日粮精粗比对山羊瘤胃内微生物蛋白微循环的影响

 【目的】以4只装有瘤胃瘘管的山羊为试验动物,研究不同精粗比日粮对山羊瘤胃微生态中原虫和细菌区系以及微生物蛋白微循环的影响规律。【方法】试验设精（玉米-豆饼）粗（稻草）比分别为10﹕90、30﹕70、50﹕50和70﹕30的4种日粮（A、B、C、D）,采用4×4拉丁方设计进行饲喂试验,采用荧光染色细菌技术测定瘤胃原虫对细菌的吞噬速率。【结果】日粮精粗比显著影响微生物细胞的密度。原虫密度C组最高;细菌和原虫的密度A组最低;日粮精粗比显著影响原虫吞噬的速率,A、B、C、D 4组的吞噬速率分别为：429.5、366.74、389.48、402.2 cells?cell-1?h-1,换算为对细菌N的吞噬速率分别为：2.319、1.98、2.103、2.172 pg N?cell-1?h-1。【结论】每天每头羊由于原虫的吞噬而造成的细菌N的循环损失估算分别为：136.49;369.02;485.99;440.56 mgN/（d?头）,即菌体蛋白损失为0.853、2.306、3.370和2.754 g/（d?头）,其中以C组菌体蛋白循环损失量最大,细菌周转率最高（3.07%）。     

体外法研究不同油脂对瘤胃原虫吞噬细菌微循环的影响

【目的】研究体外培养条件下,不同油脂对瘤胃原虫吞噬细菌微循环及微生物群体的影响。【方法】3头瘤胃瘘管山羊提供瘤胃液,分别以菜籽油(A)、豆油(B)、玉米油(C)和花生油(D)为底物培养瘤胃微生物,同时设空白对照组,培养10h时用荧光标记瘤胃细菌法进行原虫吞噬细菌试验。【结果】原虫密度以对照组最高,显著高于A、B、C组(P0.05);细菌密度以B组最高,为4.906×109cells·mL-1,显著高于对照组(P0.05);原虫蛋白在组间差异不显著(P0.05),细菌蛋白组以B组最高,B、C、D均高于对照组(P0.05)。各组原虫的吞噬速率分别为:267.6(对照组)、196.2(A组)、244.4(B组)、274.4(C组)、285.4(D组)cells/(cell·h),组间差异显著(P0.05)。吞噬细菌N的速率分别为1.445、1.059、0.320、1.482、1.541pgN·(cell·h)-1。【结论】估算每天每头山羊细菌蛋白循环量分别为121.64(对照组)、56.64(A组)、78.39(B组)、87.04(C组)和95.06(D组)mg蛋白·(d·头)-1,B组较低,仅为对照组的64.45%,且该组微生物量最大。在本试验的基础上认为4%的豆油对微循环的调控效应最好。     

青蒿素对山羊瘤胃发酵和微生物氮素微循环的影响

【目的】青蒿素是天然青蒿属植物的提取物,它很早就在中国传统中药中被用作抗疟疾、抗肿瘤和驱虫等药物。为探讨青蒿素对反刍动物瘤胃发酵、瘤胃内环境及其瘤胃微生物蛋白质循环的影响,确定青蒿素的对瘤胃发酵调控的效果和适宜添加量,为青蒿素作为一种新的瘤胃调控剂在反刍动物生产中应用提供依据。【方法】采用4只带有瘤胃瘘管的徐淮白山羊为试验动物,饲喂以玉米、豆粕和羊草为主组成的基础日粮,在基础日粮中分别添加占日粮干物质0,0.2%,0.4%和0.6%的青蒿素,进行4×4拉丁方设计试验,研究对山羊瘤胃发酵参数、瘤胃微生物种群变化;采用DTAF荧光染料标记细菌（FLB）的一种新方法测定瘤胃原虫吞噬细菌速率和吞噬量的影响。【结果】山羊瘤胃液中pH值平均值的范围在6.85-7.16,在瘤胃的正常范围内;青蒿素能够降低NH₃-N浓度,其中0.4%和0.6%两个处理组的瘤胃液中NH₃-N浓度与对照组差异显著。青蒿素能够提高乙酸、丙酸及、总挥发性脂肪酸（TVFA）的摩尔浓度及丙酸的摩尔浓度百分比,能降低乙酸/丙酸比,各添加组的乙酸/丙酸比显著或极显著低于对照组(P＜0.05);随着青蒿素添加量的增加,细菌蛋白产量增加,其中,以0.6%添加组最高,与对照组差异极显著(P＜0.01);0.4%和0.6%添加组的原虫蛋白产量极显著低于对照组(P＜0.01);青蒿素对瘤胃液肽浓度的均值没有显著影响。同时,添加青蒿素后,瘤胃中细菌总数增加而原虫总数减少,使瘤胃原虫种属结构变化。添加青蒿素能显著影响原虫对细菌的吞噬速率,对照组和添加0.2%,0.4%和0.6%青蒿素处理组的吞噬速率分别为：320.11cells/（cell h）、313.94cells/（cell h）、305.00cells/（cell h）、278.14cells/（cell h）。【结论】添加青蒿素能显著影响瘤胃发酵类型,具有降低瘤胃中氨态氮浓度的趋势;同时可显著降低瘤胃中原虫密度,增加了细菌密度,改变瘤胃中原虫的种属构成比例;使瘤胃内毛虫比例显著降低,使双毛虫和等毛虫比例显著提高。添加0.6%青蒿素能显著降低山羊瘤胃内菌体蛋白的微循环,使山羊瘤胃原虫吞噬速率和微生物氮循环量减少而提高饲料蛋白质的潜在利用效率。     

