不同浓度五味子乙素对人胃癌细胞株MGC-803增殖、凋亡的影响

目的：观察五味子乙素诱导人胃癌细胞株MGC-803凋亡作用。方法：用10、50、100、200μmol/L浓度五味子乙素作用胃癌细胞株48 h,倒置显微镜下观察细胞增殖情况;MTT法检测五味子乙素对细胞增殖的抑制作用;凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡。结果：倒置显微镜下,随着五味子乙素作用浓度升高,细胞增殖能力随之下降;MTT法亦检测到上述结果;当五味子乙素作用浓度是100μmol/L时,可检测到明显的凋亡细胞。结论：高浓度的五味子乙素可诱导胃癌细胞株MGC-803细胞的凋亡,具有量效依赖关系。     

ＨＰＬＣ法测定五味子糖浆中五味子乙素的含量

五味子糖浆是由五味子单味药材经加工制成的中药制剂 ,具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心之功效 ,临床上常用于治疗久咳虚喘、梦遗滑精、遗尿尿频、久泻不止、自汗、盗汗、津伤口渴、气短脉虚、内热消渴、心悸失眠等症 (黑龙江省药品标准 .1 986年版.48)。五味子乙素为该制剂中主要活性成分 ,我们采用 HPLC法对五味子乙素的含量进行了测定 ,以确保药效。1　实验仪器与试剂高效液相色谱仪 :HP1 1 0 0 (美国惠普公司 ) ,超声波清洗器 (上海必能信超声公司 )。五味子乙素购自中国药品生物制品检定所 ,五味子糖浆由鸡西市人民医院制剂室提供 …     

RP-HPLC法测定五子衍宗丸中五味子甲素、五味子乙素含量

五子衍宗丸为常用中成药,是<中华人民共和国药典>2000年版一部的收载品种,由车前子、枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子组成,具有补肾益精的功效.五味子为方中重要药味,其中五味子甲素、五味子乙素为重要有效成分.药典仅确定了五味子甲素的TLC定性鉴别方法,而定量分析方法未见报道.     

RP-HPLC法对不同产地五味子的五味子甲素和乙素的分析

目的建立高效液相色谱法测定不同产地五味子的五味子甲素和乙素的含量。方法采用Water Spherisorb 10 ODS1（4.6mm×250mm,10μm）;流动相：流动相：甲醇-水（70：30）;流速：1.0mL·min^-1;检测波长：254nm;进样量：20μL。结果五味子甲素在7.60～38.00μg·mL^-1;五味子乙素在1.75～48.25μg·mL^-1范围内均具有良好的现性关系。结论本法快速、简便、准确,为进一步研究五味子的质量控制标准提供依据。     

正交试验法优选五味子甲素和五味子乙素的超声提取工艺

目的:通过正交试验确定了五味子甲素和五味子乙素的超声提取工艺。方法:采用超声提取法提取五味子甲素和五味子乙素,以提取溶剂、超声时间、超声次数、溶剂用量为因素,以五味子甲素和五味子乙素提取率为考察指标,采用L9(34)正交表设计,用正交实验确定最佳提取条件,采用HPLC法分析2种成分。结果:在所考察的因素中,以五味子甲素与五味子乙素含量的均值为主要指标,确定最佳超声提取工艺为:以8倍体积甲醇为溶剂,超声提取3次,每次10min。结论:确定五味子最佳超声提取工艺,此法简单、快速、提取效率高;HPLC分析方法准确,灵敏度高,重现性好,可用于五味子有效成分的分析。     

HPLC测定生脉饮中五味子甲素和五味子乙素的含量

[目的]应用高效液相色谱法测定生脉饮中五味子甲素和五味子乙素的含量。[方法]采用Kromasil C18分析柱（4.6 mm×150 mm,3μm）,流动相为甲醇-水（77∶23）;流速为1 ml/min;检测波长为254 nm;柱温为30℃。[结果]五味子甲素和五味子乙素在0.004～0.008μg范围内,峰面积与进样量呈良好的线性关系。回归方程分别为Y=53.64160X＋4.14451×10-3,r=0.99999;Y=43.09819X＋8.347131×10-3,r=0.99998。五味子甲素平均回收率为100.93%,RSD=3.03%（n=3）;五味子乙素平均回收率为101.07%,RSD=2.13%（n=3）。[结论]本法灵敏度高、操作简便、结果准确,适用于五味子甲素和五味子乙素的含量测定。     

五味子乙素通过线粒体凋亡途径诱导凋亡的机制研究

五味子是吉林省中药材的优势产业,它具有抗衰老、抗氧化和抗肿瘤等多种作用,五味子乙素是五味子抗肿瘤的主要活性成分之一.在凋亡发生时线粒体途径一直是研究的热点内容,因此,我们将Sch B与凋亡线粒体途径中caspases及Bcl-2家族成员的关系进行综述.     

