微波辅助提取灰树花多糖工艺研究

采用提取时间、微波功率、液料比的单因素试验和正交试验法优化微波辅助提取灰树花多糖条件.结果表明,以净多糖得率为指标,影响微波辅助提取灰树花多糖的主次因素为:提取时间＞微波功率＞液料比,并且提取时间和微波功率的影响达到了极显著水平.灰树花多糖最佳提取工艺条件为:提取时间为10 min,微波功率为80%(全功率为800 W),液料比为25∶1.创立了一种用苯酚-硫酸法测定多糖时排除蛋白质干扰的方法.     

超声波辅助象拔蚌多糖提取及抗氧化活性研究

采用蒽酮比色法测定多糖含量。基于超声时间、温度、固液比单因素对象拔蚌多糖提取率影响的基础上,设计三因素三水平正交实验研究象拔蚌多糖最佳提取工艺。并测定象拔蚌多糖的总抗氧化活性和羟自由基清除活性。结果表明,影响多糖提取的首要因素是固液比,其次是超声时间和超声温度。象拔蚌多糖最佳提取条件为:温度60℃、超声时间30 min、固液比1:12。象拔蚌多糖总抗氧化活性和羟自由基清除活性均与浓度有明显的量效关系,表明超声辅助法是象拔蚌多糖提取的一种有效方法,高浓度象拔蚌多糖具有较强的抗氧化活性。     

灰树花粗多糖的提取方法比较及其分离纯化

比较了几种常规粗多糖提取法与超临界CO2提取法对灰树花粗多糖提取的差异,同时对灰树花粗多糖进行脱蛋白、脱色研究。试验结果表明:热水浸提法所得灰树花粗多糖得率最高,为28.1%,而超临界CO2提取法所得粗多糖纯度最高,为39.3%。聚酰胺法脱蛋白及脱色效果较好,蛋白脱除率及脱色率分别为69.9%、61.9%,且多糖吸附率较低。将超临界CO2法提取的灰树花粗多糖采用聚酰胺法脱蛋白及脱色后,多糖得率为79.3%,纯度为50.1%。因此聚酰胺法是分离纯化灰树花粗多糖的一种简便、高效的方法。     

黄芩多糖的提取及其抗氧化和抗肿瘤活性研究

以中药黄芩(Scutellaria baicalensis)为材料,通过比较分析水提醇沉法、微波提取法及超声波提取法的提取率,寻找最优的提取方法.对黄芩多糖(S.baicalensis polysaccharides,SBP)进行精制后,通过体外抗氧化实验,检测SBP的羟自由基和超氧阴离子的清除能力及总抗氧化能力.通过...     

山楂多糖提取工艺优化及其抗氧化活性研究

目的：优化热水浸提法提取山楂多糖的最佳工艺条件,并研究其结构和体外抗氧化活性。方法：在单因素试验的基础上,以水浴温度、水浴时间、料水比、冷浸时间为因素,通过正交试验设计优化其提取工艺;多糖经纯化后分别采用GPC、GC-MS分析其分子量和单糖组成,并通过对超氧自由、羟自由基、DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）自由基清除试验测定山楂多糖的抗氧化活性。结果：最佳提取条件为浸提温度90 ℃、浸提时间6 h、料水比1∶20、冷浸时间为13 h,此条件下提取的多糖经过纯化后,其分子量为5.59×104 Da,单糖含量比例（阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖）为1∶1∶28∶8∶12。经测定,多糖具有一定的超氧自由基、羟自由基、DPPH自由基体外清除能力,在0.5~2.5 mg/mL的浓度范围内,清除率分别为12.3%~37.9%、12.3%~40.9%、15.3%~42.6%,说明抗氧化活性较好。结论：本研究可为山楂资源的开发利用和山楂多糖的药理研究提供科学依据。     

绵马贯众多糖超声提取工艺优化及抗氧化活性分析

绵马贯众是中国传统常用中药,本研究以温度、时间、超声功率、液料比为影响因子,多糖得率为评价指标,通过响应面法优化超声辅助提取绵马贯众多糖的工艺条件,同时测定其基本理化性质及抗氧化活性。研究结果表明,绵马贯众多糖的最佳提取工艺条件为:温度64℃、时间60 min、超声功率210 W、液料比27 mL/g。此时多糖得率为9.57%,与预测值接近。理化性质分析表明绵马贯众多糖为含少量蛋白的酸性多糖。体外抗氧化研究表明绵马贯众多糖具有很强的DPPH自由基清除活性,IC50值为0.29 mg/mL;较好的羟基自由基清除活性,其IC50值为1.10 mg/mL;对DNA的氧化损伤有显著的保护作用。绵马贯众多糖可以作为一种潜在的抗氧化剂应用于食品和化妆品等领域。     