The Preliminary Report on Rumen Protozoa Grazing Rate on Bacteria with a Fluorescence-Labeled Technique

Studies on the bacterial predation rate by rumen protozoa were carried out under laboratory conditions using a technique of fluorescence-labeled bacteria （FLB）. Four Xuhuai goats were used in this experiment to obtain rumen protozoa and bacteria. Two groups were designed as follows： One group was the whole bacteria which were labeled using fluorescence through removing free bacteria from rumen fluid （WFLB）; the other group was the bacteria which were labeled using fluorescence without removing free bacteria from rumen fluid （FLB）. The result indicated that the bacterial predation rates of rumen protozoa was 398.4 cells/（cell h） for the group WFLB, 230.4 cells/（cell h） for the group FLB, when the corresponding values expressed as bacteria-N, they were 2.15 pg N/（cell h） for the group WFLB, and 1.24 pg N/（cell h） for the group FLB, respectively. Extrapolating the assimilation quantity of nitrogen by ciliates on bacteria of Xuhuai goat, there were 103.2 mg N/（d capita） for the group WFLB, and 59.5 mg N/（d capita） for the group FLB, respectively. It was estimated that protein losses due to microbial recycling were 0.645 g pro/（d capita） for the group WFLB and 0.372 g pro/（d capita） for the group FLB, respectively. In addition, the fluorescence-labeled technique would be a potential assay for the determination of bacterial predation rate by rumen protozoa.     

日粮添加豆油和胡麻油对肉牛瘤胃发酵及主要微生物数量的影响

 【目的】评价日粮添加植物油对瘤胃发酵和瘤胃微生物区系的影响。【方法】采用3×3拉丁方设计，用3头装有永久性瘤胃瘘管的杂交肉牛研究不添加油脂（对照组）、添加4％豆油（豆油组）或4％胡麻油（胡麻油组）对瘤胃pH值、NH3-N浓度、VFA以及瘤胃细菌和原虫的影响。3组日粮精粗比均为35﹕65，每期试验为21d，共3期。【结果】添加油脂对瘤胃内pH值没有影响(P＞0.05)；对照组和胡麻油组瘤胃NH3-N浓度显著高于豆油组(P＜0.05)；与对照组相比，豆油组和胡麻油组显著降低了瘤胃乙酸、丙酸、丁酸、总挥发性酸浓度以及总细菌、蛋白分解菌、纤维分解菌及原虫的数量(P＜0.05)，但对乙酸与丙酸比例以及淀粉分解菌数量两个指标组间无显著差异(P＞0.05)。对照组、豆油组和胡麻油组纤维分解菌和原虫的数量依次分别为6.79×108、5.71×108、5.92×108；10.67×104、7.11×104、9.56×104 CFU•ml-1；两个加油组显著降低了瘤胃纤维分解菌和原虫数(P＜0.05)。【结论】日粮添加4％豆油和胡麻油对瘤胃发酵及主要微生物都有一定的抑制效应，但二者抑制效应大小无显著差异。     

