石杉碱甲类似物的研究II.N-甲基吡啶酮石杉碱甲类似物的合成

石杉碱甲(1)是从中草药石杉属植物千层塔(Lycopodium serratum Thunb.)中分得的一种高效可逆的乙酰胆碱酯酶抑制剂,临床试验证实它对早老性痴呆症有显著疗效。本文报道N-甲基吡啶酮石杉碱甲类似物2和3的合成。2-甲氧基-5-甲氧羰基-11-亚甲基-5,9-甲撑环辛-7-烯并吡啶(9)在乙腈中用三甲基氯硅烷和碘化钠选择性脱保护以定量的产率得吡啶酮10,再用甲醇钠和碘甲烷甲基化得N-甲基吡啶酮11,11经碱性水解,Curtius重排和氨基的脱保护得N-甲基吡啶酮石杉碱甲类似物2。通过类似的途径从中间体2-甲氧基-5-甲氧羰基-7-甲基-11-酮-5,9-甲撑环辛-7-烯并吡啶(14)合成了类似物3。类似物2和3的乙酰胆碱酯酶抑制活性均低于天然石杉碱甲。     

老年痴呆症药物石杉碱甲类似物研究V.光学活性(-)-1-甲基石杉碱甲的合成

目的：光学活性（－）１甲基石杉碱甲的合成及其乙酰胆碱酯酶抑制活性的研究。方法：从光学纯的（５Ｓ,９Ｒ）５出发,经Ｗｉｔｉｇ反应和双键异构化得化合物６。用三甲基氯硅烷和碘化钠选择性脱保护得吡啶酮７后,用甲醇钠和碘甲烷选择性Ｎ甲基化得８,经酯水解、Ｃｕｒｔｉｕｓ重排和脱保护合成了光学活性１位氮上甲基取代的石杉碱甲类似物１１。结果：类似物１１的乙酰胆碱酯酶抑制活性低于石杉碱甲。结论：１甲基能影响类似物１１和蛋白活性之间形成氢键的作用,因此降低其抑制活性。     

老年痴呆症药物石杉碱甲的类似物研究 Ⅰ 5－取代氨甲基－2（1H）－吡啶酮和5－取代氨基－5，6，7，8－四氢喹诺酮的合成

石杉碱甲（１）是从中草药千层塔中分离的新型石松类生物碱。药理试验表明它是一个可逆性的强效乙酰胆碱酯酶抑制剂。初步临床试验证实它对记忆衰退、重症肌无力和多发梗死痴呆症具有明显的疗效，有可能成为新一代治疗老年痴呆药物。基于计算机分子模拟研究，石杉碱甲分子中的５－氨甲基－２（１Ｈ）－吡啶酮（２）结构可能是其药效部分，因此设计并合成了５－取代氨甲基－２（１Ｈ）－吡啶酮类似物（５）．（８），（１３）和５－取代氨基－５，６，７，８－四氢喹诺酮类似物（１６）．（１７）．生物试验表明，这些石杉碱甲简化结构类似物几无抗乙酰胆碱酯酶活性。     

老年痴呆症药物石杉碱甲类似物研究Ⅳ（±）-8，15-二氢-去-11，15-二甲基-8-羟基石杉碱甲的合成

石杉碱甲（１）是从我国草药千层塔中分到的一个可逆性的强效乙酰胆碱酯酶抑制剂，将成为新一代治疗早老性和老年痴呆症的药物．基于乙酰胆碱酯酶的Ｘ－衍射晶体结构及石杉碱甲抑制乙酰胆碱酯酶的作用机制研究结果，设计合成了（±）－８，１５－二氢－去－１１，１５－二甲基－８－羟基石杉碱甲（９ａ，９ｂ）．生物活性试验表明这些类似物抑制酶活性远低于天然石杉碱甲     

老年痴呆症药物石杉碱甲类似物研究V.光学活性(-)-1-甲基石杉碱甲的合成

目的：光学活性(-)-1-甲基石杉碱甲的合成及其乙酰胆碱酯酶抑制活性的研究。方法：从光学纯的(5S,9R)-5出发,经Wittig反应和双键异构化得化合物6。用三甲基氯硅烷和碘化钠选择性脱保护得吡啶酮7后,用甲醇钠和碘甲烷选择性N-甲基化得8,经酯水解、Curtius重排和脱保护合成了光学活性1位氮上甲基取代的石杉碱甲类似物11。结果：类似物11的乙酰胆碱酯酶抑制活性低于石杉碱甲。结论：1-甲基能影响类似物11和蛋白活性之间形成氢键的作用,因此降低其抑制活性。     

