甲状腺乳头状癌中BRAF V600E突变及其与甲状腺超声表现的关系

目的:探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中BRAF V600E突变及其与甲状腺超声表现的关系。方法:采用PCR反应扩增及DNA直接测序法检测34例PTC患者手术切除的新鲜甲状腺组织及其癌旁组织的BRAF V600E突变情况,比较PTC发生和未发生BRAF V600E突变患者的甲状腺超声检查影像。结果:34例PTC癌组织标本中有18例发生BRAF V600E突变,16例未发生突变;34例PTC癌旁组织标本均未检测到BRAF V600E突变。PTC BRAF V600E突变患者与未发生突变患者甲状腺超声检查的癌块大小、边界是否清楚及有无钙化差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:PTC中BRAFV600E突变率较高;BRAF V600E突变与甲状腺超声表现无明显关系。甲状腺超声表现不能预测PTC中BRAF V600E突变的存在。     

甲状腺乳头状癌并BRAFV600E突变及原癌基因重排蛋白表达与其侵袭性的关系

目的探讨BRAFV600E突变及原癌基因重排(RET)蛋白表达并存与甲状腺乳头状癌(PTC)侵袭性的关系。方法收集50例PTC患者术后病理,分别用RT-PCR检测BRAFV600E突变,免疫组织化学SP法检测RET表达情况。分析BRAFV600E突变合并RET表达组(n=24)和BRAFV600E单突变或RET单表达组(n=19)的临床及病理特征。结果 BRAFV600E突变率、RET表达率分别为76%(38/50)、56%(28/50),存在BRAFV600E突变合并RET表达者占48%(24/50)。与BRAFV600E突变合并RET表达组比较,BRAFV600E单突变或RET单表达组肿瘤组织分化程度差,且甲状腺癌评分系统评分较高(P=0.011,P=0.022)。结论 BRAFV600E突变并存RET表达时提示PTC肿瘤组织分化差、更易出现实体亚型等侵袭性较高的病理亚型,有可能增加肿瘤相关死亡风险。     

BRAF基因突变与甲状腺乳头状癌淋巴结转移相关性的研究

目的 探讨甲状腺乳头状癌(PTC)中BRAFV600E突变与淋巴结转移之间的相关性.方法 采用PCR直接测序法检测65例PTC患者肿瘤细胞DNA中BRAFV600E点突变,分析其与淋巴结转移的相关性.结果 BRAFV600E点突变在PTC中的发生率为61.5%(40/65),其中40例BRAFV600E突变的PTC中有14例淋巴结转移,而未突变的25例患者中有淋巴结转移者10例,BRAFV600E点突变与淋巴结转移无相关性(P=0.7932).结论 BRAFV600E可能参与PTC的发生,但与PTC淋巴结转移无相关性.     

基于ARMS技术检测不同标本类型BRAF基因状态与甲状腺乳头状癌的相关性探讨*

目的：探讨扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutation system, ARMS)技术检测同一患者不同标本类型BRAFV600E的突变状态并研究其突变差异性。方法：采用ARMS技术对132例甲状腺细针穿刺细胞学(fine-needle aspiration cytology, FNAC)标本和手术组织学标本进行BRAFV600E基因突变检测,分析不同标本类型及不同程度病变组织中BRAFV600E的突变差异性;同时探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)临床病理参数和BRAFV600E突变的相关性。结果：在细胞学方面,BRAFV600E基因突变率在FNAC明确诊断PTC中为95.56%,FNAC不能明确PTC中为17.24%;在组织学方面,68例PTC中BRAFV600E的突变率为85.29%,64例良性组织BRAFV600E未发现突变。另外,BRAFV600E突变与PTC临床病理参数,如性别、年龄、肿瘤大小、病灶数目、双侧病灶、是否有腺外侵犯及淋巴结转移等因素均无关(均P>0.05)。结论：基于ARMS法检测BRAFV600E基因状态是PTC非常重要的鉴别诊断指标,BRAFV600E与FNAC标本联合运用有效提高了PTC的术前诊断率,具有较高的灵敏度和特异性,但与PTC临床病理参数无关。     

