孤啡肽对大鼠大脑皮质神经元及星形胶质细胞神经甾体水平的影响

目的研究孤啡肽(orphaninFQ,OFQ)对原代培养的大鼠大脑皮质神经元及星形胶质细胞神经甾体水平的影响。方法固相萃取结合高效液相色谱-质谱联用方法测定细胞培养上清液中神经甾体的水平。结果在神经元与氯化钠溶液对照组相比,OFQ(10μmol·L-1)使硫酸脱氢表雄酮(DS)和硫酸孕烯醇酮(PS)的水平显著降低,使脱氢表雄酮(DHEA)和别孕烯醇酮(AP)的水平显著增加。在星形胶质细胞,与氯化钠溶液对照组相比,OFQ使DS和孕烯醇酮(PREG)的水平显著降低,使DHEA水平显著增加。结论OFQ不同程度影响了皮质神经元和星形胶质细胞神经甾体的合成释放。     

利鲁唑对吗啡躯体依赖的影响及其可能机制

目的：评价利鲁唑对吗啡躯体依赖的调节作用及可能机制。方法：在小鼠吗啡依赖和大鼠依赖模型上分析利鲁唑对吗啡躯体依赖的影响。用化学发光法测定小鼠脑组织NOS活性。结果：在小鼠吗啡躯体依赖模型中，利鲁唑(2．5～10mg/kg,sc)剂量依赖性地抑制吗啡依赖小鼠纳洛酮催促的戒断症状；在大鼠吗啡依赖模型中，利鲁唑(2．5和5mg/kg，sc)使吗啡依赖大鼠纳洛酮催促戒断积分明显降低。利鲁唑能显著降低吗啡依赖小鼠不同脑区(大脑、小脑、丘脑)一氧化氮合酶(NOS)活性。结论：利鲁唑抑制吗啡依赖大鼠和小鼠的戒断症状，机制与抑制吗啡依赖状态下脑组织内NOS活性代偿性升高有关。     

应激诱发吗啡条件性位置偏爱重现大鼠下丘脑和血浆中神经甾体水平的变化

目的 检测吗啡条件性位置偏爱重现大鼠下丘脑和血浆中神经甾体含量的变化。方法 建立大鼠对吗啡的条件性位置偏爱（conditioned place preference，CPP），CPP消退后用足底电击（footshoek）诱发CPP的重现。将大鼠断头取血并取出下丘脑，制备组织习浆，采用液-液萃取和固相萃取法提取下丘脑和血浆中的神经甾体，经衍生化后，采用高效液相色谱-质谱法测定神经甾体含量。结果 与生理氯化钠溶液对照组相比，吗啡CPP重现组大鼠下丘脑中的PREG和PREGS的水平分别升高36％和60％（P〈0．05）。与CPP消退组相比，吗啡CPP重现组大鼠下丘脑中的PREGS水平升高60％（P〈0．05）；吗啡CPP重现组大鼠血浆中的DHEAS水平下降33％（P〈0．01）。结论 足底电击应激诱发吗啡CPP重现时，大鼠下丘脑中的神经甾体PREG、PREGS和DHEAS水平不依赖于血浆中相应的甾体水平变化，其中枢作用可能与应激诱发的吗啡CPP重现行为有关。下丘脑中的PREG和PREGS可能通过其对GABA系统的作用参与足底电击应激诱发的大鼠吗啡CPP重现。     

液相色谱-质谱法同时测定大鼠血浆中游离型神经甾体

目的建立同时测定SD大鼠血浆中脱氢表雄酮(DHEA)、孕烯醇酮(PREG)和别孕烯醇酮(AP)的高效液相色谱质谱法。方法选择甲睾酮(MT)作为内标。雄性SD大鼠的血浆使用液液萃取后,再经固相萃取、衍生化后,以高效液相色谱质谱检测器测定DHEA、PREG和AP的浓度。采用大气压化学离子源(HPLC/APCIMS),选择离子检测方式。结果血浆中DHEA、PREG和AP线性范围分别为:0.030～2.00ng·ml-1,0.025～2.00ng·ml-1,相关系数分别为0.9988、0.9996和0.9988。低、中、高浓度血样的提取回收率在70.4%～92.4%之间,相对回收率为:92.6%～105.6%,日内、日间RSD均小于15%。正常雄性SD大鼠的血浆PREG和AP分别为0.29±0.24ng·ml-1、0.19±0.20ng·ml-1,每ml血浆DHEA含量均低于定量限。结论本实验方法具有灵敏度高、准确度好及变异较小的特点,适合测定雄性SD大鼠血浆中3种游离型神经甾体的含量。     

