双单倍体南瓜后代子叶离体再生植株研究

【目的】探索一种快速扩繁南瓜双单倍体植株的技术,以扩大双单倍体植株的数量,提高其育种效率。【方法】以双单倍体南瓜后代子叶为外植体,在MS培养基中分别添加不同质量浓度的6-BA（1.0,4.0 mg/L）和NAA（0.05,0.1,0.2,0.5,1.0 mg/L）,筛选最佳组合;在此基础上,继续添加不同质量浓度的2,4-D（0.5,1.0,1.5,2.0 mg/L）,筛选3种激素的最佳组合。在MS＋6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L的不定芽诱导培养基上,研究其对不同苗龄子叶的诱导效果。将不定芽接种在含不同质量浓度NAA (0.05, 0.1, 0.2, 0.5 mg/L)的MS生根培养基上,比较生根率和根系生长势。【结果】在诱芽培养基中,添加2种激素时,以6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L的MS培养基诱导率最高,为66.67％,分化系数为3.89;添加3种激素时,以6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L＋2,4-D 1.5 mg/L的MS培养基诱导率最高,达80.95％,分化系数为4.12。当子叶展开后苗龄为3 d时,不定芽诱导率相对较大,为77.42％。不定芽在MS+0.1 mg/L NAA培养基上生根效果最好,根系生长健壮,生根率达100%。【结论】双单倍体南瓜后代子叶离体再生的适宜激素质量浓度组合为MS＋6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L;以展开后3 d苗龄的子叶作为外植体诱导效果最好;MS+0.1 mg/L NAA是不定芽诱导生根的最适培养基。     

用于遗传转化的花生植株再生体系研究

以广西花生主栽品种桂花17和桂花22的成熟种子胚小叶为外植体,探讨外植体处理方式、不同激素组合和蔗糖浓度对外植体不定芽诱导、继代、生根培养的影响。结果表明,在MS培养基中预培养0、4d的花生种子的胚小叶利于不定芽的诱导,具有较高的分化率;近叶柄1/3处横切的小叶不定芽分化率较远离叶柄部位的高。适宜小叶不定芽分化的蔗糖浓度为40～50g/L,40、50g/L蔗糖分别利于桂花22、桂花17不定芽的分化。培养基MS＋4.0mg/L 6-BA＋1.0mg/L NAA＋2.0mg/L AgNO3对桂花17不定芽的分化效果较佳,MS＋6.0mg/L 6-BA＋1.0mg/L NAA＋2.0mg/L AgNO3利于桂花22不定芽的分化,两者的不定芽分化率均达100%;继代培养基MS＋1.5mg/L 6-BA＋0.4mg/L NAA有利于促进两个花生品种的不定芽成苗,而最佳生根培养基为1/2 MS＋0.5mg/L 6-BA＋2.0mg/L NAA。已构建的花生植株再生体系,不定芽分化率高,再生植株多,适合进行花生的遗传转化。     

番茄叶片再生系统建立的研究

比较了不同基本培养基、不同激素及其不同浓度组合对4个番茄栽培品种叶片诱导愈伤组织、不定芽分化及其生根的效果.结果表明:MS+6-BA 3.0mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖30 mg/L(pH=5.8)对愈伤组织诱导及诱导愈伤组织分化不定芽的效果最佳;MS+IAA 0.1mg/L+蔗糖20mg/L培养基对生根最好。     

黄灯笼辣椒子叶离体培养与植株再生

以黄灯笼辣椒无菌苗子叶为外植体,研究激素对不定芽分化及植株再生的影响。结果表明:6-BA对子叶不定芽的诱导效果最好;IAA与6-BA配合能明显提高子叶不定芽的分化率;在分化培养基中添加4mg/LGA3,有利于不定芽的伸长。不定芽分化的最适培养基为MS 6-BA5mg/L IAA1mg/L AgNO36mg/L,平均诱导率达75%;不定芽伸长的最适培养基为MS 6-BA3mg/L IAA1mg/L AgNO36mg/L GA34mg/L,平均伸长率可达90%;最佳生根培养基为MS IAA0.5mg/L,生根率达95%;建立了辣椒子叶植株再生体系。     

猫尾射的组织培养

以猫尾射无菌播种苗（去除根部）为外殖体,对其愈伤组织诱导和分化及其不定芽增殖进行研究。结果表明,外殖体在MS＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L培养基上,愈伤组织诱导和分化的效果较好,愈伤诱导率为82.0%,分化率为74.5%;经不定芽增殖培养基MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.05 mg/L培养,不定芽增殖倍数为8.2,平均株高为4.7cm。组培苗在MS＋IBA0.5mg/L培养基上生根率达90%。生根苗移栽成活率达84%。     