甲状腺乳头状癌BRAF~(V600E)突变表达及其与临床病理特征的相关性研究

目的:检测BRAFV600E突变在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达,分析BRAFV600E突变与PTC临床病理特征的关系,为临床预测局部转移及治疗提供有效的途径。方法:选取2003年1月~2005年8月于中山大学附属第一医院行手术切除的PTC石蜡包埋切片140例,提取石蜡切片的DNA采用Taqman荧光定量PCR检测方法检测BRAFV600E突变表达,与文献已知的PTC细胞WRO和KAT-5细胞中提取的DNA作为对照。对其中120例进行96.3~120.1个月随访。结果:140例PTC中,BRAFV600E突变率为53.6%。BRAFV600E突变与患者的性别、年龄、肿瘤大小和腺外浸润无相关,与甲状腺癌的淋巴结转移和临床分期显著相关,差异有统计学意义(P<0.01)。在120例随访病例中,发现BRAFV600E阳性的病例有较高的复发、死亡率。结论:BRAFV600E突变率与PTC的淋巴结转移和临床分期具有一定的相关性;BRAFV600E突变在临床上可以成为预测局部转移及治疗的新途径。     

BRAF基因突变检测在甲状腺乳头状病变中的临床意义

目的探讨BRAF基因在甲状腺乳头状病变中的突变情况及临床意义。方法提取石蜡肿瘤组织中DNA,采用直接测序法分析24例甲状腺乳头状癌和30例甲状腺不典型乳头状腺瘤石蜡组织中BRAF基因突变的情况。结合临床资料进一步分析。结果 24例甲状腺乳头状癌,16例发现BRAF基因15外显子第600位密码子A/T杂合（V600E）,突变率为66.7%（16/24）。而30例甲状腺不典型腺瘤中未发现V600E病理性突变（0/30）。结论 BRAF V600E位点突变仅见于甲状腺乳头状癌,具有一定的特异性,可以用于帮助临床甲状腺乳头状增生良恶性的鉴别。     

甲状腺乳头状癌BRAFV600E基因突变的研究

目的研究甲状腺乳头状癌（PTC）BRAFV600E基因的突变情况,分析突变与临床特点之间的关系。方法提取42例甲状腺乳头状癌石蜡标本DNA,对BRAF基因第15外显子进行聚合酶链反应（PCR）,产物进行直接基因测序。结果在42例PTC中,检测到19例存在BRAFV600E突变。突变患者组的年龄更轻,而突变组与无突变组间肿瘤大小、是否多灶性、包膜浸润、淋巴结转移、肿瘤分期和组织亚型差异均没有统计学意义。结论BRAF基因突变可能与甲状腺乳头状癌的发生有关。     

甲状腺乳头状癌钠碘转运体表达与BRAFV600E突变的相关性研究

目的 探究甲状腺乳头状癌(PTC)中常见的遗传学事件BRAFV600E突变与钠碘转运体(NIS)表达的关系。 方法 选取104例行手术治疗的PTC病人为观察对象,留取术中新鲜PTC组织和癌旁正常组织标本,通过荧光定量PCR法检测NISmRNA含量,石蜡包块行免疫组织化学检测NIS蛋白表达,同时行BRAFV600E突变基因检测。 结果 104例PTC组织中BRAFV600E基因突变型共70例(67.3%),高于癌旁正常组织0例(P < 0.01);PTC组织中NISmRNA的表达浓度低于癌旁正常组织(P < 0.01),但NIS蛋白表达强度则高于癌旁正常组织(P < 0.01);PTC组织中NISmRNA表达下调同时NIS蛋白表达上调的比例高于癌旁正常组织(P < 0.01);PTC BRAFV600E基因突变病人NISmRNA表达浓度低于野生型病人(P < 0.01),但NIS蛋白比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 BRAFV600E基因突变仅存在于癌组织中,可能与癌组织中NISmRNA低表达及NIS蛋白高表达具有相关性,且推测PTC中NIS蛋白可能是主要表达于细胞质中,影响其正常运输功能而导致病人无法聚碘。     

