白念珠菌菌血症诱导小鼠皮质胸腺细胞凋亡

采用白念珠诱导小鼠胸腺内细胞凋亡,对其发生部位和累及的胸腺内细胞表型进行了研究。结果发现：静脉注射白念珠菌入小鼠体内６ｈ后,开始出现胸腺细胞凋亡;１２ｈ、１８ｈ和２４ｈ胸腺凋亡细胞百分率不断增加;ＣＤ３＾＋和ＣＤ８＾＋细胞百分率均较对照组有明显的下降;胸腺内细胞凋亡主要发生在皮质区,而髓质区别少。表明白念珠菌能诱导小鼠胸腺细胞凋亡（主要是未成熟ＣＤ３＾＋ ＣＤ４＾＋ ＣＤ９＾＋细胞及少量成熟的ＣＤ     

小鼠胸腺基质细胞单抗体特性及生物功能研究

应用细胞ＥＬＩＳＡ用间接荧光染色技术，分析多种胸腺基质细胞（ＴＳＣ）单克隆抗体，结果表明不同的单抗与不同ＴＳＣ呈不同的阳性反应，其中Ｐｆ１８－３和Ｒｓ２１－Ｃ６单抗与小鼠胸腺基质细胞１－７（ＭＴＳＣ１－７）等多种细胞均呈强阳性反应，但荧光染色显示Ｐｆ１８－３和Ｒｓ２１－Ｃ６染色特征不一。将Ｐｆ１８－３或Ｒｓ２１－Ｃ６单抗加入ＴＳＣ与胸腺细胞共培养，发现两种单克隆抗体对胸腺基质细胞和胸腺细胞结合有明显抑制作用：Ｐｆ１８－３、Ｒｓ２１－Ｃ６对ＭＴＳＣ１与胸腺细胞结合的抑制率分别为６４．３％、４１．３％；对ＭＴＳＣ４与胸腺细胞结合的抑制率分别为６０．４％和３８．８％。试验表明Ｐｆ１８－３、Ｒｓ２１－Ｃ６两种单抗分别识别胸腺基质细胞表面抗原分子，且其识别的抗原分子参与了胸腺基质细胞与胸腺细胞的结合。     

75mGyX射线诱导小鼠胸腺细胞转录因子CREB,NF—kB及AP1？…

为了解低剂量Ｘ射线全身照射对小鼠胸腺细胞基因转录调控的影响。方法：采用凝胶电泳迁移率分析和寡核苷酸竞争抑制方法检测低剂量Ｘ射线对小鼠胸腺细胞基因转录调控的影响。结果；迁移率变化证实７５ｍＧｙ射线全身照射小鼠后４ｈ，胸腺细胞核蛋白提取物的转录因子ＣＲＥＢ及ＮＦ－ｋＢ与其基因启动部位增强子控制序列的结合活性分别增强６倍及４．３倍，ＡＰｌ增强２倍。     

乙酰胆碱及其受体在调节T细胞增殖中的作用

本文研究不同浓度乙酰胆碱（ＡＣｈ）对Ｔ淋巴细胞增殖的影响，并初步探讨Ｍ型胆碱能受体在ＡＣｈ调节Ｔ细胞增殖中的作用，结果表明：１０－１０ｍｏｌ／Ｌ浓度ＡＣｈ对Ｔ细胞增殖无明显影响，而１０－９～１０－４／ｍｏｌ／Ｌ浓度ＡＣｈ均可显著增强Ｔ细胞对刀豆素Ａ的增殖反应；其中以１０－７ｍｏｌ／Ｌ和１０－６ｍｏｌ／Ｌ两个ＡＣｈ浓度的作用最强。１０－６ｍｏｌ／Ｌ的阿托品可阻断１０－７ｍｏｌ／Ｌ的ＡＣｈ对Ｔ细胞增殖的影响。结果提示：ＡＣｈ在较大的浓度范围内均可促进细胞免疫功能，ＡＣｈ增强细胞免疫的作用可能是通过Ｍ型胆碱能受体实现的。     

