乙型肝炎表面抗原检测的钩状效应

目前，检测乙肝表面抗原(HBsAg)普遍采用ELISA双抗体夹心一步法。但在日常工作中会发现HBsAg出阴性而HBsAg阳性的现象，其原因就是当标本中的抗原浓度过高时产生的钩状效应(HOOK)现象，从而出现假阴性造成真阳性的漏检。为此，我们对17例HBsAg阴性而HBeAg阳性的标本，分别用一步法和二步法进行检测比较，以探讨一步法试剂的HOOK现象及二步法的实际应用意义和价值，现报告如下。     

高浓度乙肝表面抗原的钩状效应分析

[目的]减少乙肝检测中因HBsAg浓度过高而产生的假阴性。[方法]取乙肝二对半检测中的HBV e抗原(HBeAg)和核心抗体(HBcAb)阳性的血清标本22份倍比稀释至1∶2 048,用一步法和二步法分别检测比较。[结果]22份样本中,20份二步法检测为阳性,一步法在不同稀释度检测结果不同(高浓度时阴性,稀释至1∶2 048时阳性),有2份两种方法均阴性。[结论]二步法检测可避免高浓度HBsAg在一步法由于钩状效应所造成的错判。     

微波-ELISA二步法检测乙肝标志物在工厂体检中的应用

目的：探讨微波-ELISA二步法用于工厂体检中的要求及其准确性。方法：对1128份做HBsAg和HBeAg检查的工厂体检标本，对照常规ELJSA法．做微波-ELISA二步法检测；并对HBsAg阳性结果复查。结果：ELISA有119份HBsAg阳性，32份HBeAg阳性；微波法有122份HBsAg阳性，34份HBeAg阳性；HBsAg阳性结果经胶体金HBsAg快速检测纸条检测均为阳性。结论：微波-ELISA二步法检测乙肝标志物具有时间短、操作简便，灵敏度高等特点，用二步法进行检测，可减少HOOK现象，可用于检测HBsAg和HBeAg的大量工厂体检中，能加快出报告时间，大大提高工作效率。     

乙型肝炎病毒宫内感染及其相关因素的研究

目的探讨孕妇血清乙型肝炎病毒(HBV)标志物与胎儿宫内感染发生的关系。方法将62例HBsAg阳性孕妇及其胎儿为观察组,60例HBsAg阴性孕妇及其胎儿为对照组。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组孕妇血清HbsAg、HBeAg、及经利凡诺尔引产的胎儿心脏血清HBsAg,用Southern印记杂交法检测两组孕妇血清HBV-DNA和胎儿肝细胞HBV-DNA。结果观察组62例HbsAg阳性孕妇血清中,HBeAg阳性26例,HBV-DNA阳性44例;其胎儿HBsAg阳性9例(14.52%),HBV-DNA阳性10例(22.73%)。对照组60例HBsAg阴性孕妇血清中,HBeAg阳性4例,HBV-DNA检测结果均为阴性。其胎儿HBsAgl例(1.67%),HBV-DNA检测结果均阴性。胎肝HBV-DNA的整合与孕妇HBV-DNA存在相关(x2=4.88,P<0.05)。结论 HBV可以进入宫腔内感染胎儿,同时证明孕妇HBeAg和HBV-DNA阳性是胎儿宫内感染HBV的高危因素。     

探讨酶联免疫吸附试验检测乙肝核心抗体假阴性的问题

目的:了解用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝二对半核心抗体(抗-HBc)的假阴性。方法:留取用ELISA检测HBsAg阳性、HBeAg阳性、抗-HBc阴性血清标本201份,分别用美国雅培AXSYM免疫发光仪微粒子酶免疫技术(MEIA)定量检测抗HBc、ELISA进行原倍和生理盐水15倍稀释测定。结果:MEIA法定量检测抗-HBc阳性166份,阳性检出率为82. 6%;阴性(S/Co>1 0)35份,与ELISA一步法相比阴性符合率为19 .9%,生理盐水15倍稀释阳性33份,阳性检出率为19 4%,原倍血清100% 阳性。结论:MEIA法定量检测的阳性率远远高于ELISA法检测, 15倍稀释测定结果阳性率比30倍稀释有所提高,原倍血清仅作为流行病学调查结果。     