甲状腺乳头状癌BRAF基因突变与临床病理特征间的关系及临床意义

目的 探讨中国甲状腺乳头状癌患者鼠类肉瘤滤过性毒菌(v-Raf)致癌同源体B1(BRAF)基因V600E点突变与其临床病理特征之间的关系及对临床的指导意义。 方法 采用多重突变等位基因PCR方法检测187例甲状腺乳头状癌石蜡包埋组织BRAF基因V600E点突变。利用BRAF基因V600E突变型甲状腺乳头状癌细胞系K1和BRAF基因野生型甲状腺乳头状癌细胞系RO82-W-1进行灵敏度检测。 结果 多重突变等位基因PCR方法可检测最低达1%含量的BRAF基因V600E突变。甲状腺乳头状癌样本检测发现BRAF基因V600E突变率为63.64%(119/187),在甲状腺良性病变中均未检测到BRAF基因V600E突变。单因素分析显示,BRAF基因V600E突变与甲状腺乳头状癌患者年龄(≥ 45岁)、肿瘤分期和预后有关(P<0.05);BRAF基因V600E突变在仅有中央区淋巴结转移组(49.32%)与中央区及颈侧区均有转移组(75.34%)的分布差异具有统计学意义(P<0.05);多因素回归分析显示,BRAF基因V600E突变(OR=2.471,95%CI:1.149~5.312)和颈淋巴结转移(OR=0.333,95%CI:0.114~0.973)是肿瘤远处转移/复发的独立因素(P<0.05)。 结论 BRAF基因V600E突变与甲状腺乳头状癌发生年龄、肿瘤分期相关,是判断甲状腺乳头状癌预后的独立因素。     

超声引导下细针穿刺细胞学检查联合BRAFV600E基因检测诊断甲状腺癌的临床价值

目的探讨超声引导下的细针穿刺（FNA）细胞学检查联合BRAFV600E基因检测在甲状腺癌诊断的临床价值。方法回顾2021年1至12月金华市中心医院诊断为甲状腺结节并选择手术治疗的121例患者临床资料，均接受超声引导下的甲状腺FNA检查和BRAFV600E基因检测；记录FNA、BRAFV600E基因检测和术后病理检查结果。分析甲状腺癌患者的临床病理特征以及FNA联合BRAFV600E基因突变检测对诊断甲状腺癌的临床价值。结果121例手术治疗的甲状腺结节患者有117例术后确诊为甲状腺乳头状癌，其中甲状腺微小乳头状癌（PTMC）105例（89.7%）；甲状腺乳头状癌直径＞1cm时，更易发生多发结节（P＜0.05）。FNA联合BRAFV600E基因检测能提高PTC诊断的灵敏度（0.957比0.727，P＜0.01）。结论FNA联合BRAFV600E基因检测能提高诊断PTC的灵敏度，但鉴于PTMC的高检出率，因此临床应用中应考虑是否存在过度诊断。     

甲状腺乳头状癌特异性肿瘤标志物的临床应用

目的：探讨CK19、Galectin– 3、BRAFV600E基因、P53、TopoII、Ki-67、CyclinD1和HBME-1 在甲状腺乳头状癌（PTC）病理诊断中的临床应用价值方法：采用PCR和免疫组化EnVision法检测上述8种标志物在100例PTC和40例甲状腺良性病变中的表达情况结果：PTC组织中CK19、BRAFV600E基因、Galectin– 3、和HBME-1阳性表达率（97%、75%、98%、66%）显著高于甲状腺良性组织（45%、13%、25%、25%）,差异具有统计学意义（P<0.05）,8种标志物单独用于PTC的诊断时CK19、Galectin– 3的灵敏度最高（分别为97%、98%）,Galectin– 3的准确度最高（92.2%）,P53特异性最高（95%）,多种标志物联合应用时,CK19、Galectin– 3、HBME-1三项标志物联合应用作为PTC的诊断标准时准确度最高,高达到97%。结论：CK19、BRAFV600E基因、Galectin– 3、和HBME-1是诊断PTC的重要标志物,这些标志物联合应用有助于对形态不典型PTC与甲状腺良性病变进行鉴别诊断。     

BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移的关系

目的分析BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌（PTC）中央区淋巴结（CLN）转移的关系,探讨CLN转移的危险因素。方法检测104例PTC病例BRAFV600E基因突变情况,分析该突变与PTC临床病理特征、超声特征的关系,单因素及多因素分析CLN转移的危险因素。结果BRAFV600E基因突变与肿瘤最大径、肿瘤钙化、被膜外侵犯及CLN转移相关（P < 0.01）,BRAFV600E基因突变和被膜外侵犯是CLN转移的独立因素（P < 0.01）。结论BRAFV600E基因突变可为PTC手术CLN清扫提供基因依据。     

