bFGF基因转染MSC目的基因检测

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）基因外源性转染到MSC（骨髓间充质细胞）后，bFGF基因的表达情况。方法选取SD大鼠，获取骨髓间充质细胞，分为对照组、阴性对照组（转染外源性GFP）和实验组（外源性bFGF转染MSC），经过体外培养后，应用RT-PCR和ELISE法检测各组MSC的bFGF基因阳性表达情况。结果 RT-PCR法显示实验组bFGF基因表达量（0.73±0.15）高于对照组和阴性对照组（P＜0.05）。ELISA法显示bFGF基因表达主要集中在胞浆，实验组bFGF基因表达量[上清为（5.38±0.45）ng/L，胞浆为（8.27±0.82）ng/L]高于其他两组（P＜0.05）。结论采用病毒介导基因转染技术能够将外源性bFGF转染至MSC，并能够成功实现bFGF基因表达。     

母系表达基因3对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响机制研究

目的探究长链非编码RNA母系表达基因3(maternally expressed gene 3,MEG3)对卵巢癌细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达和侵袭、迁移能力的影响。方法荧光定量聚合酶链反应检测卵巢上皮细胞和卵巢癌细胞MEG3表达情况。通过慢病毒转染携带MEG3全长序列的载体和空白载体于SKOV3人卵巢癌细胞中,分别作为实验组细胞和对照组细胞,通过Transwell侵袭实验检测两组细胞的侵袭能力,通过Transwell迁移实验检测两组细胞的迁移能力,通过蛋白质印迹法检测两组细胞MMP-2和MMP-9的表达情况。结果人卵巢癌细胞SKOV3、OVCAR3和A2780中MEG3的表达显著低于人卵巢上皮细胞IOSE80(均P<0.05)。通过慢病毒转染外源性上调SKOV3细胞MEG3的表达,实验组细胞MEG3表达显著高于对照组(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果显示实验组穿过基质胶的细胞数显著少于对照组(P<0.05);Transwell迁移实验结果显示实验组迁入下室的细胞数显著少于对照组(P<0.05)。蛋白质印迹法结果显示实验组细胞MMP-2和MMP-9表达水平均显著低于对照组(均P<0.05)。结论 MEG3低表达于人卵巢癌细胞系,并可下调MMP-2和MMP-9的表达,抑制卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。     

食管鳞状细胞癌预后相关铁死亡基因筛选与预后风险模型构建

目的探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)患者预后相关的铁死亡基因, 并构建预后风险模型。方法通过GEO数据库及FerrDb数据库筛选ESCC患者铁死亡相关差异表达基因, 并对差异基因进行基因功能分析、构建PPI网络及模块分析, 使用Logistic回归分析ESCC预后相关铁死亡基因, 采用LASSO回归分析构建ESCC预后风险模型并进行验证。结果肿瘤组织和癌旁组织共筛查到51个铁死亡相关差异表达基因, 主要富集到不饱和脂肪酸的代谢过程、响应刺激、角质细胞分化等生物过程及铁死亡、白细胞介素-18信号通路、TP53通路等信号通路, 共得到三个主要模块10个基因。筛选出19个差异铁死亡基因与ESCC患者生存显著相关, 构建了由FTL、SLC39A14、ALOX12、SCP2、NCF2、DUSP1、MMP13、CDKN2A、GPT2等9个铁死亡基因组成的风险模型, LASSO回归分析和受试者工作特征曲线分析结果显示, 高风险组预后较差, 3年生存率的受试者工作特征曲线下面积为0.835。结论通过生物信息学方法筛选出19个影响ESCC患者预后的铁死亡相关基因, 并成功构建9个铁死亡相关基因组成的预后风...     

伴t(1;19)/TCF3-PBX1的儿童急性淋巴细胞白血病的临床研究

目的探讨伴t(1;19)/TCF3-PBXl的儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的临床及生物学特征。方法分析17例t(1;19)儿童ALL患者,包括细胞形态学、血常规、TCF3-PBXl融合基因及临床特征。结果 17例TCF3-PBXl阳性的儿童ALL占同期儿童ALL的5.57%;男8例,女9例,中位年龄6.4(1¹3)岁,完全缓解率为100%;平衡易位6例,不平衡易位9例,两组比较差异无显著性。结论儿童t(1;19)/TCF3-PBXl阳性的ALL有着独特的临床和实验室特点,治疗缓解率高。     

成人复发/难治性费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病的免疫治疗进展

酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)联合标准化疗显著提高了费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Philadelphia chromosome-positive acute lymphoblastic leukemia,Ph⁺-ALL)患者的预后,化疗联合第一代或第二代TKI治疗Ph⁺-ALL患者的3年总生存(overall survival,OS)率为40%～60%,联合第三代TKI如帕纳替尼,其6年OS率可达75%。但是,复发/难治性Ph⁺-ALL患者在初次挽救性治疗后2年OS率仅为20%,这需要探索新的治疗策略如免疫治疗。免疫治疗主要包括单克隆抗体的使用如贝林妥欧单抗(抗CD3和CD19双特异性抗体)、奥加伊妥珠单抗(抗CD22单克隆抗体),以及针对不同靶点的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T-cell,CAR-T)疗法。然而,免疫治疗后长期生存期改善有限,一般建议患者达到完全缓解后桥接异基因造血干细胞移植(allogeneic hema...     