小鼠胸腺基质细胞单抗特性及生物功能研究

应用细胞ＥＬＩＳＡ用间接荧光染色技术，分析多种胸腺基质细胞（ＴＳＣ）单克隆抗体，结果表明不同的抗与不同ＴＳＣ呈不同的阳性反应，其中Ｐｆ１８－３和Ｒｓ２１－Ｃ６单抗与小鼠胸腺基质细胞１－７（ＭＴＳＣ１－７）等多种细胞均呈强阳性反应，但荧光染色显示Ｐｆ１８－３和Ｒｓ２１－Ｃ６染色特征不一。将Ｐｆ１８－３或Ｒｓ２１－Ｃ６单抗加入ＴＳＣ与胸腺细胞共培养，发现两种单克隆抗体对胸腺基质细胞和胸腺细胞结合有明显     

甲状腺素对人胚胸腺细胞CD2抗原表达的影响

运用不同剂量甲状腺素与人胚胸腺细胞经不同时间孵育后，检测胸腺细胞Ｅ－玫瑰花环形成率。结果显示，在体外，甲状腺素的量高于血清总Ｔ４生理值５～１００倍时，胸腺细胞Ｅａ成花率明显增高，但无明显的量效关系，同样剂量的甲状腺素对胸腺细胞ＥＴ成花率无明显影响。孵育４ｈ后，加甲状腺素和不加甲状腺素的胸腺细胞Ｅａ成花率明显降低，孵育１６ｈ后，Ｅａ、ＥＴ进一步降低。提示，甲状腺素能促进胸腺细胞ＣＤ２抗原的表达，并可能在胸腺细胞发育过程中具有促进胸腺细胞分化的作用。     

烧伤对胸腺细胞凋亡的影响

小鼠４０％体表面积经６０℃，１２ｓ烧伤后胸腺细胞出现明显的病理性调亡，表现为：与对照组比，ＤＮＡ断裂（ＤＮＡＦｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ）百分率显著增高；琼脂糖凝胶电泳出现明显的细胞凋亡特有的“梯状”条带。动态观察发现烧伤后３ｈＤＮＡ断裂百分率明显升高，１２ｈ胸腺活细胞总数明显降低，而胸腺重量和细胞总数降低则于烧伤后１８ｈ才出现。结果提示：①烧伤可诱导胸腺细胞发生严重的病理性凋亡；②烧伤后胸腺细胞病理性凋亡导致的胸腺萎缩可能与烧伤后免疫力降低有关。     

卵巢癌抗独特型单链抗体6B11scFv／hGM—CSF融合蛋白质 …

目的：为提高卵巢癌抗独特型抗体的免疫原性，构建表达６Ｂ１１ｓｃＦｖ／ｈＧＭ－ＣＳＦ融合蛋白质，并对其活性进行测定。方法：用ＤＮＡ重组技术，将以前构建的６Ｂ１１ｓｃＦｖ－Ｌｉｎｋｅｒ－ｈＧＭ－ＣＳＦ融合基因克隆至ｐＥＴ１６（ａ＋）表达载体，表达可溶蛋白质，用ＥＬＩＳＡ分析技术和细胞增殖试验测定融合蛋白质的抗体和细胞因子活性，结果：融合蛋白质可实溶表达，能与ＣＯＣ１６６－９单抗和小鼠抗人ＧＭ－ＣＳＦ单     

