锌对染铅大鼠海马胆囊收缩素阳性神经元的保护作用

目的　探讨锌对染铅大鼠海马胆囊收缩素 (CCK)神经元的保护作用及其与动物学习记忆功能变化的关系。方法　选用Wistar大鼠 36只 ,均分为对照组、染铅组和铅加锌组 ,后两组分别饮用6 .15mmol/L醋酸铅 ,铅加锌组同时补充 3.10mmol/L硫酸锌。利用反映学习记忆功能的Y迷宫法测试大鼠神经行为的改变 ;通过原子吸收法检测血清和海马铅含量 ;采用ABC免疫组化法结合图像分析法观测大鼠海马不同亚区CCK阳性神经元的变化。结果　染铅组大鼠血清和海马铅含量比铅锌组和对照组明显升高 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,铅锌组与对照组之间的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。染铅组大鼠学习记忆能力明显低于铅锌组和对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,而铅锌组和对照组的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。免疫组化结果显示 ,染铅组大鼠海马CA1区和CA3 区CCK阳性神经元数目及其反应产物的积分光密度明显少于铅锌组和对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,铅锌组与对照组各亚区的差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　铅可损伤大鼠学习记忆能力和影响海马各区CCK阳性神经元的数目。锌对铅引起的学习记忆损伤和海马CCK阳性神经元的变化有保护作用.     

锌对染铅大鼠海马一氧化氮合酶的保护作用

目的 :　探讨铅对海马长时程增强 (LTP)的影响与海马不同亚区一氧化氮合酶(NOS)变化的关系以及锌的拮抗作用。方法 :　采用反映学习记忆功能的 Y迷宫法测试大鼠神经行为的改变 ;用 NADPH-黄递酶 (NADPH- d)组化法和神经元型 NOS(n NOS)的免疫组化法研究大鼠海马不同亚区 NOS的活性及表达情况。结果 :　染铅组大鼠的学习记忆能力比铅锌组和对照组明显下降 (P<0 .0 5 ) ,铅锌组与对照组之间无差别 ;组化及免疫组化显示 :染铅组大鼠海马CA1区和齿状回的 NOS和 n NOS阳性神经元明显少于铅锌组和对照组 (P<0 .0 5 ) ,在 CA3区无差别 ,铅锌组与对照组各亚区均无差别。结论 :　铅可损伤大鼠学习记忆能力 ,鉴于 NOS参与LTP这一代表学习记忆的电生理指标的形成和维持 ,推测铅对学习记忆和海马 LTP的影响可能与染铅后海马各区 NOS的不同变化有关。锌对铅引起的学习记忆损伤和 NOS的影响有拮抗作用。     

铅对大鼠海马生长抑素神经元及其基因表达的影响

研究铅对大鼠海马不同亚区生长抑素 (SS)神经元及其基因表达的影响 ,Wistar大鼠采用饮水加2 0 0 0 μg ml醋酸铅 (PbAc)方法染毒 3个月后 ,用原子吸收分光光度法测定血液和海马铅的含量 ,并通过免疫组化和原位杂交技术检测海马SS和SSmRNA阳性神经元蛋白和基因表达。结果显示 ,染铅组大鼠血液和海马铅含量分别为 (1 30 0 5± 1 4 2 1 )mg L和 (1 0 1 1 62± 59 54)ng L ,较对照组的 (5 54± 0 76)mg L和 (1 81 98±47 2 7)ng L明显增高 ,差异有显著性 (P <0 0 5) ;染铅组大鼠海马CA1 区SS和SSmRNA阳性神经元数目分别为 (2 3 2 7± 4 58)和 (37 60± 9 69) ,较对照组的 (40 38± 7 61 )和 (53 48± 1 0 2 2 )明显减少 ,差异有非常显著性(P <0 0 1 ) ;染铅组大鼠海马CA3 区SS和SSmRNA阳性神经元数目为 (1 2 1 6± 3 40 )和 (1 6 1 8± 6 1 9) ,较对照组的 (1 7 68± 5 86)和 (2 5 93± 7 47)明显减少 ,差异有显著性 (P <0 0 5)。提示染铅后大鼠海马各区SS阳性神经元的蛋白、基因表达能力是降低的     

