乳腺癌辅助化疗的新进展

抗癌药作为乳腺癌手术后辅助治疗开始于70年代初期:1972年美国National Surgical Adjuvant Breast Breast Project)首先在乳腺癌手术后用左旋溶肉瘤素(L—PAM)2年作为辅助化疗,1973年意大利米兰国立癌症研究院也开始用12疗程CMF方案(环磷酰氨甲喋呤+5氟脲嘧啶     

鞘氨醇调节人胰腺癌细胞株JF305生长和钙代谢

目的 :观察鞘氨醇对人胰腺癌细胞株 JF30 5的增殖作用 ;观察鞘氨醇对人胰腺细胞株 JF30 5内Ca2 浓度的影响 ,探讨鞘氨醇的细胞信使作用。方法 :细胞培养后 ,分别加入不同浓度的鞘氨醇 ,应用四甲基偶氮唑盐 MTT比色法来观察细胞增殖程度 ;应用 Fura- 2 / AM荧光比色测定 [Ca2 ]i 结果 :鞘氨醇促进人胰腺癌细胞株JF30 5的生长 ,促进 JF30 5内 Ca2 的生成 ,3min内达峰值 ,并在 0 .5 μ m ol/ L～ 2 .0 μ mol/ L 时呈剂量依赖性。结论 :鞘氨醇能促进人胰腺癌细胞株 JF30 5增殖 ;鞘氨醇的信使作用是通过刺激 Ca2 转运的和 Ca2 的释放     

豚鼠耳蜗外毛细胞的一氧化氮定量分析

目的:为了观察一氧化氮底物左旋精氨酸(L-arginie)和一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对豚鼠耳蜗外毛细胞一氧化氮的影响。方法:应用新的荧光染料4,5二氨基乙酰乙酸荧光素(4,5-diaminofluorescein diacetate,DAF-2DA)测定豚鼠耳蜗外毛细胞内一氧化氮的含量。结果:发现加左旋精氨酸后外毛细胞的荧光灰度值比正常外毛细胞的灰度值升高。而加左旋硝基精氨酸甲酯后,外毛细胞的荧光灰度值比正常外毛细胞的灰度值降低。结论:进一步证明豚鼠耳蜗外毛细胞内存在一氧化氮。     

一次口服最大耐受量的左旋米唑对肿瘤病人细胞免疫的调整作用

免疫治疗的目的是欲纠正或反转肿瘤病人的免疫缺陷。左旋米唑能使肿瘤病人对2,4——二硝基氯苯(DNCB)和纯蛋白衍化物(PPD)的皮肤迟发型超敏反应恢复。观察26个癌症病人一次口服最大耐受量的左旋米唑(200毫克/平方米)后,对下述指标的影响:皮肤迟发型超敏反应的影响,以及对体外在致有丝分裂原和抗原作用下对淋巴母细胞转化的影响,在给药     

Bcl-2反义寡核苷酸联合富勒醇对K562细胞凋亡的影响

目的:观察不同浓度的Bcl-2反义寡核苷酸和富勒醇作用后K562细胞的凋亡情况.方法:用0.1、0.2 mg/mL的富勒醇和10μmol/L的Bcl-2反义寡核苷酸以及联合10μmol/L、0.1 mg/mL的Bcl-2反义寡核苷酸和富勒醇分别作用于K562细胞,于作用后12、18和24 h观察K562细胞的凋亡情况.结果:反义寡核苷酸+富勒醇组于作用后12 h细胞增殖受抑最显著.OD值降为0.705±0.003,与空白组OD值1.057±0.007比较,两者差异有统计学意义,P<0.01,且随着时间延长,这种抑制作用有逐渐降低的趋势.反义寡核苷酸+富勒醇组OD值0.705±0.003与反义寡核苷酸组OD值0.704±0.003比较,差异无统计学意义.结论:富勒醇联合Bcl-2反义寡核苷酸在诱导肿瘤细胞凋亡方面无协同作用,富勒醇在自然光照条件下也不能干扰Bcl-2反义寡核苷酸对细胞凋亡的诱导作用.     

