雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠肾组织结构及足细胞nephrin蛋白表达的影响

目的 探讨雷公藤多苷(TWP)对糖尿病肾病大鼠尿蛋白、足细胞损伤及肾皮质nephrin 蛋白表达的影响.方法 建立高脂饮食联合链脲佐菌素诱导糖尿病肾病大鼠模型,随机分为糖尿病肾病模型组、小剂量TWP(6 mg·kg-1·d-1)治疗组及大剂量TWP(12 mg·kg-1·d-1)治疗组,并以正常大鼠为对照,每组12只.干预12周后检测大鼠24 h尿蛋白量、血肌酐及尿素氮水平,并以苏木素-伊红染色(HE)、过碘酸希夫染色(PAS)、Masson染色检测肾组织病理变化;透射电镜测量足细胞超微结构变化;免疫组化检测肾皮质nephrin蛋白表达.结果 与正常大鼠相比,2型糖尿病大鼠尿蛋白明显增加[( 3.28±0.26) mg/24 h vs.(27.60±0.24) mg/24 h],而小剂量及大剂量TWP治疗后大鼠尿蛋白均明显改善[分别为(12.63 ±0.21)及(10.50±0.15) mg/24 h,P＜0.05)],大剂量TWP治疗组尿蛋白低于小剂量TWP治疗组,但差异末达统计学意义.病理分析显示糖尿病肾病模型组表现为肾小球硬化、基底膜增厚,肾小管变形、上皮细胞空泡变性,间质纤维化,足细胞足突增宽、融合、细胞减少,TWP治疗组大鼠肾小球、小管间质及足细胞病变明显减轻.同时免疫组化结果显示TWP治疗使肾脏皮质nephrin蛋白表达增加,且大剂量TWP治疗组高于小剂量TWP治疗组.结论 TWP可能通过增加nephrin的表达,发挥其对糖尿病肾病足细胞功能的保护作用.     

醛固酮受体拮抗剂联合贝那普利对阿霉素肾病大鼠肾组织nephrin、WT1表达的影响

目的观察nephrin和WT1在阿霉素肾病大鼠肾组织中表达的变化,探讨醛固酮受体拮抗剂及贝那普利对其的影响及二者与尿蛋白的关系。方法 SD大鼠60只,随机分为正常对照(A组)、阿霉素肾病(B组)、贝那普利干预(C组)及醛固酮受体拮抗剂联合贝那普利干预(D组)各15只,实验开始后6 w观察大鼠24 h尿蛋白、血肌酐及肾脏病理改变,采用RT-PCR方法对肾组织nephrin和WT1表达进行分析。结果与A组比较,B组24 h尿蛋白明显升高,肾组织nephrin、WT1表达明显降低(P0.01);与B组比较,C、D组24 h尿蛋白定量显著降低(P0.05),D组治疗效果更显著(P0.01);C、D组与同时期B组比较病理变化明显减轻。C、D组肾脏nephrin、WT1表达较B组明显增高(P0.05,P0.01)。结论阿霉素肾病大鼠尿蛋白的变化与肾组织nephrin和WT1的表达改变有关,醛固酮受体拮抗剂及贝那普利可能通过上调nephrin和WT1的表达,降低尿蛋白、改善肾小球足细胞功能。     

活性维生素D对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的抑制效果及其可能机制

目的探讨活性维生素D对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞损伤的抑制效果及其可能机制。方法将48只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组(NC组)、正常大鼠给予活性维生素D干预组(VD组)、DN模型组(DN组)、给予活性维生素D干预的DN模型组(DN+VD组),每组10只。定期收集血、尿标本,18 w末处死,检测尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、尿蛋白水平;分别采用过碘酸雪夫(PAS)、Mssson染色观察肾组织病理改变,电镜下观察足细胞改变。免疫组化检测肾组织VDR和相关蛋白表达情况。Western印迹分析相关蛋白表达与PI3K/p-Akt信号通路的关系。结果造模后6~18 w,与NC组、VD组相比,DN组尿蛋白量明显上升(P<0.05),在给予VD干预后18 w结束时约降低37%。造模18 w后,DN组肾质量体质量比明显高于NC组和VD组(P<0.05),给予VD干预后明显下降。DN组、DN+VD组血BUN水平明显高于NC组和VD组(P<0.05)。NC组和VD组高表达Podocin和Nephrin,DN组大鼠以上两种蛋白表达明显减少;NC组大鼠低表达Desmin,DN组大鼠表达明显增加。给予VD干预后Podocin和Nephrin表达均明显高于DN组,但仍明显低于NC组和VD组;Desmin表达明显低于DN组。DN组大鼠VDR表达水平明显低于NC组和VD组,给予VD干预后表达水平明显上升。DN组大鼠肾组织PI3K-p85表白水平明显低于NC组和VD组,给予VD干预后表达水平明显上升。四组间总Akt水平无明显差异,但DN组p-Akt水平表达明显降低,经VD干预后明显上升。相关性分析显示,Nephrin与VDR、PI3K-p85、p-Akt之间均呈明显的正相关。结论活性维生素D可有效抑制链脲佐菌素(STZ)诱导的DN大鼠足细胞损伤,其机制可能与影响PI3K/p-Akt信号通路有关。     