青岛百合组织培养研究

以青岛百合叶片为外植体,研究了消毒时间、培养基、生长调节物质对青岛百合叶片不定芽发生、增殖和生根的影响。结果表明：用0.1%氯化汞对青岛百合叶片消毒5min时效果最好,污染率为31%,萌动率为79%,诱导率为65.2%。青岛百合最佳叶片不定芽分化培养基为MS＋6-BA2.0mg/L＋NAA0.2mg/L;最佳不定芽增殖培养基为MS＋6-BA1.0mg/L＋NAA0.2mg/L;最佳生根的培养基为1/2MS＋NAA0.2mg/L,形成了较为完善的组织培养再生体系。     

辣椒的离体培养及再生体系研究

以辣椒子叶、真叶、下胚轴为外植体材料进行离体培养,结果发现,以子叶为培养材料最理想。在MS附加不同激素配比的培养基上,对不定芽分化、伸长及伸长不定芽生根诱导研究的结果表明,最适合芽分化的培养基为MS+6-BA 5.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L,芽伸长最优组合为MS+ZT 2.0 mg/L+GA2.0 mg/L;不定芽伸长后在1/2 MS+NAA 0.1~0.3 mg/L培养基上生根效果最好。     

甜瓜品种‘GT-1’真叶再生体系的建立

以甜瓜薄皮品种‘甘甜一号’(‘GT-1’)为材料,研究了不同生长素对甜瓜真叶外植体不定芽分化的影响以及不同生长素、无机盐和糖浓度对甜瓜生根的影响.结果表明,‘GT-1’在含有MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.01mg/L的分化培养基上的不定芽诱导率最高,达95%,诱导真叶外植体分化附加IBA,对不定芽的分化诱导并不明显;在1/2MS+IBA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L的诱导生根培养基上生根效果最好,生根率达97.5%.     

扶芳藤不定芽再生体系的建立

以扶芳藤无芽茎段和下胚轴为外植体,建立了稳定高效的不定芽再生体系。MS＋6-BA 1.5 mg/L＋IBA0.1 mg/L对诱导无芽茎段产生不定芽最为有利,再生率为82.6%。以下胚轴为外植体时,预培养50 d更有利于不定芽的诱导,中浓度的6-BA（1.3 mg/L和1.5 mg/L）对直接分化产生不定芽有利,培养基MS＋6-BA1.5 mg/L＋NAA0.1 mg/L上不定芽再生率最高,达到95.7%。以绵白糖和蔗糖为碳源均能达到较好的再生效果（80%以上）,以葡萄糖为碳源时再生率虽然高达100%,但玻璃化严重。生根培养基以1/2 MS＋IAA（0.7 mg/L）最好,生根率高达92.9%,经驯化后移栽成活率在90%以上。     

石胡荽组织培养及无性系建立的研究

为了保护野生资源,实现石胡荽人工栽培,我们以石胡荽嫩茎为材料进行了不定芽诱导与分化、试管苗生根、继代、移栽和定植研究。结果表明：MS＋6-BA 0.4mg/L＋NAA 0.1mg/L是石胡荽嫩茎直接诱导分化不定芽的理想培养基;MS＋NAA0.1mg/L＋GA3 0.5mg/L＋6-BA 0.6mg/L是石胡荽不定芽增殖分化培养的理想培养基;把不定芽下部切口浸入浓度为40mg/L的IAA溶液处理6min后,接种到N6＋NAA 0.2mg/L培养基上进行生根培养的方法是石胡荽不定芽生根培养的理想方法。试管苗的移栽和定植易成活,定植的试管苗保持了野生石胡荽的所有植物学性状。建立起石胡荽嫩茎无性系。     

红茄子叶的不定芽诱导及植株再生

【目的】研究不同激素浓度和组合对红茄不定芽及根诱导的影响,建立红茄的高频再生体系,为开展茄子的遗传转化研究奠定基础。【方法】以红茄子叶为外植体,采用0.5~2.0 mg/L 6-BA、0.1~0.5 mg/L IAA激素组合对不定芽进行诱导,采用0~0.5 mg/L IAA对根进行诱导,筛选出最佳的分化培养基和生根培养基。【结果】在不定芽诱导培养基中,当6-BA浓度在0.5~2.0 mg/L时,随着浓度增加,不定芽分化率逐渐升高;当 IAA浓度在0.1~0.5 mg/L 时,随着IAA浓度的增加,不定芽萌发率呈先增加后降低趋势,其中以添加6-BA 2.0 mg/L、IAA 0.3 mg/L的诱导效果最好,分化率高达86%。在根诱导培养基中,随着IAA浓度的增加,根诱导率呈先降低后升高趋势,诱导率可达100.0%。【结论】红茄子叶不定芽诱导最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA;不定芽生根最佳培养基为MS+0.1 mg/L IAA。     

激素对非洲菊花托愈伤组织诱导和不定芽分化的影响

在MS培养基中分别加入不同浓度的6-BA和NAA,对非洲菊的幼嫩花托进行培养。结果表明,不同激素组合对非洲菊愈伤组织的诱导、不定芽的分化和不定芽的增殖影响明显,以MS+6-BA 7 mg/L+NAA 0.5 mg/L+琼脂9 g/L+3%蔗糖为最佳培养基。     