徐淮白山羊瘤胃细菌和原虫的类群结构研究

 【目的】研究以稻草为主的日粮条件下徐淮白山羊瘤胃细菌和原虫的类群结构。【方法】以4只安装瘤胃瘘管的徐淮山羊为试验动物,PCR扩增瘤胃细菌16S rDNA序列,利用分子克隆与测序分析、细胞计数等技术,解析瘤胃细菌和原虫群体的类群组成。【结果】获得的细菌克隆基本归为两簇：与瘤胃球菌R.bromii YE282相似性为95%的XHGR1、与瘤胃R-7菌相似性为98%的XHGR3,XHGR2位于另立的R. flavefaciens簇。瘤胃球菌属细菌占细菌克隆总数的比例较高（33.33%）,原虫生物量略低于细菌,占瘤胃生物总量的44.83%。群体主要有内毛属、双毛亚科、前毛属、头毛属和等毛科等原虫,其中内毛属原虫比例最高为74.25%。【结论】以稻草为主的日粮条件下,徐淮白山羊瘤胃中细菌和原虫生物量相近,瘤胃球菌属细菌和内毛属原虫分别是瘤胃细菌和原虫区系的优势类群。     

稻草补饲苜蓿对山羊瘤胃内蛋白微循环效率与增重的组合效应

在稻草基础日粮中分别补饲25%(处理MSL25)、50%(处理MSL50)与75%(处理MSL75)的苜蓿,研究了不同补饲处理对山羊瘤胃内蛋白微循环效率与增重的组合效应。结果表明:瘤胃原虫对细菌的吞噬量与吞噬速率总体上均随苜蓿补饲水平的增加而下降,但处理MSL50与MSL75间差异不显著;各处理的瘤胃原虫对细菌的吞噬量与吞噬速率均在吞噬时间60 min时达到最高值;不同处理的日增重和总增重均表现为:MSL25相似文献   

稻草补饲苜蓿对山羊瘤胃内蛋白微循环效率与增重的组合效应

在稻草基础日粮中分别补饲25%(处理MSL25)、50%(处理MSL50)与75%(处理MSL75)的苜蓿,研究了不同补饲处理对山羊瘤胃内蛋白微循环效率与增重的组合效应。结果表明:瘤胃原虫对细菌的吞噬量与吞噬速率总体上均随苜蓿补饲水平的增加而下降,但处理MSL50与MSL75间差异不显著;各处理的瘤胃原虫对细菌的吞噬量与吞噬速率均在吞噬时间60 min时达到最高值;不同处理的日增重和总增重均表现为:MSL25相似文献   

不同氮源日粮中添加烟酸对绵羊瘤胃发酵的影响

【目的】研究3种不同氮源日粮中添加烟酸对绵羊瘤胃发酵的影响,为生产实践提供理论依据。【方法】将9只装有永久性瘤胃瘘管的绵羊随机分为3组,每组3只,分别饲喂豆粕、麻饼和尿素-麻饼型基础日粮。通过体外培养法研究添加一定量烟酸后,3种不同氮源日粮在培养0,0.5,1,2,4,8,12,16,20,22h后,培养液中NH3-N和细菌N质量浓度、原虫数、总挥发性脂肪酸(VFA)及乙酸、丙酸浓度和乙酸/丙酸的变化情况。【结果】添加烟酸后,尿素-麻饼型日粮培养液中NH3-N和细菌N质量浓度和原虫数均高于豆粕型日粮,而豆粕型日粮又高于麻饼型日粮,差异显著性随培养时间而变化;尿素-麻饼型日粮NH3-N质量浓度在培养2h达最高,之后下降,在4h后趋于平稳,而细菌N质量浓度在培养0～12h有升高趋势,12～22h又降低,但差异均不显著(P0.05)。豆粕型日粮在培养2h内NH3-N质量浓度升高,之后下降,在培养4h达最低,4h后又缓慢升高;而细菌N质量浓度在0～8h升高,8～22h下降。麻饼型日粮在培养过程中,NH3-N和细菌N质量浓度差异均不显著(P0.05)。3种日粮培养液中原虫数均在培养后4h达最高值,之后有所下降。不同氮源日粮对总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸浓度及乙酸/丙酸的影响差异均不显著(P0.05)。【结论】添加烟酸后,尿素-麻饼型日粮NH3-N利用率较高,产生较多的细菌和原虫,饲喂效果优于其他2种日粮;麻饼型日粮饲喂效果最差。     

