Dishevelled-1、3在非小细胞肺癌中的表达与β-catenin和p120ctn的表达及不良预后相关

目的 Dishevelled(Dvl)亚家族成员在非小细胞肺癌中均存在过表达,但他们与β-catenin和p120ctn及患者预后的关系尚不清楚。方法采用S-P免疫组化和RT-PCR法检测80例非小细胞肺癌(NSCLC)组织中Dvl-1、Dvl-3与β-catenin、p120ctn表达的关系及对预后的影响。结果正常支气管黏膜上皮Dvl-1、3均呈阴性表达,而在肺癌组织中表达上调,其异常表达率分别为52.5%(42/80)和51.3%(41/80),肺腺癌的阳性率均高于鳞癌,并与NSCLC的低分化高分期和淋巴结转移有关(<0.05)。Dvl-1高表达与β-catenin异常表达相关(<0.01),而Dvl-3高表达与p120ctn异常表达相关(<0.01)。Dvl-1、3的异常表达与非小细胞肺癌患者不良预后呈正相关(<0.05)。结论 NSCLC组织中存在着Dvl-1和Dvl-3的过表达,并与组织学分型、分化、临床分期和淋巴结转移相关。Dvl-1、3过表达分别与β-catenin、p120ctn异常表达相关。Dvl-1、3在非小细胞肺癌组织的异常表达可作为评估预后的辅助指标。     

肺癌细胞中p120-catenin的基因缺失促进肺癌细胞的侵袭和转移能力

目的探讨肺癌细胞中p120-catenin(p120ctn)在非小细胞肺癌侵袭、转移中的作用及其可能的机制。方法应用siRNA方法干扰肺癌细胞系BE1,SPC,LTE中p120ctn的表达后,应用Westernblot及RT-PCR方法检测E-cadherin、β-catenin蛋白及mRNA表达情况的变化;应用流式细胞术及Transwell实验检测肺癌细胞增殖、侵袭和转移能力变化;应用Pull-down方法检测小GTP酶活性的变化;应用体内侵袭实验检测肿瘤形成情况。结果 p120ctn表达下调明显地减弱E-cadherin和β-catenin的蛋白表达,同时,还可以下调β-catenin的mRNA表达。p120ctn表达下调还能使Cdc42和Rac1活性增高,RhoA的活性降低,并且促进肺癌细胞的增殖、侵袭和转移。将稳定转染了p120siRNA和转染空质粒的细胞克隆分别移植至裸鼠皮下,发现整合了p120siRNA的荷瘤鼠的肿瘤生长迅速,侵袭和转移能力增强。结论 p120-catenin的缺失可促进肺癌细胞的侵袭和转移能力,其机制可能通过下调E-cadherin和β-catenin的表达从而降低细胞间粘附,以及激活Cdc42/Rac1、失活RhoA来实现。     

肺癌细胞中HDPR1的表达下调可促进肺癌细胞的侵袭能力

目的 研究HDPR1(human homologue of Dapper)在肺癌表达与p120ctn和β-catenin异常表达相关性的可能调节机制.方法 运用siRNA技术沉默肺癌细胞系的HDPR1表达后,应用RT-PCR和Westem blot技术观察p120ctn和β-caterun的表达情况,并应用基质胶侵袭实...     

P120-catenin和E-cadherin的协同表达与肺癌的恶性程度相关

目的方法结果结论探讨p120-catenin(p120ctn)和E-cadherin(E-cad)在非小细胞肺癌中的表达是否具有相关性。方法免疫组织化学S-P法、RT-PCR及WesternBlot等检测肺癌组织中p120ctn和E-cad的表达情况。结果p120ctn和E-cad在肺癌组织中的表达明显低于正常肺组织,并且p120ctn的异常表达与E-cad的异常表达呈正相关。肺癌组织中p120ctn和E-cad的异常表达与肺癌的高分期,低分化和淋巴结转移明显相关。与正常支气管上皮细胞HBE相比,同源的BE1和LH7细胞中都显示出p120ctn、E-cad的表达下降。但在转移能力较高的BE1细胞系中这种异常表达的现象尤为明显。结论肺癌中p120ctn和E-cad的低表达可能与肺癌的恶性度有关。     

