双路通脑方调节SIRT1/Nrf2/GPx4信号通路对缺血性脑卒中大鼠神经元铁死亡的影响

目的 探讨双路通脑方对缺血性脑卒中大鼠神经元铁死亡的作用以及对沉默信息调节因子2同源物1(SIRT1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)信号通路的调节机制。方法 采用随机数字表法选取20只大鼠作为假手术组,剩余70只大鼠均利用大脑中动脉闭塞法制备缺血性脑卒中大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型对照组、双路通脑方组、双路通脑方+SIRT1抑制剂组(双路通脑方+EX527组),每组20只。14 d后,对大鼠进行神经功能损伤评分;TTC染色检测大鼠脑梗死面积;HE染色检测大鼠脑组织病理变化;尼氏染色检测大鼠脑组织神经元数量;试剂盒检测大鼠脑组织中铁离子(Fe²⁺)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的水平;免疫组化检测大鼠脑组织中酰基-辅酶a合成酶长链家族成员4(ACSL4)、转铁蛋白受体(TFR)、铁蛋白重链多肽1(FTH1)蛋白的阳性表达;Western blotting法检测大鼠脑组织中SIRT1、Nrf2、GPx4及胱氨酸/谷氨酸转运蛋白(SLC7A11)蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型对照组...     

益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠NFAT2/COX-2的影响

目的:探讨益气养阴活血方对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏保护作用及其机制。方法:50只雄性SD大鼠随机分为正常组8只、造模组42只。除正常组外,造模组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立DN大鼠模型,造模成功的32只DN大鼠随机分为模型组、缬沙坦组、益气养阴活血方低剂量组及益气养阴活血方高剂量组,每组8只。灌胃6周后全自动生化分析仪检测各组大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、空腹血糖(FBG)、24 h尿蛋白总量(24 h-UTP);Western blot及荧光定量PCR分别检测肾脏NFAT2、COX-2相关蛋白及其mRNA表达;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏病理变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠肾小球、肾小管病理损伤较重,血清Scr、BUN、FBG、24 h-UTP、肾组织NFAT2、COX-2相关蛋白及其mRNA表达水平均升高(P＜0.01);与模型组比较,益气养阴活血方干预组大鼠肾脏病理明显改善,血清Scr、BUN、FBG、24 h-UTP、肾组织NFAT2、COX-2相关蛋白及其mRNA表达水平均降低(P＜0.01,P＜0.05)。结论:益气养阴活血方可能通过下调NFAT2/COX-2信号通路而减轻肾脏病理损害,保护肾功能,降低尿蛋白。     

秦艽醇提物下调RhoA/ROCK通路发挥对神经根型颈椎病模型大鼠镇痛作用

目的:探讨秦艽醇提物调控Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)通路对神经根型颈椎病(cervical spondylotic radiculopathy,CSR)模型大鼠镇痛的影响机制。方法:建立CSR模型大鼠,随机分为模型组、秦艽醇提物(2 g·kg^-1)组、Rhosin(RhoA抑制剂,40 mg·kg^-1)组、秦艽醇提物(2 g·kg^-1)+Rhosin(40 mg·kg^-1)组4组(各12只),再选取12只大鼠作为假手术组,分组给药干预后,检测大鼠疼痛度、运动功能、血清炎性介质水平、脊髓及神经根组织病理形态及RhoA/ROCK通路相关蛋白表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠脊髓及神经根组织出现明显病理损伤,步态障碍评分、左前肢离地时间、脊髓及神经根组织RhoA、ROCK蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),机械痛阈值、游泳时间显著降低(P＜0.05);模型大鼠经给药干预后其脊髓及神经根组织病理损伤均减轻,各指标水平变化减弱,相比秦艽醇提物、Rhosin单独干预,秦艽醇提物+Rhosin联合干预对模型大鼠作用更强。结论:秦艽醇提物可能通过下调RhoA/ROCK通路,抑制炎性介质合成释放,改善脊髓及神经根组织炎症损伤,减轻CSR大鼠疼痛,修复其神经运动功能。     

