运输应激对二花脸仔猪细胞免疫机能的影响

运输引起的应激可增加仔猪对疾病的易感性,这与免疫功能的改变有关,本研究探讨2 h运输对二花脸仔猪细胞免疫机能的影响。将21头20 kg左右二花脸仔猪分成运输组和对照组,运输组7头,对照组14头,运输组仔猪在公路上运输2 h,运输结束后,所有仔猪用巴比妥钠麻醉后宰杀,取血液和脾脏。用放射性免疫法测定血清IL-1β和IL-2含量;用MTT法测定应激猪血清对正常猪外周血T淋巴细胞增殖的影响;用RT-PCR方法测定脾脏中IL-1β和IL-2 mRNA表达。结果：（1）运输猪血清中IL-1β和IL-2含量均升高,但与对照组相比无统计学差异（P＞0.05）;（2）1∶4和1∶8稀释的运输猪血清,能显著提高正常猪外周血T淋巴细胞增殖活性（P〈0.05）;（3）与对照猪相比, 运输猪脾脏中IL-2 mRNA表达量显著增高（P〈0.05）,IL-1β mRNA表达变化不明显。本研究表明：2 h运输可改变仔猪的免疫状态,使机体代偿性地调动应急机制来应对不良环境。     

运输对仔猪抗氧化功能和促炎细胞因子产生的影响

仔猪运输能引起应激反应,从而增加对疾病的易感性,这与应激导致的免疫和抗氧化能力改变有关.本研究的目的是了解2 h运输对仔猪重要器官抗氧化功能和主要促炎细胞因子的影响,为进一步制定抗应激措施提供理论依据.将30头体质量约20 kg的仔猪平均分为试验组和对照组,试验组仔猪用卡车在公路上运输2 h,比较试验组和对照组仔猪肝脏和心脏抗氧化指标和血清IL-1β和IL-2的变化.结果显示,2 h运输对仔猪心脏抗氧化能力有一定的影响,试验组仔猪心脏活性氧(ROS)量[(14 536.0±4 313.5)AU·mg-1]多于对照组仔猪[(12 778.0±2 589.6)AU·mg-1],但无统计学差异(P>0.05);运输后仔猪肝脏总抗氧化能力(T-AOC)和过氧化氢酶(CAT)活性显著下降(P<0.05),脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量显著上升(P<0.05);肝脏和心脏中主要抗氧化酶--铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)mRNA水平虽均有所降低,但与对照组相比差异不显著(P>0.05);运输后仔猪主要促炎细胞因子IL-1β和IL-2在血清中的含量与对照组相比虽无显著性差异(P>0.05),但均有所升高.以上结果表明,2 h运输可从基因转录和表达水平上降低仔猪肝脏的抗氧化功能,使肝细胞脂质过氧化程度增强,血清中促炎细胞因子的升高也可直接损伤组织,因此,抗氧化能力的下降和促炎细胞因子的生成增加,是运输仔猪组织损伤的重要原因.     

二花脸和皮特兰猪应激状态下行为和血液生化指标的变化

对氟烷显性基因纯合子（Hal^NN）二花脸猪和氟烷隐性基因纯合子（Hal^nn）皮特兰猪分别进行翻背和装车实验,分析装车前、后血液生理生化指标的变化。结果显示：（1）3、10、17日龄二花脸猪的翻背实验评分（Backtest score,BS）均显著低于同日龄皮特兰猪（P〈0.001）;（2）二花脸猪在装车前血浆皮质醇水平显著高于皮特兰猪（P〈0.01）,肌酸激酶活性（Creatine kinase,CK）显著低于皮特兰猪（P〈0.001）,而乳酸脱氢酶活性（Lactate dehydrogenase,LDH）品种间差异不显著;（3）装车使皮特兰猪血浆皮质醇水平显著上升（P〈0.05）,而二花脸猪血浆皮质醇水平在装车前后差异不显著;血浆中CK和LDH活性在装车前后无显著变化。结果表明,氟烷显性基因纯合子二花脸猪应对翻背和装车应激的敏感性均低于氟烷隐性基因纯合子皮特兰猪。     