2型糖尿病大鼠肾组织NF-κB水平的变化

目的探讨核因子(NF)-κB在2型糖尿病大鼠肾组织的表达。方法运用随机数表法将100只健康SD大鼠分为2组,正常组与糖尿病组,糖尿病组复制2型糖尿病大鼠模型。模型构建成功后,于第2、4、8周处死大鼠,采集尿液、血液、肾脏标本。常规生化检测大鼠24 h尿蛋白定量(24 h UP)、空腹血糖(FBG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、血清白蛋白(ALB)水平。HE染色观察大鼠肾脏病理变化。免疫组化染色检测NF-κBp50表达。结果糖尿病组各时期24 h UP、FBG、BUN、SCr水平均显著高于正常组(P0.05),血清ALB水平显著低于正常组(P0.05);与正常组各时期比较,糖尿病组各时期NF-κBp50表达均显著高于正常组(P0.05),且随病程的增长表达增多;NF-κB表达水平24 h UP呈正相关(r=0.852,P0.05),与BUN呈正相关(r=0.715,P0.05),与血清ALB呈负相关(r=-0.689,P0.05)。结论 NF-κB极有可能参与了2型糖尿病肾病的形成,肾组织中NF-κB的表达水平能够反映肾损伤程度。     

原人参二醇对大鼠阿霉素肾病的保护作用

观察20(S)原人参二醇[20(S)-PPD]对阿霉素肾病大鼠的肾脏保护作用并探讨机制.方法:30只SD大鼠随机分为三组:正常对照组、阿霉素组和20 (S)-PPD组(干预组).阿霉素组和干预组分别阴茎静脉注射阿霉素7.5 mg/kg,正常对照组注射等剂量的生理盐水,造模后干预组随即20(S)-PPD灌胃8周[200mg/(kg·d)],实验结束留取大鼠血、尿及肾脏组织,分别检测各组血、尿生化指标,常规染色观察肾脏组织学改变、电镜观察足细胞损伤情况及免疫组化染色观察肾小管间质纤维化的程度.结果:(1)生化指标:阿霉素组尿白蛋白,尿白蛋白/肌酐比、血尿素氮、三酰甘油、胆固醇均较正常对照组明显升高,血白蛋白较正常对照组明显降低,干预组各项指标均较阿霉素组明显好转,差异均具有统计学意义;(2)组织学改变:阿霉素肾病大鼠肾小球可见明显的局灶节段性硬化改变,可见肾小管扩张、炎细胞浸润及间质纤维化等改变,而干预组较阿霉素组肾小球及肾小管损伤均明显减轻;(3)电镜结果:阿霉素肾病大鼠肾小球足细胞足突弥漫性融合,可见部分足细胞脱落及裸露的基膜,干预组较阿霉素组足细胞损伤明显减轻;(4)免疫组化:阿霉素组α平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原及纤维连接蛋白各项指标表达较正常对照组明显上调,干预组较阿霉素组表达量显著下降,差异具有统计学意义.结论:20(S)-PPD对阿霉素肾病大鼠的肾脏具有明显的保护作用,其机制可能与保护足细胞损伤,减少尿蛋白,进而缓解肾小管间质损害有关.     