红景天苷调控PI3K/Akt信号通路对永久性脑缺血大鼠的保护作用

目的研究红景天苷(salidroside,Sal)通过调控PI3K/AKT信号通路对永久性大脑中动脉闭塞模型(pMCAO)大鼠的神经保护作用及其机制。方法健康成年雄性SPF级雄性SD大鼠70只,其中30只大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(pMCAO组)、红景天苷给药组(pMCAO+Sal组),线栓法造模成功后,对sham组和pMCAO组大鼠腹腔注射生理盐水,pMCAO+Sal组按照50 mg·kg^-1·d^-1腹腔注射红景天苷(50 mg·kg^-1·d^-1),给药1 d。40只大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(pMCAO组)、红景天苷给药组(pMCAO+Sal组)、抑制剂组(pMCAO+Sal+LY组);侧脑室注射PI3K抑制剂30 min后,制备pMCAO模型,1 h后腹腔注射红景天苷,给药1 d。免疫组织化学染色测定脑组织中NeuN表达,Western blot分析脑组织中NeuN蛋白、NF-κBp50核蛋白的表达,RT-qPCR检测IL-6和TNF-α的表达。结果与pMCAO组比较,红景天苷作用后,NeuN免疫荧光染色表达量明显增加,且能够促进NeuN蛋白,抑制NF-κB p50核蛋白及IL-6和TNF-αmRNA表达。经PI3K抑制剂LY294002作用后,红景天苷对上述指标作用不明显。结论红景天苷能够通过调控PI3K/AKT信号通路,抑制NF-κB p50核转录水平,进而抑制炎症因子,对pMCAO模型大鼠具有神经保护的作用。     

抗血小板溶栓素对局灶性脑缺血/再灌注大鼠脑损伤的作用观察

目的:观察抗血小板溶栓素(anti-platelet thrombolysin,APT)对缺血性脑损伤的保护作用并初步探讨其作用机制。方法:SD大鼠,随机分为假手术组(Sham)、模型组(缺血再灌注组)、阳性组(依达拉奉注射液)、APT高、中、低组。双侧颈动脉结扎,建立脑缺血模型,测定大鼠脑含水量,HE染色观察脑组织病理改变;线栓法建立大鼠脑缺血/再灌注模型,进行行为学评分,酶联免疫法(ELISA)及免疫组化测定脑组织中Toll样受体4(TLR4)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、Bax蛋白含量。结果:与模型组比较,APT高、中剂量组可明显改善缺血再灌注后大鼠神经功能障碍症状,降低脑水肿程度,改善缺血后脑组织的病理改变,明显降低缺血后脑组织中TLR4、JNK、Bax蛋白表达。结论:APT对缺血性脑损伤有较好的保护作用,其机制可能与抑制脑组织中TLR4/JNK/Bax信号通路表达,从而抑制细胞凋亡有关。     

对羟基苯甲醇通过SIRT1/PGC-1α/TFAM信号通路抗脑缺血再灌注损伤的作用及机制研究

目的:基于SIRT1/PGC-1α/TFAM信号通路探讨对羟基苯甲醇(HBA)抗脑缺血再灌注损伤作用。方法:通过线栓法复制MCAO/R大鼠模型,分为假手术组、模型组(MCAO/R)、HBA组、抑制剂(EX527)组。其中抑制剂组是侧脑注射EX527(10mmol·L^-1,10μL),HBA治疗组给予HBA 20mg·kg^-1进行药物干预。旷场实验、转棒实验、Morris水迷宫实验观察大鼠行为学变化;TTC法检测脑梗死体积;取缺血侧脑组织,电镜观察线粒体显微结构变化,检测组织中活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)、呼吸链酶复合体Ⅰ~Ⅳ活性、ATP水平;免疫组化法检测脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长相关蛋白(GAP-43)蛋白阳性表达;Western blot法检测脑组织中SIRT1、PGC-1a、NRF1/2、TFAM蛋白表达。结果:HBA干预后能改善MCAO/R大鼠记忆空间学习及运动能力等行为学变化,明显降低脑梗死体积;改善线粒体结构损伤,降低ROS水平,提高线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ~Ⅳ活性、MMP以及ATP水平。促进BDNF和GAP-43及SIRT1/PGC-1a途径相关蛋白表达。SIRT1抑制剂处理后可逆转HBA的治疗作用。结论:HBA可促进缺血再灌注过程中神经元的修复,其可能与激活SIRT1/PGC-1a/TFAM信号通路有关。     