光学活性石杉碱甲的不对称全合成

２－甲氧基－６－羟基－７，８－二氢－５－喹啉羧酸甲酯（２）与２－甲基丙烯醛的不对称Ｍｉｃｈａｅｌ反应是石杉碱甲全合成的关键一步。在０．１当量奎宁的存在下，（２）与２－甲基丙烯醛在室温反应１０ｄ，得到收率大于９０％的立体异构体混合物（３），将（３）甲磺酰化后，再进行消除反应，得到（５Ｓ，９Ｒ）（＋）－（５），总收率约为５０％，对映体过量百分率（ｅｅ值）约为５２％，如果以０．１当量奎尼丁作催化剂，得到约为４０％ｅｅ的（５Ｒ，９Ｓ）－（－）－（５）．最后从（５Ｓ，９Ｒ）－（＋）－（５）得到（－）－石杉碱甲。     

老年痴呆症药物石杉碱甲的类似物研究Ⅱ(±)-失二碳石杉碱甲类似物的合成

石衫碱甲(1)是从中草药干层塔中提取分离到的一种高效可逆的乙酰胆碱酯酶抑制剂,经临床试验证实对老年痴呆症有显著疗效。本文报道保持石杉碱甲分子基本骨架,失二个甲基类似物7和8的合成。β-酮酯2和丙烯醛发生Michael-Aldol反应得直立键和平伏键的羟基化合物9和10,其相应的甲磺酸酯11和12分别在丙二酸钠和醋酸中130℃回流,直立键甲磺酸酯11发生消去反应得需要的环内双键中间体13,而平伏键甲磺酸酯12则发生SN₂取代反应得直立键醋酸酯14。基于全合成路线,合成了失二碳石杉碱甲类似物7和8,其乙酰胆碱酯酶抑制活性均低于天然石杉碱甲。     

石杉碱甲的药理作用及临床应用

石杉碱甲又名福定碱,是从石杉科石杉属蛇足石杉(千层塔)中分离出的一种生物碱,化学名为(5R,9R,11E)-5-氨基-11-亚乙基-5,6,9,10-四氢-7-甲基-5,9-亚甲基环芳辛并(b)吡啶-2(1H)酮,商品名为双益平、哈伯因。1993年美国FDA批准上市,1996年我国批准为二类新药,用于治疗阿尔海默茨病(AD),是第二代乙酰胆碱酯酶抑制剂。     

石杉碱甲及其制剂的HPLC测定

用Ａｌｌｔｉｍａ Ｃ１８色谱柱,以甲醇－０．０８ｍｏｌ／Ｌ醋酸铵缓冲液（ｐＨ６．０）（３２：６８）为流动相,采用ＨＰＬＣ法测定石杉碱甲及其制剂的含量。理论板数按石杉碱甲峰计算大于３０００,最小检测量为０．２ｎｇ（Ｓ／Ｎ≥３）。     

老年痴呆症药物石杉碱甲类似物研究Ⅵ.(-)-14-去甲基石杉碱甲的不对称全合成及其乙酰胆碱酯酶抑制活性

目的(-)-14-去甲基石杉碱甲的合成及其抑制乙酰胆碱酯酶活性研究.方法从β-酮酯3与2-亚甲基-1,3-丙二醇双醋酸酯4在手性膦配体钯催化下,对映选择性的形成双环化合物5,双键移位后得到关键中间体6,进而复结晶富集后,得到光学纯6.经Wittig反应,得双键化合物7,酯基水解后,得到相应酸8.经改良的Curtius重排,产生氨基甲酸酯9.除去保护后,得目标化合物2.结果 (-)-14-去甲基石杉碱甲仅是天然(-)-石杉碱甲抑制乙酰胆碱酯酶活性1/8.结论由电鳐乙酰胆碱酯酶与(-)-石杉碱甲复合物X-射线衍射结构分析揭示,14-甲基与酶形成氢键是(-)-石杉碱甲高抑制活性的一个必要基团.     