染铅早期大鼠海马各区NOS和nNOS阳性神经元的变化

为了解海马各区NOS和nNOS阳性神经元在铅影响学习记忆神经毒机理中的作用 ,采用NADPH 黄递酶组织化学和免疫组化ABC法 ,观察了大鼠腹腔注射 130mg kg醋酸铅溶液染毒 3、6、12h和 2 4h后海马CA1 和CA3 区NOS和nNOS的阳性神经元数目的变化。结果显示 ,与对照组相比 ,大鼠染铅 6h时 ,海马CA1和CA3 区nNOS阳性神经元数目明显增加 (P <0 0 5 ) ;染铅 12h时 ,海马CA1 和CA3 区NOS和nNOS的阳性神经元数目均明显减少 (P <0 0 1) ;而染铅 2 4h时 ,只有海马CA1 区NOS和nNOS阳性神经元数目仍明显减少(P <0 0 5 ) ;而CA3 区未见明显变化。本研究提示海马不同亚区NOS和nNOS阳性神经元的时程变化可能与铅的神经毒作用有关     

蛋氨酸胆碱对染铅大鼠海马神经元影响

目的 探讨蛋氨酸胆碱对刚断乳SD大鼠铅染毒后海马神经元形态及超微结构损伤的改善作用。方法 40只SPF级SD雄性大鼠随机分为5组:空白组、染铅组、蛋氨酸胆碱组、铅+低、高剂量蛋氨酸胆碱组,4和8周后分别麻醉动物,尾尖采血,原子吸收法测血铅含量;心脏灌注内固定,取海马做石蜡切片、硫堇染色观察海马神经元形态结构,戊二醛再固定,透射电镜观察超微结构。结果 铅染毒4、8周后,染铅组大鼠血铅含量分别升高至(274.85±19.51)、(294.32±11.00)μg/L,与染铅组比较,铅+高剂量蛋氨酸胆碱组血铅含量(187.25±16.02,192.68±14.17)μg/L明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);硫堇染色和透射电镜结果显示,4周时海马神经元无明显改变;8周时CA1区神经元有缺失、坏死,细胞数量由每3个视野(光镜400×)(306.00±43.05)个减少至(234.86±20.88)个,且超微结构发生改变,蛋氨酸胆碱干预后形态和结构均得到改善,且存在剂量-效应关系。结论 铅对海马神经元形态和结构损伤出现较晚,蛋氨酸胆碱可改善铅染毒大鼠海马神经元的形态和结构损伤。     

当归多糖对染铅大鼠海马一氧化氮合酶阳性神经细胞的保护作用

目的探讨当归多糖(angelica polysaccharides,APS)对染铅大鼠海马不同亚区一氧化氮合酶(NOS)阳性神经细胞变化的拮抗作用。方法采用反映学习记忆功能的Y-迷宫法测试大鼠神经行为的改变;用NADPH-黄递酶(NADPH-d)组织化学法研究大鼠海马不同亚区NOS的活性神经细胞变化。结果染铅组大鼠的学习记忆能力(58.37±12.49)比APS组(37.82±10.61)和对照组(34.26士9.53)明显降低(P<0.05),APS组与对照组之间无差异;组织化学实验结果显示,染铅组大鼠海马CA1区和齿状回的NOS阳性神经细胞数目(38.35±10.22和37.36±12.84)明显少于APS组(56.83±14.26和56.43±10.59)和对照组(59.42士11.48和58.29士9.55)的神经细胞数目(P<0.05),在CA3区无差别,APS组与对照组各亚区均无差异。结论铅可损伤大鼠学习记忆能力,其机制与染铅后海马各区NOS活力的不同变化有关,APS对铅引起的学习记忆损伤和NOS活力的变化有拮抗作用。     

