牛磺酸对胰腺癌细胞系BxPC-3和PANC-1细胞增殖、凋亡和迁移的影响

目的 探讨牛磺酸（Tau）对胰腺癌导管细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 体外培养胰腺癌BxPC-3和PANC-1细胞，采用不同浓度Tau(0、10、20、40、80、160 mmol/L)进行预处理。采用CCK-8、细胞划痕实验、TUNEL法观察Tau对BxPC-3和PANC-1细胞增殖、迁移和凋亡的影响；实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）和蛋白质免疫印迹法检测Tau影响BxPC-3和PANC-1细胞中相关细胞凋亡及细胞周期分子mRNA和蛋白表达的情况。结果 Tau可抑制BxPC-3和PANC-1的细胞增殖和迁移活性；同时，Tau能够促进BxPC-3和PANC-1细胞凋亡。与对照组相比，Tau处理后的BxPC-3细胞中相关凋亡因子P53、P21、Bcl-2关联X蛋白（BAX）表达水平呈上升趋势，而增殖细胞核抗原（PCNA）的表达降低；Tau处理后的PANC-1细胞中B淋巴细胞瘤-2蛋白（Bcl-2）、PCNA、细胞周期蛋白CyclinA2、CyclinB1、CyclinE、周期蛋白依赖性激酶CDK1、CDK2、CDK4、CDK6等的表达较对照组均下降，而相关凋亡蛋白P53、P21的表...     

黄芩素对人胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响

摘 要 目的：探讨黄芩素对人胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法: 人胰腺癌细胞株BxPC 3和PANC 1经不同浓度（0,50,75,100 μmol·L-1）的黄芩素处理后,通过CCK 8检测、划痕愈合实验、细胞迁移、侵袭实验、显微镜观察、Real time qPCR 检测增殖和凋亡相关基因的影响等方法,观察黄芩素在胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭以及凋亡、基因表达的影响。结果: 与空白对照组比较,黄芩素能够显著抑制胰腺癌细胞BxPC 3和PANC 1的增殖,并且随着浓度的加大,对BxPC 3和PANC 1增殖的抑制作用在加强（P＜0.01）;且黄芩素对两种胰腺癌细胞系的作用效果与临床常用抗癌药吉西他滨（2 μmol·L-1）的作用效果相似。黄芩素能显著抑制胰腺癌细胞的迁移和侵袭,诱导癌细胞的凋亡,诱导胰腺癌细胞自噬;经过黄芩素处理的癌细胞,细胞周期相关基因和抗凋亡基因（cyclinD1、cyclinE、cyclinA和Bcl 2）表达水平下降,而细胞凋亡相关基因（caspase 3和Bax）的表达水平上调明显。结论: 黄芩素能有效抑制胰腺癌细胞BxPC 3和PANC 1的增殖、迁移和侵袭,并且可以通过凋亡和自噬诱导细胞死亡。     

硫利达嗪对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响及机制探讨

目的 探讨硫利达嗪（TDZ）对胰腺癌细胞SW1990增殖、凋亡的影响及其对LINC00470的调控作用。方法 用不同浓度（5、10、20μmol/L）的TDZ处理人胰腺癌细胞SW1990,si-NC(si-NC组)、si-LINC00470(siLINC00470组)转染至SW1990细胞，分别将pcDNA(TDZ+pcDNA组)、pcDNA-LINC00470(TDZ+pcDNA-LINC00470组)转染至SW1990细胞后加入TDZ处理细胞；MTT、平板克隆形成实验检测细胞增殖及克隆形成能力；流式细胞术检测细胞凋亡率；实时荧光定量PCR检测LINC00470的表达量；Western blot检测活化的胱天蛋白酶（cleavedcaspase）3、cleaved-caspase9蛋白表达。结果 与对照组比较，TDZ不同剂量组SW1990细胞增殖抑制率、凋亡率和cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白水平升高，细胞克隆形成数减少，LINC00470的表达量降低（P<0.05）。与si-NC组比较，si-LINC00470组SW1990细胞增殖抑制率...     