提取方法对库拉索芦荟多糖的抗氧化活性影响研究

文章探讨了水提法和超声波辅助复合酶法对芦荟多糖抗氧化活性的影响.以多糖提取率和多糖含量为评价指标,分别得到水提法和超声波辅助复合酶法的提取产物,采用体外抗氧化活性体系评价 2种提取方法对芦荟多糖抗氧化活性的影响.抗氧化活性评价结果显示,超声波辅助复合酶法对于多糖提取物的羟基自由基清除率和DPPH自由基清除率均高于水提法.     

川芎精油和多糖的同步提取及其抗氧化活性分析

采用响应面优化法对超声波辅助法同步提取川芎精油(LCEO)和多糖(LCP)工艺条件进行优化,以总还原力和DPPH·清除率为指标评价LCEO和LCP的抗氧化活性.结果表明,川芎精油和多糖提取的最佳工艺条件为:液料比16mL/g,超声时间17 min,提取时间4.3 h,在此条件下,精油提取率为1.35％,多糖提取率为2....     

灰树花胞外多糖的结构及免疫调节活性

对灰树花胞外多糖A组分(EXGFP-A)进行结构分析和免疫活性的研究。结构分析结果表明,EXGFP-A是一种主要含有葡萄糖的吡喃型中性多糖。气相结果说明EXGFP-A的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,摩尔比为0.28∶0.31∶0.30∶0.06∶7.98∶0.61。MTT(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazo-lium bromide)比色实验表明,当EXGFP-A浓度为80μg/m L,作用48 h时,RAW264.7细胞增殖指数达到最大值,为137.5%。吖啶橙(AO)染色结果表明EXGFP-A能够激活RAW264.7细胞,增强细胞内部核酸代谢水平。EXGFP-A在一定浓度范围内,可以提高RAW264.7细胞中NO的释放量,上调细胞内TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IFN-γ细胞因子以及细胞中iNOS的mRNA水平的表达。结果表明,EXGFP-A具有一定的免疫调节活性,为灰树花胞外多糖的结构分析和应用提供了科学依据。     

超声参数对白术多糖抗氧化活性的影响

采用热水浸提和超声辅助法提取白术多糖,研究白术多糖的总还原能力以及对超氧阴离子(O2-·)、羟基自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)的清除作用.结果表明:超声频率80 kHz,功率220 W时,白术多糖提取率达到最大(8.017％),明显高于热水浸提法所得(6.832％).白术多糖对·OH和DPPH·具有较强的清除作用,随着质量浓度的升高,·OH清除率呈上升趋势.超声功率和频率均对白术多糖的抗氧化活性有影响且超声功率的影响较大.随着超声功率的提高,白术多糖清除·OH的能力增强,但对O2-·的清除能力影响较弱.     

Preparation of a chemically sulfated polysaccharide derived from Grifola frondosa and its potential biological activities

This report describes the preparation, characterization and potential biological activities of a chemically sulfated polysaccharide (S-GAP-P), which was derived from water-insoluble polysaccharide of Grifola frondosa mycelia. S-GAP-P was determined to be a glucan sulfate with the average molecular weight of 28 kDa and the sulfur content of 16.4%. The antitumor and immunomodulating activities of the sulfated derivative were estimated in vitro and in vivo. S-GAP-P inhibited the proliferation of SGC-7901 cells and induced apoptosis, in a dose-dependent manner. And the results from in vivo experiments demonstrated that S-GAP-P significantly inhibited the tumor growth and enhanced the peritoneal macrophages phagocytosis in S180-bearing mice. It is noteworthy that S-GAP-P could accelerate the antitumor activity of CTX and improve the immunocompetence damaged by CTX, suggesting the combination might increase cytotoxic efficacy and decrease toxicity of some chemotherapeutic agents in cancer treatment.     

