布南色林对H2O2引起PC12细胞损伤的神经保护作用研究

目的 探讨布南色林对H2O2引起的PC12细胞损伤的保护作用。方法 用H2O2损伤PC12细胞建立神经元损伤模型,实验分空白细胞对照组（C组）,H2O2处理组（H组）,布南色林-过氧化氢处理组（B组）,阳性对照组（维生素E-过氧化氢处理组,E组）。MTT法检测细胞存活率;Hoechst33258以及TUNEL检测其对细胞凋亡影响;生化法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性以及丙二醛（MDA）的含量。结果 与C组比较,H组的细胞存活率明显下降（P＜0.05）,凋亡指数增加,细胞内的SOD活性减低,MDA水平增高（P＜0.05）;与H组比较,B组的细胞活性增强,凋亡指数下降,细胞内的SOD活性加强,MDA水平减低（P＜0.05）。结论 合适浓度的布南色林对H2O2引起的神经损伤有保护作用。     

灯盏乙素对过氧化氢致心肌细胞损伤的作用与机制研究

目的：探讨灯盏乙素对过氧化氢（H2O2）损伤心肌细胞的保护作用。方法：将大鼠H9C2心肌细胞分为对照组、H2O2 (200 μmol·L-1)干预组以及灯盏乙素(100、200 μmol·L-1)+H2O2 (200 μmol·L-1)干预组,每组设6个复孔。各组经过药物干预6 h后,通过 MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪测定细胞凋亡率;测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、磷酸激酶（CK）、谷草转氨酶（AST）活性和丙二醛（MDA）含量;测定细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。结果：与对照组比较,H2O2干预组H9C2心肌细胞存活率显著降低且凋亡率显著升高,培养液中 LDH、CK、AST 活性和 MDA 含量均显著升高,细胞中 SOD、CAT、GSH-Px 活性显著降低,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。与 H2O2干预组比较,灯盏乙素（100、200 μmol·L-1）+H2O2（200 μmol·L-1）干预组培养液中H9C2心肌细胞存活率显著升高、凋亡率显著降低,培养液中LDH 、AST、CK活性和MDA 含量均显著降低,细胞中SOD、CAT、GSH-Px活性显著升高,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论：灯盏乙素能够有效提高 H2O2诱导状态下 H9C2 心肌细胞存活率并降低凋亡率,改善细胞中抗氧化酶活性、降低细胞损伤,提示灯盏乙素对H2O2诱导 H9C2心肌细胞氧化应激损伤具有剂量相关性的保护作用。     

脑源性神经营养因子可减轻 H9c2 心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的 探讨脑源性神经营养因子（BDNF）预处理对 H9c2 心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤的影响及其作用机制。方法 体外培养 H9c2 心肌细胞并以缺氧 （95%N2+5%CO2） 培养 4 h 后复氧 （95%O2+5%CO2） 培养 12 h 建立 H/R 模型, 并分为 Control 组、 H/R 组、 不同浓度 （1、 10、 100 μg/L） BDNF 预处理后 H/R 组、 酪氨酸蛋白激酶受体 B （TrkB）inhibitor 组 （同时加入 100 μg/L BDNF 和 1∶1 000 的 TrkB inhibitor 预处理后 H/R 组）。利用 MTT 方法检测各组心肌细胞的细胞存活率; 并测定各组心肌细胞 H/R 损伤后乳酸脱氢酶（LDH）、 肌酸激酶（CK）、 丙二醛（MDA）、 超氧化物歧化酶（SOD）含量及活性; 流式细胞术测定各组心肌细胞的凋亡率; Western-blot 检测 TrkB、 Bcl-2、 Bax 蛋白表达。结果 与 Control 组相比, H/R 组细胞存活率明显下降, LDH、 CK 和 MDA 含量升高, SOD 活性降低, 细胞凋亡率升高, 抗凋亡 Bcl-2 蛋白表达下降, 促凋亡 Bax 蛋白表达升高（均 P < 0.05）。与 H/R 组相比, 不同浓度 BDNF 预处理H9c2 心肌细胞后 H/R, 各组细胞存活率均明显上升, CK、 LDH、 MDA 含量逐渐下降, SOD 活性升高, 细胞凋亡率下降, TrkB 和 Bcl-2 蛋白表达升高, 而 Bax 蛋白表达降低, 但 BDNF 的作用均受到 TrkB inhibitor 的抑制。结论 BDNF预处理能够提高 H9c2 心肌细胞 H/R 损伤的细胞存活率, 通过降低细胞凋亡率和提升细胞抗氧化能力而发挥保护作用, 并与 BDNF-TrkB 信号通路有关。     