漏芦乙醇提取物抑制E2F1的表达调控甲状腺癌细胞的生物行为

摘要：目的:研究漏芦乙醇提取物调控E2F1的表达对甲状腺癌细胞活性、凋亡、迁移、侵袭的影响。方法:采用50,100,150μg·ml-1浓度的漏芦提取物处理甲状腺癌细胞SW579,噻唑蓝（MTT）和细胞克隆实验检测细胞活性与克隆形成,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室法检测细胞迁移、侵袭,蛋白质印迹法（Western blot）检测P21、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（caspase-3）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、转录因子E2F1蛋白表达,实时荧光定量PCR（q PCR）检测E2F1 mRNA表达。在SW579细胞中转染pc DNA3.1-E2F1,并使用漏芦提取物处理,观察过表达E2F1对漏芦提取物作用的细胞活性、凋亡、迁移、侵袭的影响。结果:与对照组(0μg·ml-1)相比,50,100,150μg·ml-1的漏芦提取物明显减少细胞SW579的细胞存活率、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数、MMP-2蛋白表达量、E2F1 mRNA、E2F1蛋白表达量,明显提高细胞SW579的凋亡率、P21、caspase-3、E-cadherin蛋白水平（P<0.01）,均呈浓度依赖性。过表达E2F1显著增加漏芦提取物作用的细胞SW579的E2F1表达量、细胞存活率、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数、MMP-2蛋白表达量,明显降低细胞凋亡率、P21、caspase-3、E-cadherin蛋白水平（P<0.01）。结论:漏芦乙醇提取物通过下调E2F1的表达,抑制甲状腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭,并诱导细胞凋亡。     

多纳非尼抑制胆管癌TFK-1细胞增殖、迁移和侵袭及促进凋亡的机制研究

目的 研究多纳非尼抑制人胆管癌TFK-1细胞增殖、迁移和侵袭及促进凋亡的机制。方法 将人胆管癌TFK-1细胞分为对照组（加入等量的二甲基亚砜处理）,2、5、10μmol/L多纳非尼组。CCK-8法检测细胞增殖抑制率;平板克隆实验检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;蛋白质免疫印迹法检测通路蛋白Wnt、β-catenin、细胞周期蛋白-D1(Cyclin D1)、抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax的表达;免疫荧光实验检测β-catenin进入细胞核的变化。结果 随着多纳非尼浓度增加,TFK-1细胞增殖抑制率、凋亡率升高,平板克隆形成数、细胞迁移和侵袭数量逐渐减少,Wnt、β-catenin、Cyclin D1、Bcl-2表达均逐渐下降,Bax表达逐渐增高（P<0.05）;免疫荧光显示,与对照组比较,2μmol/L多纳非尼组能够抑制β-catenin进入细胞核（P<0.05）。结论多纳非尼可以抑制人胆管癌TFK-1细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin通路活化及促进细胞凋亡相关。     

丙泊酚对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究

摘要：目的:探究麻醉药丙泊酚对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:体外培养人胃癌SGC-7901细胞,分别使用不同浓度(0,2,4,6μg·ml-1)的丙泊酚干预SGC-7901细胞(其中0μg·ml-1为对照组),采用克隆形成实验测定丙泊酚对SGC-7901细胞克隆形成能力的影响,噻唑蓝（MTT）法检测丙泊酚对SGC-7901细胞活力的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测增殖细胞核抗原、凋亡相关蛋白以及Wnt/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）信号转导途径相关蛋白水平。在4μg·ml-1的丙泊酚处理的SGC-7901细胞组施加Wnt/β-catenin信号转导途径特异性激活剂氯化锂（Li Cl）,检测对SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。结果:与对照组比较,丙泊酚组SGC-7901细胞克隆形成数目、光密度（OD）值、增殖细胞核抗原（PCNA）和Ki-67、β-连环蛋白（β-catenin）、c-myc和细胞周期蛋白D1（cyclin D1）蛋白水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,凋亡率、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved caspase-3）蛋白水平明显升高（P<0.01）。而Wnt/β-catenin激活剂LiCl可减弱丙泊酚对SGC-7901细胞的增殖抑制的作用,部分逆转丙泊酚对SGC-7901细胞凋亡诱导的作用。结论:丙泊酚抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,促进细胞凋亡,其潜在分子机制是通过抑制Wnt/β-catenin信号转导途径来实现的。     