119 正交试验法优选五味子甲素和五味子乙素的超声提取工艺

目的:通过正交试验确定了五味子甲素和五味子乙素的超声提取工艺.方法:采用超声提取法提取五味子甲素和五味子乙素,以提取溶剂、超声时间、超声次数、溶剂用量为因素,以五味子甲素和五味子乙素提取率为考察指标,采用L9(34)正交表设计,用正交实验确定最佳提取条件,采用HPLC法分析2种成分.结果:在所考察的因素中,以五味子甲素与五味子乙素含量的均值为主要指标,确定最佳超声提取工艺为:以8倍体积甲醇为溶剂,超声提取3次,每次10 min.结论:确定五味子最佳超声提取工艺,此法简单、快速、提取效率高;HPLC分析方法准确,灵敏度高,重现性好,可用于五味子有效成分的分析.     

五味子乙素B对人胃癌细胞MGC－803增殖和迁移能力的影响

目的：观察五味子乙素B（ Schisandrin B , Sch B）对人胃癌细胞MGC－803增殖、迁移能力及基质金属蛋白酶－9（matrix metalloproteinase 9, MMP－9）mRNA表达的影响,并探讨其可能的分子机制。方法：采用CCK－8法检测50、100、200、400和800μmol／L Sch B对胃癌细胞增殖的抑制作用;光镜观察细胞生长状态变化,并计数细胞分裂指数;细胞划痕实验检测200μmol／L Sch B对细胞迁移能力的影响;定量PCR检测细胞MMP－9 mRNA的表达。结果：CCK－8结果显示,Sch B对胃癌细胞的增殖具有显著抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;胃癌细胞经不同浓度Sch B处理24、48、72 h,光镜下可见大量细胞皱缩,胞膜界限模糊,核质浓缩及凋亡小体形成,细胞分裂指数随Sch B剂量增加和作用时间延长而降低;200μmol／L Sch B作用24、48、72 h,细胞迁移率分别为（39．57±9．14）％,（56．57±10．04）％和（68．21±11．43）％,明显低于对照组（P＜0．05）;PCR结果显示,胃癌细胞中MMP－9 mRNA表达显著低于对照组。结论：Sch B对胃癌细胞的增殖抑制呈剂量和浓度依赖性,并降低胃癌细胞迁移能力,可能与下调MMP－9基因的表达有关。     

新型IKKβ激酶抑制剂的体外抗胃癌活性

目的：探究新型EF24类IKKβ激酶抑制剂H18的体外抗胃癌活性。方法：利用分子对接模拟H18与IKKβ的结合模式;利用MTT实验检测H18对胃癌细胞BGC-823抑制生长的作用;集落克隆实验检测H18对BGC-823增殖的影响;利用DAPI染色检测细胞凋亡情况;利用Western blot实验分析H18对胃癌细胞BGC-823的NF-κB信号通路的影响。结果：H18可与IKKβ的变构位点结合;H18对BGC-823细胞72 h IC50为（1.7±0.3）μmol/L;与IKK抑制剂BMS-345541相比,H18明显抑制细胞的增殖,而对凋亡无明显影响;H18可对胃癌细胞NF-κB信号通路产生明显抑制作用。结论：H18具有良好的体外抗胃癌活性,是一种具有研发前景的IKKβ抑制剂。     

4’O-甲基补脂查尔酮B的体外抗胃癌活性

目的：研究4’O-甲基补脂查尔酮B的体外抗胃癌活性。方法：4’O-甲基补脂查尔酮B孵育胃癌细胞系AGS后,采用MTT和集落克隆形成实验检测细胞生长,划痕实验检测细胞迁移,流式细胞实验检测细胞周期和凋亡,Western blot实验检测双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A（DYRK1A）蛋白表达。结果：4’O-甲基补脂查尔酮B对胃癌细胞AGS的IC50为（7.7±1.3）μmol/L,并能浓度依赖性地抑制集落克隆形成以及抑制迁移,诱导周期阻滞及凋亡,并抑制DYRK1A的表达（P ＜0.05）。结论：4’-O-甲基补骨脂查尔酮B能够通过抑制DYRK1A产生显著的体外抗胃癌活性。     

线粒体途径在温热化疗诱导胃癌细胞AGS凋亡中的作用

目的探讨线粒体途径在温热化疗诱导胃癌细胞AGS凋亡中的作用。方法应用人胃癌细胞株AGS,根据不同实验处理分为常温对照(NT)、单纯温热(HT)、常温化疗(NTCT)和温热化疗(HTCT)四组。Western blotting法检测AGS细胞中Bax、Bcl-2蛋白及其线粒体胞质蛋白中细胞色素C的表达,实时PCR检测其Bax、Bcl-2的mRNA表达;分别测定各组AGS细胞Caspase3和Caspase9的酶活性变化。结果与NT、HT、NTCT组比较,HTCT组AGS细胞Bcl-2蛋白表达下调而Bax蛋白表达上调,Bax/Bcl-2显著上升;线粒体胞质蛋白中细胞色素C表达增加;Caspase9和Caspase3的酶活性显著增高。结论HTCT可引起AGS细胞Bcl-2、Bax基因和蛋白表达水平发生改变,促使其细胞色素C由线粒体释放进入细胞质,从而诱导细胞凋亡。     

