反义转化生长因子βI型受体表达质粒对实验性肝纤维化的影响

目的 观察反主转化生长因子βI型受体（TβRI）表达质粒对实验性肝纤维化的影响。方法 运用重组DNA技术构建反义TβRI真核细胞表达质粒,经与糖化多聚赖氨酸偶联后,采用尾静脉注射将其导入猪血清诱导的免疫性大鼠肝纤维化模型体内;通过Northern印迹、RT－PCR、Western印迹及免疫组化等方法检测外源导入质粒在肝组织中的表达,并通过检测血清TGFβ1浓度以及肝组织羟脯氨酸测定,I、Ⅲ型胶原免疫组化与Van Gieson染色观察反义TβRI质粒对大鼠肝纤维化的影响。结果 反义TβRI表达质粒可在肝组织中获得确切表达,其表达可抑制TGFβ1表达（P＜0．05）,降低羟脯氨酸含量（P＜0．01）,减少I、Ⅲ型胶原的沉积（P＜0．01）,并促进肝脏病理形态一定程度的改善（P＜0．01）。结论 反义TβRI表达质粒对肝纤维化有较好的改善作用。     

实验性肝纤维化大鼠TGF-β_1、Smad3、Smad7、CTGF的表达及其意义

目的 :研究四氯化碳 ( CCl4 )诱导肝纤维化大鼠肝脏转化生长因子β1( TGF-β1)、Smad3、Smad7和结缔组织生长因子 ( CTGF)的表达及定位。方法 :将 2 4只大鼠随机分为正常对照组与模型组 ,模型组大鼠予以 40 %四氯化碳皮下注射 8周后处死。免疫组化技术检测 TGF-β1、Smad3、Smad7和 CTGF在肝脏的表达及细胞内的定位 ,放射免疫方法检测透明质酸 ,并进行肝组织病理检查。结果 :与正常组大鼠比较 ,模型组大鼠肝内 TGF-β1、Smad3、CTGF表达增加 ,而 Smad7的表达降低。 TGF-β1、Smad3及 CTGF的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞浆 ,Smad7主要在肝细胞浆表达 ;模型组大鼠血清 HA及肝组织Van Giseon染色、HE染色和电镜检查均支持肝纤维化改变。结论 :肝内 TGF- β1、Smad3和CTGF表达增强、Smad7表达减弱 ,提示 TGF- β1轴、CTGF参与了肝纤维的发生发展 ,可能作为防治肝纤维化发生发展的新途径之一     

转化生长因子β1/结缔组织生长因子通路在强直性脊柱炎中的表达

目的:了解强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)骶髂关节中转化生长因子β1(transforming growthfactor beta 1,TGF-β1)/结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)通路的主要分子表达情况,探讨TGF-β1/CTGF通路与AS关节纤维化的关系。方法:30例AS患者均通过酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosor-bent assay,ELISA)法检测血清TGF-β1、CTGF水平,通过免疫组织化学方法检测TGF-β1、p-smad3、smad7、CTGF、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达。结果:与正常对照相比,AS骶髂关节组织可见TGF-β1、CTGF高表达,主要在骨髓及血管翳中炎症细胞的胞浆中表达;smad7明显低表达,p-smad3则主要表达于骨髓及血管翳中炎症细胞的细胞核中,提示smad3已被激活;Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原大量沉积,但血清中的TGF-β1和CTGF的水平与正常对照组间差异无统计学意义。结论:AS骶髂关节存在TGF-β1的过高表达,smad信号通路的激活,samd7的低表达,导致CTGF高表达,Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原大量沉积。     