右美托咪定调控miR-526b-3p/S100A4表达影响胰腺癌细胞增殖及凋亡的机制研究

摘要：目的:探讨右美托咪定（Dex）对胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能作用机制。方法:应用MTT法检测Dex对人胰腺癌Capan-1细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）与蛋白免疫印迹法检测Dex对微小RNA-526b-3p（miR-526b-3p）和钙结合蛋白A4（S100A4）表达的影响;检测miR-526b-3p过表达与干扰S100A4表达对Capan-1细胞增殖及凋亡的影响;双荧光素酶报告实验验证miR-526b-3p与S100A4的靶向作用关系;抑制miR-526b-3p表达验证Dex对Capan-1细胞增殖和凋亡的作用机制; Western blot法检测细胞周期蛋白1（CyclinD1）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、p21、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白（Bax）蛋白表达。结果:用不同浓度的Dex处理后,细胞抑制率、细胞凋亡率与miR-526b-3p、p21、Bax的表达水平显著高于对照组（P<0.05）,S100A4、CyclinD1、Bcl-2的表达水平显著降低（P<0.05）,且呈明显的浓度依赖性（P<0.05）;双荧光素酶报告实验与Western blot实验证实miR-526b-3p与S100A4存在靶向结合关系,且miR-526b-3p可负性调控S100A4的表达; miR-526b-3p过表达或干扰S100A4表达后细胞抑制率、细胞凋亡率与p21、Bax的表达水平显著升高（P<0.05）,CyclinD1、Bcl-2的表达水平显著降低（P<0.05）;抑制miR-526b-3p表达可逆转Dex对Capan-1细胞增殖与凋亡的作用。结论:Dex可通过调控miR-526b-3p/S100A4表达抑制胰腺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

基于Nrf2/HO-1通路探讨葛根素对高糖诱导成骨细胞凋亡的影响

摘要：目的:探讨葛根素对高糖诱导的成骨细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞,试验分为对照组(葡萄糖浓度为5.5 mmol·L-1)、高糖组(葡萄糖浓度为33 mmol·L-1)、高糖+葛根素组(葛根素终浓度分别为0.1,1,10μmol·L-1)。采用CCK-8法检测葛根素对高糖诱导的MC3T3-E1细胞活力影响;采用流式细胞法观察葛根素对高糖诱导的MC3T3-E1细胞凋亡能力的影响;采用免疫印迹法（WB）检测凋亡相关蛋白以及核相关E2因子2/血红素加氧酶-1（Nrf2/HO-1）信号通路相关蛋白表达;添加Nrf2/HO-1信号通路特异性抑制剂ML385检测其对细胞凋亡的影响。结果:与对照组相比,高糖组细胞活力、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白水平、HO-1蛋白水平及细胞核Nrf2蛋白水平降低（P<0.05）,细胞凋亡率、Bcl-2相关X蛋白质（Bax）、cleaved-caspase 3蛋白水平及细胞浆Nrf2蛋白水平升高（P<0.05）;与高糖组相比,高糖+各浓度葛根素组细胞活力、Bcl-2蛋白水平、HO-1蛋白水平及细胞核Nrf2蛋白水平依次升高（P<0.05）,细胞凋亡率、Bax、cleaved-caspase 3蛋白水平及细胞浆Nrf2蛋白水平依次降低（P<0.05）;与高糖+高浓度葛根素相比,高糖+高浓度葛根素+抑制剂组细胞凋亡率、Bax、cleaved-caspase 3蛋白表达升高（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达降低（P<0.05）。结论:葛根素可能通过激活Nrf2/HO-1信号通路,抑制高糖诱导的成骨细胞凋亡。     