消旋石杉碱甲的全合成研究

本文详细报道了具有抗乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的新型石松类生物碱:消旋石杉碱甲[(±)-Huperzine A]的全合成。采用5-乙氧羰基-6-甲基吡啶酮-2(7)为原料,经7步反应合成重要中间体(14),后者经Michael加成,获三环系化合物(17),再经Wittig反应后,分得相应几何构型的化合物(24),最后经改良的Curtius重排和脱除保护基等反应,获全合成终产物(1),并与天然石杉碱甲的IR,~1HNMR,MS相一致。     

(-)-14-去甲基石杉碱甲的不对称全合成及其乙酰胆碱酯酶抑制活性老年痴呆症药物石杉碱甲类似物研究VI.(-)-14-去甲基石杉碱甲的不对称全合成及其乙酰胆碱酯酶抑制活性

目的(-)-14-去甲基石杉碱甲的合成及其抑制乙酰胆碱酯酶活性研究。方法从β-酮酯3与2-亚甲基-1,3-丙二醇双醋酸酯4在手性膦配体钯催化下,对映选择性的形成双环化合物5,双键移位后得到关键中间体6,进而复结晶富集后,得到光学纯6。经Wittig反应,得双键化合物7,酯基水解后,得到相应酸8。经改良的Curtius重排,产生氨基甲酸酯9。除去保护后,得目标化合物2。结果(-)-14-去甲基石杉碱甲仅是天然(-)-石杉碱甲抑制乙酰胆碱酯酶活性1/8。结论由电鳐乙酰胆碱酯酶与(-)-石杉碱甲复合物X-射线衍射结构分析揭示,14-甲基与酶形成氢键是(-)-石杉碱甲高抑制活性的一个必要基团。     

高效液相色谱法测定石杉碱甲胶囊的含量及含量均匀度

目的：研究高效液相色谱法测定石杉碱甲的方法及条件。方法：色谱柱ＡｌｔｉｍａＣ１８，流动相为甲醇－０．１ｍｏｌ·Ｌ－１醋酸铵缓冲液（ｐＨ６．０）３６∶６４，检测波长３０８ｎｍ。结果：石杉碱甲在３．０～７．０μｇ·ｍｌ－１范围内线性关系良好，其回归方程为Ｙ＝１８１１．８７Ｘ－２３４．９０，ｒ＝０．９９９９，平均回收率为９９．９％。结论：本法快速，准确，重现性好     

导数光谱法测定石杉碱甲片中的石杉碱中的含量

采用一阶导数紫外光谱法中的峰－零法测定石杉碱甲片中石杉碱的含量，测定波长为３１８ｎｍ，三组不同量样品的平均回收率为９８．２５％，平均ＲＳＤ为２．４％。测定方法简便准确。     

石杉碱甲国内临床应用回顾

近年来已有多个胆碱酯酶抑制剂被批准用于治疗阿尔采末病。从民间草药蛇足石杉分离到的新型生物碱石杉碱甲,是一种高效、高选择性的中枢乙酰胆碱酯酶抑制剂。临床前试验证实石杉碱甲对一系列认知障碍模型动物的学习和记忆均有改善作用,1994年批准在国内临床用于治疗阿尔采末病和良性记忆障碍。随着临床应用的扩大,发现石杉碱甲对血管性痴呆及不同病因引起的认知功能障碍也表现出较好的疗效,具有广阔的临床应用前景。     

石杉碱类似物异香兰石杉碱甲对胆碱酯酶的抑制作用和东莨菪碱导…

研究石杉碱类似物异香兰石杉碱甲（ＩＶＨＡ）对胆碱酯酶的抑制作用和东莨菪碱导致的记忆障碍的影响。方法：乙酰胆碱脂酶和丁酰胆碱酶活力用Ｅｌｌｍａｎ比公法测定。抑九Ｋｉ值和抑制机制用Ｌｉｎｅｗｅａｖｅｒ和Ｂｕｒｋ的双倒数作图测定。行为测试用八臂迷宫装置。结果：ＩＶＨＡ的抗ＡＣｈＥ作用弱于Ｈｕｐ－Ａ。它对红细胞膜ＡＣｈＥ作用稍０．１１μｍｏｌＬ－１。作用强于Ｐｈｙｓ和Ｇａｌ。属混合型制剂，Ｋｉ值为３２ｎｍ     