乙型肝炎血清标志物与HBV-DNA水平关系探讨

目的探讨乙型肝炎患者血清标志物与HBV-DNA水平之间的关系。方法选择2009年1月—2012年11月收治的乙型肝炎患者722例,根据入院乙型肝炎五项检测结果,HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性患者213例为A组,HBsAg、HBeAg阳性患者25例为B组,HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性患者311例为C组,HBsAg、抗-HBc阳性患者129例为D组,HBsAg阳性患者44例为E组。用ELISA法检测血清标志物,用PCR法检测HBV-DNA水平,并对检测结果进行比较。计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 HBeAg阳性239例,其中HBV-DNA阳性226例,阳性率94.56%;HBeAg阴性483例,其中HBV-DNA阳性226例,阳性率46.79%。HBeAg阳性与HBeAg阴性患者HBV-DNA阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。HBV-DNA检测阳性A组204例,占95.77%;B组22例,占88.00%;C组160例,占51.45%;D组50例,占38.76%;E组16例,占36.36%。HBV-DNA检测阴性A组9例,占4.23%;B组3例,占12.00%;C组151例,占48.55%;D组79例,占61.24%;E组28例,占63.64%。结论对乙型肝炎患者血清标志物进行检测,可了解HBV在体内的感染情况,但不能直接反映HBV在患者体内的复制情况,HBV-DNA水平检测可以更好地反映病毒的复制情况。     

乙型肝炎病毒血清标志e抗原两种模式在不同病毒复制水平中的分布及其与丙氨酸转氨酶的关系

〔目的〕分析乙型肝炎病毒感染者HBV血清标志e抗原（HBeAg）的阳性与阴性模式在不同病毒复制水平中的分布,并分析这2种模式与丙氨酸转氨酶（ALT）的相关性。〔方法〕应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HBV感染血清标志,运用荧光实时定量PCR法测定HBV的拷贝数,采用速率法测定血清内的ALT。〔结果〕随着病毒复制水平的升高,HBsAg和HBeAg阳性乙肝病毒感染者的检出率显著增加,HBsAg阳性和HBeAg阴性乙肝病毒感染者的检出率具有逐渐减少的趋势;而且HBsAg和HBeAg阳性组的ALT水平要显著高于HBsAg阳性和HBeAg阴性组（P〈0.001）。〔结论〕HBeAg阳性检出率与病毒复制水平和ALT异常的检出率间存在相关性,进一步证实了HBeAg阳性是反映HBV复制水平的可靠指标,可作为疾病进展的参考依据。     

中和试验在确认HBsAg弱反应性样本中的意义

目的探讨中和试验在确认HBsAg弱反应性样本中的意义。方法对用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测出的126例HBsAg弱反应性患者的血清标本进行以微粒子酶免疫法(microparticle enzymeimmunoassay,MEIA)检测,确认样本是真或假阳性,再进行中和试验分析检测结果。结果在126例HBsAg弱反应性样本中,MEIA确认的阴性为15例,该15例用中和试验法检测也为阴性;而其余的111例用MEIA确认为阳性,它们按ELISA法测得到的S/CO值分类4组:S/CO值在3.1~5.0的48例,中和抑制率为75.5%±12.5%;在2.1~3.0的30例,中和抑制率为80.3%±5.1%;在1.1~2.0的24例,中和抑制率为70.2%±8.7%,这3组样本的中和抑制率都高于50%,均可确认为阳性;S/CO值在0.6~1.1的9例,中和抑制率为50.0%±3.1%,这组样本用中和试验无法确认。结论对于ELISA法的S/CO值>1.1的弱反应性样本,中和试验可确认其真假阳性,结果与MEIA法完全一致,但S/CO值<1.1的样本不宜用中和试验确认。     

