早孕蜕膜中淋巴细胞抗原的表达及IFN－γ测定

本文以几种抗淋巴细胞表面标志的单克隆抗体，采用花环标记、碱－磷酶抗碱－磷酶（ＡＰＡＡＰ）法、酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法，对２３例早孕蜕膜组织中的淋巴细胞及γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）进行了测定。结果发现，早孕蜕膜淋巴细胞中ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ１６＋及Ｂ细胞百分率（ｘ±ｓ）分别为２９．５２±６．８０％、２３．６０±４．８６％、２０．９１±４．０６％、１．０７±１．００％、７．８１±２．５６％，ＣＤ４／ＣＤ８为１．２０±０．２０。ＣＤ３－淋巴细胞呈大颗粒淋巴细胞（ＬＧＬ）形态，蜕膜组织浸液中ＩＦＮ－γ含量＜０．６μｇ／Ｌ。提示，早孕蜕膜中存在较多ＣＤ３－、ＣＤ１６－的形态呈ＬＧＬ的ＮＫ细胞，ＣＤ４＋细胞与ＣＤ８＋细胞的比值较正常外周血明显降低     

生长激素在营养不良,尿毒症与酸中毒中对胰岛素样生长因子及？…

目的：研究重组人生长激素（ｒｈＧＨ，２ＩＵ／ｄ）对食物限制、尿毒症和酸中毒幼年大白鼠的影响。方法：食物限制（ＣＲ）是限制食物摄入为正常随意进食（ＡＬ）量的５０％；尿毒症（ＵＢ）产生于大部分肾切除伴有富含蛋白（３０％）ＮａＨＣＯ３饮食；酸中毒（ＣＡ）产生于饮用含有ＮＨ４Ｃｌ的水。采用Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｌｉｇａｎｄ Ｂｌｏｔ测定血浆ＩＧＦＢＰ３（３８ＫＤ￣４２ＫＤ）和ＩＧＦＢＰ４（２４ＫＤ）；然后进一步     

泰山赤灵芝免疫活性多糖的化学研究

从泰山赤灵芝［Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ（Ｗ．Ｃｕｒｔ．Ｆｒ．）Ｋａｒｓｔ］中分离得到免疫活性多糖ＴＧＬＢ，它既有免疫增强作用又有对免疫抑制剂的拮抗作用。从ＴＧＬＢ中鉴定了两个葡聚糖、三个肽多糖。主要成分ＴＧＬＢ１分子量１０１００，为β－（１→３）（１→６）甙键为主的吡喃型葡聚糖；ＴＧＬＢ８分子量７８００，为α－（１→４）（１→３）（１→６）甙键甘露葡聚糖肽；ＴＧＬＢ１０分子量３０００，为（１→６）（１→４）甙键甘露葡聚糖肽。     