腺病毒介导的小鼠γ-干扰素在小鼠肺上皮细胞中的表达

目的：观察腺病毒介导的小鼠γ干扰素（ｍＩＦＮγ）在小鼠肺上皮细胞内的转基因表达。方法：腺病毒介导的ｍＩＦＮγ在小鼠肺上皮细胞内的转基因，其表达的ｍＩＦＮγｍＲＮＡ、蛋白质及生物活性分别经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交、ＥＬＩＳＡ和抑制鼠弓形体在小鼠巨噬细胞内生长等检测技术确定。结果：病毒的细胞感染增殖率（ＭＯＩ）５０为腺病毒介导的ｍＩＦＮγ在小鼠肺上皮细胞内表达的最适浓度：在感染６ｈ后经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交发现ｍＩＦＮγｍＲＮＡ转录信号，２４ｈ达高峰；在感染１２ｈ后经ＥＬＩＳＡ检测ｍＩＦＮγ蛋白的表达阳性，４８ｈ后达峰值。经重组腺病毒感染的小鼠肺上皮细胞培养上清液中的ｍＩＦＮγ可明显抑制鼠弓形体在经大肠杆菌脂多糖刺激的小鼠巨噬细胞内的生长。结论：小鼠的ＩＦＮγ可经腺病毒介导向小鼠肺上皮细胞的转移，并可实现早期、高效且相对持久的表达，为细胞因子的体内转基因免疫治疗机制研究奠定了基础。     

烧伤对胸腺细胞凋亡的影响

小鼠４０％体表面积经６０℃１２ｓ烧伤后胸腺细胞的出现明显的病理性凋亡，表现为：与对照组比，ＤＮＡ断裂（ＤＮＡＦｒｎｍｅｎｔａｔｉｏｎ）百分率显著增高，琼脂糖凝胶电泳出现明显的细胞凋亡特有的“梯状”条带，动态观察发现烧伤后３ｈＤＮＡ断裂百分率明显升高，１２ｈ胸腺活细胞总数明显降低，而胸腺重量和细胞总数降低到烧伤后１８ｈ才才出现，结果提示：（１）烧伤可诱导胸腺细胞发生严重的病理性凋亡；（２）烧伤后胸腺     

HPV16型E6C真核表达质粒的构建及其免疫小鼠后对T？…

目的：研究ＨＰＶ１６型Ｅ６早期蛋白Ｃ端编码区基因片段（Ｅ６Ｃ）免疫小鼠的作用。方法：利用基因重组技术构建含ＨＰＶ１６型Ｅ６Ｃ的真核表达质粒，用此质粒肌肉注射免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，观察该疫苗对小鼠Ｔ细胞增殖的影响。结果：实验组小鼠Ｔ细胞与对照组相比增殖明显增强。结论：应用质粒能够诱导机体的细胞免疫反应增强，为乳头瘤病毒相关疾病的预防和治疗提供了思路。     

衰老小鼠激活T细胞内原癌基因表达及钙离子浓度的变化

为了研究影响白细胞介素２基因诱导表达的因素和磷酯酰肌醒信息途径在Ｔ细胞衰老过程中的作用，作者用斑点杂交法检测了老龄小鼠Ｔ细胞原癌基因的表达，用［３Ｈ］－胸腺嘧啶核苷掺入，测定其增殖能力，同时用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光法测定其细胞内钙浓度的变化。结果表明：ｃ－ｆｏｓ的表达在老龄小鼠Ｔ细胞中受到抑制；老龄小鼠Ｔ细胞对伴刀豆球蛋白（ＣｏｎＡ）刺激的增殖力比幼龄小鼠低，佛波酯（ＰＭＡ）和离子霉素联合刺激不能使其增殖力恢复；经ＣｏｎＡ以及ＰＭＡ和离子霉素联合刺激以后，老龄小鼠Ｔ细胞胞内钙浓度比幼龄小鼠低。结果提示老龄小鼠Ｔ细胞中可能存在信息传递系统的变化。     