稻草与苜蓿组合对山羊瘤胃内蛋白微循环效率及增重的影响

将9只体况良好,体质量相近（41．3±1．2）kg,安装有永久性瘤胃瘘管的成都麻羊半同胞羯羊,随机分成3组,饲以稻草基础日粮,分别补饲25％（ MSL25）、50％（ MSL50）与75％（ MSL75）的苜蓿（ MSL）,在进行增重性能组合效应研究的同时,采集各组瘤胃液以获取瘤胃原虫和细菌,用4,6-二脒基-2-苯基吲哚（ DAPI）标记细菌的荧光强度,进行瘤胃原虫对细菌吞噬作用的组合效应研究。结果表明：1、瘤胃原虫对细菌的吞噬作用。瘤胃原虫的细菌吞噬量与吞噬速率,均随苜蓿补饲水平的增加而减少,当补饲水平达到50％时,趋于平稳。各补饲水平组的吞噬量在60 min达到饱和,此时吞噬量自高到低的排序为MSL25（381．91）＞MSL50（377．02）＞MSL50（376．47）,括号中的数字为吞噬量,单位为cells/cell。2、增重性能。①MSL25、MSL50与MSL75的日增重分别为19．14 g/d、40．40 g/d与49．26 g/d（ P＜0．05）;②MSL25、MSL50与MSL75单位增重所需的饲料分别为44．14、23．69与21．26,其中MSL50与MSL75的组间差异不显著（ P＞0．05）;③MSL25、MSL50与MSL75每公斤增重饲料成本分别为58．49元/kg、48．56元/kg与59．01元/kg,其中MSL25与MSL75的组间差异不显著（ P＞0．05）。本研究结论,山羊稻草基础日粮补饲50％的苜蓿可提高瘤胃内蛋白微循环效率,改善增重性能,降低饲料成本。     

特定氨基酸缺省底物对体外培养混合瘤胃微生物及其发酵的影响

 【目的】研究特定氨基酸在人工瘤胃体外培养条件下如何影响瘤胃微生物群系特征及其发酵。【方法】研究中以3只瘘管山羊作为瘤胃液供体,采用底物去除技术,底物设计分别为：全量必需氨基酸组（TEAA）,组氨酸、赖氨酸、蛋氨酸和支链氨基酸（BCAA）的缺省组。【结果】底物对培养液pH均值没有显著性影响,但各组pH值随时间的变化模式有所不同;培养液氨氮浓度较高,在10.99～30.51 mg/100 ml范围变动,各组氨氮浓度随时间的变化模式也有明显的不同;特定氨基酸缺省对微生物蛋白产量限制程度不同,以BCAA缺省对微生物蛋白产量的限制最大,相对于全量组混合微生物蛋白下降了44.52%。研究还发现底物对微生物区系也有一定的影响,原虫与细菌比值以赖氨酸缺省组最低（89.12%）,BCAA缺省组最高（127.60%）（P＜0.01）。另外,微生物的PCR-SSCP图谱显示微生物区系内的种属也因底物变化而发生了改变。【结论】底物氨基酸对瘤胃混合微生物群系及其发酵有一定的影响作用,支链氨基酸是瘤胃混合微生物生长所必需的氨基酸。     

不同碳水化合物结构日粮对山羊瘤胃发酵和 微生物氨基酸组成的影响

 【目的】研究日粮中不同碳水化合物结构对山羊瘤胃发酵和微生物氨基酸组成的影响,为回答“瘤胃微生物的氨基酸组成是否恒定？”这一国际学术界仍有争论的问题提供理论依据。【方法】选用4头装有永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊,采用4×4拉丁方试验设计,以玉米、豆粕、稻草为基础日粮,研究不同非结构性碳水化合物与结构性碳水化合物之比(NSC/SC)处理(A：0.33、B：0.63、C：1.17及D：2.18)对pH、NH3-N、VFA浓度及瘤胃微生物氨基酸组成的影响。【结果】随着日粮中NSC/SC的升高,瘤胃pH显著降低(P＜0.05),NH3-N浓度显著升高(P＜0.05),乙酸的摩尔百分比和乙酸/丙酸的比值随日粮中NSC/SC的升高而显著降低(P＜0.05)。不同NSC/SC的日粮下的细菌氨基酸含量中,天冬氨酸、丝氨酸、甘氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、精氨酸、脯氨酸含量都存在显著差异或极显著差异(P＜0.05),原虫氨基酸中天冬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、脯氨酸产生了显著变化(P＜0.05)。【结论】瘤胃微生物氨基酸组成会受到日粮中NSC/SC比例的影响。     