阿霉素肾病大鼠nephrin及podocalyxin蛋白表达及泼尼松干预作用的探讨

目的 探讨阿霉素肾病（ADN）大鼠肾组织nephrin及podocalyxin蛋白表达及泼尼松的干预作用。方法 24只雄性Wistar大鼠随机分成ADN组、泼尼松组、对照组,于0、4、8周测定大鼠24h尿蛋白（24hUP）、血清胆固醇（Cho）及白蛋白（Alb）。实验8周取肾组织观察病理形态改变,计算肾小球细胞外基质面积与肾小球面积之比（ECM/GA）,评估肾脏病理积分。用免疫组织化学法观察肾小球nephrin、podocalyxin表达。结果 实验4周时,ADN组较之对照组24hUP、Cho升高（P〈0.05）,Alb下降（P〈0.01）。实验8周时,泼尼松组较ADN组24hUP、Cho下降,ECM/GA及肾脏病理积分降低,nephrin、podoralyxin表达增多,Alb升高（P〈0.01）。ADN组nephrin、podlocalyxin表达与24hUP、Cho、ECM/GA及肾小球病理积分均呈负相关,与Alb呈正相关;nephrin与podocalyxin呈正相关。结论 nephrin、podocalyxin与蛋白尿的发生及发展密切相关。泼尼松能减轻ADN大鼠的蛋白尿及肾脏病理损害,其机制可能通过上调nephrin、podoralyxin表达来发挥肾保护作用。     

膜性肾病肾活检组织中nephrin和podocin表达改变及其意义

目的:检测膜性肾病(MN)患者肾活检组织中nephrin、podocin的表达和分布,分析MN蛋白尿与nephrin和podocin表达改变的关系,探讨肾小球足细胞裂孔隔膜蛋白nephrin和podocin在MN蛋白尿发生中的作用. 方法:选取2005年1月至2008年1月经肾穿刺活检病理确诊为II、III期MN的患者22例,其中肾病综合征组15例(MN-A组),非肾病综合征组7例(MN-B组),临床上排除系统性红斑狼疮、乙肝相关性肾病、糖尿病肾病以及肿瘤等继发性肾脏疾病;另取5例因肾脏肿瘤行一侧肾切除的远端相对正常肾脏组织作为对照(对照组).收集并分析患者的主要临床表现、内生肌酐清除率(Ccr)、尿常规、24h尿蛋白定量、血清白蛋白(Alb)、血脂等相关临床资料;按常规方法取肾组织制备3 μm厚石蜡切片,行HE、PAS、PASM、Masson染色普通光镜以及免疫组化(IgG、IgA、IgM、C3、C4、C1q)检查;各组肾组织行nephrin、podocin及IV型胶原α3链免疫荧光双套色染色,激光共聚焦显微镜下观察nephrin、podocin在两组MN及对照组肾组织中表达及分布的改变,以计算机图像分析系统进行半定量分析. 结果:22例MN病理分期分别为II期14例,III期8例;肾小球内免疫球蛋白及补体的沉积以IgG和C3为主,呈颗粒状沿毛细血管袢弥漫性分布.对照组肾组织免疫荧光染色可见nephrin和podocin沿肾小球毛细血管袢呈均匀连续线样分布;MN患者肾小球内nephrin与podocin表达皆明显减弱,免疫荧光强度降低,分布不均,部分区域有节段性缺失,部分由线状分布变成颗粒状分布,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);MN-A组与MN-B组比较,MN-A组肾小球nephrin和podocin的平均表达量均低于MN-B组,差异有统计学意义(P<0.05),且尿蛋白量与nephrin或podocin表达呈负相关. 结论:MN患者肾小球内nephrin和podocin表达量均降低,分布形式亦发生改变,部分呈节段性缺失或不连续颗粒状分布,并与尿蛋白排泄量呈负相关,提示nephrin和podocin表达的减少及分布异常可能与蛋白尿发生及蛋白尿程度有关;但其损伤的始动因素仍需进一步探讨.     