p120ctn在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨p120ctn在非小细胞肺癌组织中的表达及与各临床病理因素和预后的关系.方法应用p120ctn单克隆抗体,采用免疫组织化学SP法检测143例非小细胞肺癌p120ctn表达情况,其中36例同时应用Western blot方法对其蛋白表达和亚型情况进行了观察.结果免疫组织化学正常支气管黏膜细胞p120ctn表达为细胞膜强阳性,而在非小细胞肺癌中绝大多数表现为膜表达减弱或出现胞质内异位表达,其异常表达率为79.7%(114/143).异常表达与组织学类型无关(P>0.05),但与肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.05),与非小细胞肺癌患者不良预后正相关.胞质的异位表达更容易出现在胞膜表达减弱的病例中,鳞癌中胞质异位表达高于腺癌.Western blot正常组织中p120ctn总蛋白量明显高于非小细胞肺癌,二者差异有统计学意义(P＝0.003).正常肺组织p120ctn以亚型1(相对分子质量120 000)和亚型3(相对分子质量100 000)表达为主,而肿瘤组织中则以亚型1表达缺失或减弱为主.结论 p120ctn在非小细胞肺癌组织有异常表达,可作为评估预后的辅助指标.     

p120-catenin缺失下调E-cadherin/β-catenin复合体在肺癌细胞系的表达

目的探讨catenin家族的重要成员p120-catenin(p120ctn)对E-cadherin介导的细胞粘附作用的调节及机制,检测在活体内外肺癌细胞系中p120ctn对E-cadherin/β-catenin复合体的调节作用。及其对肺癌细胞侵袭和转移能力的影响。方法应用siRNA技术建立p120ctn基因沉默的多种癌细胞系后,采用Western Blot,Transwell分析,裸鼠移植实验等方法进行检测。结果在成功干扰p120ctn表达的肺癌细胞系中,应用Western Blot和RT-PCR方法,我们观察到E-cadherin的蛋白表达出现不同程度的减弱,但mRNA的表达几乎没有变化;而β-catenin在蛋白和mRNA水平上都出现了明显的表达减弱。同时应用Transwell和裸鼠移植实验,我们在活体内外还观察到p120ctn缺失的肺癌细胞系具有较强的侵袭转移能力。结论肺癌细胞系中p120ctn的表达缺失可能通过下调E-cadherin和β-catenin的表达,参与肺癌细胞的侵袭和转移。     

非小细胞肺癌中Naked1的表达及意义

目的探讨Naked1(NKD1)蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达与预后的关系。方法采用RT-PCR、Western blot法对35例新鲜肺癌组织进行检测;采用免疫组化SP法对100例NSCLC石蜡标本进行检测。结果在79%的新鲜肺癌标本中,NKD1的蛋白水平明显低于相对应的癌旁正常肺组织,而mRNA水平明显高于正常肺组织(P<0.01)。在78%的NSCLC免疫组化标本中,NKD1的表达明显低于正常肺组织(P<0.01)。在肺鳞癌中NKD1的表达低于腺癌,并与分化程度呈正相关(P<0.01),与淋巴结转移(P<0.05)和TNM分期(P<0.01)呈负相关,NKD1低表达者的术后生存时间明显低于正常表达者(P=0.01)。结论在NSCLC中,NKD1 mRNA上调,而蛋白水平下调,其蛋白的下调程度与临床病理因素和不良预后相关。     

β连环素和表皮生长因子受体在非小细胞肺癌中表达的临床研究

目的:探讨β连环素和表皮生长因子受体在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化法回顾性研究了58例非小细胞肺癌标本β-catenin和EGFR的表达,并分析其表达与病理类型、分化程度和淋巴结转移的关系。结果:58例肺癌标本中β-catenin强阳性表达23例（36.66％）;EGFR强阳性表达27例（46.55％）,弱阳性表达19例（32.76％）;β-catenin和EGFR的表达与病理类型均无关;β-catenin的表达与分化程度有关;β-catenin和EGFR的表达均与有无淋巴结转移密切相关;β-catenin与EGFR的表达呈负相关关系（r=-0.3317,P=0.0110）。结论:β-catenin与EGFR的表达与非小细胞肺癌的生长分化、淋巴转移等恶性行为密切相关,EGFR的高表达可能与β-catenin表达水平降低有关。     