两种含锌化合物对染铅大鼠海马神经元型NOS的影响

目的探讨硫酸锌 (ZnSO4 )和牛磺酸锌 (TZC)拮抗铅对学习记忆损害的作用 ,为补锌防治铅中毒提供实验依据。方法采用免疫组织化学方法 ,观察饮用含 0 .2g·L- 1醋酸铅 (PbAc)饮水和每公斤含锌 2 0 0mg、6 0 0mg(5、15g·kg- 1ZnSO4 ,5 .9、17.7g·kg- 1TZC)的饲料喂养 3个月后大鼠海马神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)阳性神经元数目的变化。结果与正常对照组大鼠海马CA1区nNOS阳性神经元数 (6 0 .6 7± 13.4 8)相比 ,染铅组海马CA1区nNOS阳性神经元数 (4 6 .6 7± 9.0 4 )明显减少 ,差别有显著性 (P <0 .0 5 )。而铅加 5g·kg- 1和 15g·kg- 1ZnSO4组以及铅加 5 .9g·kg- 1TZC组海马CA1区nNOS阳性神经元数 (5 3.6 0± 8.4 3、5 4.0 0± 6 .4 4和 5 6 .87± 6 .6 4)均较染铅组显著增加 (P <0 .0 5 ) ,以铅加 5 .9g·kg- 1TZC组的数目增加最多 ;而铅加 17.7g·kg- 1TZC组海马CA1区nNOS阳性神经元数 (5 1.6 7± 7.74 )与染铅组的差别无显著性 (P >0 .0 5 )。各组大鼠海马齿状回nNOS阳性细胞数的变化与CA1区变化基本一致 ,而CA3区与正常对照组无明显差别。结论锌对抗铅的毒性作用与锌的化学结合形式、锌的剂量有关     

牛磺酸对染铅大鼠海马神经元型一氧化氮合酶阳性神经元的影响

目的:探讨牛磺酸拮抗铅损害学习记忆能力的作用。方法:采用ABC免疫组织化学方法,研究饮用含不同剂量醋酸铅(0.02、0.2g/L)饮水和含不同剂量牛磺酸(5、10g/kg)饲料喂养的大鼠海马神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元数量的变化。结果:牛磺酸能明显增加染铅大鼠海马nNOS阳性神经元的数量。结论:牛磺酸对铅损害学习记忆能力有较明显的拮抗作用。     

牛磺酸锌对染铅大鼠海马NOS活性和nNOS蛋白及基因表达的影响

目的:探讨不同剂量牛磺酸锌(TZC)拮抗铅对大鼠海马一氧化氮合酶(NOS)活性和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)蛋白及基因表达的损害。方法:用NADPH-黄递酶(NADPH-d)组化、ABC免疫组化和半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法,研究饮用含0.2 g/L醋酸铅(PbAc)饮水和含不同剂量(5.9、17.7g/kg)TZC饲料喂养的大鼠海马NOS活性、nNOS阳性神经元数目以及nNOS基因表达的变化。结果:与对照组大鼠海马CA1区NOS、nNOS阳性神经元数(56.80±6.69,60.67±13.48)和海马nNOS mRNA相对含量(0.454±0.045)相比,染铅组大鼠海马CA1区NOS、nNOS阳性神经元数(42.60±6.1 7,46.67±9.04)和海马nNOS mRNA相对含量(0.071±0.025)明显减少(P<0.05)。而铅加5.9 g/kg TZC 组大鼠海马CA1区NOS、nNOS阳性神经元数(61.60±7.30,56.87±6.64)和海马nNOSmRNA相对含量(0.412±0.061)均较染铅组明显增加(P<0.05)。铅加牛磺酸(Tau)组和铅加17.7 g/kgTZC组海马nNOS mRNA相对含量(0.138±0.026和0.137±0.019)较染铅组明显增加(P<0.05)。各组大鼠海马齿状回NOS和nNOS阳性细胞数的变化与CA1区变化基本一致,而CA3区无明显差别。结论:5.9 g/kg TZC能明显增强慢性染铅大鼠海马NOS活性和nNOS蛋白及基因表达。     