HBV核酸与HBV血清标志物的关系研究

〔目的〕探讨乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)与HBV血清标志物的关系。〔方法〕将血清样本用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测HBV-DNA和乙型肝炎病毒标志物。〔结果〕A组(HBsAg和HBeAg两项阳性)、B组(大三阳)、C组(HBsAg、HBcAb两项阳性)和D组(小三阳)的HBV-DNA阳性率分别为97.06%、88.24%、57.14%和43.33%,HBV-DNA量的对数均值分别为6.0267、5.5667、4.9639、5.1520、5.4574,各组间HBV-DNA阳性率和HBV-DNA量均存在显著性差异(P<0.05);178份HBV-DNA阳性标本中HBsAg100.00%阳性;HBsAg阳性、HBeAg阳性和HBsAg阳性,HBeAg阴性组中HBV-DNA阳性率分别为89.34%和44.52%,存在显著性差异(P<0.05)。〔结论〕HBsAg和HBeAg两个阳性组病毒复制最活跃,HBV-DNA阳性率和HBV-DNA量显著高于其它组别;HBeAg与HBV-DNA密切相关,但不能完全反映HBV在体内的复制情况,将FQ-PCR定量检测作为血清学方法的补充具有重要的临床意义。     

ELISA—步法检测乙肝表面抗原需注意“前带现象”

检测乙肝表面抗原(HBsAg)由二步法改为一步法大大缩短了实验时间。但我们发现高滴度HBsAg血清在检测中存在“前带现象”易出现假阴性结果,给诊断带来误差。我们经多次试验,建议凡在检测中出现HBsAg、(HBeAg)~-、抗-(HBC)~-结果,可将血清稀释或采用二步法复检,以避免阳性标本漏检。     

2007年贺州市食品及公共场所从业人员HBsAg、HBeAg携带情况

目的了解贺州市食品及公共场所从业人员HBsAg、HBeAg携带情况，旨在更有效地控制乙型肝炎流行。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA），对该市食品及公共场所从业人员进行HBsAg、HBeAg检测。结果共检测7261人，其中HBsAg阳性661人，阳性率9．1％，男性高于女性。在661人HBsAg阳性者中，HBeAg阳性219人，阳性率33．13％，其阳性率随年龄递增而下降。结论该市食品及公共场所从业人员HBsAg阳性率低于全国HBsAg阳性率平均水平（9．75％），但仍需继续加强对HBsAg、HBeAg携带者的管理。     

剖析住院患者中的乙肝病毒携带状态

目的 剖析住院患者中的乙型肝炎病毒（HBV）携带状态,为制定护理人员HBV职业感染的防护方法提供依据.方法对992例连续入院的住院患者入院时取空腹静脉血3 ml,分离血清于-40℃保存备用.使用ELISA法检测每份血清的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）.使用套式聚合酶链反应（n-PCR）检测所有HBsAg阳性患者和100例连续入院的HBsAg阴性患者血液的HBV DNA.将n-PCR检测HBV DNA低限作为一个HBV感染剂量,使用n-PCR极量稀释法检出每份HBV DNA阳性血清所含的HBV感染剂量/ml,以此作为HBV传染性或病毒浓度的指标.结果 992例住院患者中156例HBsAg阳性（HBsAg阳性者）,依据HBeAg是否阳性将HBsAg阳性者分为HBeAg阳性和阴性2种类型,HBeAg阳性者31例（19.87%）,阴性者125例（80.13%）.73.7% 的HBsAg阳性者HBV DNA阳性,病毒浓度范围为0～109感染剂量/ml,26.3%的 HBsAg阳性者HBV DNA阴性,病毒浓度在n-PCR的检测阈值之下.9%的HBsAg阴性者HBV DNA阳性,病毒浓度范围在0～104感染剂量/ml,最大传染性较HBsAg阳性者小105感染剂量/ml.HBeAg阳性者的病毒浓度范围在102～109 感染剂量/ml,阴性者在0～106 感染剂量/ml;HBeAg阳性者的病毒浓度较阴性者高103倍.结论住院患者中存在隐匿性和HBsAg阳性2种HBV携带状态,两者的最大HBV浓度相差105感染剂量/ml;HBeAg阳性者是HBV携带者中传染性较强部分,病毒浓度较阴性者高103倍.这些特点可为制定护理人员HBV职业感染的防护方法提供依据.     