醌茜素通过MAPK及Akt信号途径诱导人胃癌AGS细胞凋亡

目的 探讨醌茜素对人胃癌细胞的凋亡作用及其分子机制.方法 MTT法检测醌茜素对3种人胃癌AGS、MKN-28及MKN-45细胞的杀伤作用;Annexin V-FITC/PI双染法、流式细胞术检测醌茜素诱导AGS细胞凋亡能力及细胞内活性氧簇(ROS)水平;蛋白质免疫印迹法检测细胞凋亡相关蛋白的表达量变化.结果 醌茜素对3种胃癌细胞均具有明显的杀伤作用,且呈浓度依赖性(P<0.05).经计算其IC50值分别为7.07μmol/L、22.55μmol/L及14.18μmol/L.醌茜素能诱导AGS细胞发生凋亡,且呈浓度依赖性(P<0.001),并能够促进细胞内活性氧水平升高(P<0.001).当预处理ROS清除剂NAC后,能够明显抑制醌茜素诱导的细胞凋亡(P<0.001).Western blotting结果显示促凋亡蛋白p-p38、p-JNK、Bad、cleaved-caspase-3及cleaved-PARP-1表达量增加(P<0.05),抗凋亡蛋白p-Akt、p-ERK及Bcl-2蛋白表达量减小(P<0.05).结论 醌茜素通过上调细胞内ROS水平,调控MAPK及Akt信号途径,进而诱导人胃癌AGS细胞发生凋亡.     

胃癌耐药细胞系传统型蛋白激酶C的表达及活性

目的 观察传统型蛋白激酶C（cPKCs）在胃癌耐药细胞系SGC7901／VCR1.0、耐药亚系SGC7901／VCR0.3,7901/0.7及药敏细胞系SGC7901表达及活性的变化,以及对细胞内药物浓度的影响。方法 用免疫荧光化学及蛋白印迹方法观察传统型蛋白激酶C在胃癌耐药细胞系及药敏细胞系的表达;竞争蛋白结合法测定PKC的活性;应用流式细胞仪观察细胞内药物浓度的变化。结果 PKCα,PKCβⅠ,PKCβⅡ及PKCγ在胃癌耐药细胞系及药敏细胞系均有表达,PKCα在耐药细胞表达呈强阳性,在药敏细胞表达呈阳性;PCKβⅠ及PKCβⅡ在耐药细胞及药敏细胞表达均为阳性;PKCγ在耐药细胞及药敏细胞表达均为强阳性。免疫蛋白印迹实验证实,随耐药指数的增加,PKCα表达呈逐渐增高的趋势,薄层扫描蛋白印迹带的吸光度（A）分别为9584.17,9421.06,8534.64,8088.79,而PKCβⅠ、PKCβⅡ及PKCγ在耐药细胞系、耐药亚系及其药敏细胞系表达无明显变化。PKC活性检测结果提示,随耐药指数的增加,PKC活性呈逐渐增高的趋势,以细胞质及细胞核的PKC活性增高为主。结论 传统型蛋白激酶C在维持胃癌耐药细胞系SGC7901／VCR的多药耐药中起重要作用且具有同工酶特异性。     

肌腱蛋白C在直肠癌及胃癌组织中的表达及临床意义

目的 研究肌腱蛋白C(TN-C)在直肠癌及胃癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学技术,分别对34例直肠癌及29例胃癌组织标本进行处理,分析TN-C在直肠癌及胃癌不同分化程度及临床分期中的表达强度.结果 34例直肠癌标本及29例胃癌标本均呈阳性表达;随着病理学分级的增高TN-C的表达逐渐增强,高分化与中分化、中分化与低分化癌变组织中TN-C表达相比,差异有统计学意义(P＜0.05);随着临床分期的增加,TN-C的表达也逐渐增强,Ⅰ～Ⅱ期直肠癌和胃癌患者组织TN-C表达与Ⅲ～Ⅳ期患者相比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在直肠癌及胃癌组织中均有TN-C的表达,且表达量与肿瘤分化程度及临床分期相关.     

海洋生物活性药物BA-TPQ和FBA-TPQ对胃癌细胞的作用

目的:观察两种海洋生物活性药物BA-TPQ和FBA-TPQ对人胃癌细胞株BGC-823的作用与机制.方法:采用四唑氮蓝(MTT) 法测定不同浓度BA-TPQ和FBA-TPQ对BGC-823细胞的生长作用,应用流式细胞术检测BA-TPQ和FBA-TPQ对 BGC-823细胞增殖和细胞周期的影响,应用蛋白质印迹法检测BA-...     

正交设计优选微波提取五味子中五味子醇甲的研究

目的研究微波辅助提取五味子中五味子醇甲的优化工艺。方法采用正交设计优化微波提取工艺,用高效液相色谱法测定五味子醇甲的量,并考察了微波功率、乙醇浓度、料液比、提取时间和药材粉碎度对提取五味子醇甲的影响。结果微波辅助提取五味子醇甲的优化工艺:微波功率为850W,乙醇浓度为80%,料液比为1∶12,提取时间为35min,药材粉碎度为80目。结论微波提取法明显优于加热回流提取法,表明微波提取法是适合提取五味子醇甲的有效方法。