不同运输时间运输应激对肉牛组织中急性期蛋白的影响

为研究不同时间运输应激对肉牛肝脏和脾脏中急性期蛋白的影响,选取15头体质量相近健康肉牛作为实验动物,并将其随机分为运输0h组、运输应激3h组和运输应激6h组,每组5头肉牛。以速度为80km/h公路运输。运输刺激后,立即采集试验肉牛肝脏和脾脏。采用酶联免疫吸附试验和荧光定量PCR方法分别测定肝脏和脾脏中急性期蛋白SAA和HP的水平。结果表明:qRT-PCR方法检测结果显示,与运输0h组相比,运输3,6h后,肝脏组织中SAA的mRNA的表达量均显著升高(P0.05);而脾脏组织中SAA只在运输应激6h后,表达量显著增加(P0.05)。与0h组相比,在运输应激3h后,肝脏组织中HP的mRNA显著升高。在运输应激6h后,脾脏组织中HP的mRNA的表达量呈极显著性水平升高(P0.01)。使用ELISA方法检测结果显示,与0h组相比,运输应激后,肝脏组织中SAA浓度呈递增显著性水平升高(P0.05)。与运输0h组相比,运输应激6h后,肝脏和脾脏组织中SAA、HP均极显著性升高(P0.01)。说明不同运输时间可以引起不同组织中SAA和HP的变化,机体可以通过改变肝脏和脾脏中SAA和HP的含量来应对应激反应。     

L-精氨酸对脂多糖刺激的断奶仔猪肠道损伤的缓解作用

研究L-精氨酸(Arg)对脂多糖(LPS)刺激的断奶仔猪小肠黏膜蛋白质、DNA、RNA含量、二糖酶活性和血浆D-木糖含量的影响,旨在探讨L-Arg是否可以缓解LPS刺激所导致的肠道损伤.选取24头健康的(21±1)d断奶仔猪,分成4个处理,每个处理6个重复.采用单因子设计(1)基础日粮(非应激对照组);(2)基础日粮 LPS(应激对照组);(3)基础日粮 LPS 0.5%Arg(0.5%Arg组);(4)基础日粮 LPS 1.0%Arg(1.0%Arg组).在第16天,给应激对照组、0.5%和1.0%Arg组注射100 μg/kg BW的LPS,非应激对照组注射等量的生理盐水.注射LPS 2 h后,按1 mL/kg BW的剂量分别给仔猪灌服D-木糖溶液,注射LPS 3 h后,采血,分离血浆待测;注射LPS后48 h屠宰仔猪,刮取小肠黏膜待测.结果表明(1)和非应激对照组相比,应激对照组的十二指肠黏膜蛋白质含量,空肠、回肠黏膜DNA含量,空肠黏膜蔗糖酶活性,回肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶活性,血浆D-木糖含量均显著降低(P＜0.05),这表明LPS刺激导致断奶仔猪肠道损伤;(2)0.5%Arg组十二指肠黏膜蛋白质含量,空肠黏膜DNA含量,回肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶活性,血浆D-木糖含量以及1.0%Arg组空肠DNA含量,空肠黏膜蔗糖酶活性,回肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶活性,血浆D-木糖含量均高于应激对照组,且与非应激对照组无显著差异(P＞0.05).这表明L-Arg在一定程度上缓解了LPS刺激所造成的肠道损伤.     

运输应激对肉牛肝脏和脾脏中应激相关蛋白的影响

选取15头体况相似的健康肉牛作为研究对象,随机分为运输0h组、运输3h组和运输6h组,每组5头肉牛,采用公路运输方式运输(平均速度为80km/h)。采集各组牛肝脏和脾脏组织样本,用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量PCR(qRT-PCR)2种试验方法检测各组肝脏和脾脏组织中应激蛋白-热休克蛋白70(HSP70)和急性期蛋白-C反应蛋白(CRP)含量的变化。qRT-PCR检测结果显示:与运输0h组相比,运输3h和6h肝脏组织中HSP70mRNA的表达量极显著升高(P0.01);而脾脏组织中HSP70mRNA只在运输应激6h后表达量显著增加(P0.05)。与0h组相比,运输应激后肝脏组织中CRP mRNA的表达量极显著升高(P0.01),脾脏组织中CRP mRNA的表达量显著升高(P0.05)。ELISA检测结果显示:与0h组相比,运输应激3h和6h肝脏中的HSP70质量浓度极显著升高(P0.01),脾脏中HSP70的质量浓度在运输6h后显著升高(P0.05);肝脏和脾脏CRP的表达在运输应激6h后极显著升高(P0.01)。结果表明:不同运输时间的运输应激可导致肝脏和脾脏中HSP70和CRP的浓度和mRNA转录水平升高,且肝脏中HSP70和CRP的表达量高于脾脏。HSP70和CRP可作为肉牛运输应激候选诊断标志物。     