TGF—β1在肝纤维化大鼠肝组织中的表达及其生物学意义

目的：通过研究大鼠肝纤维化模型肝组织中转化生长因子β1(Transforming growth factor β1,TGF－β1)的表达和分布规律，初步探讨TGF－β1在肝纤维化发病机制中的作用。方法：雄性SD大鼠32只，体重250－300克，皮下注射CCl4制备大鼠肝纤维化模型，分别于注射CCl4后1，4，8周处理动物，采用免疫组织化学方法检测肝组织中TGF－β1的表达及分布。结果：TGF－β1主要表达于肝脏间质组织中。CCl4注射诱导后，大鼠肝组织中TGF－β1的表达较正常对照明显增强（P＜0．01）。且CCl4注射1、4、8周组肝组织中TGF－β1的表达强度呈明显的逐级递增的趋势（P＜0．01）。结论：TGF－β1的表达水平与大鼠肝纤维化严重程度呈显正相关，可能与肝纤维化的发生发展有关。     

水飞蓟素对大鼠肝纤维化转化生长因子β1及结缔组织生长因子表达的影响

目的 观察水飞蓟素在胆总管结扎诱导的大鼠肝纤维化模型的治疗效果及其作用机制.方法 60只雄性SD大鼠,随机分为假手术对照组、纤维化模型组及水飞蓟素治疗组.采用胆总管结扎法造模.4周后处死全部大鼠,采用放射免疫法(RIA)检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)及Ⅲ型前胶原(PCⅢ)的水平;HE染色和Masson染色观察大鼠肝组织病理改变;免疫组织化学检测结缔组织生长因子(CTGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)在肝组织内的表达.结果 与模型组大鼠比较,水飞蓟素治疗后大鼠血清中HA、LN和PCⅢ的水平显著降低;肝组织内纤维化程度降低,肝小叶结构趋于正常;治疗后大鼠肝组织CTGF及TGF-β1表达明显降低(P<0.01),免疫反应阳性信号主要位于纤维间隔细胞的胞浆中.结论 水飞蓟素能有效地减轻胆总管结扎诱导的肝纤维化大鼠的肝损伤及纤维化程度,其机制可能与抑制肝内CTGF和TGF-β1表达有关.     

转化生长因子-β1及结缔组织生长因子在病毒性心肌炎中的表达

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)在病毒性心肌炎(VM)中的表达。方法:雄性Balb/c小鼠36只随机均分为对照组和模型组。模型组建立VM模型。分别于7、14、28 d每组随机抽取6只小鼠断颈处死。心脏称重后用4%多聚甲醛固定,苏木精-伊红染色,光镜下观察心肌组织形态学改变,半定量计算病理积分。免疫组织化学方法检测心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原的蛋白表达,并应用病理图像分析仪进行图像分析,分别计算Ⅰ型和Ⅲ型胶原的面积。心肌组织CTGF、TGF-β1同样采用免疫组织化学测定,免疫组织化学图像分析经标准灰度校正后测定阳性细胞的吸光度及面积,以两者乘积表示组织中该抗原相对含量。结果:与对照组比较,模型组病理积分、心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达、心肌组织中CTGF、TGF-β1的表达均显著增加(P0.01)。心肌Ⅲ型胶原蛋白的表达与CTGF、TGF-β1呈正相关关系(r=0.612,0.533,P0.05)。TGF-β1与CTGF表达也呈正相关关系(r=0.939 P0.05)。结论:TGF-β1及CTGF协同参与了VM心肌纤维化的发生、发展过程。     

都匀亚洲牛带绦虫病小鼠肝纤维化肝脏CTCF、TCF-β1的表达意义

目的研究结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）与转化生长因子-β1（transforming growthfactor-betal,TGF-β1）在都匀亚洲牛带绦虫小鼠肝纤维化肝脏中的表达状况及意义。方法用昆明小鼠感染都匀亚洲牛带绦虫建立小鼠肝纤维化模型;感染小鼠于30、40、50、60 d剖杀,HE染色观察肝脏病理变化,免疫组化法检测肝内CTGF、TGF-β1蛋白的表达水平。结果感染小鼠30 d时形成都匀亚洲牛带绦虫肝纤维化,40d时肝内CTGF和TGF-β1蛋白表达达高峰,随后出现下降,感染小鼠CTGF和TGF-β1蛋白表达水平具有直线相关性。结论CTGF与TGF-β1的表达与都匀亚洲牛带绦虫小鼠肝纤维化形成有密切关系,TGF-β1的致纤维化作用可能部分通过CTGF的生物学作用介导,阻断CTGF的传导通路可能是绦虫病肝纤维化治疗的有效靶点。     