原苏木素A通过调控Notch1信号通路增加前列腺癌细胞的放疗敏感性

摘要：目的:研究原苏木素A（PrA）对前列腺癌PC-3细胞放疗敏感性及的Notch1信号通路影响。方法:体外培养人前列腺癌PC-3细胞,分别用不同浓度PrA(100,200,400,800,1 600μmol·L-1)处理对数生长期PC-3细胞,分别设为PrA-1组、PrA-2组、PrA-4组、PrA-8组、PrA-16组,另设无处理PC-3细胞为正常对照（NC）组,只进行放射处理的PC-3细胞为放射处理（RT）组。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各组前列腺癌PC-3细胞增殖情况;采用平板克隆试验法检测前列腺癌PC-3细胞增殖能力;采用流式细胞仪和Annexin V-FITC/PI法体外检测前列腺癌PC-3细胞凋亡率; Western Blot检测前列腺癌PC-3细胞中凋亡相关半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cleaved-caspase3）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平及Notch1信号通路相关蛋白Jagged1、Notch1、Hes-1蛋白表达。结果:与NC组比较,RT组、PrA-1、PrA-2、PrA-4、PrA-8组前列腺癌PC-3细胞增值抑制率呈时间依赖性依次增加（P<0.05）,PrA-8组48 h时,前列腺癌PC-3细胞抑制率为51.03%,与半数抑制浓度（IC50）接近,因此将800μmol·L-1作为PrA最佳浓度,48 h作为最佳作用时间用于下游实验。与NC组比较,RT组、PrA-4、PrA-8组列腺癌PC-3细胞平板克隆形成率、Bcl-2蛋白水平依次降低（P<0.05）,细胞凋亡率、Bax、cleaved-caspase3、Jagged1、Notch1、Hes-1蛋白水平依次升高（P<0.05）。PrA-8和PrA-16组前列腺癌PC-3细胞增值抑制率、克隆形成率、凋亡率、Bcl-2、Bax、cleaved-caspase3、Jagged1、Notch1、Hes-1蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论:原苏木素A可通过上调Bax、cleaved-caspase3,下调Bcl-2蛋白,激活Notch1信号通路增加前列腺癌PC-3细胞的放疗敏感性。     

苦豆碱对宫颈癌Hela细胞的增殖、凋亡的影响

摘要：目的:考察苦豆碱（ALO）对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Hela细胞,采用CCK-8法检测ALO对Hela细胞增殖的影响,实验设置对照组（不作给药处理）以及ALO浓度分别为80,90,100,110,120,130μg·ml-1的实验组,给药时间设置为24 h和48 h。采用流式细胞术检测ALO对Hela细胞凋亡的影响,根据CCK-8结果,设置实验分组为:对照组、ALO低(90μg·ml-1)、中(110μg·ml-1)、高(130μg·ml-1)浓度组; Western blot法测定ALO对Hela细胞中凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）和周期蛋白G1/S-特异性周期蛋白-D1（Cyclin D1）相对表达量的影响,实验分组同流式细胞术。结果:与对照组相比,ALO各浓度组细胞在培养24和48 h后,增殖抑制率显著升高（P<0.05或P<0.01）,各实验组细胞凋亡均明显增多（P<0.05或P<0.01）,各实验组ALO作用于Hela细胞48 h后,均能够显著增加凋亡蛋白caspase-3的表达（P<0.01）,下调细胞周期蛋白表达量（P<0.01）,各指标变化呈剂量和时间依赖性。结论:ALO能够明显抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,同时抑制周期蛋白表达,进一步抑制细胞增殖。并促进其凋亡蛋白的表达,进而促进凋亡。     