ARVCF和Rac1在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的探讨在非小细胞肺癌组织中ARVCF与Rac1的表达相关性。方法免疫组化法检测130例非小细胞肺癌标本中ARVCF和Rac1的表达水平。采用Western Blotting法检测30例新鲜肺癌组织及周围正常肺组织中ARVCF和Rac1蛋白表达量。并在ARVCF表达较高的A549细胞系中干扰ARVCF表达后,检测Rac1的蛋白表达及活性的改变。结果 ARVCF和Rac1在肺癌组织表达水平均明显高于正常肺组织,二者呈正相关。ARVCF和Rac1的共表达与具有高临床分期,低分化,腺癌,淋巴结转移等临床病理因素呈正相关,共表达的肺癌患者具有更短的生存时间。在A549细胞系中下调ARVCF后,Rac1的表达和活性均降低,并减弱肺癌细胞的侵袭能力。结论 ARVCF和Rac1在非小细胞肺癌中共表达,与患者的不良预后正相关,而ARVCF通过调节Rac1表达与活性影响肺癌细胞侵袭能力。     

miR-125a-5p靶向LIMK1逆转非小细胞肺癌A549/DDP细胞对顺铂的耐药性

目的:探讨微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)对非小细胞肺癌A549/DDP细胞对顺铂耐药性的影响及其作用机制。方法:RT-qPCR检测非小细胞肺癌组织及其细胞株A549和A549/DDP中miR-125a-5p和LIM激酶1(LIMK1)的表达;在A549/DDP细胞中上调或下调miR-125a-5p或LIMK1表达,分别采用MTT法、流式细胞术和Western blot检测细胞活力、凋亡率及耐药相关蛋白表达;TargetScan在线预测、萤光素酶报告基因实验验证miR-125a-5p和LIMK1的靶向关系;共表达miR-125a-5p和LIMK1,检测细胞活力、凋亡率及耐药相关蛋白表达。结果:在非小细胞肺癌组织及其细胞株中,miR-125a-5p表达下调,LIMK1表达上调(P0.05);萤光素酶报告基因实验表明miR-125a-5p可负向调控LIMK1表达。过表达miR-125a-5p或敲减LIMK1表达使A549/DDP细胞的活力下降,细胞凋亡率增加,顺铂的IC_(50)减小,耐药相关蛋白表达下调(P0.05)。过表达LIMK1则使miR-125a-5p对A549/DDP细胞活力和耐药相关蛋白表达的抑制作用减弱。结论:miR-125a-5p能通过抑制LIMK1基因表达,下调耐药相关蛋白表达,从而逆转A549/DDP细胞对顺铂的耐药性。     

非小细胞肺癌中Chibby的表达及与β-catenin表达的关系

目的探讨Chibby在非小细胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)的表达及与临床病理因素,β-catenin表达之间的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测100例NSCLC及相应癌旁正常肺组织中Chibby和β-catenin的表达,采用Western Blot方法检测35例新鲜肺癌组织及其癌旁正常肺组织中Chibby的表达情况。结果 Western Blot结果显示NSCLC中Chibby蛋白表达水平与癌旁正常肺组织相比无显著差异(>0.05)。免疫组化结果显示Chibby在NSCLC组织中的细胞核阳性率为43.0%(43/100),其在正常肺组织中的细胞核阳性率为82.0%(82/100),差异显著(<0.05);肺腺癌中Chibby细胞核阳性率57.9%(33/57)显著高于其在肺鳞癌中的阳性率23.3%(10/43,<0.05);无淋巴结转移组中Chibby的细胞膜阳性率38.9%(21/54)显著高于淋巴结转移组19.6%(9/46,<0.05)。β-catenin在细胞浆中的异常表达与NSCLC的分化程度呈负相关(<0.05)。Spearman相关性分析发现,NSCLC中Chibby在细胞膜/浆中的定位分别与β-catenin在细胞膜/浆的定位具有相关性(<0.05)。结论 Chibby在NSCLC组织中的细胞核表达显著低于正常肺组织,Chibby可能作为β-catenin的分子伴侣并调控β-catenin在细胞内的定位。     

p120-catenin表达下调可促进肺癌细胞的生长

目的 研究p120-catenin( p120ctn)对肺癌细胞是否有调节作用,探讨其对细胞周期是否具有调节功能.方法 应用siRNA方法建立p120ctn基因沉默的多种癌细胞系BEI,SPC和LTE的细胞克隆后,采用流式细胞术和裸鼠移植实验在活体内外观察p120ctn对肺癌细胞的生长是否具有调节作用.结果 我们发现在...     