血清胱抑素Ｃ和尿ＮＧＡＬ联合检测在急性肾损伤病情评估及预后中的价值

摘要：【目的】评价血清胱抑素Ｃ（ＣｙｓＣ）及尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（ＮＧＡＬ）联合检测在急性肾功能损伤（ＡＫＩ）病情评估及预后中的临床价值及意义。【方法】选取２０１０年１月至２０１１年１２月我院住院收治的９０例ＡＫＩ患者（ＡＫＩ组）的血液标本,均符合ＡＫＩ诊断标准。根据ＡＫＩ分期标准分为ＡＫＩ１期组（３０例）、ＡＫＩ２期组（３０例）和ＡＫＩ３期组（３０例）,记录其血清ＣｙｓＣ、尿ＮＧＡＬ的变化,并对其进行ＡＰＡＣＨＥⅡ评分,分析ＣｙｓＣ及ＮＧＡＬ与ＡＰＡＣＨＥⅡ的相关性,评价两者联合检测在ＡＫＩ患者中的预后价值。【结果】与其它３组相比,ＡＫＩ３期患者血清ＣｙｓＣ及尿ＮＧＡＬ水平显著升高,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;ＡＫＩ患者血清ＣｙｓＣ、尿ＮＧＡＬ与ＡＰＡＣＨＥⅡ成明显线性相关（ｒ值分别为０．８７７、０．７１７,Ｐ＜０．０５）;ＡＫＩ患者死亡率为２８．８９％（２６／９０）,血清ＣｙｓＣ及尿ＮＧＡＬ水平随ＡＰＡＣＨＥⅡ评分增多而升高,存活组与死亡组之间比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;高ＣｙｓＣ＋ＮＧＡＬ组ＡＰＡＣＨＥⅡ评分及病死率明显高于高ＣｙｓＣ及高ＮＧＡＬ组,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。【结论】急性ＡＫＩ患者血清ＣｙｓＣ和尿ＮＧＡＬ均升高,血清ＣｙｓＣ及尿ＮＧＡＬ是反映ＡＫＩ较敏感的生物学标志物,可以作为评价ＡＫＩ患者病情和预后的指标。     

肺癌组织中结核菌L型的检出与意义

目的 探讨结核菌Ｌ型与肺癌的可能关系。方法应用改良抗酸染色法及免疫酶染色法,对９６例经纤维支气管镜活检标本及２０例手术切除肺标本进行结核菌及其Ｌ型检测,结果：９３例肺癌组织抗酸染色及免疫酶染色阳性率分别为３８．７１％和５１．６１％,均高于非肺癌非肺结核（对照）组（Ｐ〈０．０１和Ｐ〈０．０５）,抗酸染色所检出的结核菌除１例为典型杆菌外,其余都为Ｌ型,免疫酶染色阳性中,有２９．７１％阳性颗粒见于癌细胞     

IVIG抑制脐血细胞免疫球蛋白的机制

为阐明静脉免疫球蛋白（ＩＶＩＧ）抑制新生儿Ｂ细胞免疫球蛋白释放的机制，采用间接免疫荣光标记法及ＲＴ－ＰＣＲ法分别检测了ＩＶＩＧ（５０ｍｇ／ｍｌ）作用后的脐血淋巴细胞ＣＤ４０与ＣＤ４０配体表达及其分泌的ＩＬ－２．ＩＬ－４ｍＲＮＡ表达。结果：１．ＩＶＩＧ不改变脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）中ＣＤ４０＾＋染色阳性细胞的百分比：ＩＶＩＧ促进了ＣＢＭＣ的ＣＤ４０Ｌ表达２．ＩＶＩＧ抑制ＣＢＭＣ ＩＬ－２．ＩＬ－４     

602株细菌及对常用抗生素敏感试验分析

我们应用自制血液增菌培养基（葡萄糖肉汤）和Ｌ型菌培养基对１７１１份血液和骨髓标本培养，阳性检出率为３５．２％，其中Ｇ￣＋球菌占５７．３％，Ｇ￣＿杆菌占３７．ｏ％，Ｌ型菌占检出菌的１３．６％，这说明Ｌ型菌感染应引起临床高度重视．同时对检出致病菌和条件致病菌进行药物敏感试验，结果表明，常见致病菌对各种抗生素的平均耐药率分别为ＣＥＦ（２５．４％）、ＧＥＮ（３０．９％）、ＣＭＰ（３５．８％）、ＯＸＡ（５６．４％）、ＥＲＹ（５７．９％）、ＣＯＳ（６２．９％）、ＡＫＮ（１５．６％）、ＫＡＮ（４４．４％）、ＳＴＲ（５８．４％）、ＡＭＰ（４９．９％），因此，ＣＥＦ和ＡＫＮ仍是治疗各种败血症和菌血症的较理想抗菌药物．     

