苦荞蛋白的分离及其体外抗氧化活性的研究

目的:提取苦荞蛋白并评价苦荞蛋白各组分的体外抗氧化能力。方法:采用不同溶剂分级提取苦荞中的清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,并采用考马斯亮蓝蛋白定量法测定各组分的蛋白含量,SDS-PAGE电泳观察各蛋白组分的分子量分布情况;采用比色法测定各蛋白组分在体外抑制超氧阴离子自由基(O2-·)的能力和清除羟自由基(·OH)的能力。结果:清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白占总蛋白的百分含量分别为42.65%、14.08%、9.54%和33.73%,清蛋白含量最高,醇溶蛋白含量最少;各蛋白组分的分子量分布不一样;清蛋白和球蛋白均具有清除羟自由基(·OH)的能力和抑制超氧阴离子自由基(O2-·)的能力,且球蛋白高于清蛋白(p0.05),而醇溶蛋白和谷蛋白无抗氧化能力。结论:苦荞中的清蛋白和球蛋白具有体外抗氧化能力。     

不同花生品种籽仁发育过程中蛋白质组分分析

采用蛋白质组分的连续累进提取法提取4个花生品种籽仁的清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白。利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术,对各蛋白组分的亚基组成进行分析。结果表明,花生籽仁发育过程中,清蛋白始终占绝对优势,占花生蛋白质总量的70%以上,最高达95%;球蛋白含量较低,仅占花生蛋白质总量的3%~5%,谷蛋白含量最低,其不足3%,醇溶蛋白痕量;在4种组分中,品种之间球蛋白含量差异最大。SDS-PAGE图谱显示,染色后清蛋白、球蛋白条带清晰可见,谷蛋白条带较为模糊,清蛋白含量高,清蛋白和球蛋白成分较丰富。花生蛋白亚基分子质量在14.4~97.4 ku之间,清蛋白有10~12个亚基,球蛋白有9~10个亚基。采用连续累进提取法可将花生蛋白组分分离,利用SDS-PAGE方法可以得到花生籽仁清蛋白、球蛋白的清晰条带且多态性高,而谷蛋白条带模糊。     

苦荞粉蛋白质的分级制备及理化性质

对苦荞粉蛋白进行了分级制备,并对其理化性质进行测定分析.结果表明,苦荞蛋白组分中清蛋白的质量最高（43.82%）,其次为谷蛋白（14.58%）,醇溶蛋白（10.50%）,球蛋白的质量最低（7.82%）;还原和非还原条件下的SDS-PAGE表明4种蛋白组分中均有二硫键的存在;与FAO/WHO推荐的氨基酸模式相比,除了球蛋白一些必需氨基酸稍微缺乏之外,其余3种组分均含有充足的必需氨基酸;DSC分析表明苦荞清蛋白和球蛋白的变性温度分别为81.34 ℃和98.43 ℃.     

Osborne法分级提取五味子蛋白及抗氧化活性比较

目的:采用Osborne法提取五味子各组分蛋白,并对其体外抗氧化活性比较研究。方法:用Osborne方法分级提取五味子中的蛋白质,得到四种组分蛋白:清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,对其进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶（sodium lauryl sulfate-polyacrylamide gel,SDS-PAGE）电泳分析,并对不同组分蛋白和总蛋白的体外抗氧化活性进行对比研究。结果:分级提取得到的四种蛋白质,清蛋白亚基分子量分布在15~25 kDa和40~55 kDa,球蛋白分子量大致分布在15~25 kDa和35~55 kDa,谷蛋白亚基分子量在15~20 kDa和30~40 kDa。以五味子总蛋白为参照物,体外抗氧化试验结果表明,总蛋白对羟基自由基和DPPH自由基的清除能力强于各分级蛋白;四种分级蛋白对Fe3+的还原能力强于总蛋白;在ABTS自由基清除试验中含量最高的谷蛋白效果最佳,其清除效果在一定的浓度下与Vc接近,同时,其在羟基、DPPH自由基与Fe3+还原能力的试验中抗氧化活性良好,表明五味子组分蛋白中谷蛋白可作为一种良好的抗氧化潜在物质。     

酶法提取苦荞麦蛋白的理化性质和加工性质

以苦荞麦为原料,采用酶法提取制备苦荞麦粗蛋白,并进一步对粗蛋白进行分离得到4 种蛋白组分,然后对粗蛋白和各蛋白组分的理化性质和加工性质进行研究。结果显示：5 种蛋白的等电点依次是：粗蛋白pH4.6、清蛋白pH4.4、球蛋白pH5.1、醇溶蛋白pH4.5、谷蛋白pH5.2;变性温度依次是：粗蛋白95.5℃、清蛋白100.0℃、球蛋白94.3℃、醇溶蛋白53.4℃、谷蛋白84.0℃;苦荞中各种蛋白质的分子质量都较低,缺乏高分子质量蛋白质组分,容易消化吸收,且氨基酸组成合理,种类齐全,富含赖氨酸。本研究获得的苦荞麦粗蛋白和得率最大的谷蛋白组分,能够在类似火腿肠的体系测试中呈现良好的功能性质。     