茶叶、蚕豆对人肾小球系膜细胞分泌IL-8影响的实验研究

目的：研究茶叶和蚕豆等对人肾小球系膜细胞（ｈＭＣ）的增殖和合成、分泌ＩＬ－８的影响。方法：应用体外培养技术、３Ｈ－ＴｄＲ掺入法及ＭＴＴ法观察茶叶和蚕豆等对ｈＭＣ增殖的抑制作用。用ＥＬＩＳＡ夹心法测定ＩＬ－１、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）刺激ｈＭＣ的培养上清中ＩＬ－８和ＩＬ－６的含量，并观察茶叶、蚕豆对ｈＭＣ分泌ＩＬ－６和ＩＬ－８的抑制作用。结果和结论：茶叶和蚕豆等对体外培养的ｈＭＣ的增殖有抑制作用，ＩＬ－１、ＴＮＦ可刺激ｈＭＣ分泌ＩＬ－８和ＩＬ－６，而ＩＬ－８对中性粒细胞和Ｔ细胞有强大趋化作用，ＩＬ－６可促进ｈＭＣ增生。茶叶等可抑制ｈＭＣ分泌ＩＬ－８和ＩＬ－６，从而抑制ｈＭＣ增生，减轻炎症反应     

卵巢癌抗独特型单链抗体6B11scFv/hGM-CSF融合蛋白质的表达及活性测定

目的：为提高卵巢癌抗独特型抗体的免疫原性，构建表达６Ｂ１１ｓｃＦｖ／ｈＧＭＣＳＦ融合蛋白质，并对其活性进行测定。方法：用ＤＮＡ重组技术，将以前构建的６Ｂ１１ｓｃＦｖＬｉｎｋｅｒｈＧＭＣＳＦ融合基因克隆至ｐＥＴ１６（ａ＋）表达载体，表达可溶蛋白质。用ＥＬＩＳＡ分析技术和细胞增殖试验测定融合蛋白质的抗体和细胞因子活性。结果：融合蛋白质实现可溶表达，能与ＣＯＣ１６６９单抗和小鼠抗人ＧＭＣＳＦ单抗特异结合，并能刺激ＧＭＣＳＦ依赖株增殖。结论：融合蛋白质保留了２种蛋白质的活性，为进一步研究其功能和临床应用提供基础     

加味当归补血汤及枸杞子对TH细胞缺陷小鼠的实验治疗

实验性ＴＨ细胞缺陷小鼠口饲加味当归补血汤（ＢＴ）和枸杞子（ＬＢ）２周后，其免疫功能得到明显改善，表现为：（１）脾细胞对ＣｏｎＡ，ＬＰＳ的反应性及自然增殖率明显高于未治疗免疫缺陷组（ＩＤ），Ｐ＜０．０１；（２）ＭＬＲ：ＢＴ组提高１．６倍，ＬＢ组提高３．６倍；（３）对ＴＤ抗原的免疫应答，ＩｇＧ、ＩｇＥ抗体应答及ＤＴＨ都显著高于ＩＤ组；（４）ＣｏｎＡ活化的脾细胞对外源性ＩＬ－２的反应性大大高于ＩＤ组，接近正常对照小鼠。ＢＴ和ＬＢ还可增强正常小鼠的免疫功能。     

雷公藤单体T4对类风湿关节炎患者周围血单个核细胞及滑膜…

观察了经雷公藤单体Ｔ４处理２ｈ后对正常人和类风湿关节炎患者外周血单个核细胞及ＲＡ患者消化的滑膜单个细胞分泌ＴＮＦ的影响。在３５ｎｇ／ｍｌ浓度下，正常人ＰＢＭＣ（ｎ＝１０）及ＲＡ－ＰＢＭＣ（ｎ＝６）Ｔ４处理组产生ＴＮＦ活性水平明显低于对照组（＜０．００１）。延长Ｔ４作用时间至６ｈＲＡ－ＰＢＭＣＴ４处理组ＴＮＦ活性水平下降更为明显（Ｐ＜０．００１），表明Ｔ４可抑制ＰＢＭＣ体外产生ＴＮＦ活性水平，其对Ｒ     