梓醇调节cGAS-STING信号通路对肺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响

目的:探讨梓醇(Catalpol)通过调节GMP-AMP合酶/干扰素基因刺激物(cGAS-STING)信号通路对肺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:培养肺癌细胞A-427,使用1μmol/L～20μmol/L的梓醇处理细胞,选择最佳药物浓度。将细胞分为对照组(Control组)、梓醇低浓度组(Catalpol-L组,5μmol/L Catalpol)、梓醇中浓度组(Catalpol-M组,10μmol/L Catalpol)、梓醇高浓度组(Catalpol-H组,15μmol/L Catalpol)、梓醇高浓度+cGAS通路抑制剂RU.521组(Catalpol-H+RU.521组,15μmol/L Catalpol+1μmol/L RU.521)。MTT法检测细胞存活率;Edu法检测细胞增殖;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成;流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期;蛋白免疫印迹检测Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase-3、cGAS和STING蛋白表达;将CD8⁺T细胞与各组处理的细胞共培养,台盼蓝染色检测CD8⁺T细胞存活率;...     

左旋棉酚体外诱导人前列腺PC-3细胞凋亡的研究

目的：研究左旋棉酚对人前列腺癌Pc-3细胞体外增殖和凋亡的影响。方法：MTT法检测左旋棉酚对Pc-3细胞增殖的影响,透射电镜观察细胞超微结构的改变,TUNEL染色观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期的改变,半定量RT—PCR检测Bcl-2及BakmRNA的表达水平。结果：左旋棉酚能显著抑制Pc-3细胞的体外增殖,并呈浓度一时间依赖性。左旋棉酚可以诱导Pc-3细胞发生典型的凋亡形态学改变和G0／G1期阻滞,RT—PCR显示Bcl-2mRNA表达水平降低,BakmRNA表达水平升高。结论：左旋棉酚能诱导前列腺癌细胞的体外凋亡,主要可能与BakmRNA的表达升高及Bcl-2mRNA的表达下调有关。     

利胆醇、利胆片协同及促进二甲肼诱发Wistar大鼠大肠癌的实验研究

本研究用二甲肼诱发Wistar大鼠大肠癌,观察促胆汁酸分泌的利胆药物—利胆醇、利胆片对大肠癌发病的影响,结果二甲肼组大鼠大肠癌发病率和癌肿数量分别为72.43％、58只,显著低于二甲肼加利胆醇     

伏立诺他与左旋苯丙氨酸氮芥对人类多发性骨髓瘤细胞的协同作用

 目的　观察体外伏立诺他和左旋苯丙氨酸氮芥联合对人类多发性骨髓瘤细胞株U266、KM3的抗瘤作用。方法　应用MTT法分别测定伏立诺他和左旋苯丙氨酸氮芥不同浓度对骨髓瘤细胞株U266、KM3的抗瘤作用,计算两药的IC50值;应用MTT法测定固定一种药物浓度联合不同浓度另一药物时对U266、KM3的抑制作用,计算药物联合指数（CI）,判断药物相互作用。 结果　伏立诺他单药对U266细胞的IC50值介于5.0～7.5 μmol／L,对KM 3细胞的IC50值介于2.5～5.0 μmol／L;左旋苯丙氨酸氮芥单药杀伤U266细胞的IC50值介于40～60 μmol／L,杀伤KM3细胞的IC50值介于60～80 μmol／L。固定伏立诺他浓度（U266细胞中为1.25 μmol／L,KM 3细胞中浓度为1.0 μmol／L）,在U266细胞中左旋苯丙氨酸氮芥浓度为20、40、60、80 μmol／L时均CI＜0.9,表现为协同作用,在KM3细胞中左旋苯丙氨酸氮芥浓度为40、60、80、100 μmol／L时均CI＜0.9,表现为协同作用;固定左旋苯丙氨酸氮芥浓度（U266细胞中为10 μmol／L,KM3细胞中浓度为20 μmol／L）,在U266细胞中伏立诺他浓度为2.5、5.0、7.5 μmol／L时均CI＜0.9,表现为协同作用,在KM3细胞中伏立诺他浓度为1.0、2.5、5.0 μmol／L时均CI＜0.9,表现为协同作用;当伏立诺他浓度为7.5 μmol／L联合左旋苯丙氨酸氮芥20 μmol／L时呈现相加作用（CI＝0.93）。结论　体外伏立诺他单药对两种多发性骨髓瘤细胞株有明显的杀伤作用,与左旋苯丙氨酸氮芥有协同抗骨髓瘤细胞作用。     