蒺藜皂苷抑制胃癌细胞AGS增殖并促进其凋亡的机制研究

摘要：目的:研究蒺藜皂苷对胃癌细胞AGS增殖和凋亡的影响及机制。方法:以胃癌细胞AGS作为研究对象,用蒺藜皂苷处理细胞,噻唑蓝（MTT）检测细胞增殖,碘化丙啶（PI）单染法检测细胞周期,膜联蛋白V-FITC（Annexin V-FITC）/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot检测细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved caspase3）、Nin1结合蛋白（NOB1）蛋白表达。在胃癌细胞中转染pc DNA3.1-NOB1,给予蒺藜皂苷处理,检测细胞增殖、周期、凋亡和Cyclin D1、cleaved caspase 3、NOB1蛋白表达变化。结果:蒺藜皂苷处理后,胃癌细胞增殖能力和Cyclin D1、NOB1蛋白表达水平下降（P<0.05）,细胞G1期比例、细胞凋亡率、cleaved caspase 3蛋白表达水平升高（P<0.05）。转染pc DNA3.1-NOB1后,胃癌细胞增殖能力和Cyclin D1、NOB1蛋白表达水平升高（P<0.05）,细胞G1期比例、细胞凋亡率、cleaved caspase 3蛋白表达水平下降（P<0.05）。结论:蒺藜皂苷通过下调NOB1抑制胃癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

青天葵甲醇提取物通过ERK通路抑制人肝癌细胞增殖并诱导其凋亡

目的 研究青天葵甲醇提取物（Nervilia fordii methanol extracts，NFME）体外对人肝癌SMMC7721和HepG2细胞的凋亡作用及其作用机制。方法 紫外-可见分光光度法测定青天葵中总黄酮和总多酚的含量；MTT法检测不同浓度（0，0.25，0.5，1，1.5，2 mg·mL^-1）NFME处理24 h对SMMC7721、HepG2和LO2细胞生长抑制率的影响；克隆形成试验观察NFME对SMMC7721和HepG2细胞克隆形成率的影响；Hoechst凋亡染色观察NFME对SMMC7721细胞凋亡的影响；流式细胞术检测NFME对SMMC7721细胞凋亡和细胞周期的影响；Western blotting测试NFME作用下caspase3、PARP、ERK1/2和c-Raf蛋白磷酸化水平的变化。结果 NFME中总多酚含量为（4.25±0.46）mg·g^-1，总黄酮含量为（4.72±0.13）mg·g^-1；MTT试验结果显示，与对照组相比，在给药24 h时0.5 mg·mL^-1的NFME就能抑制SMMC7721和HepG2细胞的增殖（P<0.001）；克隆形成试验表明，0.125 mg·mL^-1的NFME能够抑制SMMC7721和HepG2细胞集落的形成（P<0.001）；Hoechst凋亡染色观察到0.25 mg·mL^-1的NFME作用24 h能够观察到SMMC7721细胞发生凋亡（P<0.05）；流式细胞试验结果证实0.5 mg·mL^-1的NFME能够诱导SMMC7721细胞的凋亡（P<0.01），凋亡率14.43%，阻滞细胞周期于S期；Western blotting结果表明NFME能使SMMC7721细胞中caspase3发生剪切，随着给药浓度增加其剪切作用越明显（P<0.05），活化的caspase3剪切下游PARP的表达；同时NFME能够降低SMMC7721细胞中ERK1/2和c-Raf蛋白的磷酸化水平（P<0.05）。结论 NFME能抑制人肝癌SMMC7721和HepG2细胞的活性并诱导其发生凋亡，其作用机制可能与抑制ERK信号通路从而诱导细胞凋亡有关。     