氯沙坦对阿霉素肾病大鼠肾脏保护作用的研究

目的 探讨氯沙坦对阿霉素肾病肾脏的保护作用及机制.方法 48只Wistar大鼠随机分为对照组、肾衰组、氯沙坦组,每组16只.肾衰组及氯沙坦组大鼠腹腔注射阿霉素4 mg/kg,每周1次,持续5 w,制作阿霉素肾病大鼠模型;对照组应用同样的方法注射生理盐水.模型复制成功后,氯沙坦组大鼠给予氯沙坦1.2 mg/只灌胃,1 次/d;肾衰组给予同等量生理盐水灌胃,1次/d,均连续给药2 w.生化法检测24 h血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr),化学比色法检测肾皮质中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD),RT-PCR方法检测肾组织AT1、AT2、ACE及AGT mRNA表达.结果 与对照组比较,肾衰组血清BUN、Cr均显著升高,肾皮质中MDA升高,SOD降低(P＜0.05);氯沙坦组与肾衰组比较,血清BUN、Cr均显著降低,肾皮质中MDA降低,SOD升高(P＜0.05).与对照组比较,肾衰组肾脏AT1表达上调,AT2降低,AGT和ACE水平增高(P＜0.05);氯沙坦组转为AT1下调,AT2表达接近对照组水平,AGT水平降低,ACE水平降低但仍高于对照组水平(P＜0.05).结论 氯沙坦具有延缓阿霉素肾病大鼠肾功能不全进展,减少氧化应激损伤的保护作用.     

1,25-(OH)_2D_3对阿霉素肾病模型大鼠足细胞损伤及podocin表达缺失的影响

目的研究活性维生素D3[1,25-(OH)_2D_3]对阿霉素(ADR)肾病模型大鼠足细胞的作用及对podocin表达的影响。方法 90只雄性SD大鼠随机选取30只作为对照组,其余60只被一次性尾静脉注射ADR 7.5 mg/kg。建模成功后,随机均分为ADR组、治疗组,治疗组每日给予1,25-(OH)_2D_3 0.25μg/kg灌胃,对照组及ADR组每日给予等量的花生油灌胃。于治疗第2、4、6、8、10周末收集24 h尿,进行生化分析;取肾组织进行后续的组织学观察和分子水平检测。结果与对照组相比,ADR组24 h尿蛋白显著增加(P0.05),1,25-(OH)_2D_3显著减少24 h尿蛋白含量(P0.05)。苏木素-伊红(HE)染色结果显示,对照组肾小球形态完好,ADR组肾小球基底膜增厚、肾间质纤维化、大量炎性细胞浸润,1,25-(OH)_2D_3治疗减轻了肾小球损伤。电镜观察显示:与对照组比较,模型组足细胞超微结构发生改变,出现细胞空腔、细胞核畸形,基底膜呈节段性增厚、足突被压扁且融合;1,25-(OH)_2D_3治疗后,足细胞损伤减轻。免疫组织化学检测显示:podocin主要定位于细胞膜,在正常肾小球中高表达,而ADR组表达较低(P0.05);1,25-(OH)_2D_3治疗后,podocin的表达显著增高(P0.05)。荧光定量PCR和Western印迹结果显示:podocin mRNA和蛋白水平具有高度的一致性,与对照组相比,ADR组表达显著降低(P0.05);1,25-(OH)_2D_3治疗后,podocin表达有所恢复。结论 1,25-(OH)_2D_3能够改善ADR肾病模型大鼠肾脏足细胞损伤,逆转podocin蛋白表达缺失,从而减少24 h尿蛋白,发挥重要的肾脏保护作用。     

低剂量雷帕霉素对糖尿病肾病大鼠nephrin表达的影响

目的 探讨低剂量雷帕霉素对糖尿病肾病大鼠足细胞超微结构及nephrin表达的影响.方法 将22只雄性SD大鼠随机分为正常组(C组,n=7),糖尿病组(D组,n=7),雷帕霉素治疗组(R组,n=8).造模后第5周起R组大鼠给予雷帕霉素1 mg/kg/d灌胃,C组和D组给予等体积的羧甲基纤维素溶液灌胃.12 w末,观察各组大鼠血糖、24h尿蛋白量、体重校正的内生肌酐清除率(Ccr),以及透射电镜观察足细胞的超微结构;并通过免疫组化、RT-PCR检测nephrin的蛋白及其mRNA的表达.结果 至12 w末,与C组相比,D组大鼠血糖、Ccr、24 h尿蛋白量增加(P＜0.01),nephrin蛋白及其mRNA表达下调(P＜0.01);R组Ccr及24 h尿蛋白量较D组降低(P＜0.01),nephrin蛋白及其mRNA表达增加(P＜0.01).结论 低剂量雷帕霉素可能通过上调nephrin表达改善足细胞超微结构,从而延缓糖尿病肾病的进展.     