不同剂量黄芩苷对局灶脑缺血再灌注大鼠皮质基质细胞衍生因子表达的影响

目的：探讨不同剂量黄芩苷对大鼠皮质基质细胞衍生因子表达的影响。方法：雄性SD大鼠60只，分为假手术、模型组和治疗组，治疗组又分为低、中和高剂量组。方法：按照longa方法建立局灶脑缺血再灌注模型。术后12，24，72 h，5 d进行神经运动功能评分，5 d后HE染色观察皮层神经元死亡情况，Western bloting观察SDF-1蛋白表达情况。结果：与对照组相比，12，24，72 h时段内低剂量、中剂量、高剂量组神经行为学评分无明显差异（P>0.05），5 d时，低剂量组，高剂量组行为学评分降低明显（P<0.05）。与假手术组相比，对照组的SDF-1表达量明显增加（P<0.05）；与对照组相比，低、中、高剂量组各相应时间点SDF-1蛋白表达水平增高（P<0.01）；不同剂量组之间相比，各相应时间点SDF-1表达水平未见明显差异（P>0.05）。结论：黄芩苷可以改善脑缺血再灌注大鼠的神经功能评分，具有一定脑保护作用。我们推测这种脑保护作用的机制可能与上调了缺血区SDF-1蛋白表达有关，但这种促进作用不具有明显剂量依赖性，高剂量黄芩苷对SDF-1的表达呈现出一定的抑制作用。     

鼠曲草提取物对COPD模型大鼠气道炎症的抑制作用及对NF-κB通路的影响

目的:研究鼠曲草提取物对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型大鼠气道炎症的影响及作用机制。方法:大鼠随机分为正常组,模型组,鼠曲草提取物低、中、高剂量组(0.75,1.5,3g·kg^-1)和地塞米松组(阳性对照药,27mg·kg^-1),每组9只。除正常组外,其余各组大鼠采用香烟烟熏联合气管内滴注脂多糖建立COPD大鼠模型。造模15d后,各给药组大鼠灌胃相应药物,正常组和模型组大鼠灌胃等体积0.9%氯化钠溶液,每日1次,连续14d。末次给药后,检测各组大鼠肺功能;HE染色观察肺组织病理学变化;酶联免疫法检测肺泡灌洗液、血清中IL-6、IL-8、IL-17、IL-1β、TNF-α、TGF-β含量;RT-PCR法检测右肺组织中NF-κB mRNA的相对表达量;Western blot法检测右肺组织中NF-κB、IKKβ、IκBα及其p-IκBα蛋白的相对表达量。结果:不同剂量的鼠曲草提取物干预后,均可显著提高大鼠肺功能参数FEV0.3、FVC、FEV0.3/FVC,明显降低肺泡灌洗液中IL-8、IL-17、TNF-α及血清中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α、TGF-β含量,改善大鼠肺组织病理变化,同时显著降低p-IκB、IKK蛋白及NF-κB mRNA和蛋白相对表达量。结论:鼠曲草能够改善COPD模型大鼠的肺功能,减轻肺组织病理损伤,抑制炎症反应,其作用可能与抑制NF-κB信号通路有关。     

芍药苷调控环磷酸腺苷 /蛋白激酶 A/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白通路对脑卒中大鼠的影响