盐酸小檗碱对人黑色素瘤A375-S2细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究

摘要：目的:探讨盐酸小檗碱对人黑色素瘤A375-S2细胞增殖、凋亡以及核因子κB（NF-κB）通路相关蛋白表达的影响。方法:体外培养A375-S2细胞,实验分为对照组（不添加任何药物处理）、盐酸小檗碱高、中、低剂量组(25,50,100μmol·L-1)、阳性对照组(顺铂,0.01 mmol·L-1)。采用CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡以及周期分布情况;免疫印迹法（WB）检测细胞中NF-κB的抑制蛋白α（IκB-α）、p-NF-κB、NF-κB、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、剪切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cleaved-caspase3）蛋白表达情况。结果:与对照组相比,盐酸小檗碱不同剂量组A375-S2细胞增殖抑制率、凋亡率、G1期DNA量、IκB-α、Bax、cleaved-caspase3蛋白表达均显著升高,p-NF-κB、Bcl-2蛋白表达显著降低（P<0.05）,且盐酸小檗碱高剂量组、阳性对照组与盐酸小檗碱中、低剂量组比较,差异有统计学意义（P<0.05）,高剂量组与阳性对照组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论:盐酸小檗碱可明显抑制人黑色素瘤A375-S2细胞增殖并诱导细胞凋亡,其可能与引起细胞周期G1期阻滞及抑制NF-κB信号通路激活有关。     

荜茇酰胺抑制骨肉瘤细胞143B增殖和迁移并通过ROS诱导细胞凋亡的研究

摘要：目的:研究荜茇酰胺对骨肉瘤细胞143B的增殖、迁移和凋亡的影响,探讨其可能的抗肿瘤机制。方法:给予不同浓度的荜茇酰胺处理骨肉瘤细胞143B,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞的生长作用,细胞集落法检测细胞的增殖作用,流式细胞术分别检测细胞凋亡作用、细胞内活性氧（ROS）含量变化和细胞周期的作用,Western Blotting法检测Bcl-2、Bax及MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平,同时,预孵育N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）,流式细胞术检测ROS介导细胞凋亡作用。结果:与空白对照组比较,用不同浓度的荜茇酰胺处理骨肉瘤细胞143B后,能够浓度依赖性地抑制细胞生长、细胞集落形成及促进细胞凋亡（P<0.05或P<0.01）。荜茇酰胺浓度依赖性地阻滞G2/M期,促进Bax蛋白的表达,抑制Bcl-2、MMP-2和MMP-9蛋白的表达（P<0.05或P<0.01）。同时,荜茇酰胺升高细胞内ROS的含量并通过ROS诱导细胞凋亡（P<0.01）。结论:荜茇酰胺抑制骨肉瘤细胞143B的增殖、迁移,阻滞G2/M期,并升高细胞的ROS水平诱导细胞凋亡。     

丙泊酚下调miR-93-5p表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭的影响

摘要：目的:探讨丙泊酚对miR-93-5p以及人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及侵袭的影响。方法:培养对数期MDA-MB-231细胞,进行细胞毒性试验,筛选最佳丙泊酚处理浓度与时间,实验分为空白对照组（0.1%DMSO培养基）、阳性对照组(30μmol·L-1环磷酰胺)、丙泊酚1,2,5 mg·L-1浓度组。CCK8法检测细胞增殖,细胞划痕及Transwell实验检测细胞迁移侵袭情况,免疫印迹法（Western Blot）检测增殖相关蛋白增殖细胞核抗原（PCNA）、侵袭迁移相关蛋白金属机制蛋白酶2（MMP-2）、金属机制蛋白酶2（MMP-9）蛋白表达情况,定量即时聚合酶链锁反应（qRT-PCR）检测细胞miR-93-5p表达情况。结果:与空白对照组相比,阳性对照组与丙泊酚各浓度组MDA-MB-231细胞增殖抑制率、迁移抑制率显著升高,裸鼠肿瘤体积、侵袭细胞数量及PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达、miR-93-5p表达显著降低（P<0.05）。与阳性对照组相比,1 mg·L-1和2 mg·L-1丙泊酚组MDA-MB-231细胞裸鼠肿瘤体积、侵袭细胞数量及PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达、miR-93-5p表达依次升高,增殖抑制率、迁移抑制率依次降低（P<0.05）。结论:丙泊酚可能通过下调miR-93-5p表达,抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭能力发挥抗肿瘤作用。     