14-3-3 ζ与β连接素在人T1期非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 观察14-3-3 ζ 和β连接素(β-catenin)在人T₁期非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,探讨两者与非小细胞肺癌发展、侵袭和转移的关系。 方法 采用免疫组织化学、免疫荧光双标、激光扫描共焦显微技术和Western blotting,检测 NSCLC 及正常肺组织中14-3-3 ζ 和β-catenin 蛋白的表达。 结果 与正常肺组织相比,14-3-3 ζ 在NSCLC 中的表达显著增强,且表达与肺癌的分化程度和淋巴结转移有关,而与病理学分型无关。β-catenin 在NSCLC中的表达与正常肺组织相比减弱,且其表达与肺癌的分化程度呈正相关,与淋巴结转移呈负相关,而与肺癌病理学分型无关。 结论 14-3-3 ζ 和β-catenin与T₁期NSCLC发展、侵袭和转移密切相关。14-3-3 ζ 高表达可能促进了NSCLC的发展与转移,因此14-3-3 ζ可以作为非小细胞肺癌又一个有效的治疗靶点。     

δ-catenin和Ki67在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨δ-catenin、Ki-67在非小细胞肺癌中的表达状况及其与临床病理学参数间的关系。方法利用免疫组织化学(ElivisionTM plus法),检测肺癌组织芯片中155例非小细胞肺癌患者δ-catenin、Ki-67的表达情况。结果肺癌组织的δ-catenin蛋白阳性表达率为61.30%(95/155),相应癌旁组织δ-catenin阳性表达率为35.6%(16/45),差别有显著意义(<0.05)。δ-catenin在TNM III/IV期的NSCLC组织中阳性表达率为73.2%(41/56),明显高于在Ⅰ/II期NSCLC组织中阳性表达率54.5%(54/99,=0.022);δ-catenin在出现淋巴结转移的表达率为72.3%(60/83),显著高于没有淋巴结转移的阳性表达率48.6%(35/72,=0.003);非小细胞肺癌中δ-catenin高表达同Ki-67高表达呈显著正相关关系(χ2=12.685,r=0.282,<0.01)。结论δ-catenin的高表达与非小细胞肺癌的分期,淋巴结转移及增殖有关。     

肺癌中Kaiso的浆表达与人肺癌的恶性表型正相关

目的研究BTB/POZ蛋白家族成员Kaiso在肺癌组织中的表达情况探讨其与临床病理参数、肺癌患者预后的相关性。方法应用免疫组织化学法检测Kaiso蛋白在100例原发性非小细胞肺癌组织(其中68例备有完整的预后资料)和30例相应癌旁肺组织中的表达情况,应用Westernblot的方法比较30例癌旁肺组织与配对肺癌组织中Kaiso相对表达量的差异。结果免疫组织化学染色表明Kaiso在正常支气管上皮细胞呈极微弱的浆表达,Westernblot检测结果表明肺癌组织中Kaiso蛋白的表达量显著高于正常肺组织的表达水平(n=30,P=0.000)。肺癌组织中浆阳性率为63.00%(63/100),Kaiso蛋白浆表达与高TNM分期(P=0.006)和淋巴结转移(P=0.004)成正相关。Kaiso蛋白浆表达与肺癌的不良预后有密切关系,阳性表达组术后5年生存率(22.22%)显著低于阴性组(64.00%,P=0.002,LogRank法)。Kaiso在细胞核中的阳性表达率仅为5.00%(5/100),但与临床病理因素无关。结论 Kaiso蛋白浆表达增强与肺癌患者的恶性表型及不良预后正相关。