川芎的组织培养技术研究

探索川芎的不同组培条件,优化其诱导和分化培养基。以川芎根、茎段和叶片作外植体进行组织培养,获得了大量的组培苗,建立了相应的植株再生系统。川芎根诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 1.2 mg/L;茎段及叶片诱导愈伤组织的最佳培养基均为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L;根愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.2 mg/L+IAA 0.3 mg/L;茎段及叶片愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+KT 2.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L。根外植体在愈伤组织、分化不定芽和生根方面的诱导率分别为84%、86%和87%;茎段和叶片愈伤组织的诱导率达到92%和96%,其不定芽分化率为98%,生根率为93%。经炼苗后,获得的组培苗的移栽成活率达98%。提出了优化激素搭配的培养基,得到了高效的诱导率、分化率和生根率。     

佛甲草的组培快繁技术研究

[目的]通过组织培养技术建立佛甲草快繁体系,为更好满足市场需要、实现其生态景观效益提供材料。[方法]以佛甲草茎段为外植体,研究不同浓度配比的激素对组培过程中不定芽诱导、丛生芽增殖及生根的影响,筛选出各阶段最适培养基。[结果]佛甲草不定芽诱导最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+活性炭1.6 g/L;丛生芽增殖最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+活性炭1.6 g/L;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L。[结论]以茎段为途径建立佛甲草快繁体系,能够高效稳定地获得组培苗。     

钙果不定芽生根诱导研究

[目的]研究间苯三酚(PG)、NAA和IBA对钙果不定芽生根的影响,为钙果组培苗的批量生产提供技术参考。[方法]以1/2 MS为基本培养基,利用PG、NAA和IBA不同浓度的组合对钙果不定芽进行生根诱导,研究不同组合培养基的诱导生根效果。[结果]培养基中单独添加IBA、NAA或PG均不能诱导钙果生根;不同浓度的IBA和NAA组合诱导生根率低于5.0%;PG配合IBA和NAA使用可明显促进钙果生根,其中以培养基1/2 MS+PG 5.0 mg/L+IBA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L生根效果最好,培养20 d,钙果生根率达85.0%,且根系正常。[结论]适宜浓度的PG配合IBA和NAA使用,使钙果的生根率明显增加,以1/2 MS+PG 5.0 mg/L+IBA 1.5mg/L+NAA 0.05 mg/L培养基生根效果最好。     

穿山薯蓣不定芽的诱导与植株再生

以穿山薯蓣带腋芽茎段为外植体进行离体培养,通过正交试验筛选出最佳的诱导和增殖培养基,利用单因子试验筛选出最佳生根培养基。结果表明,培养基MS BA2．0mg／L NAA0．5mg／L为不定芽诱导的最佳培养基,诱导率为100％;培养基MS BA2．0mg／L NAA0．1mg／L最有利于植株再生,增殖倍数达4．9;培养基1／2MS NAA0．4mg／L对穿龙薯蓣试管苗生根培养较适合,生根率达86．7％;在塑料拱棚中利用蛭石：泥炭土：珍珠岩=3：3：1为移栽基质,移栽成活率可达85％以上。     

甜瓜黄醉仙子叶再生体系的初步建立

[目的]选出最适宜诱导甜瓜黄醉仙子叶愈伤组织和不定芽的培养基,以及适宜其不定芽伸长和生根的培养基。[方法]以甜瓜黄醉仙子叶为外植体,研究添加不同浓度BA和IAA激素组合的MS培养基对其愈伤组织和不定芽诱导及不定芽伸长的影响,以及添加不同浓度IBA激素组合的MS培养基对其生根的影响。[结果]最适宜诱导甜瓜黄醉仙子叶愈伤组织培养基是MS+0.5 mg/L BA+2.0mg/L IAA和MS+1.0 mg/L BA+2.0 mg/L IAA,最适宜其子叶不定芽诱导的培养基是MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L IAA,不定芽伸长的最适宜培养基是MS+1.0 mg/L IAA,生根的适宜培养基是1/2MS+1.0 mg/L IBA。[结论]初步选出一套完整适宜甜瓜黄醉仙子叶再生体系建立的培养基。     

非洲菊愈伤组织诱导和不定芽分化研究

以非洲菊深圳5号为材料,研究了几种因素对非洲菊花托愈伤组织诱导和不定芽分化的影响,结果表明,花托在1/2MS 6-BA 10 mg/L NAA 0.2 mg/L IAA 0.3 mg/L培养基中诱导愈伤组织的速度最快,诱导率达100%;花托在在1/2MS基本培养基中诱导出的愈伤组织较少褐变,且易分化不定芽;将愈伤组织转接到1/2MS 6-BA 3 mg/L NAA 0.2mg/L IAA 0.1 mg/L培养基中进行继代增殖培养可有效降低褐化率,不定芽分化率达67.5%、不定芽平均数为2.3株,指出高效的愈伤组织和不定芽再生频率为非洲菊基因转化体系的建立奠定了基础。