牛磺酸锌对汞染毒大鼠海马胆囊收缩素阳性神经元的保护作用

目的探讨牛磺酸锌(TZC)对汞染毒大鼠海马胆囊收缩素(CCK)神经元的保护作用及其与动物学习记忆功能变化的关系。方法选用Wistar大鼠32只,分为对照组、汞染毒组(每日饮用4.3 mg/kg氯化汞水溶液)、汞 低TZC组(汞染毒的同时饮0.23 g/L TZC水)和汞 高TZC组(汞染毒的同时饮0.46 g/L TZC水)。利用反映学习记忆功能的Y迷宫法测试大鼠神经行为的改变;采用ABC免疫组化检测大鼠海马不同亚区CCK阳性神经元的变化。结果汞染毒组大鼠学习记忆能力明显低于对照组和高TZC组,差异有统计学意义(P<0.05),而高TZC组和对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果显示,汞染毒组大鼠海马CA1区和CA3区CCK阳性神经元数目明显少于高TZC组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论汞可损伤大鼠学习记忆能力和影响海马各区CCK阳性神经元的数目。TZC对汞引起大鼠的学习记忆损伤和海马CCK阳性神经元的变化有保护作用。     

锌对睡眠剥夺大鼠大脑皮层nNOS及SS阳性神经元的影响

目的:观察锌对睡眠剥夺(SD)大鼠大脑皮层神经元型一氧化氮合酶(nNOS)和生长抑素(SS)阳性神经元的影响,探讨锌在改善SD大鼠学习记忆能力中的作用机制。方法:采用小平台水环境法建立大鼠SD模型,补锌组于SD前3d开始喂以加Zn饲料(含Zn200mg/kg)。观察大鼠经过不同时间SD后,实验组和补锌组大鼠大脑皮层nNOS和SS阳性神经元的变化情况。结果:SD1d+Zn(补锌SD1d组)组皮层的nNOS和SS阳性神经元数目较SD1d组明显减少(P<0.05),SD2d+Zn(补锌SD2d组)和SD3d+Zn(补锌SD3d组)各组皮层的nNOS和SS阳性神经元数目较相应SD对照组均明显增加(P<0.05)。CC(对照组)、SD1d+Zn和SD2d+Zn组之间相互比较差异无显著性(P>0.05)结论:锌可以通过保护大脑皮层的nNOS和SS阳性神经元来改善SD大鼠的学习记忆能力。     

缺锌对大鼠海马神经元突触参数的影响

采用液体缺锌饲料以灌胃的方式使大鼠缺锌二周。用电镜形态计量法测定海马ＣＡ３区神经元及其突触结构的变化。结果表明：在缺锌状态下，海马ＣＡ３区含有５０个以上囊泡的突触的构成比明显减少，而含有１０个以下囊泡的突触的构成比则增加，突触结构内线粒体的最小直径减小，突触前后膜的截面积缩小。提示缺锌状态下，海马ＣＡ３区突触的能量代谢降低，神经递质的释放能力和反应性降低。     

锌调控神经细胞生长抑素mRNA表达的研究

目的:探讨锌对神经细胞生长抑素mRNA表达的影响。方法:利用不同含量锌的饲料饲喂生长大鼠及用不同含量锌的培养基培养神经-肿瘤杂交细胞株LA-N-5及LA-N-5-2,采用放射性同位素标记的生长抑素基因探针与脑组织细胞总RNA进行点杂交法检测不同的锌处理对大脑皮层以及培养的细胞株生长抑素基因表达的影响。结果:饲料缺锌的大鼠大脑皮层神经细胞生长抑素基因的表达较对喂组明显降低,补锌后可逆转。同时富锌培养的细胞较正常含锌培养的细胞生长抑素基因的转录有增高趋势。结论:锌可以在转录水平上影响神经细胞生长抑素基因的表达。     

牛磺酸锌对贫铀污染大鼠学习记忆及生长抑素阳性神经元的影响

目的:探讨牛磺酸锌(taurine-zinccoordinationcompound,TZC)对贫铀[depleteduranium,DU(5mg)]毒性作用的防护机制。方法:用不同剂量DU颗粒气管灌注,观察大鼠“Y”迷宫实验学会次数和皮层生长抑素(somatostatin,SS)阳性神经元的变化及TZC的保护作用。结果:与对照组比较,各染DU组学会次数均明显增多(P<0.05),而DU+TZC组学会次数与DU组比较明显减少(P<0.05)。各染铀组皮层SS阳性神经元数目与NS组比较明显减少(P<0.05),DU+TZC组SS阳性神经元数目与DU组比较明显增多(P<0.05)。结论:DU能引起大鼠“Y”迷宫实验学会次数增加和皮层SS阳性神经元数目减少,TZC可减少染铀大鼠的学会次数并通过影响大脑皮层SS阳性神经元保护大鼠受损的学习记忆功能。     