目的探讨芍药苷调控环磷酸腺苷( cAMP)/蛋白激酶 A(PKA)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白( CREB)通路对脑卒中大鼠的影响。方法该研究起止时间为 2019年 12月至 2020年 12月。 40只 SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、药苷组(灌胃 30 mg/kg芍药苷)、 H89组［腹腔注射 1 mg/kg H89(PKA抑制剂)］、芍药苷 +H89组(灌胃芍药苷后腹腔注射 H89)芍,除假手术组仅进行动脉分离,其余各组均构建缺血性脑卒中模型,模型构建成功后进行药物干预,持续给药 2周,模型组、假手术组以生理盐水代替。根据 Zea Longa评分法对各组大鼠进行神经功能缺损评分, Morris水迷宫测定大鼠记忆行为学能力,酶联免疫吸附测定( ELISA)试剂盒检测大鼠血清炎性因子水平,苏木精 -伊红( HE)染色观察大鼠脑组织病理学变化,蛋白质印迹法检测大鼠脑组织 cAMP/PKA/CREB通路相关蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组脑组织受损严重,大鼠神经功能缺损评分、血清中炎性因子水平显著升高( P<0.05)记忆行为学能力、脑组织中 cAMP［( 0.31±0.05)比( 1.03±0.23)］、 PKA［( 0.30±     

PI3K/Akt/eNOS通路介导山药蛋白对肾阳虚大鼠阴茎勃起功能障碍的改善作用

目的:探讨山药蛋白(DP1)对肾阳虚大鼠阴茎勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)的改善作用及机制。方法:建立氢化可的松诱导的肾阳虚大鼠模型,分成对照组、模型组、DP1低剂量组(0.6mg·kg^-1)、DP1高剂量组(0.9mg·kg^-1)。检测大鼠体质量变化;采用ELISA法检测促性腺激素释放激素(GnRH)、促黄体生成素(LH)和睾酮(T)含量;通过皮下注射阿扑吗啡测定大鼠阴茎勃起次数和勃起率;以苏木素-伊红染色观察阴茎海绵体组织形态;采用Western blot检测勃起关键信号通路蛋白表达水平、ELISA测定一氧化氮(NO)和环磷酸鸟苷(cGMP)含量,探索DP1改善肾阳虚大鼠ED的机制。结果:与模型组相比,DP1组大鼠体质量显著增加;GnRH、LH和T含量升高;阴茎勃起次数及勃起率显著提高;海绵体组织形态完整性恢复。DP1的干预能够增加磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)以及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白磷酸化水平,显著提高NO和cGMP含量。结论:DP1能够改善肾阳虚大鼠ED,且与激活PI3K/Akt/eNOS信号通路相关。     

复元醒脑汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的 探讨复元醒脑汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 将SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、复元醒脑汤低、中、高（5.5、11、22 g/kg）剂量组。采用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,缺血2 h再灌注24 h,对各组大鼠进行神经功能缺失评分,TTC染色测定脑梗死体积,HE染色观察脑组织病理变化,Nissl染色观察脑组织中尼氏小体的变化,Tunnel染色观察脑组织中神经细胞的凋亡情况。测定血清中的超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的水平。结果 与模型组相比,复元醒脑汤低、中、高剂量组均可明显改善大脑中动脉缺血再灌注损伤大鼠的神经行为障碍;TTC染色结果显示,复元醒脑汤低、中、高剂量组大鼠脑梗死体积明显减小;HE结果显示给药组改善脑组织病理结构,Nissl染色结果表明给药组尼氏小体形态数量得到改善,Tunnel染色阳性细胞数减少,细胞凋亡率下降;与模型组相比,复元醒脑汤可提高脑缺血再灌注大鼠血清中SOD的水平,降低MDA水平。结论 复元醒脑汤对大鼠大脑脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

Therapeutic neuroprotective effects of XQ-1H in a rat model of permanent focal cerebral ischemia