甜荞蛋白质组分的物化特性研究

研究甜荞不同蛋白组分的物化特性.采用分步提取法分离收集甜荞清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白.结果表明甜荞清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的含量分别占总蛋白的21.91%、19.36%、2.26%和19.95%,等电点分别为pH4.40、5.00、4.80和4.60,变性温度分别为79.39℃、70.36℃、80.04℃和83.09℃,前三种蛋白白色略偏黄,而谷蛋白偏红色.甜荞清蛋白、球蛋白和谷蛋白的必需氨基酸含量丰富.甜荞清蛋白含铁量高,醇溶蛋白含锌量高,球蛋白含镁量高,而铅、锡、砷在各蛋白质组分中的含量均很低.     

绿豆中四种蛋白质的分级提取与功能性质研究

采用Osborne方法分级分离了绿豆中的蛋白质,得到四种蛋白组分:清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,并对其进行功能性质评价。对比评价结果表明:溶解度大小为:清蛋白>球蛋白>谷蛋白>醇溶蛋白;四种蛋白组分中,谷蛋白持水与持油能力较好,清蛋白起泡性较好,醇溶蛋白颜色最好、感官接受度较高,四种蛋白组分在碱性条件下均有较好的乳化性,且均在270~280nm处产生最大吸收峰。     

萌发荞麦种子蛋白质组分含量变化的研究

研究了荞麦种子萌发后总蛋白质和各蛋白组分如清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的含量变化，结果表明：本试验条件下，山西甜荞和四川苦荞萌发后总蛋白质含量呈逐渐下降趋势。山西甜荞经过72h的萌发，其蛋白质总量由最初的11．90％下降到5．44％，下降了6．5个百分点。四川苦荞由萌发初的6．53％下降到0．96％，下降了5．6个百分点。荞麦清蛋白和球蛋白在萌发后均呈现下降趋势，与总蛋白质含量变化相一致。谷蛋白在萌发后至36h内含量下降，之后又快速增加。四川苦荞醇溶蛋白含量在萌发后逐渐增加．而山西甜荞则有逐渐下降趋势。     

非洲山毛豆蛋白质组成及其功能特性研究

以山毛豆种子为原料,研究其蛋白质组成及其功能特性。结果表明,脱脂山毛豆粉的总蛋白质量分数为47.11%,其中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的质量分数分别为64.04%、8.83%、11.06%和14.50%,另有1.57%的难溶复合蛋白。清蛋白和谷蛋白在pH4和球蛋白和醇溶蛋白在pH5溶解性、起泡性、乳化性均差,而泡沫稳定性和乳化稳定性较好。各蛋白组分的持水持油性均较好。在pH5或pH4的条件下,清蛋白和球蛋白的溶解性、起泡性和乳化性较好,其余蛋白组分相对较差。与大豆蛋白相比,山毛豆主要蛋白清蛋白有较好的溶解度、持水持油性、起泡性、泡沫稳定性、乳化性及乳化稳定性。     

油牡丹籽粕蛋白质提取工艺优化及其抗氧化活性研究

以经超临界CO2萃取提油后的油牡丹籽粕为原料，研究油牡丹籽粕蛋白质提取工艺、氨基酸组成和抗氧化活性。通过Osborne分级法分离出四种蛋白质，并对清蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白及球蛋白提取工艺进行初步优化，采用响应面法分析油牡丹籽粕主要蛋白质清蛋白最佳提取条件，分析四种蛋白质的氨基酸组成。在此基础上，通过DPPH及ABTS自由基清除率评价四种蛋白的抗氧化效果。研究结果表明：油牡丹籽粕清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白的最佳提取条件为粉碎度100目，提取温度依次为45、40、50、30℃，提取时间依次为86、100、100、60 min，清蛋白提取率为47.02%。此外，四种蛋白质均为完全蛋白质具有较强的DPPH自由基清除能力及ABTS自由基清除率能力。油牡丹籽粕蛋白是优质蛋白质资源，本研究为油牡丹籽粕综合利用奠定理论基础。     

IN VITRO DIGESTIBILITY OF CHINESE TARTARY BUCKWHEAT PROTEIN FRACTIONS: THE MICROSTRUCTURE AND MOLECULAR WEIGHT DISTRIBUTION OF THEIR HYDROLYSATES