中国期刊全文数据库节点文献BRAF^V600E基因突变及p27蛋白表达与甲状腺乳头状癌颈淋巴结转移的关系

目的：研究甲状腺乳头状癌（PTC）中BRAFV600E基因突变及p27蛋白表达并评估在PTC颈淋巴结转移危险因素中的意义。方法：采用PCR-SSCP、DNA序列分析、免疫组化等技术,检测83例PTC标本中BRAFV600E基因突变和p27蛋白染色状况。结果：单因素结果提示PTC颈淋巴结转移情况在年龄、临床分期、BRAFV600E基因突变和p27蛋白表达的差异上有统计学意义（P〈0.05）。而在性别、原发肿瘤直径和病灶单双叶的差异则无明显意义（P〉0.05）。多因素分析结果提示年龄（P=0.009）、BRAFV600E基因突变（P=0.031）和p27蛋白表达（P〈0.001）作为评估甲状腺乳头状癌颈淋巴结转移危险因素上的差异有显著性。结论：BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌的发生发展密切相关,BRAFV600E基因突变及p27蛋白低表达可以作为评估PTC颈淋巴结转移的危险因素。     

甲状腺结节细针穿刺标本中BRAFV600E突变的临床意义

目的探讨BRAFV600E突变率在甲状腺结节术前诊断中的意义及其可行性。方法选择2012-01-2013-01行细针穿刺术（FNA）的甲状腺结节患者337例,根据细胞学诊断分为Thy1、Thy2、Thy4和Thy5组,分别检测FNA标本的BRAFV600E突变。结果 Thy5组BRAFV600E突变率为22.2%;甲状腺结节的不同病理类型及BRAF突变率与桥本甲状腺炎（HT）无相关性（均P＞0.05）;与Thy2组比,Thy5组TSH水平较高[（2.83±2.11 vs 1.95±1.29）mU/L,t=2.251,P＜0.05]。结论检测甲状腺结节FNA标本的BRAFV600E突变简便、可行;对一部分因取材不满意标本可提供补充诊断;BRAF突变与HT可能无关。     

超声结合BRAFV600E基因突变检测在桥本甲状腺炎合并甲状腺结节鉴别中的应用价值

目的 采用超声、BRAFV600E基因突变检测桥本甲状腺炎合并甲状腺结节,探讨两者联合检测对桥本甲状腺炎合并甲状腺结节良恶性的诊断价值。方法 选取2017年9月—2019年10月在惠州市中心人民医院就诊的桥本甲状腺炎合并甲状腺结节患者329例为研究对象,根据病理确诊甲状腺结节良恶性分为恶性组（177例）和良性组（152例）。采用超声、BRAFV600E基因突变检测桥本甲状腺炎合并甲状腺结节情况,并分析超声、BRAFV600E基因突变及两者联合检测对桥本甲状腺炎合并甲状腺结节良恶性的诊断价值。结果 金标准、超声、BRAFV600E基因突变诊断甲状腺炎合并甲状腺结节恶性分别为177例、167例、163例,良性分别为152例、162例、166例。超声、BRAFV600E基因突变、两者联合检测桥本甲状腺炎合并甲状腺结节恶性的敏感性分别为72.31%、65.54%和85.31%,特异性分别为74.34%、69.08%和71.71%,准确度分别为73.25%、67.17%和79.03%。与超声比较,两者联合诊断敏感性较高（P <0.0125）,BRAFV600E基因突变诊断准确度较低（P <0.0125）;与BRAFV600E基因突变比较,两者联合诊断敏感性、准确度较高（P <0.0125）。结论 超声、BRAFV600E基因突变均对桥本甲状腺炎合并甲状腺结节良恶性具有一定诊断价值,单两者联合优于单独诊断。     

Predictive Value of BRAF<Superscript>V600E</Superscript> Mutation for Lymph Node Metastasis in Papillary Thyroid Cancer: A Meta-analysis