代谢在移植物抗宿主病中的研究进展

异基因造血干细胞移植(allogeneic hemopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)是白血病等血液系统疾病有效甚至唯一的根治手段,但移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD)严重影响患者预后,是移植相关死亡的主要原因之一。新陈代谢是细胞最常见的特点,在免疫应答对T细胞的活化和分化等功能中具有重要作用。初始T细胞是主要介导GVHD的免疫细胞,其可以通过特异性的代谢过程获得相应的免疫功能。巨噬细胞、树突状细胞等固有免疫细胞的增殖和分化也需要通过代谢进行调节。Allo-HSCT后,以代谢途径作为靶点,抑制与GVHD相关的初始T细胞、保留移植物抗白血病相关的记忆性T细胞,可能对提高allo-HSCT的疗效、降低GVHD的发生率具有重要作用和意义。因此,深入研究和探讨代谢在移植中的意义及其机制并寻找可能的特异性治疗靶点至关重要。本文就GVHD代谢相关发病机制和研究进展做一综述。     

人干扰素结合蛋白35在人巨细胞病毒感染过程中的表达及意义

目的探讨人干扰素结合蛋白35(interferon-induced protein 35,IFP35)在人巨细胞病毒感染过程中的表达及意义。方法依据是否感染人巨细胞病毒将血细胞分为感染组和未感染组;根据人包皮成纤维细胞转染si RNA和阴性si RNA分为基因敲减组和阴性对照组;采用SYBRGreen荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和蛋白质印迹法检测不同分组中IFP35的表达量;用人巨细胞病毒感染人包皮成纤维细胞,采用SYBRGreen荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测不同感染复数的人巨细胞病毒感染人包皮成纤维细胞表达IFP35的差异以及相同感染复数的人包皮成纤维细胞感染人巨细胞病毒0、12、24、48、96小时后IFP35表达的差异;敲减IFP35基因后,检测人巨细胞病毒量的变化情况。结果感染组血细胞中IFP35表达量显著高于未感染组(P<0.05)。感染后细胞中IFP35的表达量随人巨细胞病毒浓度的增加而增加,与经感染复数为0的人巨细胞病毒感染后的细胞比较,经感染复数为0.01、0.1及1.0的人巨细胞病毒感染后细胞中IFP35的表达量均显著升高(P<0.05)。IFP35的表达量随人巨细胞病毒感染时间的延长而增加,且与0小时相比,其余时间其表达量均显著增加(P<0.05)。基因敲减组人包皮成纤维细胞中IFP35的表达水平显著低于阴性对照组(P<0.05)。敲减IFP35基因的人巨细胞病毒DNA基因拷贝数较未敲减IFP35基因的人巨细胞病毒显著增加(P<0.05)。结论 IFP35的表达量与人巨细胞病毒感染的浓度和时间均呈正相关。IFP35基因的表达可能在一定程度上抑制人巨细胞病毒的感染。     

无关供者与同胞相合供者异基因造血干细胞移植对急性淋巴细胞白血病患儿疗效比较

目的对比分析无关供者(unrelated donor,URD)与同胞相合供者(type matching sibling donor,MSD)异基因造血干细胞移植(allpgeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)对急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)患儿的临床疗效。方法选择2008年3月至2015年3月于本院行allo-HSCT治疗的ALL患儿58例为研究对象,根据供者来源将入选患儿分为URD组(24例)和MSD组(34例),比较两组患儿移植后造血重建情况、并发症发生率及随访生存情况。结果两组患儿造血重建率、血小板重建时间、中性粒细胞重建时间、移植后相关并发症[急性移植物抗宿主病、慢性移植物抗宿主病、肺部感染、巨细胞病毒感染、出血性膀胱炎、EB病毒感染]发生率、总生存率及无病生存率比较均无显著差异(P>0.05)。结论 URD allo-HSCT治疗儿童ALL的疗效与MSD allo-HSCT相当,可将其作为无同胞人类白细胞抗原匹配ALL患儿的治疗选择。     

系统生物学与心律失常

1系统生物学的定义及作用尽管有关系统生物学的精确定义还存在一些争议,不过从实用的角度讲可将其定义为一种分析框架,其特征为基于系统参数对多个生物学过程进行的一种整合性描述。运用到医学上来说,首要的条件是要有一个足够大的高质量数据集,它应该囊括疾病表型和自然病史,具体到本篇涉及的当然是关     