联合检测乙肝病毒Pre-S1和HBcAg的价值探讨

目的探讨联合检测乙肝病毒前S1蛋白(Pre-S1)以及乙肝病毒核心抗原(HBcAg)在乙肝患者临床诊疗中的价值。方法选取2009年3月至2010年11月于我院就诊的乙肝患者220例,用荧光定量PCR法检测HBV DNA,用酶联免疫法(ELISA)检测Pre-S1和HBcAg(即乙肝病毒核酸相关抗原。HBV Nucleic acid Related Antigen,HBV-NRA),并检测HBsAg、HBeAg、HbcAb、HBcAb,对比分析检测结果。结果 HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性79例,HBV-NRA阳性77例;HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性70例,HBV-NRA阳性67例;HBsAg、HBcAb阳性61例,HBV-NRA阳性61例;HBsAg和(或)HBeAg阳性10例,HBV-NRA阳性9例。HBV-NRA检出率为97.3%(214/220)。结论联合检测Pre-S1和HBcAg可作为判断患者乙肝病情指标之一,在乙肝患者临床诊疗中有较高价值。     

乙型肝炎病毒宫内感染的分子流行病学研究

目的为了掌握乙型肝炎病毒宫内感染的发生率和危险因素,探讨HBV相关抗体在胎儿体内产生的作用。方法用ELISA法筛选出HBsAg阳性孕妇及引产胎儿153例 ,HBsAg阴性孕妇及胎儿65例 ,共218例。然后用多聚酶链技术对孕妇 -引产胎儿HBV宫内感染进行检测。结果HBsAg阳性孕妇HBVDNA宫内感染率为53.59 %(82/153) ,HBsAg阴性孕妇静脉血中6.15%(4/65)检出HBVDNA阳性 ,两者相比有显著性差异 (P<0.01) ;母亲血中HBsAg、HBeAg、抗 -HBc同时阳性其相应胎儿HBVDNA感染率为92.5%(74/80) ,46例抗 -HBs阳性的胎儿血有5例检出HBVDNA阳性。结论HBV宫内感染率较高 ,HBsAg阴性孕妇也可能发生HBV宫内感染 ,应引起人们的重视     

乙肝病毒携带产妇乳汁、唾液乙肝病毒标志物检测结果分析

目的:探讨乙肝病毒携带产妇乳汁、唾液中乙肝病毒的携带情况,以指导正确进行母婴喂养和母婴接触。方法:用ELISA法检测32例携带乙肝病毒产妇的血液、乳汁、唾液乙肝病毒标志物;用荧光定量PCR法检测其中25例孕产妇血清的HBV-DNA含量。结果:乙肝病毒携带产妇的乳汁HBsAg阳性率为40.6%,唾液HBsAg阳性率为37.5%,两者没有显著性差异(P>0.05);血HBeAg阳性产妇乳汁和唾液HBsAg阳性率、血HBV-DNA阳性率均比HBeAg阴性者高(P<0.05);部分HBeAg阴性乙肝病毒携带产妇血清HBV-DNA阳性,乳汁和唾液中也能检出HBsAg。结论:①血HBeAg阳性产妇乳汁、唾液潜在传染性高,建议采用人工喂养,最好适当进行母婴隔离。②血HBeAg阴性乙肝病毒携带产妇仍有传染HBV的可能,建议检测血HBV-DNA含量,以指导正确进行哺乳及母婴接触。     

联合检测乙肝病毒Pre-S1和HBcAg的价值探讨

目的探讨联合检测乙肝病毒前s1蛋白（Pre-S1）双及乙肝病毒核心抗原（HBcAg）在乙肝患者临床诊疗中的价值。方法选取2009年3月至2010年11月于我院就诊的乙肝患者220例，用荧光定量PCR法检测HBvDNA,用酶联免疫法（ELISA）检测Pre-S1和HBcAg（即乙肝病毒核酸相关抗原。HBV Nucleic acid Related Antigen，HBV-NRA），并检测HBsAg、HBeAg、HbcAb、HBcAb，对比分析检测结果。结果HBsAg，HBeAg、HBcAb阳性79例，HBV-NRA阳性77例；HBsAg，HBeAb、HBcAbFO性70例，HBV-NRA阳性67例；HBsAg、HBcAb阳性61例，HBV--NRA阳性61例；HBsAg和（或）HBeAg阳性10例，HBV--NRA阳性9例。HBV—NRA检出率为97．3％（214／220）。结论联合检测Pre-S1和HBcAg可作为判断患者乙肝病情指标之一，在乙肝患者临床诊疗中有较高价值。     