结缔组织生长因子与肾血管性高血压大鼠心肌纤维化的关系研究

目的:探讨结缔组织生长因子(CTGF)在高血压心肌纤维化发生、发展中的作用。方法:以两肾一夹肾血管性高血压大鼠(RHR)为模型,假手术实验大鼠(SOR)为对照,将实验大鼠分为4组:高血压4周组(H4),高血压12周组(H12),假手术4周组(S4),假手术12周组(S12)。用免疫组化法对CTGF、TGFβ1在4组的左室心肌的分布及表达进行半定量分析;用VG染色法观察左室心肌胶原形态,图像分析系统测量胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原面积(PVCA)。结果:(1)CVF、PVCA在RHR组明显高于SOR组(P均<0.01);(2)CTGF、TGFβ1在RHR组左室心肌中的表达较SOR组明显增强(P均<0.05),CTGF主要在血管平滑肌和心肌间质及疤痕组织中表达。SOR组CTGF在心肌间质呈弱表达;(3)相关分析表明,CTGF与TGFβ1(r=0.626,P<0.05)、CVF(r=0.815,P<0.01)、PVCA(r=0.793,P=0.01)呈正相关。结论:CTGF参与了肾血管性高血压心肌纤维化的形成过程。     

肝细胞生长因子对高糖及结缔组织生长因子培养的肾小管上皮细胞纤维化的影响

目的：探讨肝细胞生长因子（HGF）对高糖及结缔组织生长因子（CTGF）诱导肾小管上皮细胞（HKC）纤维化的影响.方法：体外培养HKC,分别在高糖及CTGF环境下加入不同浓度人重组肝细胞生长因子（rhHGF）,以RT-PCR检测转化生长因子β1（TGF-β1）、CTGF、以及纤维化指标Ⅳ型胶原（COL4A1）、纤连蛋白（FN）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）等的基因表达.结果：高糖及CTGF刺激下,细胞因子和纤维化指标表达均不同程度增加,其中,CTGF作用下,COL4A1表达明显低于高糖组（P＜0.01）.高糖及CTGF环境下加入rhHGF后,纤维化指标显著降低（P＜0.01）,其中高糖＋rhHGF组,CTGF表达减少,TGF-β1表达无明显改变（P＞0.05）.结论：HGF可通过抑制TGF-β下游因子CTGF的表达,发挥抗肾小管上皮细胞纤维化作用,但CTGF并不是其惟一的阻断途径.     

结缔组织生长因子的研究进展

结缔组织生长因子（connectivetissuegrowthfactor,CTGF）是一种新发现的可刺激成纤维细胞增殖和胶原沉积的细胞因子,被视为转化生长因子的下游反应元件。上世纪90年代初,Bradham［1］等首先在人脐静脉内皮细胞条件培养基中分离获得CTGF。在生理状态下,机体组织间质细胞可有微量的CTGF分泌,在病理情况下,它与皮肤瘢痕形成、动脉粥样硬化、器官纤维化以及创伤修复等有关。随着对纤维化机制研究的不断深入,CTGF逐渐成为人们研究纤维化的焦点之一,它已成为可能替代转化生长因子‐β（TGF‐β）治疗纤维化疾病的靶细胞因子［2～4］。     