广义多因素降维法在心脑血管病基因-基因/环境交互作用分析及风险预测中的应用

心脑血管疾病是由易感基因和环境因素共同作用引起的复杂性遗传疾病。在影响心脑血管疾病发病的因素中,基因与基因之间、基因与环境之间均存在着交互作用。近年来,随着被发现的易感基因和环境因素越来越多,单独使用Logistic回归模型等方法处理交互作用存在"维度灾难"等局限性,导致研究结果假阳性率增加。广义多因素降维法引入计分统计量的原理,能够列举所有基因型和环境因素的组合情况,分析端粒长度等连续型结局变量,且能够纳入协变量,校正年龄、性别等影响心脑血管疾病发病的混杂因素,从而控制混杂因素引起的结果偏移乃至错误。广义多因素降维法将高维数据降为一维模型后,结合Logistic回归模型能够更好地预测心脑血管疾病的发病风险,对阐明心脑血管疾病的发病机制具有重要意义。     

足细胞损伤与糖尿病肾病

<正>糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病的常见微血管并发症,约1/3的糖尿病患者会发展为DN[1]。蛋白尿是DN的特征性标志,虽然DN的病理改变包括肾小球基底膜增厚及系膜增生,但这些变化不能完全解释患者蛋白尿形成的原因。近年来,越来越多的研究发现肾小球脏层上皮细胞(足细胞)损伤参与DN蛋白尿发生,并认为足细胞是糖尿病蛋白尿发生与进展的中心靶点[2]。本文就DN足细胞损伤的研究进展作一综述。1DN足细胞损伤与蛋白尿     

血清鳞状细胞癌抗原在各类妇科肿瘤患者中的表达差异

目的研究鳞状细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC-Ag)在各类妇科肿瘤患者中的表达差异,以探讨SCC-Ag对诊断宫颈鳞状细胞癌的临床意义。方法选取2009年1月至2014年12月经江西省妇幼保健院确诊的宫颈鳞状细胞癌患者(573例)、宫颈鳞状上皮不典型增生患者(270例)、其他妇科恶性肿瘤患者(305例)及妇科良性肿瘤患者(1459例)为研究对象,检测并比较上述不同类型疾病患者间血清SCC-Ag水平及阳性率。结果宫颈鳞状细胞癌患者血清SCC-Ag水平明显高于宫颈鳞状上皮不典型增生患者、其他妇科恶性肿瘤患者及妇科良性肿瘤患者(P<0.05);宫颈鳞状上皮不典型增生患者血清SCC-Ag水平明显高于妇科良性肿瘤患者(P<0.05),而与其他妇科恶性肿瘤患者比较无显著差异(P>0.05),其他妇科恶性肿瘤与妇科良性肿瘤患者比较无显著差异(P>0.05)。宫颈鳞状细胞癌患者阳性率明显高于宫颈鳞状上皮不典型增生患者(P<0.05),宫颈鳞状上皮不典型增生患者与其他妇科恶性肿瘤患者阳性率比较无显著差异(P>0.05),但二者阳性率均明显高于妇科良性肿瘤患者(P<0.05)。结论血清SCC-Ag水平升高对于诊断宫颈鳞状细胞癌具有一定的参考价值,但需结合其他检查确诊。     

双相障碍动物模型的研究进展

双相障碍是一种具有高共病率、高复发率、高自杀率特点的重性精神障碍.其病因尚未完全阐明,因此动物模型的精准建立对于进一步探索该病的病理生理学机制至关重要.本文将从基因编辑及蛋白干扰、药物诱导以及其他特殊方法三个方面综述双相障碍动物模型的研究进展,增进对该病发病机制的理解,旨在为该病的治疗提供实验依据.     

ApoE基因多态性与脑出血的关系研究进展

脑出血是一类具有高致残率和高致死率的卒中亚型,导致严重的社会经济负担,其发病和预后与环境、遗传等多种因素相关。载脂蛋白E(apolipoprotein E,AopE)是一种重要的脂质转运蛋白,在外周和中枢神经系统脂质代谢中均发挥重要作用。近年来,有关ApoE基因多态性与脑出血相关性的研究不断增加,本文就ApoE基因多态性与脑出血流行病学、发病特点、预后、治疗的研究成果和进展进行综述。     

广西南宁地区结直肠癌患者KRAS基因突变分析

目的分析广西南宁地区结直肠癌患者KRAS基因突变的情况。方法采用突变特异性扩增系统(amplification refractory mutation system,ARMS)PCR法检测149例结直肠癌患者KRAS基因2号外显子第12和13位密码子突变情况,同时分析其突变与临床特征的关系。结果 149例结直肠癌患者中共检出29例患者KRAS基因突变(19.5%)。其中腺癌患者142例,突变率为20.4%(29/142)。女性患者KRAS基因突变率(24.5%,13/53)与男性患者KRAS基因突变率(16.7%,16/96)相比差异无显著性。≤60岁患者突变率(22.4%,22/98)与>60岁患者突变率(13.7%,7/51)相比差异无显著性。汉族患者突变率(17.3%,19/110)与壮族患者突变率(25%,7/28)相比差异无显著性。突变类型以2号外显子第12位突变为主,其中Gly12Asp突变比例最高(34.5%,10/29)。结论广西南宁地区结直肠癌KRAS基因突变以2号外显子第12位的突变为主。KRAS基因突变率与性别和年龄无相关性。