生物免疫刺激剂对大鼠外周血淋巴细胞和肝大颗粒淋巴细胞生物活性的影响

正常大鼠在体内应用干扰素（ＩＦＮα—２ｂ），卡介苗（ＢＣＧ）或二者联用后，检测外周血淋巴细胞转化率和酸性非特异性酯酶（ＡＮＡＥ）阳性淋巴细胞数量的变化。同时从正常大鼠肝内分离出大颗粒淋巴细胞（ＬＧＬ），体外分别受ＩＦＮα－２ｂ、ＢＣＧ或二者联合作用后，以３Ｈ－ＴｄＲ掺入实验测定生物免疫刺激剂（ＢＩＳ）对ＬＧＬ抗肝癌细胞作用的影响。结果：（１）单用ＩＦＮα－２ｂ对大鼠淋巴细胞母细胞化有一定的抑制作用，抑制率为２１．７％；单用ＢＣＧ使大鼠淋巴细胞转化率提高了２７．９％，二者联用则可消除ＩＦＮα－２ｂ对大鼠淋巴细胞母细胞化的抑制作用。（２）ＩＦＮα－２ｂ、ＢＣＧ或二者联用均使大鼠外周血ＡＮＡＥ阳性淋巴细胞显著增多，其中ＢＣＧ作用强于ＩＦＮα－２ｂ（Ｐ＜０．０１），以ＩＦＮα－２ｂ和ＢＣＧ二者联用的效果最强。（３）ＩＦＮα－２ｂ、ＢＣＧ均可显著增强大鼠肝ＬＧＬ的抑肝癌细胞增殖作用，ＢＣＧ作用较ＩＦＮα－２ｂ强，二者分别使肝ＬＧＬ抑肝癌细胞增殖作用提高了５０％和２２．４％，ＩＦＮα－２ｂ和ＢＣＧ协同作用的效果最强，使肝ＬＧＬ的抑肝癌细胞作用提高了６３％。实验结果为肝癌免疫治疗的最佳选择提供了充分的科学依据。     

用快速斑点免疫金渗滤法检测抗双链DNA抗体

目的为了提供一种简便、快速、可靠的检测抗双链ＤＮＡ（ｄｓ－ＤＮＡ）抗体的新方法。方法将生物素化的质粒ｄｓ－ＤＮＡ结合于包被了亲和素的硝酸纤维素（ＮＣ）膜上，以胶体金标记的葡萄球菌蛋白Ａ（ＳＰＡ）作为显示剂，建立了一种检测抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体的快速斑点免疫金渗滤法（ＤＩＧＦＡ）。结果ＤＩＧＦＡ对未经选择的系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）和活动性ＳＬＥ的阳性率分别为６７．２％和９５．９％；对非ＳＬＥ的自身免疫病患者的阳性率仅为２．９％；正常人未见假阳性。与短膜虫免疫荧光法（ＣＬ．ＩＦＡ）、放射免疫法（Ｆａｒ）、酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）和斑点免疫结合法（ＤＩＢＡ）四种方法比较，ＤＩＧＦＡ的敏感性优于ＣＬ．ＩＦＡ、ＥＬＩＳＡ和ＤＩＢＡ，特异性优于Ｆａｒ和ＥＬＩＳＡ。结论ＤＩＧＦＡ快速、简便，整个检测过程只需２分钟，不需特殊设备，是一种值得推广的检测抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体的常规方法。     