Our previous study showed that in vitro pepsin digestibility of Chinese tartary buckwheat protein was relatively low compared to those of other edible seeds. In vitro pepsin digestibilities of four protein fractions of tartary buckwheat, microstructure and molecular weight (MW) distributions of hydrolysates were investigated. In vitro pepsin digestion assay showed that the digestibilities of tartary buckwheat protein fractions were albumin (81.20%), globulin (79.56%), prolamin (66.99%) and glutelin (58.09%). Scanning electron microscopy showed that albumin and globulin fractions were digested by pitting from the outer surface to the inner part and were more digestible, while prolamin and glutelin fractions resisted digestion because only the outer surfaces of their protein bodies were digested and the interior was protected. MW distribution of the hydrolysates from the four protein fractions was determined by high‐performance liquid chromatography. The hydrolysates of albumin mainly consisted of polypeptides with lower MW. The hydrolysates of glutelin had larger polypeptides together with small and medium‐sized peptide fractions.     

苦荞蛋白质的低消化性研究Ⅰ——热处理、还原二硫键及添加芦丁对其体外消化率的影响

采用Osborne分级分离的方法从苦荞粉中制备得到清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白。体外消化率测定结果表明,四种蛋白组分的消化率均低于对照-小麦胚分离蛋白和大豆分离蛋白,并且四种组分的体外消化率也存在不同程度的差别:清蛋白最高,谷蛋白最低。热处理可以明显提高苦荞粉四种蛋白组分的体外消化率。添加芦丁不但没有降低四种蛋白组分的体外消化率,反而均有一定程度的提高。二硫键的破坏,除醇溶蛋白得以提高之外,对于其它三种组分只是提高了初始水解速度,最终体外消化率没有明显提高。体外消化实验后,四种蛋白组分所剩的残渣蛋白SDS-PAGE分析结果表明:这些残渣蛋白的谱带存在相似之处:在20kDa处有一条很窄的谱带,在14～10kDa处的谱带较宽。     

Effect of heat,rutin and disulfide bond reduction on in vitro pepsin digestibility of Chinese tartary buckwheat protein fractions

Protein fractions (albumin, globulin, prolamin and glutelin) were extracted from defatted tartary buckwheat flour. The in vitro pepsin digestibilities of the four protein fractions were different, and albumin was more susceptible to pepsin hydrolysis. The native structure of the four protein fractions may be destroyed by heat treatment, and the digestibilities were all improved significantly (P < 0.05). Adding rutin to the digestion mixture of the four fractions did not cause a decrease in pepsin digestibility, although it did cause a significant increase in certain instances (P < 0.05). Treatment with β-mercaptoethanol (2-ME) only caused a higher initial proteolysis rate and did not increase the final digestibility distinctly except for prolamin. After pepsin digestion, the remaining proteins of unhydrolyzed albumin, globulin, prolamin and glutelin (untreated) shared some similarities. They also exhibited a minor band at 20,000 Da and a broad band at 10,000–14,000 Da.     

荞麦籽粒谷蛋白亚基结构研究初探

通过对陕北苦荞、陕北甜荞以及小麦小偃6号和小麦面粉Meneba的比较分析,认为荞麦面粉的蛋白质含量低于小麦;荞麦面粉富含清蛋白,醇溶蛋白的含量极低,谷蛋白含量低于小麦品种和面粉,残渣蛋白的含量极高。荞麦籽粒谷蛋白亚基分子量较小,高分子谷蛋白的亚基数量和含量远小于小麦。     

苦荞蛋白对高血脂症小鼠降血脂及抗氧化功能研究

利用高脂饲料诱导小鼠高脂血症模型,对苦荞蛋白各组分进行体内降血脂及抗氧化功能研究。结果表明,苦荞蛋白各组分均具有不同程度的降血脂及体内抗氧化功能,其中清蛋白最强,球蛋白次之,谷蛋白最弱。与高脂模型组相比,苦荞清蛋白高、低剂量组和球蛋白高剂量组,均显著降低高脂血症小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇含量(LDL-C) (P ＜ 0.05),显著提高高密度脂蛋白胆固醇含量(HDL-C) (P ＜ 0.05),有降血脂作用;同时清蛋白高低剂量组能显著降低高脂血症小鼠血清和肝脏脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量(P ＜ 0.05),显著增强血清和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P ＜ 0.05)。     

美藤果蛋白的分级提取、理化性质鉴定及抗氧化活性研究

为了探究美藤果分级蛋白的理化性质和抗氧化活性,以榨油后的美藤果粕为原料,采用超临界萃取法去除残留油脂,并用Osborne法进行美藤果粕分级蛋白的提取。结果显示,4种美藤果分级蛋白的氨基酸组成不同,美藤果清蛋白的营养价值最高。4种分级蛋白在不同pH值下的溶解度变化结果显示,4种分级蛋白的等电点大小为球蛋白(pH11)>醇溶蛋白(pH5)>谷蛋白(pH3,pH4)>清蛋白(pH2)。傅里叶红外光谱(FT-IR)分析结果证明清蛋白二级结构的稳定性最好,谷蛋白最差。差示扫描量热法(DSC)结果显示,醇溶蛋白的热稳定性最好,清蛋白的热稳定性最差。综合DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率和还原力的试验结果,4种分级蛋白中,清蛋白的抗氧化活性最好,优于其他3种分级蛋白。     