结缔组织生长因子在大鼠肝纤维化发生中的作用机制初探

目的:研究结缔组织生长因子(CTGF)在大鼠肝纤维化形成中的作用机制。方法:雄性SD大鼠32只,体重250~300g,皮下注射四氯化碳(CC l4)制备大鼠肝纤维化模型,分别于注射后1、4、8周处理动物,采用免疫组化、RT-PCR、W estern b lot等方法对肝组织中CTGF的表达进行检测。结果:免疫组化、W estern b lot结果显示,CC l4注射诱导后,大鼠肝组织中CTGF的表达较正常对照明显增强,且CC l4注射1、4、8周组肝组织中CTGF的表达强度呈明显递增趋势。CTGF主要表达于肝星状细胞胞质中。RT-PCR检测结果显示CTGF mRNA的表达与其蛋白质水平的改变相一致。结论:CTGF作为一种致纤维化因子,其过表达促进肝星状细胞的活化增殖及细胞外基质的形成,从而促进大鼠肝纤维化的发生、发展。     

替米沙坦对肾性高血压心肌纤维化及结缔组织生长因子的影响

目的　探讨替米沙坦对肾血管性高血压心肌纤维化及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法　建立二肾一夹肾血管性高血压(2K1C- RH)大鼠模型,将实验大鼠随机分为3组:假手术组、高血压组及替米沙坦治疗组。术后4周末开始以替米沙坦3 0mg·kg-1·d-1灌胃,共8周。测量大鼠收缩压、胶原容积分数(CVF)、血管周围胶原面积(PV CA)及CTGF、转化生长因子 β1(TGF-β1)的表达。结果　与假手术组大鼠相比,高血压组的收缩压、CVF及PVCA显著增加(P <0 .0 1) ,CTGF、TGF -β1表达上调(P <0 .0 1) ;替米沙坦组与高血压组相比,心肌组织中CVF、PVCA、CTGF及TGF -β1的表达明显降低(P <0 .0 5 )。结论　替米沙坦可抑制高血压心肌纤维化,其机制可能与下调CTGF的表达有关。     

16,16二甲基前列腺素E2对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用

目的 :探讨 1 6 ,1 6二甲基前列腺素E2 (dmPGE2 )在博莱霉素诱导大鼠肺纤维化进程中对结缔组织生长因子 (CTGF)表达水平的影响。方法 :通过苏木素伊红 (HE)染色及Ⅰ型胶原 (Col Ⅰ )、Ⅲ型胶原 (Col Ⅲ )免疫组化染色评价纤维化程度 ,用原位杂交方法检测结缔组织生长因子 (CTGF)的mRNA在肺内的表达情况 ,用免疫组化法检测转化生长因子 β1 (TGF β1 )及cAMP依赖性磷脂酶A(PKA)的表达。结果 :①模型组中TGF β1 、CTGFmR NA、Col Ⅰ、Col Ⅲ表达水平较空白组明显增高 ;②实验组中CTGFmRNA和Col Ⅰ、Col Ⅲ水平与模型组比明显下降 ,较正常组稍高。结论 :PGE2 可减轻博莱霉素所诱导的肺间质纤维化程度 ,这种作用可能部分通过抑制CTGFmRNA转录实现     

TGF-β_1、PDGF-BB、CTGF与慢性乙型肝炎肝纤维化相关性研究

目的观察转化生长因子(TGF-β_1)、血小板源性生长因子(PDGF-BB)、结缔组织生长因子(CTGF)在慢性乙型病毒性肝炎患者不同纤维化分期的免疫组化表达和定位情况,并探讨三者在肝纤维化进展过程的作用和三者之间的相关性。方法100例乙肝患者,其中S_0期19例,S_1期22例,S_2期21例,S_3期20例,S_4例18例。对肝组织TGF-β_1、PDGF-BB、CTGF行免疫组化定量分析,并与肝脏纤维化分期进行统计学分析。结果TGF-β_1、PDGF-BB、CTGF免疫组织化学表达强度与不同纤维化分期呈正相关,相关系数(r)分别为0.824、0.798、0.812(P均<0.05),TGF-β_1与PDGF-BB、CTGF之间的表达呈正相关,相关系数(r)分别为0.724、0.699(P均<0.05)。结论TGF-β_1、PDGF-BB、CTGF的表达在慢性乙型病毒性肝炎纤维化形成中起着关键的调节作用,可作为评价肝纤维化严重程度的重要指标。     