Cerebral ischemia is one of the leading causes for death and severe disabilities in the world. XQ-1H exerts neuroprotective effects under various neurotoxic conditions in vitro. In vivo, it reduces brain damage after transient focal cerebral ischemia. The present study evaluated the dose effectiveness and therapeutic time window of neuroprotection of XQ-1H by behavioral and histological measures in rats subjected to permanent middle cerebral artery occlusion (pMCAO). Neurological deficits, TTC stain, brain water content, necrosis neuron counts, and Evans-Blue extravasation were used to quantify brain damage and blood-brain barrier dysfunction. Our results demonstrated that postischemic treatment with XQ-1H at a dose of 31.2 mg/kg produced a significant reduction in neurological scores when treatment was initiated within 2 h of pMCAO. A similar improvement was also observed in infarct volume, brain water content, Evans-Blue extravasation, and neuronal necrosis when treatment was initiated within 1 h of pMCAO. Treatment with XQ-1H at the dose of 15.6 mg/kg within 1 h also produced significant improvement in ischemia deficit. In conclusion, the therapeutic time window of XQ-1H extends for up to 1 h after pMCAO, and treatment with XQ-1H exhibits potent neuroprotection that may be of value for the design of stroke therapies.     

丹参酮Ⅱ-A对局灶性脑缺血大鼠COX-2、PGI2以及TXA2含量的影响

目的探讨丹参酮Ⅱ-A对局灶性脑缺血大鼠脑组织环氧化酶2(COX-2)及其下游产物含量的影响。方法 46只SD大鼠随机分为假手术(S)组(n=10)、缺血模型(I)组(n=11)和丹参酮Ⅱ-A低(T1)(n=12,丹参酮Ⅱ-A腹腔预注射1周,每日2mg/kg)、高(T2)(n=13,丹参酮Ⅱ-A腹腔预注射1周,每日4mg/kg)剂量预防组。采用持续性大脑中动脉线栓法制作局灶性脑缺血模型。持续栓塞3h后进行神经行为学评分,6h后断头取脑,干湿重法求出脑组织含水量,ELISA法测定脑组织中COX-2、6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、血栓素B2(TXB2)含量。结果与I组相比,T1、T2组神经功能损伤改善,脑组织含水量减少,COX-2、6-keto-PGF1α和TXB2的产生呈剂量依赖性的降低(P<0.01)。结论抑制COX-2及其下游产物TXA2、前列环素(PGI2)可能是丹参酮Ⅱ-A保护局灶性脑缺血大鼠神经功能的作用机制之一。     

梓醇对大鼠梗死灶周围大脑皮质神经元树突生长及突触素表达的影响

目的观察梓醇对局灶脑缺血大鼠梗死灶周围大脑皮质(peri-infarction cortex,PIC)锥体神经元树突生长及突触素p38蛋白表达的影响,探讨其促脑卒中后神经修复作用及机制。方法 57只清洁级成年SD大鼠,随机分为假手术组,模型组,生理盐水组,梓醇低、中、高剂量(分别为1、5、10 mg·kg-1)组和胞磷胆碱(0.5 g·kg-1)对照组。开颅电凝右侧大脑中动脉制备局灶永久性脑缺血模型。于造模后24 h开始腹腔注射不同剂量梓醇或胞磷胆碱,每日1次,连续7d。术后1、4、7和15 d采用角落实验评估神经缺失功能恢复状况;术后1 d和15 d磁共振成像测量脑梗死体积;术后15 d,断头取脑,Golgi-Cox染色显示PIC区锥体神经元树突变化,免疫荧光组织化学染色及Western blot检测PIC区突触素p38蛋白表达。结果梓醇各剂量组和胞磷胆碱组术后7 d和15 d神经功能恢复明显优于模型组和生理盐水组(P<0.05);术后1 d、15 d,各实验组脑梗死体积差异无显著性(P>0.05);梓醇中剂量组PIC区锥体神经元树突分支数和树突棘密度均比模型组、生理盐水组和胞磷胆碱组明显增加(P<0.05);梓醇各剂量组PIC区突触素p38表达均比模型组、生理盐水组和胞磷胆碱组明显上调(P<0.05)。结论梓醇可增强局灶脑缺血大鼠PIC区锥体神经元树突可塑性,上调突触素p38表达,促进神经缺失功能恢复。     

Neuroprotection by Valproic Acid in Mouse Models of Permanent and Transient Focal Cerebral Ischemia

