、总黄酮与树脂质量比等工艺条件对桂花总黄酮的吸附洗脱量、回收率等影响甚大。结论:AB-8型大孔树脂分离纯化桂花总黄酮最佳工艺条件为:上柱液pH4～ 5;洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量为4倍树脂体积,流速3～ 4 mL/min;上柱总黄酮质量与树脂质量比为1:9.4,上柱液总黄酮浓度为17.86 mg/mL,流速2～ 3 mL/min;冲洗杂质用水体积2～ 3 BV,流速2～ 3mL/min;径高比1.5/21.6;温度升高,吸附量下降但洗脱率加大。     

野菊花总黄酮的提取与纯化

以野菊花总黄酮含量及回收率等为考察指标,研究野菊花总黄酮提取工艺及大孔吸附树脂分离纯化野菊花总黄酮工艺.结果表明:采取乙醇浸提L9(34)正交试验方法,野菊花总黄酮最佳提取工艺条件为乙醇浓度60%、提取温度80℃、提取时间3 h、提取次数3次.AB-8型大孔吸附树脂对野菊花总黄酮静态饱和吸附量为114.65 mg/g(干树脂),洗脱率94.9%,动态饱和吸附量为94.5 mg/g(干树脂1,总黄酮回收率在92.6%、纯度在90%以上,是实验树脂中分离纯化野菊花总黄酮的最佳大孔吸附树脂.分离纯化野菊花总黄酮最佳工艺条件为AB-8型大孔吸附树脂,洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量为3倍树脂体积,流速3～4 mL/min,上柱总黄酮量与树脂比为1:10.5,上柱液总黄酮浓度为19.8 mg/mL,流速2～3 mL/min,上柱液pH值4～5,冲洗杂质用水体积2～3 BV.     

SP850树脂分离萝卜硫素

为了提高萝卜硫素的纯度,研究了大孔树脂分离纯化萝卜硫素工艺。通过静态吸附和静态洗脱实验,从8种不同性质的树脂中筛选出适合分离萝卜硫素SP850树脂,并对其动态吸附和动态洗脱条件进行了研究。结果表明:SP850树脂处理约20 BV(1BV=10mL)萝卜硫素溶液时才开始泄漏,并且动态吸附曲线可以用Bo-hart-Adams数学模型描述。SP850树脂纯化萝卜硫素的适宜的工艺条件为:上柱液体积为20 BV,上柱流速为5BV/h,洗脱液乙醇的体积分数为50%,洗脱液体积为6BV,洗脱速度为3 BV/h,在此条件下,吸附量为32.83 mg/mL树脂,洗脱率高达91.84%,萝卜硫素产品纯度可达88.7%。     

大孔树脂法纯化辣椒碱的工艺

研究大孔树脂分离纯化辣椒碱的工艺.结果表明:D201阴离子交换树脂对辣椒碱的分离效果最好.确定D201阴离子交换树脂分离纯化辣椒碱的最佳工艺条件:上柱液浓度为0.703 mg/mL,洗脱剂pH值为2.0的70%乙醇溶液,动态吸附流速为1.5 BV/h,上柱量为3 BY,洗脱流速为2 BV/h.D201阴离子交换树脂对辣椒碱的交换稳定性好,该树脂在使用3次后需进行再生.     

高纯度低聚半乳糖单一组分的制备研究

采用聚丙烯酰胺凝胶Bio-Gel P-2柱对低聚半乳糖混合物进行分离纯化,考察了柱温、洗脱流速和进料量对分离的影响。结果表明,采用1.6cm×120cm凝胶柱,脱气蒸馏水为洗脱剂,最佳操作条件为:柱温度50℃,洗脱流速15～20mL/h,进料量3mL。此条件下,可以制备纯度85%左右的三糖、四糖和五糖粗品,将一次分离产品浓缩后二次分离,得到纯度98%以上的三糖、四糖和五糖单一组分,收率分别为95.5%、74.4%和96.7%,达到了标准品的纯度要求。     

玉米胚谷胱甘肽分离纯化工艺的研究

采用732阳离子交换树脂对玉米胚提取液中谷胱甘肽进行分离纯化,确定了分离纯化的最佳条件为:谷胱甘肽与树脂体积比4:1、吸附时间40min、流速1 mL/min、洗脱剂NaOH浓度0.2mol/L、洗脱剂与树脂体积比4:1、解析时间105min,谷胱甘肽回收率83.33%.     