盐酸戊乙奎醚注射液对体外循环患者cTnI的影响

目的观察盐酸戊乙奎醚注射液对体外循环（CPB）患者心肌肌钙蛋白I（cTnI）的影响。方法美国麻醉医师协会（ASA）选择Ⅱ～Ⅲ级择期CPB下行心脏不停跳瓣膜置换手术患者40例,随机分为盐酸戊乙奎醚注射液组（A组）和对照组（B组）,每组20例。A组于CPB前10min静脉注射盐酸戊乙奎醚注射液3mg,B组注入等量的生理盐水。分别记录CPB前、CPB1h、术后1、2、3d五个时点的cT-nI。结果两组患者CPB前的cTnI均为正常值,差异无统计学意义（P〉0.05）。两组CPB1h及术后1、2、3d各时点的cTnI与CPB前比较均明显升高（P〈0.05）,与B组比较,A组的cTnI浓度明显小于B组（P〈0.05）。结论盐酸戊乙奎醚注射液可降低CPB下心脏手术的cTnI的浓度,提示盐酸戊乙奎醚注射液有心肌保护的作用,     

盐酸戊乙奎醚对哮喘鼠气道平滑肌细胞增殖作用的研究

目的探讨盐酸戊乙奎醚对哮喘鼠气道平滑肌细胞（ASMC）增殖的影响。方法BALB／c小鼠随机分为对照组（A）、哮喘组（B）和盐酸戊乙奎醚干预组（C）。进行支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞分类计数;测定转移生长因子-β1（TGF-β1）的浓度及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达;观察肺组织病理形态学变化;图像分析测定支气管基底膜周径（Pbm）、气道壁总面积（WAt）、平滑肌面积（WArn）。结果C组的TGF-β1、PCNA表达及WAt／Pbm、WAm／Pbm比值明显低于B组（P〈0．05）,而高于A组（P〈0．05）。结论早期行盐酸戊乙奎醚干预可通过减少TGF-β1在肺组织的表达减轻ASMC增殖。     

盐酸戊乙奎醚对心脏瓣膜置换术患者心肌缺血 再灌注损伤的保护作用

目的：观察盐酸戊乙奎醚对心脏瓣膜置换术患者心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法：60例择期心瓣膜置换术患者分为盐酸戊乙奎醚2 mg组（I组）、4 mg组（Ⅱ组）和对照组（Ⅲ组）,每组20例,Ⅰ,Ⅱ组患者术前用药为盐酸戊乙奎醚0.03 mg?kg-1肌注,转流前20 min用盐酸戊乙奎醚2 mg静注,心肺转流前20 min用盐酸戊乙奎醚4 mg静注,III组术前用药为东莨蓉碱0.03 mg?kg-1肌注,转流前20 min用等量生理盐水静注。在转流前（T0）,开放主动脉后30 min（T1）,1 h（T2）,2 h（T3）,12 h(T4),24 h（T5）抽取桡动脉血测过氧化脂质（MDA）、细胞炎性因子TNF-α,IL-6,IL-10和心肌肌钙蛋白I（cTnI）。结果：I,Ⅱ组与III组比较：MDA明显减少（P<0.05）;TNF-α,IL-6含量明显降低（P<0.05）,IL-10明显升高（P<0.05）;cTn1含量明显降低（P<0.05）;I组与II组同时值比较：TNF-α,IL-6明显升高（P<0.05）,IL-10明显降低（P<0.05）,T3,T4时cTnI明显升高（P<0.05）,T1,T2时MDA明显升高（P<0.05）。结论：盐酸戊乙奎醚可明显减轻心脏瓣膜置换术患者心肌缺血再灌注后脂质过氧化和过度的炎性反应,减轻心肌受损程度,在一定的剂量范围内加大剂量,其心肌保护作用增强。     