抗沙眼衣原体主要外膜蛋白种特异性单克隆抗体

用人工合成沙眼衣原体主要外膜蛋白（ＭＯＭＰ）氨基端１／４肽链免疫８周龄雄性ＢＡＬＢ／ｃ小鼠３只，第１４天用Ｌ１／４４０／Ｂｕ原体加强免疫，第２４天将免疫反应良好的１只小鼠脾细胞与ＮＳ－１瘤细胞融合。用１／４ＭＯＭＰ和Ｌ１原体抗原包被的聚丙乙烯板检测上清中抗体，淘汰与鹦鹉热衣原体种（ＥＡＥ株）、肺炎衣原体种（ＡＴＣＣＶＲ１３１０株）以及正常组织培养细胞（ＢＧＭＫ）有交叉反应的克隆，最后得到４株抗沙眼衣原体特异性单克隆抗体（ＭＡｂｓ），其抗体属ＩｓＧ１和ＩｇＧ２ａ亚类。微量免疫荧光试验（ｍｉｃｒｏ－ＩＦ）发现４株ＭＡｂｓ均与本实验室制备的沙眼衣原体Ｌ１、Ｌ２、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｅ原体及Ｌ２包涵体抗原发生反应，并与沙眼衣原体所有１５个标准血清型结合，其腹水ＭＡｂｓ滴度≥１：１２８００。免疫印迹试验显示４株ＭＡｂｓ均与沙眼衣原体分子量为４００００的ＭＯＭＰ反应。     

改良痰结核分枝杆菌L型涂片检测方法的建立和应用

目的建立一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分枝杆菌L型的涂片染色检测方法。方法对常规的抗酸染色法进行方法学改良,以特异性基因扩增诊断法为标准,分析评价改良方法的灵敏度、特异性和总有效检出率等统计学指标;分别采用本改良抗酸染色法(以下简称本改良法)、常规抗酸染色法和改良IK抗酸染色法检测468例临床标本,对三种方法的阳性检出率进行统计学比较。结果本改良法阳性检出率与特异性基因扩增诊断法、改良IK抗酸染色法比较均无明显差异(χ2=0.25,P=0.6171;U=0.155,P=0.4404),但明显高于常规抗酸染色法(U=3.713,P<0.0010);本改良法灵敏度、特异性和总有效检出率与改良IK抗酸染色法相似,但高于常规抗酸染色法。同时,本改良法所需时间少于改良IK抗酸染色法(5minvs24h)。结论成功建立了一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分支杆菌L型的涂片染色检测方法,适合临床推广应用。     

改进的抗酸染色技术在提高麻风杆菌检出率中的应用

目的将传统的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法进行改进,提高麻风杆菌的阳性检出率。方法对商洛疗养院68例麻风病人和121例疑似病例用传统的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法和改进的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法进行实验室检测,病理切片做进一步比较。结果改进的抗酸染色法麻风杆菌阳性检出率明显高于传统的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法,前者阳性检出率为70.4%,后者为44.4%,差异有统计学意义(χ2=7.07,P0.05)。改进的抗酸染色法麻风杆菌切片着色率高、染色效果佳。结论改进的抗酸染色法优于传统的抗酸染色法,为麻风病的实验室诊断和筛查提供了靶方向。     

Comparative Evaluation of Ziehl Neelsen Staining and Knowledge,Attitudes and Practices of Laboratory Personnel in Relation to Ziehl Nielsen

Objective:

To describe laboratory personnel''s attitude and practices toward phenol exposure during Ziehl Neelsen (ZN) acid fast staining method and to evaluate the feasibility of an alternate modified Kinyoun cold (MKC) stain.

Method:

A total of 187 sputum samples were collected from suspected tuberculosis cases and stained by the MKC method and ZN stain and were read by an experienced microscopist and a researcher. A cross-sectional questionnaire survey of 35 laboratory personnel was also conducted.

Results:

Modified Kinyoun cold stain gave sensitivity, specificity, positive and negative predictive values of 100%, 99.4%, 94.1% and 100%, respectively. Both stains corresponded with an agreement rate of 99.5%. Almost 94.7% of respondents reported that they worked in a closed area when staining and 57.1% did the staining method without ventilation. Material safety data sheet (MSDS) of phenol was not known to 77.1% of laboratory personnel. All of the participants (100%) in this study welcomed a similar, non heating method for acid-fast bacillus (AFB). There was significant association between those not comfortable with phenol exposure (77.1%) and complaints of irritation (48.6%) and headache (2.9%) [χ² = 10.98, r = 0.55, p = 0.001].