半制备高压液相色谱法制备罗汉果苷Ⅴ标准品

目的：通过半制备高压液相色谱分离技术,建立一种快速、稳定、高效制备高纯度罗汉果苷Ⅴ标准品的方法。方法：先采用树脂吸附脱色技术进行前处理,再通过半制备高压液相色谱分离制备罗汉果苷Ⅴ,色谱条件为Eclipse XDB-C18 色谱柱(9.4mm × 250mm,5μm) ,流动相为乙腈- 水,采用梯度洗脱,流速4mL/min,检测波长210nm,进样量36mg,柱温38℃。结果：分离得到的罗汉果苷Ⅴ的纯度为99.1%。结论：本方法具有操作简单、快速、稳定和产品纯度高等优点,可应用于实际样品的检测。     

大孔树脂分离啤酒废酵母中谷胱甘肽的研究

对大孔树脂D001分离啤酒废酵母中的还原型谷胱甘肽进行了研究.其最佳试验条件为:pH 4.5的0.02 mol/L磷酸缓冲液平衡,pH 7.5的0.02 mol/L磷酸缓冲液洗脱,洗脱流速为2.0 mL/min.在最佳分离条件下,大孔树脂D001分离GSH的平均收得率为20.03%,产品中GSH的含量为28.47%,产品颜色为白色.     

膜分离与大孔树脂联用技术纯化茶皂素

采用膜分离与大孔树脂联用技术纯化茶皂素。粗茶皂素经陶瓷膜和360Da纳滤膜初步分离浓缩,得率为62.1%,纯度为79%;根据静态和动态吸附筛选试验,选择大孔树脂AmberliteXAD7HP对茶皂素进一步纯化,通过单因素试验,确定最佳工艺参数为:上样流速0.5 mL/min、上样液浓度30mg/mL;以10%,40%,70%的乙醇溶液进行梯度洗脱,洗脱剂流速1mL/min,洗脱液体积为3BV,该条件下纯化,茶皂素最终得率为55.3%,纯度可达95%。该试验表明膜分离与大孔树脂联用技术可得到高纯度的茶皂素,是一种可工业化推广的方法。     

二维多通道色谱法分离松多酚的条件优化

以东北红松松塔为原料,采用本课题组设计的二维多通道色谱分离设备,确定其分离松多酚的最佳工艺条件。首先通过静态吸附解吸实验,筛选二维多通道色谱分离设备的固相介质和洗脱剂;然后进行单因素动态试验,考察影响二维多通道色谱设备分离效果的4 个因素：上样量、上样质量浓度、洗脱速率和色谱柱数量。结果表明：X-5大孔树脂为二维多通道色谱设备分离松多酚的最佳固相介质,0.5%甲酸-60%乙醇溶液为其最佳洗脱剂,其对松多酚的最大吸附量为 38.74 mg/g,解吸率达72.08%;二维多通道色谱设备分离松多酚的最佳工艺条件：上样量256 mg、上样质量浓度2.0 mg/mL、洗脱速率（200±20）mL/min和色谱柱联用数量4 根。在此条件下,松多酚纯度由2.37%提高到了23.257%,产率达到46.81%。     

大孔吸附树脂分离纯化茶叶籽饼粕中的茶皂素研究

目的对采用大孔吸附树脂法分离纯化茶叶籽饼粕中茶皂素的工艺进行优化,为进一步开发利用茶叶籽资源提供依据。方法以茶皂素吸附率与解吸率为指标,通过静态吸附与解吸实验筛选最优树脂。通过单因素实验、正交实验及验证性实验,优化最优树脂动态吸附与解吸茶皂素的工艺参数。结果D101树脂的静态吸附量与解吸率分别为142.974 mg/g和98.02%,为分离纯化料液中茶皂素的最优树脂;当主要考虑茶皂素得率时,其最优动态吸附与解吸工艺参数为上样质量浓度10 mg/m L、上样流速3 BV/h、上样体积6 BV、乙醇洗脱体积浓度80%、洗脱流速3 BV/h、洗脱剂体积5 BV,在该工艺参数条件下,茶皂素得率为74.25%,纯度为84.30%;当主要考虑茶皂素纯度时,最优动态吸附与解吸工艺参数为上样质量浓度10 mg/m L、上样流速4 BV/h、上样体积7 BV、乙醇洗脱体积浓度70%、洗脱流速3 BV/h、洗脱体积5 BV,在该工艺参数条件下,茶皂素纯度为97.7%,得率为72.04%。结论 D101大孔吸附树脂是一种可应用于茶叶籽饼粕中茶皂素分离纯化的较好树脂。     