盐酸戊乙奎醚对大鼠急性全脑缺血再灌注损伤的影响

目的探讨胆碱受体阻滞剂盐酸戊乙奎醚对三动脉阻断法全脑缺血再灌注损伤模型大鼠的脑保护作用。方法♂性SD大鼠随机分为假手术组、NS组、东莨菪碱组和盐酸戊乙奎醚组,后3组大鼠缺血前40min分别腹腔注射NS(1mL)、东莨菪碱(0.01mg·kg~(-1))和盐酸戊乙奎醚(0.01mg·kg~(-1))。分别于脑缺血再灌注2、12、24h、3和7d取材测定海马CAl区存活神经元数量、凋亡神经元数量、bel-2和bax阳性神经元数量。另取部分动物于缺血再灌注4d用TIC法测定脑梗死体积。结果与NS组比较,盐酸戊乙奎醚组和东莨菪碱组均可见CA1区存活神经元数目增加,凋亡神经元数目减少,海马CAl区bel-2提前并延长表达,脑梗死体积缩小。盐酸戊乙奎醚组bax表达下降。盐酸戊乙奎醚组较同等剂量的东莨菪碱组改善更明显。结论盐酸戊乙奎醚可能通过改变bel-2/bax的比例对脑缺血再灌注损伤大鼠产生脑保护作用。     

槲皮素对肝细胞氧化应激损伤的保护作用

摘要： 目的 探讨槲皮素对氧化应激 Chang liver 细胞损伤的保护作用及其作用的分子机制。方法 培养 Chang liver 细胞, 将细胞随机分为正常对照组、 H2O2组及槲皮素低、 中、 高剂量组。MTT 法检测肝细胞的存活率; 流式 细胞术检测细胞凋亡率。2′,7′-二氯荧光素乙二酯(DCFH-DA)细胞内活性氧 （ROS） 荧光染色后, 荧光显微镜观察照 相及流式细胞仪检测细胞内活性氧水平。试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、 过氧化氢酶（CAT）、 谷胱甘肽 过氧化物酶 （GSH-Px） 活性及细胞中丙二醛 （MDA） 的含量。采用 Western blot 法检测 Nrf2 蛋白的表达。结果 H2O2 组较正常对照组细胞存活率、 SOD、 GSH-Px、 CAT 活性降低 (P < 0.05), 凋亡率、 平均荧光强度（MFI）及 MDA 升高 (P < 0.05)。不同剂量槲皮素组细胞存活率及细胞内 SOD、 GSH-Px、 CAT 活性高于 H2O2组(P < 0.05), MDA、 凋亡率、 MFI 水平低于 H2O2组(P < 0.05)。槲皮素低、 中及高剂量组 Nrf2 蛋白均高于 H2O2组(P < 0.05)。结论 槲皮素对氧化 应激肝细胞损伤具有保护作用, 其机制可能与激活 Nrf2-ARE 通路, 进而增强下游抗氧化基因的表达有关。     

老年患者麻醉前应用盐酸戊乙奎醚对心率、血压的影响

目的了解不同剂量盐酸戊乙奎醚作为老年患者麻醉前用药对心率和血压的影响。方法老年手术患者60例,分为低剂量盐酸戊乙奎醚组、高剂量盐酸戊乙奎醚组和东莨菪碱组各20例。进手术室后分别肌注盐酸戊乙奎醚0.005mg/kg（低剂量组）、0.01mg/kg（高剂量组）或东莨菪碱0.2～0.3mg。记录入室即刻、注射后20min和40min三个时间的心率和血压。结果两组肌注盐酸戊乙奎醚患者的心率和血压有轻度变化,但差异无统计学意义（P〉0.05）;东莨菪碱组患者心率明显增加,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论与东莨菪碱相比,盐酸戊乙奎醚对心脏影响轻微,可安全用于老年患者麻醉前给药。     

盐酸戊乙奎醚对食管癌根治术呼吸循环功能的影响

目的比较盐酸戊乙奎醚（长托宁）和阿托品用于食管癌根治术前药对呼吸循环功能的影响。方法40例ASAI-Ⅱ级全麻下行食管癌根治术患者,随机分为两组,P组（盐酸戊乙奎醚组）和A组（阿托品组）,每组20例,每组患者术前分别静脉滴注盐酸戊乙奎醚0．02mg／kg和阿托品0．01mg／kg,观察双肺通气后15min（T1）、单肺通气后60min（T2）、再次双肺通气30min（T3）血压、心率和动脉血气的影响。结果12时,两组动脉氧分压（PaO2）均显著降低（P〈0．05）,P组PaO2显著高于A组（P〈0．05）,T3时A组PaO2显著低于P组（P〈0．05）。T3时P组平均动脉压（MAP）显著低于A组（P〈0．05）,T2和T3时A组心率显著高于P组（P〈0．05）。结论盐酸戊乙奎醚可以改善患者呼吸功能,血流动力学稳定,作用时间长,比阿托品更适合食管癌根治手术。     