YAP-c-Myc信号通路抑制涉及冬凌草甲素抗神经胶质瘤作用

目的探讨冬凌草甲素对神经胶质瘤U87细胞增殖、迁移和凋亡影响及其作用机制是否涉及抑制YAP-c-Myc信号通路。方法采用MTT法检测冬凌草甲素对U87细胞活力的影响;划痕试验检测细胞迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测caspase-3、Bcl-2、Bax、YAP、c-Myc mRNA的表达;Western blot检测caspase-3、Bcl-2、Bax、YAP、p-YAP(Ser127)、c-Myc蛋白的表达。结果冬凌草甲素呈剂量依赖性抑制神经胶质瘤U87细胞增殖(P<0.05)及迁移(P<0.01);流式细胞术分析细胞凋亡率明显增加(P<0.01);caspase-3 mRNA和蛋白表达均增高(P<0.05),Bcl-2/Bax mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05),YAP、c-Myc的mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05),p-YAP的蛋白表达增高(P<0.05)。结论冬凌草甲素可促进神经胶质瘤U87细胞增殖、迁移并促进胶质瘤细胞凋亡,其机制可能与抑制YAP信号通路相关。     

绞股蓝皂苷对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制

目的 探索绞股蓝皂苷对人胃癌细胞SGC-7901和AGS增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 不同浓度的绞股蓝皂苷分别处理SGC-7901和AGS细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖活性并计算得到IC₅₀;细胞克隆实验检测集落形成情况;流式实验检测细胞凋亡;caspase活性检测实验检测细胞内caspase-9和caspase-3的活性;Western blot实验检测细胞内凋亡相关蛋白的表达。结果 CCK-8和细胞克隆实验结果显示,绞股蓝皂苷能抑制SGC-7901和AGS细胞的增殖。流式结果表明,绞股蓝皂苷能够促进细胞的凋亡。caspase活性检测结果表明,绞股蓝皂苷能增加细胞内caspase-9和caspase-3的活性。Western blot结果表明,绞股蓝皂苷主要通过上调人胃癌细胞cleaved-PARP、caspase-9和caspase-3蛋白的表达,同时下调Bcl-2蛋白的表达,诱导细胞凋亡。结论 绞股蓝皂苷能抑制SGC-7901和AGS细胞的增殖,并调控凋亡途径所涉及的cleaved-PARP、caspase-9、caspase-3和Bcl-2等相关...     

甲硫氨酸限制对口腔癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响北大核心CSCD

目的探讨甲硫氨酸限制对人口腔鳞状癌细胞CAL-27的增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用计数法检测甲硫氨酸限制对口腔癌细胞CAL-27增殖的影响;平板克隆法检测CAL-27细胞克隆形成;流式细胞术结合PI单染法检测CAL-27细胞的周期;Annexin V-PE/7AAD双染法检测CAL-27细胞的凋亡;划痕与Transwell实验检测CAL-27细胞的迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞凋亡蛋白Bcl-2和Bax、细胞周期蛋白CDK2和CDK4以及迁移侵袭蛋白N-cadherin和E-cadherin的表达水平的变化。结果甲硫氨酸限制明显抑制口腔癌CAL-27细胞的增殖和克隆形成(P<0.01);甲硫氨酸限制将口腔癌细胞CAL-27阻滞在G_(0)/G_(1)期(P<0.01);甲硫氨酸限制明显诱导口腔癌细胞CAL-27细胞发生凋亡,抑制细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01);Western blot结果表明甲硫氨酸限制明显下调口腔癌CAL-27细胞的凋亡蛋白Bcl-2的表达以及周期蛋白CDK2和CDK4的表达,并且明显下调迁移和侵袭蛋白N-cadherin以及上调E-cadherin的表达水平。结论口腔癌细胞CAL-27具有甲硫氨酸依赖性;通过甲硫氨酸限制明显抑制口腔癌细胞CAL-27细胞的增殖、迁移和侵袭,可为甲硫氨酸限制疗法应用于口腔癌的治疗提供理论依据。     