Effects of Limiting Amino Acids on Rumen Fermentation and Microbial Community In vitro

Three goats fitted with cannula were used to provide rumen liquor to investigate the effects of limiting amino acids on rumen fermentation and microbial community in vitro. The removal method was used in the current experiments. Treatments are total essential amino acid (TEAA), His-removal, Lys-removal, Met-removal, and branch chain amino acid (BCAA)-removal. Results indicated that, pH-value ranged between 5.9 and 6.8, with the highest mean value for the group with BCAA-removal (6.54) in the culture. Concentration of NH3-N ranged between 10.99 to 30.51 mg 100 mL-1, with the group of TEAA recording the highest average NH3-N concentration (17.85 mg 100 mL-1). Yields of microbial protein and limiting degree on microbial growth varied with treatments (P < 0.01), and the lowest accrued in treatment with BCAA-removal (0.1389, 0.1772, and 0.3161 mg mL-1 for bacteria, protozoa, and mixed microbes, respectively), compared to the group with TEAA, microbial production of mixed microbes decreased by 44.52%. As for micro-flora, protozoa to bacteria ratio was the lowe st for the group with Lys-removal (89.12%), while the h i ghe st for the group with B CAA-removal (127.60%) (P < 0.01). Furthermore, PCR-SSCP analysis revealed that, microbial profile subjected to substrates within bacteria and protozoa groups. It was therefore concluded that, dietary amino acid influenced both rumen fermentation and microbial characteristics.     

体内驱除厌氧真菌对绵羊瘤胃微生物种群及发酵参数的影响

选用6只体况良好、体重35 kg左右,年龄1.5岁左右的蒙古绵羊,研究体内驱除厌氧真菌对瘤胃微生物和发酵参数的影响.结果表明,驱除真菌导致绵羊瘤胃细菌总数和纤维分解细菌数量显著升高(P<0.05),毛口目原虫数量和原虫总数也明显增加(P<0.05),而内毛目原虫的数量没有变化.瘤胃内羧甲基纤维素酶的活力随厌氧真菌的消失而显著降低(P<0.05),但滤纸酶、木聚糖酶和果胶酶的活力并不受影响.驱除厌氧真菌后,瘤胃pH值和NH3-N浓度没有显著的变化(P>0.05);乙酸、丁酸和TVFA的浓度均出现下降,其中,乙酸浓度降低极为显著(P<0.01),其余两者表现为显著降低(P<0.05);丙酸浓度并没有受到驱除真菌的影响(P>0.05).对乙酸与丙酸摩尔比例的比较显示,驱除厌氧真菌显著降低了乙酸/丙酸的值(P<0.05),说明驱除厌氧真菌改变了瘤胃内的发酵模式,使之更趋向于乙酸减少的方向进行.     

Effects of Limiting Amino Acids on Rumen Fermentation and Microbial Community In vitro

Three goats fitted with cannula were used to provide rumen liquor to investigate the effects of limiting amino acids on rumen fermentation and microbial community in vitro. The removal method was used in the current experiments. Treatments are total essential amino acid （TEAA）, His-removal, Lys-removal, Met-removal, and branch chain amino acid （BCAA）- removal. Results indicated that, pH-value ranged between 5.9 and 6.8, with the highest mean value for the group with BCAA-removal （6.54） in the culture. Concentration of NH3-N ranged between 10.99 to 30.51 mg 100 mL^-1, with the group of TEAA recording the highest average NH3-N concentration （17.85 mg 100 mL^-1）. Yields of microbial protein and limiting degree on microbial growth varied with treatments （P 〈 0.01）, and the lowest accrued in treatment with BCAA-removal （0.1389, 0.1772, and 0.3161 mg mL^-1 for bacteria, protozoa, and mixed microbes, respectively）, compared to the group with TEAA, microbial production of mixed microbes decreased by 44.52%. As for micro-flora, protozoa to bacteria ratio was the lowest for the group with Lys-removal （89.12%）, while the highest for the group with BCAA-removal （127.60%） （P 〈 0.01）. Furthermore, PCR-SSCP analysis revealed that, microbial profile subjected to substrates within bacteria and protozoa groups. It was therefore concluded that, dietary amino acid influenced both rumen fermentation and microbial characteristics.