DADAG对L1210细胞内Bc1-2及Bc1-X_L蛋白表达的影响

目的：探讨二乙酰二脱水卫矛醇(diacetyldianhydrogalactitol,DADAG)对小鼠白血病L1210细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法：MTT法测定DADAG对L1210细胞的杀伤作用；流式细胞技术和透射电镜检测细胞凋亡；Western blot法分析细胞内Bcl-2和Bcl-X_L蛋白水平的变化。结果：与对照组相比,DADAG可降低L1210细胞的存活率,且具有浓度依赖性。给药12.0、17.2、24.5、35.0和50.0mg/L 24h后,流式细胞术周期分析结果显示,各处理组均出现凋亡峰。DADAG 50.0mg/L作用L1210细胞24h后,靶细胞出现固缩、染色质边集；DADAG可下调Bcl-2和Bcl-X_L蛋白水平,且具有时间依赖性。结论：DADAG可能通过抑制Bcl-2及Bcl-X_L蛋白的表达而诱导L1210细胞发生凋亡。     

DAVH与TAVH方案治疗难治性乳腺癌

应用DAVH(二嗅甜醇、阿霉素、长春新硷及氟羟甲睾酮)方案和TAVH(噻替派、阿霉素、长春花硷及氟羟甲睾酮)方案治疗难治性乳腺癌,评介其有效率和有效期。病人选自1982年5月～1984年11月的246例患者,按选择条件列入本实验。治疗方法:患者随机接受DAVH及TAVH方案治疗。DAVH方案:二溴甜醇135mg/m~2,口服2～11天,阿霉素45mg/m~2和长春     

羽扇豆醇对鼻咽癌细胞生物学功能和放、化疗敏感性的影响及凋亡机制研究

目的:探讨羽扇豆醇对人鼻咽癌CNE2细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡、周期及对放、化疗敏感性的影响,同时探讨其凋亡机制。方法:CCK-8法检测羽扇豆醇对CNE2细胞增殖的影响以及联合顺铂对CNE2细胞的增殖抑制作用有无增强;细胞划痕、Transwell实验、流式细胞术分别用于检测羽扇豆醇对CNE2细胞迁移、侵袭、凋亡及周期的影响;平板细胞克隆形成实验检测羽扇豆醇联合X线放射处理对CNE2细胞克隆形成能力的影响;Western blot法检测羽扇豆醇对CNE2细胞凋亡信号通路中关键蛋白Bcl-2、Bax及Cleaved caspase-3的影响,探究羽扇豆醇的抗肿瘤机制。结果:羽扇豆醇呈药物浓度和时间依赖性地抑制CNE2细胞的增殖,选取羽扇豆醇40、60、80 μmol/L用于后续实验。羽扇豆醇显著降低了CNE2细胞的迁移、侵袭能力,出现典型的凋亡特征,G1期延长,S期、G2期缩短,提高了顺铂或X线放射对CNE2细胞增殖及克隆形成的抑制能力,同时引起CNE2细胞中Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达下调（所有结果均P＜0.001或P＜0.000 1）。结论:羽扇豆醇抑制CNE2细胞的增殖、迁移、侵袭,诱导CNE2细胞的凋亡,引起细胞周期阻滞在G1期,同时可提高顺铂及X射线对CNE2细胞的敏感性。证实了羽扇豆醇诱导CNE2细胞凋亡可能与调控凋亡信号通路中凋亡蛋白Bax、凋亡启动因子Cleaved caspase-3升高及抗凋亡蛋白Bcl-2降低有关。     

左旋棉酚体外诱导人前列腺PC-3细胞凋亡的研究

目的:研究左旋棉酚对人前列腺癌PC-3细胞体外增殖和凋亡的影响。方法:MTT法检测左旋棉酚对PC-3细胞增殖的影响,透射电镜观察细胞超微结构的改变,TUNEL染色观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期的改变,半定量RT-PCR检测Bcl-2及Bak mRNA的表达水平。结果:左旋棉酚能显著抑制PC-3细胞的体外增殖,并呈浓度-时间依赖性。左旋棉酚可以诱导PC-3细胞发生典型的凋亡形态学改变和G0/G1期阻滞,RT-PCR显示Bcl-2 mRNA表达水平降低,Bak mRNA表达水平升高。结论:左旋棉酚能诱导前列腺癌细胞的体外凋亡,主要可能与Bak mRNA的表达升高及Bcl-2 mRNA的表达下调有关。     

甲状腺乳头状腺癌合并甲状旁腺腺瘤原发性甲旁亢一例

患者女 ,2 9岁。因颈部、胸背及四肢疼痛 5年入院。查体 :心率、血压正常 ,颈部未查见异常。实验室检查 :血钙3.0mmol L(正常值 2 .1～ 2 .7mmol L) ,血磷 0 .8mmol L(正常值 0 .6～ 1.6mmol L) ,PTH 4 4 .7pmol L(正常值 1.5 9～ 6 .89pmol L) ,甲状腺功能检查无异常。彩超 :甲状腺右叶上极实质内查见 0 .5cm× 0 .5cm× 0 .4cm弱回声团块 ,边界较清楚 ,形态较规则 ,内部回声欠均匀。甲状腺左叶下极后方查见 2 .6cm× 1.8cm× 1.7cm弱回声团块 ,边界清楚 ,形态规则 ,内部回声均匀。术前诊断 :右下甲状旁腺腺瘤伴原发性甲旁亢 ;甲状腺右…     