给药途径对强啡肽A1—13抑制吗啡依赖大鼠戒断症状的影响

目的研究不同给药途径对强啡肽A1-13(Dyn)抑制吗啡依赖戒断症状的影响.方法采用剂量递增法建立大鼠吗啡身体依赖模型;吗啡依赖大鼠戒断症状采用sc 5mg*kg-1纳洛酮激发;Dyn对吗啡依赖大鼠戒断症状的影响采用侧脑室、脊髓及静脉内注射Dyn后,对大鼠经纳洛酮激发后60min内可数和不可数的戒断症状进行评分的方法进行.结果静脉内注射100μg*kg-1 Dyn可短暂抑制戒断症状;髓鞘内注射4μg*kg-1 Dyn可明显抑制绝大部分的戒断症状;侧脑室注射Dyn对吗啡依赖大鼠戒断症状无显著的抑制作用.结论 Dyn抑制阿片类物质戒断症状可能主要是通过脊髓水平起作用的.     

N-硝基-L-精氨酸抑制大鼠吗啡身体依赖的强啡肽机制

目的　研究N 硝基 L 精氨酸 (NO2 Arg)在抑制吗啡身体依赖形成中的作用及探讨强啡肽在该过程中的可能作用。方法　采用剂量递增皮下注射吗啡法建立大鼠吗啡身体依赖模型 ;身体依赖程度采用皮下注射 5mg·kg-1 纳洛酮激发戒断症状并对大鼠 6 0min内可数和不可数的戒断症状评分的方法进行 ;采用放射免疫法分别测定大鼠脑各分区、垂体、脊髓和血浆内免疫活性强啡肽A(ir-Dyn)的含量。结果　NO2 Arg可剂量相关性地抑制吗啡身体依赖的形成 ,其中 5mg·kg-1 NO2 Arg可显著抑制吗啡依赖大鼠大多数戒断症状 ;NO2 Arg处理可显著升高吗啡依赖大鼠脊髓、纹状体、垂体及血浆内ir-Dyn的水平。该作用可被特异性κ -受体阻滞剂norbinaltorphimine (nor-BNI)所拮抗。结论　NO2 Arg剂量相关性地抑制吗啡身体依赖的形成 ,该抑制作用可能与其调节机体内源性强啡肽的水平显著相关     

急、慢性吗啡依赖大鼠脑内Gi2蛋白的表达

目的研究吗啡依赖大鼠腹侧背盖区（VTA）、伏隔核（NAc）、前额皮质（PC）、海马及蓝斑（LC）各脑区Ⅱ型抑制性鸟苷酸结合蛋白（Gi2蛋白）的改变，探讨吗啡依赖的可能机制。方法36只SD大鼠随机分为6组，分别为急性吗啡依赖组、急性吗啡戒断组、急性空白对照组、慢性吗啡依赖组、慢性吗啡戒断组和慢性空白对照组。建立吗啡依赖大鼠模型。戒断组腹腔注射纳洛酮5mg／kg，作用30min。断头处死各组大鼠，取出脑组织，进行冰冻切片。用免疫组化技术检测NAc、PC、LC、VTA和海马的相对Gi2蛋白水平。结果急性吗啡依赖组和戒断组与急性空白对照组比较，NAc区Gi2蛋白水平明显降低（P〈0．01）。慢性吗啡依赖组和戒断组与慢性空白对照组比较，NAc区Gi2蛋白水平明显降低（P〈0．01），LC区Gi2蛋白水平明显升高（P〈0．01）。结论吗啡依赖可引起大鼠脑内Gi2蛋白水平发生改变，但各脑区Gi2蛋白水平的变化并不相同。Gi2蛋白水平改变可能是吗啡耐受和依赖潜在的分子机制。     

CREB1蛋白在大鼠急、慢性吗啡依赖和戒断中的表达变化

目的 研究急、慢性吗啡依赖和戒断对大鼠脑组织cAMP反应元件结合蛋白（CREB1）的表达调节作用。方法 雄性SD大鼠36只，随机分为急性对照组、急性吗啡依赖组、急性吗啡戒断组、慢性对照组、慢性吗啡依赖组、慢性吗啡戒断组，每组6只。采用免疫组化方法测定不同脑区和核团CREB1蛋白表达水平。结果 急性吗啡依赖和戒断抑制蓝斑CREB1蛋白表达。慢性吗啡依赖和戒断增加皮质、海马、蓝斑等脑区核团CREB1蛋白的表达，但是在慢性吗啡依赖和戒断时，伏隔核CREB1蛋白表达下降。结论 急、慢性吗啡依赖和戒断时CREB1在大鼠皮质、海马、下丘脑、蓝斑、伏隔核等脑区的表达存在差异，可能与介导阿片类药物依赖信号转道通路的反应性不同有关。     