Conclusions:

The MKC is suitable for use as a substitute for the ZN method for the demonstration of AFB in the primary diagnosis and treatment assessment of pulmonary tuberculosis. Focus should be given on educating laboratory staff on the hazards, risks and precautions associated with the phenol/ZN method.     

两种染色法检测结核分支杆菌的对比观察

目的比较(intenfised kinyoun,IK)染色法和改良的Wade-Fite染色法检测抗酸菌的临床应用价值。方法采用IK染色法和改良的Wade-Fite染色法对66例病理诊断为慢性肉芽肿性炎,形态符合结核病改变的患者的石蜡组织切片分别进行染色。结果 IK染色法阳性例数为43例,阳性率为65.2%(43/66),其中抗酸分支杆菌L型的阳性率为43.9%(29/66);改良的Wade-Fite染色法阳性例数为24例,阳性率为36.4%(24/66),其中抗酸分支杆菌L型的阳性率为21.2%(14/66),两种方法染色阳性率之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 IK染色法检测抗酸菌的阳性率明显高于改良的Wade-Fite染色法。     

荧光染色技术在艾滋病患者活检标本病原学诊断中的应用

目的探讨快速真菌与抗酸分枝杆菌荧光技术在艾滋病患者活检标本病原体诊断中的应用价值及意义。方法选取艾滋病患者500例活检标本,采用快速真菌荧光染色及六胺银、PAS染色对300例可疑真菌感染的活检标本进行检测,采用抗酸分枝杆菌荧光染色及萋尼抗酸染色对200例可疑结核的活检标本进行检测,并对检测结果进行对比。结果（1）快速真菌荧光镜检法检出阳性205例（阳性率68.3%）,六胺银染色法检出阳性209例（阳性率69.7%）,PAS染色法检出阳性97例（阳性率39.5%）,快速真菌荧光染色与六胺银染色检出阳性率差异无统计学意义（P>0.05),但高于PAS染色法;（2）抗酸分枝杆菌荧光染色检出阳性179例（阳性率89.5%）,萋尼抗酸染色法检出阳性117例（阳性率58.5%）,抗酸分枝杆菌荧光染色阳性率高于萋尼抗酸染色法,两者差异有统计学意义（P<0.01）;（3）荧光染色比常规特殊染色操作更快速、简便、显示更清晰。结论艾滋病患者并发机会性感染病原体种类多样,普通的特殊染色阳性率不高并且费时费力,而快速真菌及抗酸荧光染色特别是抗酸荧光染色的阳性率明显增高,为活检组织诊断真菌及结核分枝杆菌感染提供一种快速、准确、经济、对比更清晰的染色方法,能够为真菌感染及结核病患者诊断提供可靠的指导依据,值得在病原体诊断工作中广泛使用。     