Valproic acid (VPA) is a well-known anti-epileptic and mood stabilizing drug. A growing number of reports demonstrate that VPA is neuroprotective against various insults. Despite intensive efforts to develop new therapeutics for stroke over the past two decades, all treatments have thus far failed to show clinical effect because of treatment-limiting side effects of the drugs. Therefore, a safety-validated drug like VPA would be an attractive candidate if it has neuroprotective effects against ischemic insults. The present study was undertaken to examine whether pre- and post-insult treatments with VPA protect against brain infarct and neurological deficits in mouse transient (tMCAO) and permanent middle cerebral artery occlusion (pMCAO) models. In the tMCAO (2 hr MCAO and 22 hr reperfusion) model, intraperitoneal injection of VPA (300 mg/kg, i.p.) 30 min prior to MCAO significantly reduced the infarct size and the neurological deficit. VPA treatment immediately after reperfusion significantly reduced the infarct size. The administration of VPA at 4 hr after reperfusion failed to reduce the infarct size and the neurological deficit. In the pMCAO model, treatment with VPA (300 mg/kg, i.p.) 30 min prior to MCAO significantly attenuated the infarct size, but did not affect the neurological deficit. Western blot analysis of acetylated H3 and H4 protein levels in extracts from the ischemic cortical area showed that treatment with VPA increased the expression of acetylated H3 and H4 at 2 hrs after MCAO. These results demonstrated that treatment with VPA prior to ischemia attenuated ischemic brain damage in both mice tMCAO and pMCAO models and treatment with VPA immediately after reperfusion reduced the infarct area in the tMCAO model. VPA could therefore be evaluated for clinical use in stroke patients.     

丁基苯酞调控沉默信息调节因子 1/核因子相关因子 2通路抑制缺血性脑卒中大鼠氧化应激损伤的实验研究

目的 观察丁基苯酞对缺血性脑卒中大鼠氧化应激的影响,并探讨其对沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子相关因子2(Nrf2)通路的调控机制.方法 2018年3月至2019年3月,50只成年雄性SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组、模型组和低、中、高剂量组5组,每组10只.建模且低、中、高剂量组分别腹腔注射40、80、160 mg/kg丁基苯酞,余均腹腔注射等量生理盐水.Zea Longa评分标准评价神经功能缺损;苏木素-伊红(HE)染色观察各组脑组织病理学变化;化学比色法检测各组脑皮质组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性;实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测脑皮质组织SIRT1、Nrf2 mRNA表达;蛋白质印迹法(Western Blot)检测脑皮质组织SIRT1、Nrf2蛋白表达.结果 给药后假手术组神经功能缺损评分无明显变化(P>0.05),模型组评分给药后明显高于给药前[(3.12±0.30)分比(2.67±0.23)分,P<0.05],给药前后低[(2.69±0.25)分比(1.96±0.23)分]、中[(2.67±0.22)分比(1.20±0.17)分]、高[(2.65±0.24)分比(0.85±0.22)分]剂量组评分均下降(P<0.05),且呈剂量依赖性;假手术组脑皮质组织基本无病理改变,余4组均呈病理变化,低、中、高剂量组均较模型组病理变化有所改善,且呈剂量依赖性;模型组MDA、SOD、GSH-PX的活性均明显异常(P<0.05),且低、中、高剂量组均较模型组的活性明显改善(P<0.05),效果呈剂量依赖性;模型组SIRT1、Nrf2 mRNA及蛋白表达均下降(P<0.05),低、中、高剂量组较模型组mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05),且呈剂量依赖性.结论 对缺血性脑卒中大鼠给予丁基苯酞可减轻神经功能缺损和脑组织病理改变,控制脑皮质氧化应激反应,推测可能是通过调控SIRT1/Nrf2通路,上调SIRT1、Nrf2 mRNA及蛋白表达实现的.     