糖皮质激素对吗啡依赖大鼠海马c-fos基因表达的影响

目的 观察吗啡依赖大鼠脑内海马区c-fos mRNA水平的变化,研究糖皮质激素(地塞米松)控制阿片戒断症状的分子机理。方法 剂量递增腹腔注射吗啡建立大鼠成瘾模型,给与地塞米松干预,纳洛酮促瘾后观察戒断症状,应用原位杂交方法观察海马区c-fos mRNA。结果 吗啡依赖大鼠经地塞米松干预后,由纳洛酮催促戒断症状评分明显低于未经地塞米松处理组;同时经地塞米松干预后,海马c-fos mRNA的表达量明显低于未经地塞米松处理,但较盐水对照组高。结论糖皮质激素(地塞米松)能抑制吗啡依赖大鼠戒断症状以及海马c-fos mRNA的表达。     

脱氢表雄酮衍生物对东莨菪碱所致小鼠记忆障碍的影响

目的　研究脱氢表雄酮衍生物对小鼠记忆障碍的改善作用。方法　用东莨菪碱造成小鼠记忆障碍模型 ,用水迷宫法测定小鼠的学习记忆功能。结果　小鼠腹腔注射东莨菪碱 4mg·kg-1可造成明显的记忆障碍 ,给予脱氢表雄酮硫酸酯 (0 .1～5mg·kg-1,sc)对记忆有明显改善作用 ,给予脱氢表雄酮唾液酸苷 (0 .1～ 5mg·kg-1,sc)也有改善作用 ,在 1mg·kg-1剂量时能显著减少错误次数、缩短到达平台时间和游泳距离 (P <0 .0 5 )。结论　脱氢表雄酮唾液酸苷有记忆增强作用。     

三七皂苷对大鼠吗啡依赖戒断症状的抑制作用及对海马神经元内游离钙的影响

 目的 研究三七叶的三七皂苷(Arasaponins of Panax notoginseng leaves,APnL)对大鼠吗啡依赖及纳络酮催促戒断症状的抑制作用,以及对大鼠海马神经元内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,进一步探讨APnL抑制吗啡戒断症状的作用机制.方法 应用剂量递增法皮下注射盐酸吗啡建立吗啡躯体依赖模型,腹腔注射纳络酮建立催促戒断模型.在使用吗啡的同时,采用(50、100和200 mg/kg)3种剂量的APnL进行灌胃.第6天上午8:00末次注射吗啡50 mg/kg,观察各组催促戒断症状及体重减轻情况;1 h后急性分离海马神经元,并采用流式细胞技术检测了APnL对吗啡依赖大鼠海马神经元[Ca2+]i的浓度.结果 ①剂量递增法慢性吗啡处理5 d后经ip NAL催促戒断后,与吗啡组相比可明显地诱发大鼠体重减轻和跳跃次数的发生(P＜0.01).②3种不同剂量APnL均可抑制大鼠戒断后体重减轻和跳跃的发生.③APnL可以有效地抑制纳络酮催促戒断所引起的大鼠海马神经元[Ca2+]i浓度的降低,200 mg/kg剂量组作用最佳(P＜0.01).结论 APnL可以缓解纳络酮催促戒断诱导的吗啡成瘾大鼠戒断症状的发生,同时可以抑制纳络酮催促戒断所引起的大鼠海马神经元[Ca2+]i浓度的降低.     

清君饮戒毒效应的实验研究

研究观察中药制剂清君饮对动物药物依赖性的影响。用逐次逐日增加吗啡注射剂量的方法造成大鼠的吗啡依赖性模型后，又分别分为中药大、小剂量组，吗啡维持组，空白对照组，再给予腹腔注射纳洛酮给予催瘾，观察经不同药物处理后动物的戒断症状反应。结果表明：中药能明显抑制成瘾大鼠的戒断症状。主要症状积分值的降低与空白对照组相比有显著差异（Ｐ＜０．０１）并能促进动物体重的恢复。中药的效应与剂量相关     