结核杆菌痰检方法的临床应用比较

目的：比较结核杆菌抗酸染色、金胺O荧光染色（以下简称荧光染色）及结核杆菌分离培养（以下简称结核培养）3种检测方法的阳性检出率,探讨最适合基层医疗机构结核杆菌筛查的检测模式。方法选取确诊为肺结核的患者536例,期间共计痰检人次为1531次,按医学影像学和临床症状分为3个组,每位肺结核患者每痰检1次则记为1例,其中处于进展期895例,好转期357例,稳定期279例。对处于进展期、好转期和稳定期的患者的痰检标本分别采用抗酸染色、金胺O荧光染色及结核杆菌分离培养3种方法同时检测即时、夜间和晨痰3份标本。对检测结果进行统计学分析。结果（1）肺结核进展期895例,其中抗酸染色阳性病例为266例（29.72%）,金胺O荧光染色阳性病例377例（42.12%）,结核杆菌分离培养阳性病例401例（44.80%）。结核杆菌分离培养阳性检出率最高,荧光染色次之,抗酸染色最低;抗酸染色与另2种检测方法之间比较差异有统计学意义（P＜0.05）;另2种检测方法之间比较差异无统计学意义。（2）肺结核好转期357例,其中抗酸染色阳性病例为7例（1.96%）,金胺O荧光染色阳性病例23例（6.44%）,结核杆菌分离培养阳性病例19例（5.32%）。后2种检测方法之间比较差异无统计学意义;抗酸染色与后2种检测方法之间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。（3）稳定期279例,其中抗酸染色阳性病例为5例（1.79%）,金胺O荧光染色阳性病例8例（2.86%）,结核杆菌分离培养阳性病例7例（2.51%）。3种方法之间比较差异均无统计学意义。结论抗酸染色检测迅速,实验操作及设备要求简单,适合基层医疗机构大规模结核病初次筛查及稳定期患者的痰检;金胺O荧光染色检测迅速,操作简单,实验设备要求相对较高,配合抗酸染色有助于提高结核杆菌检出率,适用于肺结核治疗过程中痰菌检测;结核杆菌分离培养在3种方法中阳性检出率最高,但是检测时间相对较长,不利于结核杆菌的快速检出,可用于检测抗酸染色和金胺O荧光染色不能确定的可疑标本。     

聚合酶链反应和改良抗酸染色诊断L型结核杆菌感染

目的　探讨 L 型抗酸菌的 IK染色和 PCR检测的临床应用价值 .方法　采用 IK染色和 PCR技术 ,对结核病患者(35例 )、非特异性淋巴结炎患者 (30例 )和正常胎儿 (1 0例 )的石蜡切片进行对比研究 .结果　两种方法 (PCR和 IK染色 )对上述 3组 75例的检测阳性率分别为 80 % ,83% ;6 7% ,6 0 %及 0 % .结论　 PCR技术及 IK染色 ,检测抗酸菌 L 型的阳性率及灵敏度均较高     

不同染色试剂和时间对组织抗酸杆菌染色的影响及其质量控制的意义

目的：观察不同染色试剂和时间对组织抗酸杆菌染色结果的影响，并探讨其质量控制措施。方法搜集抗酸杆菌染色阳性病例共38例，取带菌落的典型组织蜡块，每个蜡块切片4张，用不同的染色试剂和时间进行抗酸染色。结果采用二甲苯及乙醇流程染色20 min 组在显微镜下观察到抗酸杆菌明显淡弱，抗酸杆菌区域呈不连续的模糊淡红色小点，阳性0例，阳性率0%；松节油流程染色15 min 组在显微镜下观察到抗酸杆菌清晰，呈红色，微弯曲分枝状，容易识别辨认，阳性34例，阳性率89%；松节油流程染色20 min 组在显微镜下观察到抗酸杆菌区域整个背景呈红色，不易辨识抗酸杆菌，阳性28例，阳性率74%；松节油流程染色30 min 组，在显微镜下观察到整个抗酸杆菌区域呈深红色，难以辨识抗酸杆菌，阳性27例，阳性率71%。结论不同染色试剂和时间对抗酸杆菌染色阳性结果有明显差异；组织抗酸杆菌适宜松节油流程设定染色15 min 组。     

L型抗酸菌感染的病理和PCR检测

为了探讨抗酸菌Ｌ型感染的病理和分子生物学检测意义。方法我们采用改良抗酸染色法和聚合酶链反应法对３０例病理学诊断为非特异性淋巴结炎和１５例正常胎儿石蜡包埋组织重新切片进行检测分析。结果对３０例非特慢性淋巴结炎的ＩＫ检测,其中２０例显示抗酸菌Ｌ型感染阳性,ＰＣＲ法检测１８／３０例抗酸菌Ｌ型感染阳性,两种方法间无显著差异;正常胎儿组织均为阴性,两组间（淋巴结炎组和正常胎儿组（Ｐ〈０．０１,有显著性差异。