顺铂联合HMME介导的光动力疗法对人鼻咽癌CNE-2细胞杀伤作用的观察

目的:探讨顺铂(DDP)联合血卟淋单甲醚HMME介导的光动力学疗法(HMME-PDT)对人鼻咽癌细胞(CNE-2)的杀伤作用.方法:实验分对照组、单独DDP组、单独PDT组和联合组.所用的DDP浓度为0.8和1.6 mg/L;光敏剂为HMME,剂量5 mg/L,光能量密度为1.2、2.4和4.8 J/cm2.联合组为不同剂量单独作用的组合.MTT法检测DDP和HMME-PDT单独或联合作用下24 h的细胞抑制率,并用金氏公式分析联合效应.HE染色光镜下观察处理前后细胞的形态学变化,Hoechst染色荧光显微镜观察细胞核.结果:金氏公式分析显示,0.8和1.6 mg/L的DDP与5 mg/L HMME,1.2、2.4和4.8 J/cm2能量密度的PDT,两者联合处理观察到协同或相加效应.HE和Hoechst染色均可见,联合组比单独处理组细胞形态学改变现象更明显.结论:DDP与HMME-PDT联合处理在一定剂量范围内可以协同杀伤CNE-2细胞.     

DADAG对L1210细胞内Bcl-2及Bcl-XL蛋白表达的影响

目的：探讨二乙酰二脱水卫矛醇（diacetyldianhydrogalactitol，DADAG）对小鼠白血病L1210细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法：MTT法测定DADAG对L1210细胞的杀伤作用；流式细胞技术和透射电镜检测细胞凋亡；Westernblot法分析细胞内Bcl-2和Bcl-XL．蛋白水平的变化。结果：与对照组相比，DADAG可降低L1210细胞的存活率，且具有浓度依赖性。给药12．0、17．2、24．5、35．0和50．0mg／L24h后，流式细胞术周期分析结果显示，各处理组均出现凋亡峰。DADAG50．0mg／L作用L1210细胞24h后，靶细胞出现固缩、染色质边集；DADAG可下调Bcl-2和Bcl-XL蛋白水平，且具有时间依赖性。结论：DADAG可能通过抑制Bcl2及Bcl-XL，蛋白的表达而诱导L1210细胞发生凋亡。     

左旋棉酚对裸鼠人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤的生长抑制作用

目的:探讨左旋棉酚对裸鼠人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤的生长抑制作用及其机制.方法:建立裸鼠人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤模型,将移植瘤裸鼠80只随机分成4组,每组20只,分别为10.0mg/kg、5.0mg/kg、2.5ng/kg左旋棉酚治疗组和对照组,进行疗效分析与组织病理形态学观察,同时检测肿瘤组织内PCNA、bcl-2、caspase-3和caspase-8的表达.结果:左旋棉酚可使人前列腺癌PC-3细胞荷瘤裸鼠存活率提高,肿瘤体积缩小,肿瘤组织坏死明显,PCNA与bcl-2表达减少,caspase-3和caspase-8表达增加,但高剂量左旋棉酚对PC-3荷瘤裸鼠肝脏和肠道有一定毒性.结论:当治疗剂量大于5.0mg/kg时,左旋棉酚可通过增殖抑制和诱导凋亡,明显抑制裸鼠人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤的生长.     