The PI3K/p-Akt signaling pathway participates in calcitriol ameliorating podocyte injury in DN rats

Objectives

The present study aimed to investigate the relationship between PI3K/p-Akt signaling pathway and podocyte impairment in DN rats as well as the protective effect of calcitriol.

Methods

SD rats were randomly divided into four groups: normal control (NC), normal treated with calcitriol (NC + VD), diabetic nephropathy (DN) and DN treated with calcitriol (DN + VD); all VD rats were treated with 0.1 μg/kg/d calcitriol by gavage. DN model rats were established by intraperitoneal injections of streptozotocin (STZ). Rats were sacrificed after 18 weeks of treatments.

Results

In the present study, increased albuminuria was observed as early as 3 weeks of diabetes and continued to increase more than six-fold throughout the length of the study (18 weeks). Expectedly, animals receiving the treatment with calcitriol was protected from this increase, lower about one third. Meanwhile, the expression of podocyte specific markers, including nephrin and podocin, together with PI3K/p-Akt was significantly decreased in DN rats, whereas calcitriol reversed these above changes accompanied by elevated the expression levels of VDR. Additionally, a positive correlation was observed between the expression levels of nephrin and VDR (r = 0.776, P < 0.05). Likewise, the expression of nephrin was positively correlated with both PI3K-p85 and p-Akt (r = 0.736, P < 0.05; r = 0.855, P < 0.05, respectively).

Conclusion

PI3K/p-Akt signaling pathway participates in calcitriol ameliorating podocyte injury in DN rats. The manipulation of calcitriol might act as a promising therapeutic intervention for diabetic nephropathy.     

糖尿病肾病患者微炎症状态与营养不良的相关性研究

目的:分析糖尿病肾病患者微炎症状态与营养不良的相关性。方法:选取接受血液透析治疗的糖尿病肾病患者106例,随机分成常规血液透析组和联合血液透析组(常规血液透析+血液灌流),另选取不需接受血液透析治疗的糖尿病肾病患者53例为对照组,分析3组患者治疗前及治疗后3、6、9、12个月血清C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6),血清白蛋白(Alb)、血红蛋白(Hb)、胆固醇(Ch)、血肌酐(SCr)及尿素氮(BUN)水平。结果:(1)常规透析组中的CRP和IL-6水平低于对照组(均P0.05);而联合透析组中的CRP和IL-6水平低于对照组和常规透析组(均P0.05)。(2)常规透析组中的Hb、Ch和Alb水平高于对照组(均P0.05);联合透析组中的Hb、Ch和Alb水平高于对照组和常规透析组(均P0.05)。(3)CRP与IL-6、Hb、Ch和Alb之间有相关性。结论:联合血液透析能改善糖尿病肾病患者微炎症状态与营养不良状况,微炎症指标与营养指标在糖尿病肾病发生过程中有相关性。     

间充质干细胞条件培养基对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用

目的利用微量渗透泵持续恒量地向糖尿病肾病(DN)模型大鼠腹腔内泵入间充质干细胞(MSCs)条件培养基,观察其对DN大鼠的保护作用。方法将30只SD大鼠随机分为3组:正常组,DN模型组和MSCs条件培养基组,每组10只。正常组给予普通饲料喂养;DN模型组大鼠每天给予高脂高糖饲料;MSCs条件培养基组是对造模成功的DN大鼠植入Alzet微量渗透泵。检测血糖、血清胰岛素和甘油三酯等指标,观察肾脏病理情况,免疫印迹法(Western blot)检测肾组织nephbin蛋白的表达情况。结果与DN模型组大鼠相比,MSCs条件培养基组的血糖、血清胰岛素、24 h尿蛋白、血肌酐和血尿素氮均显著增高,差异具有统计学意义(P0.05)。MSCs条件培养基组大鼠的肾小球系膜截面积与肾小球体积均显著减小(P0.05)。与正常组大鼠相比,MSCs条件培养基组大鼠nephrin蛋白的表达情况显著降低(P0.05),但与DN模型组相比显著增加(P0.05)。结论微量渗透泵持续泵入MSCs条件培养基可显著改善DN大鼠肾功能。     

糖尿病肾病患者肾小球中nephrin表达及其临床意义

目的检测糖尿病肾病（DN）患者肾小球组织中nephrin的表达,以探讨nephrin在DN患者蛋白尿发生机理中可能的作用.方法免疫荧光染色图像分析及RT-PCR法检测DN组、单纯糖尿病组、单纯血尿组及对照组肾小球组织nephrin的表达水平.结果DN组肾小球组织nephrin的表达量显著低于单纯糖尿病组、单纯血尿组及对照组（P＜0.05）.DN组患者肾小球组织中nephrin的mRNA表达量也显著低于单纯糖尿病组、单纯血尿组及对照组（P＜0.05）.结论DN患者肾小球组织nephrin的表达减少,可能影响肾小球滤过屏障的通透性,导致蛋白尿的产生.     