乙型肝炎病毒血清学标志物不同检测方法比较

目的以微粒子酶免疫分析(MEIA)为金标准,探讨时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)在乙型肝炎病毒血清学标志物检测中的临床应用价值。方法分别采用MEIA法、TRFIA法、ELISA法对260份乙型肝炎患者的血清标本进行HBsAg、HBeAg和HBeAb3项指标的检测。结果TRFIA法和ELISA法分别与MEIA法进行比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但3项指标的符合率ELISA法均不如TRFIA法高,在检测临床标本时,用ELISA法测定HBsAg、HBeAg和HBeAb比TRFIA法易出现假阴性,测定HBeAg、抗-HBe时,这两种方法都有假阳性可能。结论时间分辨荧光免疫法是目前临床上用于检测乙型肝炎病毒血清学标志物的较为灵敏、特异、准确的的检测方法。     

MEIA法测定HBV血清标志物的临床应用意义

目的通过与酶联免疫吸附试验(ELISA)的比较,了解微粒子酶免疫分析法(MEIA)对乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物的检测性能。方法分别用MEIA法和ELISA法对HBV感染者的血清标志物(HBsAg、HBeAg、抗HBc和抗HBe)进行检测。结果1140例患者血清HBV标志物检测,MEIA法阳性率为:HBsAg94.00%,HBeAg46.75%,抗HBc97.96%,抗HBe61.41%;ELISA法阳性率为:HBsAg91.89%,HBeAg36.14%,抗HBc93.26%,抗HBe18.11%;MEIA法阳性率高于ELISA法,其中对HBeAg和抗HBe的检测,两种方法差异有高度显著性(P<0.01)。与MEIA法比较,ELISA法检测HBsAg的相对灵敏度达97.46%,抗HBc为94.93%,HBeAg为73.41%,抗HBe最低,为41.73%。对一些低滴度的HBeAg/抗HBe的HBV感染者,ELISA法检测可出现假阴性。结论对于血清HBV标志物的检测,MEIA法和ELISA法均有较高的特异性,但MEIA法敏感性优于ELISA法。     

乙肝标志物检测在母乳喂养中的意义

目的研究乙肝表面抗原阳性产妇母乳喂养的安全性.方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乳汁中乙肝标志物及荧光实时定量RCR方法检测HBV-DNA含量.结果253例血清HBsAg阳性产妇的乳汁中,HBsAg阳性167例占66%.对167例HBsAg阳性的乳汁作HBV-DNA定量检测发现HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAg(+)的传染性最高,HBsAg(+)HBeAg (+)HbcAg(+)的传染性相对较低.结论针对乳汁中传染危险性采取措施,指导母乳喂养.     

酶联免疫法与时间分辨荧光免疫法检测HBsAg

目的比较两种方法4种试剂对乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)的检测性能,并探讨HBsAg阳性模式组间及其与HBsAg阴性模式组间的HBsAg浓度差异。方法酶联免疫法(ELISA)定性检测1205例标本。其中153例标本再用3个厂家的时间分辨荧光免疫法(TrFIA)定量测试试剂进行HBsAg比对检测,其余的1052例标本均再用TrFIA法进行HBsAg定量检测,再对1205例标本HBsAg定量结果按抗原抗体模式分组统计分析。结果两种方法4种试剂间HBsAg阳性检出率均无统计学差异(p>0.05),3个厂家的TrFIA法试剂HBsAg定量检测结果相关性良好,r>0.95。TrFIA法能对0.2～1.0ng/ml的低浓度HB-sAg标本进行有效检测。研究发现TrFIA法定量检测未经稀释的HBV感染者血标本HBsAg浓度在0.2～650.0ng/ml间。研究中HBsAg阳性模式中除"HBsAg、抗-HBc"阳性模式组与"HBsAg、e抗体(抗-HBe)、抗-HBc"阳性模式的HBsAg浓度差异无统计学意义(p>0.05)外,其它HBsAg阳性模式间HBsAg浓度差异均有统计学意义(p<0.05),HBsAg阳性模式与HBsAg阴性模式间HBsAg浓度差异均有统计学意义(p<0.05)。结论HBeAg或抗-HBe的出现与HBsAg的浓度呈一定的关系,HBsAg浓度与病毒的复制存在一定的关系。ELISA法HBVM定性检测结合TrFIA法HBsAg定量检测对HBV感染诊断和防治具有重要意义。