红花水提物不同有效部位的体外 抗辐射作用及 机制研究

目的：通过对红花水提物中不同有效部位进行抗辐射效应及作用机制的初步探讨,为开发新型安全有效的辐射防护药物提供实验依据。方法：红花药材用蒸馏水60 ℃提取得红花水提物,采用大孔树脂HP-20洗脱分离得到水部位和30%、50%、70%、95%醇部位,采用电子自旋共振波谱仪（ESR）检测红花水提物不同有效部位清除自由基的能力;经红花水提物30%及5%醇部位处理后,利用CCK-8法检测其对⁶⁰Co γ射线照射后人肝L02细胞存活率的影响;流式细胞术研究其对⁶⁰Co γ射线照射后人淋巴细胞AHH-1细胞凋亡、细胞周期及Bcl-2/Bax比率的影响。结果：ESR自由基清除实验显示红花水提物的不同有效部位均具有清除自由基能力,半数抑制浓度IC₅₀值为1.7~79.7 mg/mL。CCK-8法检测结果显示30%及50%醇部位处理辐照后L02细胞的存活率分别为128.3%及130.9%,与照射组比较显著增加（P < 0.01）。流式细胞术结果显示与照射组凋亡率（24.7%±4.4%）比较,红花水提物30%及50%醇部位处理组凋亡率分别为15.3%±1.6%及15.2%±1.9%,明显降低（P < 0.01）。细胞周期实验结果显示与照射组AHH-1细胞G2/M期比例（45.7%±0.7%）比较,红花水提物30%及50%醇部位处理组G2/M期细胞比例分别为（42.3%±0.6%）及（36.4%±0.4%）,差异有统计学意义（P < 0.01）,同时红花水提物30%及50%醇部位能缓解照射引起的Bcl-2/Bax比率下降（P < 0.05）。结论：红花水提物的30%及50%醇洗脱部位对⁶⁰Co γ射线照射的L02、AHH-1细胞具有明显的辐射防护作用,其作用机制可能与清除自由基、改善细胞周期G2/M期阻滞、调控Bcl-2/Bax比率进而抑制细胞凋亡有关,可作为潜在的安全有效的抗辐射药物继续研究。     

二甲双胍抑制人MDA-MB-231细胞增殖及迁移的体外实验研究

目的： 研究二甲双胍对体外培养的人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及迁移的影响。方法： MTT实验分为4个处理组,分别为RPMI 1640培养基对照组,浓度为1、2、4 mmol/L的二甲双胍处理组,在作用48、72 h后测定各组的细胞活力并进行统计学分析;倒置相差显微镜下观察药物处理72 h后人乳腺癌MDA-MB-231细胞与对照组相比的形态变化;Giemsa染色观察4 mmol/L二甲双胍作用48 h后的细胞形态;采用细胞划痕实验和Transwell实验,检测二甲双胍（2、4 mmol/L）作用人乳腺癌MDA-MB-231细胞24 h后,对细胞迁移能力的影响。结果： MTT实验结果显示4 mmol/L二甲双胍作用72 h可显著抑制MDA-MB-231细胞的活力,抑制率为（29.83±2.25）％,与对照组相比,细胞活力降低（P<0.05）。倒置相差显微镜下形态学观察发现,与对照组相比,4 mmol/L二甲双胍处理组细胞密度降低,变圆的细胞数量增加,细胞与细胞之间的联系减少。Giemsa染色结果显示4 mmol/L二甲双胍作用48 h后,部分细胞出现凋亡细胞核碎裂形态。划痕实验结果表明,2、4 mmol/L二甲双胍作用24 h后细胞汇合度明显低于对照组,其中4 mmol/L处理组的划痕愈合率为（52.67±4.48）%,与对照组间的差异显著（P<0.01）;Transwell实验结果表明,2、4 mmol/L二甲双胍作用细胞24 h后穿膜细胞数量减少,穿膜细胞数量分别为（61.6±1.6）、（51.3±2.6）个,均低于对照组的（99.3±18.9）个（P<0.05）。结论： 二甲双胍在体外可抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖及迁移。     

神经母细胞瘤1例误诊分析

患儿,男,7岁,因右眼眶皮肤瘀斑3个月、进行性面色苍白1个月住院。患儿于入院前3个月因右眼眶碰伤,右眼眶皮肢出现瘀斑,就诊于当地医院,按“眼眶外伤”住院治疗二个月,无明显好转。行眼部CT检查示:外伤后血块机化,继续以外伤处理。于入院前1个月,患儿出现进行性面色苍白,牙龈渗血。查骨髓象,诊断为急性淋巴细胞白血病L_2型,给予DOP,DOAP,2个疗程化疗及对症治疗,症状仍无明显好转,遂转我院治疗。查体:T36.8C,神志清楚,中度贫血貌,右眼眶皮肤见陈旧性瘀斑,左颈部可触及1个约2cm×2cm大小淋巴结,质硬、表面光滑、无触痛、较固定,咽不红,颈软,胸骨无压痛,心肺无异常,腹平软,肝脾肋下末触及,睾丸无肿大,无硬结,神经系统无异常。Hb 72g/L,WBC 1.6×10~9/L,N 0.52、L 0.48,PLT 50×10~9/L;尿VMA阳性。腹部