五味子乙素和γ-分泌酶抑制剂GSI联用对脑胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的　探讨五味子乙素和γ- 分泌酶抑制剂GSI 联用对人脑胶质瘤SHG-44 细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法　采用CCK8 实验检测25、50、100、200 mg/L 五味子乙素及2.5、5、10、20 μmol/L 的GSI 分别作用于人脑胶质瘤SHG-44 细胞24、48、72 h 后细胞的增殖情况，计算IC50 值；根据IC50 值选择最佳的五味子乙素及GSI 的作用浓度，将细胞分为对照组、五味子乙素组、GSI 组、五味子乙素+GSI 组，通过CCK8 试验检测细胞的增殖情况，流式细胞术检测细胞的凋亡情况，Western blot 检测Cleaved caspase3、Notch1、Hes1 蛋白的表达。结果　不同浓度的五味子乙素及GSI 处理细胞24、48、72h 后均能显著降低人脑胶质瘤SHG-44 细胞的存活率，并呈浓度和时间依赖性，选择60 mg/L 五味子乙素和10 μmol/L 的GSI 进行后续研究。五味子乙素组、GSI 组、五味子乙素+GSI 组细胞存活率及Notch1、Hes1 蛋白表达均显著低于对照组，细胞凋亡率及Cleaved caspase3 蛋白表达均显著高于对照组（P<0.01）；五味子乙素+GSI 组细胞存活率及Notch1、Hes1 蛋白表达均显著低于五味子乙素组和GSI 组，细胞凋亡率及Cleaved caspase3 蛋白表达均显著高于五味子乙素组和GSI 组（P<0.01）。结论　不同浓度五味子乙素和GSI 均能显著抑制人脑胶质瘤SHG-44 细胞增殖并促进其凋亡，而五味子乙素和GSI 联用对人脑胶质瘤SHG-44 细胞增殖和凋亡的影响大于单独使用五味子乙素和GSI，可能与其显著下调Notch1、Hes1 蛋白表达有关。     

芹菜素对子宫内膜癌HEC-1-B细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的　研究芹菜素对子宫内膜癌细胞HEC-1-B增殖、侵袭、迁移、凋亡的影响及其作用机制。方法　取对数生长期的HEC-1-B细胞,加入0、20、40和80 μmol/L的芹菜素,采用CCK-8法检测培养24、48和72 h后细胞的光密度,计算增殖抑制率。流式细胞术检测细胞凋亡水平,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力变化。Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2以及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、磷酸化PI3K（p-PI3K）、蛋白激酶B（AKT）和磷酸化AKT（p-AKT）的表达水平。结果　20~80 μmol/L范围内,随着芹菜素干预浓度的升高,HEC-1-B细胞的增殖明显受到抑制,细胞凋亡率升高,同时促凋亡蛋白Bax表达增高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下降。0、5、10和20 μmol/L范围内,随着芹菜素干预浓度的升高,HEC-1-B细胞侵袭和迁移能力下降。Western blot结果显示,40 μmol/L芹菜素能够下调PI3K/AKT通路蛋白p-PI3K和p-AKT的表达。结论　芹菜素能够抑制HEC-1-B细胞增殖、侵袭、迁移并促进其凋亡,其作用机制可能与PI3K/AKT信号通路有关。