运输应激对荣昌猪肝脏生化指标及腹泻的影响

为获得荣昌猪抵抗运输应激的能力及运输应激对荣昌猪影响的规律, 选择40日龄荣昌仔猪36头,分试验组及对照组,试验组仔猪在15℃室外温度、50 km/h的车速条件下运输2 h约100 km,分别监测运输前、运输后30 min、运输后第1天、运输后第3天、运输后第7天、运输后第15天试验组及对照组仔猪肝脏主要生化指标和腹泻发生率.结果表明,运输后30 min时肝脏主要生化指标谷丙转氨酶、谷草转氨酶、谷氨酰氨基转移酶的指标升高明显,均显著大于正常范围值,运输后第3天下降,运输后第15天时逐渐恢复接近正常值;经过2 h运输的试验仔猪比位于圈舍的对照组仔猪更易腹泻,腹泻率达33.3%.荣昌仔猪较易受运输应激的影响,运输应激后较易出现腹泻.     

β-伴大豆球蛋白在仔猪胃肠组织中分布规律的研究

本试验旨在研究β-伴大豆球蛋白在仔猪胃肠组织中的分布规律。选用母本品种、胎次相同及体重相近的28日龄健康的杜*长*大断奶仔公猪20头,随机分为2组,每组2个重复,每个重复5头仔猪。对照组饲喂不含大豆抗原蛋白的基础日粮,试验组饲喂含4% β-伴大豆球蛋白的日粮。试验期5 d。结果表明,在仔猪消化道内,仔猪空肠后段中β-伴大豆球蛋白含量最高,而胃和小肠前半段的含量较低,且胃、十二指肠黏膜中β-伴大豆球蛋白含量显著高于胃肠组织（P＜0.05）。     

运输应激对大鼠空肠形态与热休克蛋白家族mRNA表达的影响

本试验以SD大鼠为试验动物,利用摇床模拟公路运输过程中的摇晃、高温、噪音、饥渴、拥挤、碰撞6个主要的刺激因子,构建了大鼠运输应激模型.应激条件为60 r/min,35℃,每天应激2h.体重为270±20 g,20只SD大鼠被随机均分为4组:对照组、应激1d组、应激2d组、应激3d组.在应激结束后,应激组大鼠体温均显著升高(P＜0.05),体重显著下降(P＜0.05),血清中皮质醇含量显著升高(P＜0.05).试验结果与实际公路运输结果一致,表明运输应激模型构建成立.形态学研究显示,运输应激造成了大鼠空肠组织损伤,与对照组相比从应激第1天到应激第3天空肠绒毛脱落逐渐加剧.荧光定量PCR研究结果则显示,Hsp27,Hsp70和Hsp90 mRNA的表达量也剧烈的升高.本试验研究表明,随着应激时间增加,大鼠空肠损伤逐渐加重,且Hsps mRNA表达量升高,表明Hsps的表达量与运输应激造成空肠的损伤严重程度有关.运输应激后表达量急剧升高的保护性分子Hsps,是动物抵抗运输应激的重要机制之一.     

急性冷刺激对大鼠骨骼肌和7个内脏器官的组织结构影响

冷刺激是北方寒区常见的应激原,可对机体多个内脏器官组织学结构产生影响。本试验采用病理学观察方法,研究急性冷刺激处理对大鼠骨骼肌和7个内脏器官的组织结构影响。将10只Wistar大鼠随机均分为对照组和冷刺激组。对照组在(24.0±0.1)℃温度下饲养;冷应激温度为(4.0±0.1)℃,冷刺激时间为12h。冷刺激后,采集两组大鼠骨骼肌、心脏、脾脏、肝脏、肾脏、胃、十二指肠及肺脏8种样品,制作成组织切片,镜下观察。结果显示,急性冷刺激对大鼠骨骼肌、心肌、胃壁黏膜及肾脏均有不同程度的损伤;肝脏、十二指肠组织结构未见病理变化;脾脏可见淋巴小结体积增大,反应性增生。结果表明,急性冷应激可造成大鼠机体骨骼肌及内脏损伤,但免疫功能增强。