灰树花深层培养的生长动力学与计算机模拟

研究了灰树花的生长特性,建立了灰树花的生长速率模型和基质消耗动力学模型;并运用SIMULINK仿真环境,建立了灰树花在培养过程中的主要因素通气量和pH对菌丝生物影响的模型,结果表明,模拟结果较理想。     

枸杞色素及多糖的不同提取次序对其得率及抗氧化活性的影响

为探究先后提取枸杞多糖及枸杞色素时对各自得率的影响。本研究通过分别考察这两种成分在提取过程中的提取溶剂、提取温度、料液比、提取次数及提取时间等因素对枸杞色素和枸杞多糖的得率影响,确定枸杞色素和枸杞多糖在提取次序不同时,两者的最佳提取工艺以及对DPPH·和·OH自由基清除率。结果表明,首先提取枸杞多糖后,枸杞色素的最佳提取工艺为采用正己烷,80℃时,料液比1∶10,提取2次,每次1 h,枸杞色素得率为2.48%,此时枸杞多糖得率为7.45%;而首先提取枸杞色素后,采用了超声辅助提取的方式提取枸杞多糖,发现超声效率为25%,料液比1∶10,提取20 min,枸杞多糖得率为5.23%,此时枸杞色素得率为3.93%。因此,首先提取枸杞多糖,使其平均得率为7.45%,而后提取枸杞色素,其平均得率为2.48%;总体上,枸杞色素1和枸杞多糖1对DPPH·自由基清除率都较高,枸杞多糖1对·OH自由基清除率较高,其抗氧化活性都接近Vc。     

不同营养基质与条件对灰树花生长的影响

探讨了不同营养基质与条件对灰树花[Grifola frondosa(Fr.)S.F.Gray]生长的影响。试验结果表明：菌丝生长的最适pH为5-6;最适氮源为蛋白胨、牛肉膏和谷氨酰胺,葡萄糖和蛋白胨最适浓度分别为100和1g/L;菌丝在黑暗环境下生长良好;使用马铃薯蛋白胨培养基进行振荡培养,菌丝球生长较好;母种采用马铃薯麦麸培养基,栽培种选用棉子壳麦麸石培养料,可缩短制种周期,获得质量较高的菌种;菌丝含有较多的钙、铁和锌等元素。     

灰树花秸秆栽培基质配方的优化

木屑一直是灰树花主要的栽培基质,但木质资源日趋匮乏。本文采用单纯格子法筛选替代木屑基质的原材料及高产配方,以玉米芯、玉米秸秆、大豆秸秆、水稻秸秆为栽培基质,以产量为考核指标,建立各组分配比与产量之间的回归模型,优化栽培配方及考察配方中各组分的互作效应。结果表明:玉米芯可以替代木屑栽培灰树花,大豆秸秆、水稻秸秆和玉米秸秆可以与玉米芯进行合适配比,也可以替代木屑基质。优化的高产配方为75%玉米芯,23%麦麸,2%轻质碳酸钙,每袋产量平均达133.3 g,比对照配方平均产量(97.25 g)高出36.05 g,提高了37.07%。     

灰树花提取物清除氧自由基的研究

采用化学发光法比较了灰树花各提取物对超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除效果。研究结果表明,灰树花子实体和菌丝体的提取物对羟基自由基均有很好的清除作用,灰树花菌丝体水提物(GFME)、灰树花子实体水提物(GFE)、灰树花子实体水提多糖(GFP)、灰树花子实体碱提多糖(GFAP)清除羟基自由基的IC50均小于1.0 mg/mL,其他提取物清除羟基自由基的IC50也均小于3.0 mg/mL。而对超氧阴离子自由基仅GFME、GFMP、GFE有清除作用,其他的提取物清除作用很弱。     

Heterologous expression of two minor laccase isozyme cDNAs from the edible mushroom Grifola frondosa

Two cDNAs encoding the minor laccase isozymes (Lac2 and Lac3) of Grifola frondosa were cloned, characterized, and expressed in Pichia pastoris. The recombinant Lac2 (rLac2) was stable at pH 6.0, whereas the recombinant Lac3 (rLac3) was stable in a broad pH range (pH 4.0–8.0). In addition, rLac2 and rLac3 showed the highest catalytic efficiency (k_cat/K_m) for 2,2′-azino-bis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid).     

灰树花生长发育过程中的几种胞外酶活性变化

胞外CMC酶、FP酶、HC酶活性高峰出现于子实体的成熟期;胞外淀粉酶活性在菌丝生长的前期阶段较高,以后逐渐下降;胞外漆酶活性在菌丝生长阶段一直较高,原基形成后逐渐下降;胞外过氧化物酶活性在菌丝生长阶段较高,子实体生长发育阶段明显下降,子实体成熟后消失.