石杉碱甲的药理作用及临床应用

石杉碱甲(Huperzine-A)是从石杉科(Huperziaceae)石杉属(Huperzia)的千层塔(Huperzia serrata(Thunb.)Trev.)中分离得到的一种新生物碱.它易透过血脑屏障,对脑内乙酰胆碱酯酶(AChE)具有强效抑制作用,明显提高脑内乙酰胆碱水平,是AChE一种可逆性的抑制剂.动物试验,经注射或ig该药,有明显促进学习、记忆过程或明显改善记忆障碍的作用,且选择性分布在皮质海马等与学习、记忆有关的脑区.临床试验,石杉碱甲片用于治疗良性衰老性遗忘症(Beniga Senescent Forgetfulners,BSF)和阿尔采末病(Alzheimers Disease,AD)有良好疗效.1 药理作用1.1 体外试验 石杉碱甲对AChE的抑制作用比丁酰胆碱酯酶(BuChE)明显强.石杉碱甲对AChE的选择性抑制作用远比毒     

石杉碱甲缓释片的制备及体外释放度的测定

石杉碱甲（Huperzine A）是从石杉科石杉属植物千层塔中分离得到的一种新型石松类生物碱有效单体。石杉碱甲具有多靶点作用，除抑制乙酰胆碱酯酶活性外．还对神经元产生保护作用．对多种实验性记忆损害均有改善作用。近年来，国内大量临床研究也已证实，石杉碱甲对阿尔茨海默病（AD）、血管性痴呆（VD）、智力低下、精神分裂症等患者的学习、记忆障碍以及神经退行性疾病有一定的治疗作用．     

石杉碱甲生物合成与代谢调控关键基因的差异表达分析

目的选择并比较L-赖氨酸脱羧酶、CYP450(CYP450-71A1和CYP450-72A1)、加双氧酶、N-甲基转移酶等石杉碱生物合成途径可能的关键基因(酶)在华南马尾杉(Phlegariurus austrosinicus(ching)L.B.Zhang)和有柄马尾杉(Phlegariurus petiolatus(C.B.Clarke)H.S.Kung et L.B.Zhang)中差异表达的情况。方法以相同生境但石杉碱甲含量差异明显的一对石杉科马尾杉属植物华南马尾杉与有柄马尾杉为试材,提取总RNA并进行总RNA的反转录,根据文献分别设计引物,开展荧光定量PCR实验并对2者的差异表达结果进行分析。结果加双氧酶基因在高含量石杉碱甲的有柄马尾杉中表达,但在华南马尾杉中表达量极低或者不表达;在有柄马尾杉植体中相对高表达的基因有L-赖氨酸脱羧酶基因(约180倍),CYP450-71A1基因(约33倍),CYP450-72A1基因(约223倍);N-甲基转移酶基因在2种材料中表达量接近。结论加双氧酶基因极有可能编码石杉碱生物合成限速酶和关键酶,导致2种植物中石杉碱甲的含量明显差异;L-赖氨酸脱羧酶基因、CYP450-71A1基因、CYP450-72A1基因编码的蛋白对石杉碱甲的积累具有促进作用;N-甲基转移酶基因应是编码定位于石杉碱生物合成途径下游石杉碱与石杉碱甲之间转换的催化酶,但非关键限速酶。     

石杉碱甲胶囊与片剂治疗良性衰老性遗忘症的双盲对照研究

目的：比较石杉碱甲胶囊与片剂治疗良性衰老性遗忘症（ＢＳＦ）的疗效。方法：ＢＳＦ ６６例,采用双模拟双盲分段分层对照法,随机分成石杉碱甲胶囊组４４例,其中男性 ４０例,女性 ４例,年龄６４ ａ±ｓｌｌａ。石杉碱甲片剂组２２例,其中男性２０例,女性 ２例,年龄 ６３ ａ± ７ ａ。 ２组分别用石杉碱甲胶囊和片剂,各 １５０μｇ,ｂｉｄ,３０ ｄ为一个疗程。结果：治疗后胶囊组ＭＱ和ＭＭＳＥ分别增加２４分±８分和 １． ６分± ０． ９分;片剂组分别增加 ２３分± １０分和１．５分±１．1分。疗前疗末对比差异有非常显著意义（Ｐ＜０．０１）,组间对比差异无显著意义（Ｐ＜０．０５）。２组未见严重不良反应。结论：石杉碱甲胶囊治疗ＢＳＦ与片剂等效。