血清转化生长因子β对大鼠肝纤维化影响的研究

目的观察转化生长因子β(TGF-β)对肝纤维化模型SD大鼠肝功能的影响。方法将60只SD大鼠随机平均分为3组:正常对照组不做任何处理;生理盐水对照组腹腔注射生理盐水;肝纤维化模型组腹腔注射10%四氯化碳(CCl4)建立肝纤维化模型。造模6周后采集血清全自动生化仪测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量,酶联免疫吸附(ELISA)方法检测TGF-β的含量,实时荧光定量PCR法检测肝纤维化相关基因血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)和结缔组织生长因子(CTGF)表达情况。结果生理盐水对照组ALT、AST和TGF-β含量与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05);肝纤维化模型大鼠血清ALT、AST较正常对照组及生理盐水对照组大鼠明显增高(P<0.01),TGF-β的含量明显增高(P<0.05),肝纤维化模型组肝纤维化相关基因PDGF-BB、CTGF表达明显,而生理盐水组与对照组均无表达。结论血清中TGF-β与大鼠肝纤维化密切相关,在大鼠肝纤维化模型中明显增高,同时肝纤维化组织中PDGF-BB、CTGF表达也增高。     

苦参素穴位注射对肝纤维化大鼠Ⅳ型胶原和TGF-β_1表达的影响

目的:观察苦参素足三里(OMZSL)注射对肝纤维化大鼠Ⅳ型胶原和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,随机分为5组:正常组、模型组、苦参素腹腔注射(OMip)组和OMZSL注射治疗组、OMZSL注射预防组。实验至10周末,取肝组织,VG染色观察肝组织中总胶原含量;免疫组化观察Ⅳ型胶原和TGF-β1的表达。结果:与模型组比较OMZSL预防与治疗给药均能明显降低肝纤维化大鼠肝组织中总胶原含量,减少Ⅳ型胶原、细胞因子TGF-β1的表达。结论:OMZSL给药能明显减少肝纤维化组织中总胶原含量及Ⅳ型胶原、TGF-β1的表达,抑制细胞外基质沉积,从而减轻或逆转肝纤维化。     

转化生长因子β1通过Smad2途径调节足细胞结缔组织生长因子表达

目的　研究肾脏足细胞是否表达结缔组织生长因子 (CTGF)以及TGFβ1对CTGF表达调控的信号途径。方法　以肾小球足细胞为对象 ,应用Western印迹分析技术 ,观察了 3种促进肾脏纤维化的蛋白因子 ,转化生长因子 β1(TGFβ1)、血小板源生长因子 (PDGF)和血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )对体外培养的足细胞CTGF蛋白表达的影响 ,以及ERK、Smad两条信号途径在TGFβ1调节CTGF蛋白表达中的影响 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测CTGFmRNA的变化。结果　体外培养的足细胞表达基础水平CTGF蛋白 ,2 0ng/mlPDGF和 10 -6mol/LAngII刺激 2 4小时后细胞内CTGF蛋白水平与对照相比差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,而 1ng/mlTGFβ1刺激 2 4h足细胞CTGF蛋白水平显著高于对照 (P <0 0 5 ) ,且增加呈TGFβ1剂量依赖趋势 ;1ng/mlTGFβ1刺激 12h可以使细胞CTGFmRNA表达增加。1ng/mlTGFβ1使足细胞Smad2 和细胞外信号调节激酶 (ERK1/ 2 )磷酸化 ,在刺激 30min达高峰 ;应用丝 /苏氨酸激酶抑制剂Staurosporine抑制Smad2 磷酸化可以消减TGFβ1刺激的CTGF蛋白增加 ,但ERK1/ 2 活化抑制剂PD 980 5 9阻断ERK1/ 2 磷酸化不能减弱TGFβ1刺激CTGF蛋白表达的效应。结论　在足细胞上 ,TGFβ1刺激CTGF表达依赖于Smad2 信号通路的活化 ,而不依赖于ERK1/     