大鼠烧伤后立即切痂对心肌损伤的保护作用

目的：探讨烧伤后即行切痂对心肌损伤的防治作用。方法：建立３０％ＴＢＳＡⅢ°烧伤大鼠伤后立即一次性切痂模型，动物随机分为对照组（ｎ＝１０），未切痂组（ｎ＝５０）和切痂组（ｎ＝５０），于伤后１、３、６、１２和２４ｈ检测血浆肌球蛋白轻链１（ＭＬＣ１）、血浆及心肌组织ＴＮＦ等指标。结果：烧伤后６ｈ血浆ＭＬＣ１、ＴＮＦ即显著升高，心肌组织中ＴＮＦ也在伤后１２ｈ显著升高。未切痂组与切痂组比较，伤后１～６ｈ未切痂组ＭＬＣ１略低于切痂组，至伤后１２ｈ，未切痂组ＭＬＣ１、ＴＮＦ显著高于切痂组。ＭＬＣ１与ＴＮＦ存在显著正相关。结论：伤后即行一次性切痂可以降低血浆ＭＬＣ１和ＴＮＦ水平，提示其对烧伤后心肌损伤具有一定防治作用     

大鼠浅Ⅱ度烫伤愈合渗出液细胞中生长因子mRNA的表达动态

为探讨生长因子在浅Ⅱ度烫伤愈合中的作用提供基础资料，从分子水平研究了烫伤愈合渗出液细胞中生长因子ｍＲＮＡ的表达动态。在ＳＤ大鼠背部埋入海绵，于热烫伤浅Ⅱ度后６ｈ和１、３、７、１０、１４ｄ分别取渗出液细胞，提取细胞总ＲＮＡ，用逆转录聚合酶链反应方法，以βａｃｔｉｎ为内对照，计算ＴＧＦα、ＴＧＦβ１、ＰＤＧＦ和ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达量的变化。结果表明：伤后６ｈ，ＴＧＦα、ＴＧＦβ１、ｂＦＧＦ均有表达；伤后３ｄＴＧＦα、ＴＧＦβ１、ＰＤＧＦ均出现表达峰，表达水平明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）；伤后１０ｄＴＧＦβ１、ｂＦＧＦ出现表达峰，表达水平也明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。这提示它们在烫伤愈合的不同时期协同发挥效应。     

黑色素细胞培养上清液对增生性瘢痕成纤维细胞的生物学 …

目的 观察正常的黑色素细胞（ＭＣ）对增生性瘢痕成纤维细胞（ＨＳＦｉｂ）的生物学效应。方法 收集ＭＣ的上清液按不同的浓度加入培养的ＨＳＦｉｂ中,ＭＴＴ法测定细胞的增殖率,＾３Ｈ－ＴｄＲ参入法测定细胞ＤＮＡ合成率。结果 加入ＭＣ上清液的ＨＳＦｉｂ,培养４８ｈ后,较正常对照组,实验组细胞增殖明显（Ｐ〈０．０５（,ＤＮＡ合成率各实验组（ＭＣ１组外）与对照组相差显著（Ｐ〈０．０１）,但高浓度组（７５％）的合     

人巨细胞病毒特异性转移因子对小鼠脾细胞分化增殖的作用

①目的检测人巨细胞病毒特异性转移因子（ＨＣＭＶ－ＳＴＦ）对小鼠脾细胞分化增殖作用。②方法采用微量细胞培养法培养小鼠脾细胞，共分５组，分别加入１６４０培养液（空白对照），ＰＨＡ，ＨＣＭＶ－Ａｇ，ＨＣＭＶ－ＳＴＦ，ＨＣＭＶ－Ａｇ＋ＨＣＭＶ－ＳＴＦ．培养４８ｈ后加入氚－胸腺嘧啶（３Ｈ－ＴＤＲ），再培养２４ｈ，收集细胞，用液体闪烁计数器计数（ｃｐｍ），计算促进率。③结果ＨＣＭＶ－Ａｇ＋ＨＣＭＶ－ＳＴＦ组与ＨＣＭＶ－Ａｇ，ＨＣＭＶ－ＳＴＦ组比较具有明显的促进小鼠脾细胞分化增殖的作用（ｑ＝３．３５，４．７５，Ｐ＜０．０５）。④结论ＨＣＭＶ－ＳＴＦ具有相应抗原的依赖活性；同时也证明３Ｈ－ＴＤＲ掺入法检测小鼠脾细胞分化增殖效应，是特异性转移因子质控的一种较为理想的测试方法。