马氏珍珠贝中核苷类成分的分离富集工艺研究

目的:对马氏珍珠贝中核苷类成分进行分离富集工艺研究,以期得到纯度较高的天然核苷。方法:以马氏珍珠贝水提醇沉液中的核苷类成分为指标,采用HPLC测定含量,对大孔树脂型号、上样工艺、洗脱工艺进行考察,采用UV对纯化部位的核苷类成分进行测定。结果:根据HPLC-UV所得结果,选定大孔树脂型号为SP207、上样浓度为2.19 mg/mL、上样pH为4.6、上样流速为2 BV/h,核苷最佳上样体积为25 mL,洗脱时水洗量为2 BV,洗脱溶剂选择15%乙醇,洗脱流速选择3 BV/h,洗脱体积选择为3 BV,径高比选择1:7。结论:经SP207纯化后,总核苷纯度为58.19%,表明该方法适用于分离富集马氏珍珠贝中的核苷类成分。     

基于响应面优化青藏高原狭果茶藨子游离氨基酸纯化工艺

为建立狭果茶藨子鲜果氨基酸纯化工艺,提高青藏高原狭果茶藨子天然资源的利用价值。本研究通过静态吸附-解吸动力学试验对SA-2、201*7、001*7、D61、D152共5种不同类型的离子交换树脂进行筛选,并结合动态吸附-解吸动力学单因素试验和响应面设计优化狭果茶藨子鲜果氨基酸纯化工艺。结果表明,001*7离子交换树脂对狭果茶藨子鲜果氨基酸有较好的吸附和解吸效果,吸附率达(70.73±0.47)%,解吸率达(91.29±2.60)%。最优纯化条件为:狭果茶藨子氨基酸质量浓度0.025g/mL,上样液流速0.9mL/min,上样液pH4.66,氨水洗脱液体积分数1.54%,洗脱流速1.50mL/min,洗脱液体积61.67mL,此条件下狭果茶藨子氨基酸纯度从23.26%提高到77.50%,提高了54.24%。该研究可为青藏高原狭果茶藨子氨基酸成分的纯化提供技术支持。     

基于响应面优化青藏高原狭果茶藨子游离氨基酸纯化工艺

为建立狭果茶藨子鲜果氨基酸纯化工艺,提高青藏高原狭果茶藨子天然资源的利用价值。本研究通过静态吸附-解吸动力学试验对SA-2、201*7、001*7、D61、D152共5种不同类型的离子交换树脂进行筛选,并结合动态吸附-解吸动力学单因素试验和响应面设计优化狭果茶藨子鲜果氨基酸纯化工艺。结果表明,001*7离子交换树脂对狭果茶藨子鲜果氨基酸有较好的吸附和解吸效果,吸附率达(70.73±0.47)%,解吸率达(91.29±2.60)%。最优纯化条件为:狭果茶藨子氨基酸质量浓度0.025g/mL,上样液流速0.9mL/min,上样液pH4.66,氨水洗脱液体积分数1.54%,洗脱流速1.50mL/min,洗脱液体积61.67mL,此条件下狭果茶藨子氨基酸纯度从23.26%提高到77.50%,提高了54.24%。该研究可为青藏高原狭果茶藨子氨基酸成分的纯化提供技术支持。     

半制备型高效液相色谱法分离刺葡萄花色苷单体

经大孔吸附树脂HP-20纯化刺葡萄花色苷的粗提物后,以半制备型高效液相色谱法分离得到高纯度的刺葡萄花色苷单体。以XCharge C18柱（20 mm×250 mm,10 μm）制备柱,考察梯度洗脱条件、流动相流速、进样量对刺葡萄花色苷分离的影响,确定了最佳制备条件为甲醇-3%甲酸溶液流动相梯度洗脱、流速15 mL/min、进样量1.2 mL,实现了2 种主要花色苷单体的分离及制备。经超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱鉴定,2 种花色苷单体分别是锦葵素-3,5-O-双葡萄糖苷和锦葵素-3,5-O-双葡萄糖苷-香豆酰,产品纯度分别达到了99.54%和98.28%。方法具有简单易行、经济快速、易于放大等特点,适用于刺葡萄花色苷标准品的大规模制备。