妊娠合并急性胰腺炎的危险因素及临床诊治分析

目的：探讨妊娠合并急性胰腺炎（acute pancreatitis,AP）的危险因素及临床诊治情况。方法回顾性分析40例确诊AP产妇（AP组）和50名健康产妇（对照组）临床资料,经多因素logistic回归分析妊娠期合并AP的危险因素。对比2组受试者血钙、空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）、血脂[总胆固醇（total cholesterol,TC）、三酰甘油（triglyceride, TG）]、纤维蛋白原（fibrinogen,FIB）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、血清淀粉酶（serum amylase,AMS）、白细胞计数（white blood cells count,WBC）等生化指标检测结果,记录40例AP产妇治疗结局。结果AP组合并胆道疾病、高脂血症、高钙血症、高糖血症比例分别为47.5%、40.0%、42.5%、37.5%,均显著高于对照组（P＜0.05）。经多因素logistic回归分析可知,合并胆道疾病、高脂血症、高钙血症、高糖血症等是影响妊娠合并AP的独立危险因素（P＜0.05）。AP组产妇血钙、FPG、TC、TG、FIB、CRP、AMS、WBC等生化指标检测结果均显著高于对照组（P＜0.05）。40例接受临床治疗的AP产妇均母婴存活,其中27例继续妊娠至足月分娩（10例保守治疗后痊愈,顺产分娩新生儿,母婴平安;17例治疗期间顺产分娩,母婴结局良好）,另4例行腹腔置管引流术,术后保守治疗痊愈,6例保守治疗36 h内行剖宫产分娩,3例行剖宫产后接受腹膜后胰腺坏死组织清除术。结论妊娠期合并胆道疾病、高脂血症、高钙血症、高糖血症等可能增加AP发生风险,需引起临床重视;妊娠期AP产妇多存在血脂、血糖、血钙指标异常情况,早期诊断及治疗是获得理想预后的关键。     

Comparisons of responses by planarian to micromolar to attomolar dosages of morphine or naloxone and/or weak pulsed magnetic fields: Revealing receptor subtype affinities and non-specific effects

Abstract

Purpose: The behavioral responses of planaria to the exposures of a range of concentrations of morphine (μM to attoM) or the μ-opiate antagonist naloxone or to either of these compounds and a burst-firing magnetic field (5 μT) were studied.

Material and methods: The locomotor velocity (LMV) of planaria was measured after individual worms were exposed to increasing concentrations from attomolar to micromolar of morphine or naloxone, physiologically patterned magnetic fields or a combination of the two.

Results: Compared to spring water controls, the 2-hour exposure to the patterned magnetic field before measurement reduced activity by about 50% which was comparable to the non-specific effects of morphine and naloxone across all dosages except 1 attomolar that did not differ from spring water. The specific dosage of 100 nM produced additional marked reduction in activity for planaria exposed to either morphine or naloxone while only 1 pM of morphine produced this effect.

Conclusion: The results support the presence of at least two receptor subtypes that mediate the diminished activity effects elicited by morphine specifically and suggests that exposure to the specifically patterned magnetic field produces a behavioral suppression whose magnitude is similar to the ‘dose independent’ effects from this opiate.     

海洛因依赖者前额叶皮质及杏仁核1H-MR波谱研究

目的 探讨海洛因依赖(HD)患者前额叶皮质及杏仁核1H-MRS特征,以及与吸食海洛因累计总量的关系.方法 选择14例HD患者(HD组)和12名健康志愿者(HC组)行前额叶皮质及双侧杏仁核1H-MRS检查,测量两组前额叶皮质区及双侧杏仁核N-乙酰天冬氨酸/肌酸(NAA/Cr)、胆碱/肌酸(Cho/Cr)值,并采用独立样本t检验进行比较.对HD患者吸食海洛因累计总量[(852±341)g]与前额叶皮质及左、右侧杏仁核区NAA/Cr作直线相关分析.结果 与HC组相比,HD组的前额叶皮质、左侧杏仁核及右侧杏仁核NAA/Cr比值降低,分别为1.44±0.46、1.32±0.08、1.34±0.09,HC组分别为1.50±0.75、1.42±0.08、1.44±0.10,2组间差异有统计学意义(t值分别为1.77、3.41、2.63,JP值均<0.05);HD组前额叶皮质、左侧杏仁核及右侧杏仁核Cho/Cr分别为0.92±0.06、1.20±0.12、1.26±0.15,对照组分别为0.86±0.08、1.07±0.04、1.12±0.11,2组差异有统计学意义(t值分别为2.31、3.60、2.60,P值均<0.05).前额叶皮质、左侧杏仁核及右侧杏仁核代谢物NAA/Cr与海洛因累计吸食总量呈负相关性(r值分别为-0.9159、-0.8756、-0.9399,P值均<0.01).结论 1H-MRS能显示前额叶皮质及杏仁核的神经元受损及神经胶质增生,从该区代谢物的改变反映出HD患者执行及情感功能的异常,其代谢物改变程度与海洛因累计吸食总量有关.