Fractionation and characterization of tartary buckwheat flour proteins

Protein fractions (albumin, globulin, prolamin and glutelin) were extracted from defatted tartary buckwheat flour. Albumin was the predominant protein fraction (43.8%) followed by glutelin (14.6%), prolamin (10.5%), and globulin (7.82%). Albumin was relatively rich in histidine, threonine, valine, phenylalanine, isoleucine, leucine and lysine. Globulin had high levels of methionine and lysine. Prolamin was high in histidine, threonine, valine, isoleucine, and leucine. Glutelin was rich in histidine, threonine, valine, isoleucine, and leucine. SDS–PAGE analysis, under non-reductive and reductive conditions, showed that disulfide bonds existed in the four fractions. Non-reduced albumin showed major bands at 64, 57, 41, and 38 kDa, and globulin at 57, 28, 23, 19 and 15 kDa. Reduced albumin and globulin shared two common bands at 41 and 38 kDa. Reduced prolamin showed major bands at 29, 26, 17 and 15 kDa. In vitro pepsin digestibility of the four fractions (from high to low) was: albumin > globulin > prolamin and glutelin.     

冠突散囊菌不同发酵条件对苦荞蛋白质的影响

利用冠突散囊菌（Eurotium cirstatum）固态发酵苦荞,探讨发酵时间、物料厚度、发酵温度、固液比对苦荞蛋白含量、蛋白酶活性及抗氧化能力的影响。结果表明,当发酵时间为4 d、物料厚度为1.0 cm、温度在24 ℃、固液比为1∶0.6（g∶mL）时,苦荞总蛋白含量达到最高,其中苦荞清蛋白含量在发酵时间4 d、物料厚度1.0 cm、发酵温度32 ℃、固液比1∶0.4（g∶mL）时比未发酵高;苦荞球蛋白含量在发酵时间6 d、物料厚度2.0 cm、发酵温度28 ℃、固液比1∶0.6（g∶mL）时比未发酵高;苦荞醇蛋白在发酵时间8 d、物料厚度2.5 cm、发酵温度30 ℃、固液比1∶0.8（g∶mL）时比未发酵高;苦荞谷蛋白在发酵期间没有明显变化,蛋白酶活性影响着苦荞总蛋白的含量。苦荞经发酵后其体外抗氧化能力高于未发酵苦荞。     

燕麦麸蛋白的组成及功能性质研究

以燕麦麸为原料制备了燕麦麸浓缩蛋白（OBPC）。同时，也按照Osborne蛋白分级提取方法对燕麦麸蛋白进行了精细的分类，分别得到了燕麦麸清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白。球蛋白和谷蛋白是燕麦麸蛋白的主要组分。清蛋白提取液中含有高含量的可溶性碳水化合物，可以通过（NH4）2S04分级沉淀的方法将其纯度由6．5％提高到67．2％。SDS-PAGE的结果表明OBPC及各蛋白组分有不同的分子组成。OBPC及各蛋白组分的功能性质，包括溶解性、持水持油性、乳化活性、泡沫性质也分别进行了测定，以评价燕麦蛋白作为一种潜在的配料在食品中的应用价值。     

Extractability and Chromatographic Characterization of Wheat (Triticum aestivum L.) Bran Protein

About 70% of the protein for human consumption is derived from plants, with cereals as the most important source. Wheat bran protein has a more balanced amino acid profile than that of flour. We here for the first time report the amino acid, size exclusion, and SDS‐PAGE profiles of bran Osborne protein fractions (OPFs). Moreover, we also investigated how OPFs are affected when physical barriers which entrap proteins in bran tissues are removed. Albumin/globulin is the most abundant OPF. It is richer in lysine and asparagine/aspartic acid than other OPF. Most bran albumin/globulin proteins have a molecular weight (MW) lower than 30 k and their chromatographic profiles differ from those of flour. The prolamin has high levels of proline and glutamine/glutamic acid. It is rich in proteins with a MW of 30 to 45 k and about 66 k reflecting contamination with gliadin from endosperm. The glutelin has high levels of glycine, proline, and glutamine/glutamic acid. Its protein is of intermediate and high MW with little protein with MW lower than 30 k. The high (MWs from 80 to 120 k) and low (MW around 45 k) MW glutenin subunits of flour are also present in bran. The glutelin of wheat endosperm is named glutenin. Ball milling releases albumin/globulin and glutelin but not prolamin. Not all glutelin was endosperm glutenin as a substantial part was entrapped in the aleurone cells.