反义转化生长因子βⅠ型受体表达质粒对实验性肝纤维化的影响

目的观察反义转化生长因子βⅠ型受体(T β RⅠ)表达质粒对实验性肝纤维化的影响.方法运用重组DNA技术构建反义T β RⅠ真核细胞表达质粒,经与糖化多聚赖氨酸偶联后,采用尾静脉注射将其导入猪血清诱导的免疫性大鼠肝纤维化模型体内;通过Northern印迹、RT-PCR、Western印迹及免疫组化等方法检测外源导入质粒在肝组织中的表达,并通过检测血清TGF β1浓度以及肝组织羟脯氨酸测定,Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组化与Van Gieson 染色观察反义T β RⅠ质粒对大鼠肝纤维化的影响.结果反义T β RⅠ表达质粒可在肝组织中获得确切表达,其表达可抑制TGF β1表达(P<0.05),降低羟脯氨酸含量(P<0.01),减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的沉积(P<0.01),并促进肝脏病理形态一定程度的改善(P<0.01).结论反义T β RⅠ表达质粒对肝纤维化有较好的改善作用.     

结缔组织生长因子反义寡核苷酸抑制TGFβ1诱导人肾小管上皮细胞转分化

目的探讨转化生长因子β-1(TGFβ1)诱导人肾小管上皮-肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中结缔组织生长因子(CTGF)的表达和作用.方法在用MTT比色、荧光分析证明阳离子脂质体(DOTAP)介导CTGF反义寡核苷酸(AS)转染HKC可行的基础上,将培养的HKC分为4组正常对照组(C组);TGFβ1组(T组);TGFβ1加AS组(T+AS组);4、TGFβ1加CTGF错义寡核苷酸组(T+SC组).分组处理96h后,分别采用免疫组化、Western blot和RT-PCR技术检测各组CTGF、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,并分析CTGF和α-SMA表达量的相关性.结果C组CTGF和α-SMA表达阴性;T组CTGF和α-SMA表达阳性;T+AS组CTGF和α-SMA表达阳性,但皆显著低于T组(P＜0.01)T+SC组CTGF和α-SMA表达皆和T组无显著差异(P＞0.05).相关分析CTGF和α-SMA在表达量上皆呈较强的线性相关性.结论CTGF的AS能有效地抑制TGFβ1所诱导的TEMT,提示CTGF是TGF β1诱导TEMT所必需的成份.     

前列腺素E_1对梗阻性肾病中TGF-β_1和CTGF表达的影响的实验研究

目的:探讨前列腺素E1对梗阻性肾病中转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响。方法:60只Wistar大鼠,随机分为PGE1治疗组、生理盐水组和假手术组,然后制作梗阻性肾病动物模型,最后在光镜下观察肾脏组织的病理学改变;采用免疫组化法检测肾脏的TGF-β1和CTGF的表达,分析肾脏纤维化与TGF-β1和CTGF的表达之间的相关性。结果:①生理盐水组和PGE1治疗组大鼠的间质纤维化的程度均高于假手术组(P<0.05),大鼠肾组织TGF-β1和CTGF表达高于假手术组(P<0.05),且与Masson染色结果呈正相关关系;②PGE1组以上各项指标均低于生理盐水组。结论:PGE1可以抑制TGF-β1、CTGF的表达,减轻肾间质纤维化,从而防治梗阻性肾病。