亚硒酸钠对糖尿病肾病大鼠肾脏脂联素和nephrin表达的影响

目的 探讨亚硒酸钠对糖尿病肾病大鼠肾脏脂联素和nephrin表达的影响及其相互间的关系,从而研究亚硒酸钠与脂联素、nephrin在糖尿病肾病中的作用机制.方法 通过链脲佐菌素法加高脂饮食诱导模拟大鼠糖尿病肾病模型,实验设完全空白对照组、糖尿病组、糖尿病药物干预组,药物干预组每日给予亚硒酸钠溶液灌胃,其它组给予等量盐水溶液灌胃.10周后处死大鼠,取血、尿标本测相关生化指标,取肾脏组织分别提取DNA和蛋白质标本,石蜡切片光镜观察病理改变及免疫组化分析蛋白表达定位,实时定量PCR法检测脂联素mRNA表达、RT-PCR法检测nephrin mRNA表达,Western印迹法检测脂联素和nephrin蛋白表达.结果 亚硒酸钠干预组大鼠生化指标较糖尿病组明显改善,光镜下观察亚硒酸钠干预组病理改变较糖尿病组明显减轻.免疫组化分析,亚硒酸钠干预组脂联素蛋白着色较糖尿病组明显增强,且肾小管、肾小球内均有着色;糖尿病组nephrin蛋白表达着色较空白对照组减少,亚硒酸钠干预组较糖尿病组着色明显增多.亚硒酸钠干预组脂联素mRNA和蛋白表达明显高于糖尿病组和正常对照组,差异有统计学意义(均P＜0.05).亚硒酸钠干预组nephrin mRNA和蛋白表达均较糖尿病组明显增加,但仍较空白对照组降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 亚硒酸钠能促进大鼠肾脏脂联素和nephrin表达,表明亚硒酸钠、脂联素和nephrin在延缓和防治糖尿病肾病的发生发展中可能起重要作用.     

2型糖尿病肾病大鼠肾动脉上BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路的激活

目的探讨2型糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾动脉钙化及BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路的激活情况。方法 40只大鼠随机分为对照组和2型糖尿病肾病组(DN组,STZ加高脂高糖饮食诱导的2型DN大鼠模型),采用钙离子试剂盒检测8、12、16周时肾动脉钙含量,Von Kossa染色观察肾动脉上钙盐沉积。免疫组化检测肾动脉的BMP2、Smad1、Runx2及Osterix蛋白表达,RT-PCR法检测肾动脉BMP2及Runx2 mRNA水平。结果DN组大鼠各时间点血糖、尿素氮、胱抑素C及24 h尿白蛋白水平均较对照组明显增高(P0.05),自实验12周后,DN组大鼠的血肌酐值较对照组显著增高(P0.05)。DN组大鼠肾动脉组织钙含量较同时间点对照组明显增加(P0.05),Von Kossa染色见对照组大鼠各时间点均无明显钙盐沉积,而DN组大鼠肾动脉自第8周时即有黑色颗粒沉积,随着时间的延长沉积的黑色钙盐逐渐增多并聚集成团。与对照组相比,DN组大鼠肾动脉组织中BMP2及其下游因子的表达明显升高,同时BMP2、Runx2 mRNA水平亦增加。相关性分析表明,肾动脉钙含量与BMP2、Runx2 mRNA均呈显著正相关(r=0.641,r=0.683,均P0.01)。结论 2型糖尿病肾病模型大鼠肾动脉早期即可出现血管钙化,且BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路激活在其中起重要调节作用。     