锌对新生大鼠海马培养神经元生长发育的作用

采用无血清培养的新生大鼠海马神经细胞，观察锌对脑细胞生长发育的作用。结果表明，锌能促进体外培养海马神经元的神经突起生长，突起数增多；神经元的活存数和神经元胞体的直径和面积增加。用流式细胞术分析证明，神经元总蛋白含量增高。本结果提示，锌对海马神经元的生长发育具有促进作用     

缺锌大鼠海马生长抑素和精氨酸加压素的变化

方法：采用液体缺锌饲料灌胃的方式使大鼠缺锌二周。采用Ｙ－迷宫实验和原子吸收及放射免疫分析技术，分别测定大鼠的学习记忆行为，血清锌含量和海马生长抑素（ＳＳ）、精氨酸加压素（ＡＶＰ）水平的变化。结果：与正常对照组相比，缺锌大鼠在Ｙ－迷宫中达到学会标准所用的时间明显增多（Ｐ＜０．０５）；血清锌含量明显降低（Ｐ＜０．０５）；海马ＳＳ和ＡＶＰ水平明显降低（Ｐ＜０．０１）。结论：在缺锌状态下，海马内的ＳＳ和ＡＶＰ水平是降低的，这种变化可能是缺锌影响脑的智力发育的重要因素之一。     

氯化锂对染铅大鼠海马nNOS蛋白与基因表达的影响

目的:探讨锂对醋酸铅神经毒性的拮抗效应及其可能机制。方法:通过ABC免疫组化法和半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,研究饮用0.2g/L醋酸铅(PbAc)饮水和含不同剂量(3、30、300和3000mg/kg)氯化锂(LiCl)饲料喂养的大鼠海马nNOS蛋白与基因表达的变化。结果:与对照组比,3、30mg/kgLiCl组大鼠海马CA1区nNOS阳性神经元数目和nNOSmRNA相对含量显著增多;而染铅组大鼠则显著减少。Pb+LiCl(3、30和300mg/kg)组均较染铅组有显著性增加,但Pb+3000mg/kgLiCl组与染铅组无显著性差异。各组大鼠海马齿状回nNOS阳性神经元数目的变化与CA1区变化基本一致,CA3区变化不显著。结论:锂对铅的神经毒性有明显的拮抗作用。     

饲料锌对幼鼠海马发育和学习记忆的影响

从哺乳期开始建立缺锌（ＺＤ）高锌（ＺＨ）和对照（ＡＬ）幼鼠模型研究饲料锌含量对幼鼠海马发育和学习记忆的影响。结果、（１）ＺＤ、ＺＨ组幼鼠体重增长值、饲料效价均低于ＡＬ组（Ｐ＜０．０１）；（２）血清锌和海马锌含量ＺＤ组明显低于而ＺＨ组明显高于ＡＬ组；（３）海马锥体细胞ＤＮＡ含量ＺＤ组明显低于ＡＬ组，ＺＨ组与ＡＬ组无差异；（４）兴奋性和抑制性基氨酸总量ＺＤ、ＺＨ组均高于ＡＬ组，以谷氨酸和γ氨基丁酸差异最显著；（５）ＺＤ、ＺＨ组主动回避反应习得率均明显低于ＡＬ组；（６）ＺＤ、ＺＨ组海马长时程增强诱发率为０，ＡＬ组为１００％；（７）海马神经元突触小泡ＺＤ组明显减少，而ＺＨ组则突触小泡破裂，海马神经元、胶质细胞均有不同程度变性坏死，上述结果提示：从哺乳期开始摄入缺锌、高锌饲料均可影响幼鼠海马发育和学习记忆。