Wogonin inhibits ischemic brain injury in a rat model of permanent middle cerebral artery occlusion

The present study evaluated the effect of wogonin, a flavonoid originated from the root of Scutellaria baicalensis GEORGI, on focal ischemic brain injury in rats. Focal brain ischemia was induced by the permanent occlusion of middle cerebral artery (pMCAO) for 24 h with a silicone rubber cylinder inserted through the right internal carotid artery. We found that wogonin, intraperitoneally administered at a dosage of 20 mg/kg at 30 min before and 4 h after the surgery, reduced the pMCAO-induced infarct areas in the cerebral cortex as well as in the striatum. The total volume of infarction was significantly reduced by the treatment with wogonin. In addition, wogonin was found to significantly improve the pMCAO-induced behavioral deficits at 24 h after the surgery. Taken together, these results demonstrate that wogonin inhibits ischemic brain injury and improves behavioral dysfunction caused by pMCAO. These findings, along with previous reports demonstrating the neuroprotective effects of wogonin, provide strong pharmacological basis for the use of wogonin or Scutellaria baicalensis in the treatment of stroke.     

氧化苦参碱对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用及其抑制凋亡的作用机制

目的探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用及其抑制凋亡的作用机制。方法采用大鼠永久性大脑中动脉阻塞(permanent middle cer-ebral artery occlusion,pMCAO)方法,建立脑缺血模型,大鼠pMCAO术后通过腹腔给予OMT(30、60、120 mg.kg-1),以脑梗死体积、脑含水量和行为学症状等指标评价OMT对脑缺血的神经保护作用。通过HE染色方法观察OMT对缺血皮层神经细胞的形态变化以及数目的影响;应用Westernblot法检测OMT对缺血皮层Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白水平的表达。结果在大鼠局灶性脑缺血体内模型中,OMT(30、60、120 mg.kg-1)可明显减小脑梗死体积、脑含水量和改善行为学体征(P<0.01)。HE染色结果提示:OMT可明显增加神经细胞的存活率改善神经细胞的形态。Western blot结果显示:与假手术组相比,大鼠pMCAO后3、6、12、24 h,缺血皮层Caspase-3、Bax蛋白的表达水平在3 h开始上升,24 h达到峰值;而Bcl-2的表达水平在3h开始下降,24 h降到最低。给予OMT后可下调pMCAO大鼠缺血皮层中Caspase-3、Bax蛋白,上调Bcl-2蛋白。结论氧化苦参碱对脑缺血损伤有直接的神经保护作用,其机制可能通过上调Bcl-2及下调Bax、Caspase-3蛋白水平抑制凋亡发生。     

Nrf2调控AIM2炎症小体在大鼠脑缺血再灌注 损伤中的作用

目的 探讨核因子E2相关因子2（Nrf2）对脑缺血再灌注损伤的影响及对黑色素瘤缺乏因子2（AIM2）炎症 小体的调控作用。方法 将108只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、脑缺血再灌注模型组（I/R 组）、Nrf2抑制剂鸦胆子苦醇（Bru）干预组（Bru组），每组再按随机数字表法进一步分为脑缺血再灌注后8、24、72 h组， 共9组，每组12只。I/R组和Bru组采用线栓法建立大脑中动脉栓塞（MCAO）模型。于相应时间点对各组行神经功能 缺损评分；采用2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色测定脑梗死面积；HE染色检测脑组织病理损伤；荧光定量PCR 法检测缺血侧脑组织中AIM2 mRNA表达；Western blot法检测缺血区脑组织中AIM2、Nrf2蛋白的表达；酶联免疫吸 附试验法检测缺血区脑组织中凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-1、白细胞介素（IL）-1β和IL-18 的表达。结果 与Sham组比较，I/R组各时间点神经功能缺损评分升高，脑组织病理损伤显著加重，AIM2 mRNA以 及Nrf2、AIM2、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白表达水平升高（P＜0.05）。与I/R组比较，Bru组各时间点神经功能 缺损评分升高，脑组织病理损伤更重，Nrf2蛋白表达水平降低，AIM2 mRNA和蛋白，ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋 白表达水平升高（P＜0.05）。结论 Nrf2在脑缺血再灌注损伤中具有内源性神经保护作用，其机制可能与Nrf2可负 性调控AIM2炎症小体，减少炎性细胞因子的释放有关。