雷帕霉素对阿霉素肾损害大鼠肾组织的保护作用及机制

目的 观察雷帕霉素（RPM）对阿霉素肾损害大鼠肾组织中血管内皮生长因子（VEGF）及其受体2（KDR）表达的影响,探讨其可能的作用机制.方法 将24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（A组）、阿霉素肾损害组（B组）、RPM干预组（C组）,每组8只.应用阿霉素（4 mg/kg）尾静脉注射、1周后重复的方法建立阿霉素肾损害大鼠模型,实验2周末给予C组RPM 1.5 mg/（kg·d）灌胃,A组和B组给予等量0.5％羧甲基纤维素.于第7周末检测各组24h尿蛋白、血清白蛋白（Alb）、TG、TC,并观察肾组织病理形态变化,应用Western印迹法与免疫组化技术分别检测肾组织VEGF及KDR蛋白表达.结果 ①B组24h尿蛋白、Alb、TG、TC明显高于A、C组（P均＜0.01）.B组肾小球肥大,肾小囊扩张,肾小球有不同程度的硬化,间质可见部分纤维化和局灶性炎细胞.C组小管间质炎症和纤维化明显减轻.②C组肾组织VEGF、KDR蛋白表达明显低于B组（P均＜0.01）;免疫组化技术发现,B、C组肾组织VEGF受体1表达较A组增加（P均＜0.05）.结论 RPM能在一定程度上减轻阿霉素肾损害大鼠慢性肾损害的发展,其机制可能与抑制VEGF、KDR蛋白表达有关.     

贝前列腺素钠对2型糖尿病大鼠肾功能及氧化应激水平的影响

目的 观察贝前列腺素钠(BPS)对2型糖尿病大鼠肾功能及氧化应激水平的影响. 方法 将30只SD大鼠随机分为正常对照组(NC组),2型糖尿病组(T2DM组),BPS治疗组(BPS组),T2DM组和BPS组大鼠给予高脂饮食合并小剂量链脲佐菌素( STZ)腹腔注射,建模成功后,BPS组给予0.6 mg/(kg.d)灌胃,其余饲养条件3组相同,最终纳入实验各组6只.给药8周后检测各组大鼠体质量、血糖、24 h尿量、肾质量体质量比(KW/BW)、24h尿蛋白(24 h Ualb),血肌酐(Cr),尿素氮(BUN)以及各组大鼠氧化应激水平及炎症因子指标,包括总超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、髓过氧化物酶(MPO)、超敏C反应蛋白(hs-CRP). 结果 给药8周后,T2DM组血糖、尿量、KW/BW、24 h Ualb、Cr、BUN、MIDA、IL-6、TNF-α、MPO、hs-CRP水平均较NC组显著升高;体质量、SOD、GSH水平较NC组显著降低(P＜0.01).BPS组较T2DM组血糖、尿量、KW/BW、24 h Ualb、Cr、IL-6、M DA、TNF-α、MPO、hs-CRP水平显著降低(P＜0.05或0.01),体质量、SOD、GSH水平显著升高(P＜0.05). 结论 BPS可通过降低氧化应激水平,减少炎症因子的生成,显著减少糖尿病肾病大鼠尿蛋白排泄量,改善其肾功能,对T2DM大鼠肾脏具有保护作用.     

肾缺血再灌注损伤大鼠肺内CAT的表达变化

目的 观察肾缺血再灌注损伤大鼠肺内过氧化氢酶(catalase,CAT)的表达变化,探讨CAT在抗氧化应激反应中的作用.方法 大鼠切除右肾,无损伤动脉夹夹闭左肾动脉,建立肾缺血再灌注损伤模型.再灌注24 h后取材(血、肾、肺).酶偶联速率法和苦味酸法分别检测血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)浓度;HE染色法观察大鼠肾形态;硫代巴比妥酸比色法检测肺内丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量;采用RT-PCR和Western blot方法分别测定大鼠肺组织内抗氧化酶CAT的mRNA与蛋白表达水平.结果 HE结果显示肾缺血再灌注损伤组大鼠的肾组织受损明显.与对照组相比,肾缺血再灌注损伤组血清中的BUN和SCr、肺组织中的MDA含量均明显升高(P<0.05或P<0.01),CAT的mRNA表达水平与蛋白表达水平均明显升高(P值均<0.01).结论 肾缺血再灌注损伤后,肺内发生了过氧化损伤.CAT在肾缺血再灌注损伤大鼠肺内发挥了抗氧化应激的作用.