BRAF^V600E mutation has been thought to be a valuable molecular marker that may predict a worse prognosis for papillary thyroid cancer (PTC). But whether BRAF^V600E mutation is associated with lymph node metastasis (LNM) remains controversial. Different surgical strategies may bring a bias in demonsstrating the association between them. In order to delineate a risk stratification to guide a tailored initial approach to tumors that express BRAF^V600E mutation, we performed this meta-analysis by using the articles in which total or near-total thyroidectomy plus bilateral central lymph node dissection was routinely performed to avoid the bias from the surgical strategy. We searched the Medline, Embase and CNKI database for eligible studies from January 2003 to May 2018. Meta-analysis was performed using the STATA 12.0 software. Odds ratios (ORs) and 95% confidence intervals (CIs) were calculated under fixed-effects or randomeffects models. Fifteen clinical studies were included with a total of 4909 PTC patients. Our meta-analysis results reported that BRAFV600E mutation was associated with LNM (OR=1.34; 95% CI: 1.09–1.65; P=0.005), as well as central LNM (OR=1.59; 95% CI: 1.35–1.88; P<0.00001). Moreover, in patients with papillary thyroid microcarcinoma, we also confirmed the predictive value of BRAF^V600E mutation for LNM (OR=3.49; 95% CI: 2.02–6.02; P<0.00001). This meta-analysis demonstrates that BRAF^V600E mutation is closely related to LNM in PTC patients. The results suggest that BRAF^V600E mutation can be considered as a risk factor for LNM in PTC. Moreover, combining BRAF^V600E mutation with other risk factors to determine the initial surgical treatment may bring benefits for PTC patients.     

BRAFV600E突变对甲状腺乳头状癌HMGB1表达的影响

目的 近年来甲状腺乳头状癌(PTC)的发病率逐渐升高,发生复发和转移的患者也在增多。本文意在探索在PTC中BRAFV600E突变对高迁移率族蛋白(HMGB1)表达的影响,寻求BRAF基因影响PTC发展及预后的机制,指导临床进行精准治疗。 方法 收集2015年9—12月青岛大学附属医院收治的44例PTC患者的术前血清及术后新鲜病理组织,组织提取DNA进行基因测序。根据有无BRAFV600E突变将患者分为BRAF突变阳性组和BRAF突变阴性组,运用免疫组化和Western blot检测组织中HMGB1蛋白的分布和含量;荧光定量PCR检测组织中HMGB1 mRNA的水平;应用ELISA法检测血清中HMGB1蛋白的水平。Western blot数据应用Image J软件计算灰度值,采用相对定量法计算荧光定量PCR数据,用2-△Ct进行分析,应用ELISA Calc回归/拟合计算程序计算血清中的HMGB1蛋白浓度。所得数据均采用SPSS 20.0进行统计分析。Western blot、荧光定量PCR和ELISA数据分别用χ2检验、Mann-Whitney-Wilcoxon test和独立样本t检验的方法进行统计学处理。淋巴结转移和腺体外浸润与BRAFV600E突变发生的关系采用χ2检验进行统计分析。 结果 在PTC组织中,HMGB1蛋白主要定位于胞浆,BRAFV600E突变阳性组HMGB1的转录水平及蛋白水平均低于BRAFV600E突变阴性组(Z=2.117,P<0.01;χ2=19.989,P<0.05),而这种变化在外周血中并未呈现(t=1.135,P>0.05)。BRAFV600E突变增加淋巴结转移和腺体外浸润的风险(χ2=6.117,P<0.05;χ2=5.587,P<0.05)。发生淋巴结转移PTC中的HMGB1 mRNA和蛋白的表达量均低于无淋巴结转移PTC (Z=-2.216,P<0.05;t=-2.217,P<0.05),发生腺体外浸润的PTC也呈现此种趋势(Z=-2.267,P<0.05;t=-3.885,P<0.01)。 结论 在PTC中,BRAFV600E突变可能通过下调HMGB1的表达加速肿瘤的恶性发展。      

弹性成像对甲状腺微小癌的诊断价值

目的：探讨高频超声结合弹性成像对甲状腺微小癌的诊断价值。方法：收集2015年1月至2018年1月温州市中心医院经细针穿刺活检或手术治疗的甲状腺微小癌患者68例,回顾性分析高频超声特征、弹性成像评分及应变率比值并进行定性诊断,将其与手术或细针穿刺结果进行对比。结果：68例患者共87个结节,高频超声结合弹性成像诊断良性微小结节55个,甲状腺微小癌32个;手术或细针穿刺结果诊断良性微小结节59个,甲状腺微小癌28个。高频超声结合弹性成像评分诊断甲状腺微小癌的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值分别为89.2%、89.8%、89.7%、80.6%和89.8%;ROC曲线结果显示,弹性应变率比值的最佳截断值为2.98,其诊断甲状腺微小癌的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值分别为82.1%、84.7%、83.9%、71.8%和90.1%。结论：高频超声是微小甲状腺癌评估的基础,结合弹性成像可以提高对微小甲状腺癌的诊断价值。