分泌型丛生蛋白通过抑制线粒体自噬缓解H2O2诱导的心肌细胞损伤 #br#

目的 探讨分泌型丛生蛋白（sCLU）对心肌细胞氧化损伤的影响及其机制。方法 采用大鼠心肌细胞 H9C2。实验1分为Control组（仅更换培养基）和H2O2组（100 µmol/L H2O2处理）。实验2分为Control组、pcDNA3.1组 （转染 pcDNA3.1 对照空质粒）、pcDNA3.1-sCLU 组（转染 pcDNA3.1-sCLU 过表达质粒）、H2O2组（100 µmol/L H2O2处 理）、H2O2+pcDNA3.1 组（pcDNA3.1 对照空质粒转染 48 h 后加入 100 µmol/L H2O2处理）、H2O2+pcDNA3.1-sCLU 组 （pcDNA3.1-sCLU 过表达质粒转染 48 h 后加入 100 µmol/L H2O2处理）。实验 3 分为 DMSO 组（加入 1% 体积分数 的 DMSO）、Mdivi-1 组（10 µmol/L 的 Mdivi-1 处理）、H2O2+DMSO 组（加入 1% 体积分数的 DMSO 处理 30 min 后加入 100 µmol/L的H2O2处理）、H2O2+Mdivi-1组（10 µmol/L的Mdivi-1处理30 min后加入100 µmol/L的H2O2处理）、H2O2+ pcDNA3.1-sCLU 组（pcDNA3.1-sCLU 过表达质粒转染 48 h 后加入 100 µmol/L H2O2处理）、H2O2+pcDNA3.1-sCLU+ Mdivi-1组（pcDNA3.1-sCLU过表达质粒转染48 h后加入10 µmol/L的Mdivi-1处理30 min,再加入100 µmol/L H2O2 处理）。采用MTT法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二 醛（MDA）水平。DFCH-DA荧光探针测定细胞活性氧（ROS）水平。实时定量聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试验 检测细胞中sCLU表达,Western blot法检测CLU、PINK1、Parkin和LC3蛋白表达水平。结果 （1）实验1。与Control 组比较,H2O2组细胞中sCLU mRNA、细胞培养上清中sCLU蛋白及细胞中CLU蛋白相对表达水平均降低（P＜0.01）。 （2）实验2。与Control组比较,H2O2组细胞活力、SOD水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均降低,细胞凋亡率、ROS水平、MDA 水平、PINK1和Parkin蛋白表达水平均升高（P＜0.05）;与H2O2组比较,H2O2+pcDNA3.1-sCLU组细胞活力、SOD水平、 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均升高,细胞凋亡率、ROS水平、MDA水平、PINK1和Parkin蛋白表达水平均降低（P＜0.05）。（3） 实验3。与DMSO组比较,Mdivi-1组细胞活力与细胞凋亡率差异无统计学意义;H2O2+DMSO组细胞活力下降,细胞 凋亡率升高（P＜0.05）。与H2O2+DMSO组比较,H2O2+Mdivi-1组、H2O2+pcDNA3.1-sCLU组和H2O2+pcDNA3.1-sCLU+ Mdivi-1 组细胞活力均升高,细胞凋亡率均下降（P＜0.05）。与 H2O2+Mdivi-1 组比较,H2O2+pcDNA3.1-sCLU 组和 H 2O2+pcDNA3.1-sCLU+Mdivi-1组细胞活力差异无统计学意义,细胞凋亡率降低（P＜0.05）。结论 sCLU对氧化应 激条下的心肌细胞具有保护作用,其机制可能与线粒体自噬的抑制有关。     

BMAL1对H2O2诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及机制探讨

目的 探讨节律基因BMAL1对过氧化氢（H2O2）诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及机制。方法 构建 BMAL1稳定过表达的H9C2细胞系后,实验分为2个部分。（1）实验1。对照组、H2O2组（0.2 mmol/L的H2O2处理24 h）、 BMAL1 过表达（BMAL1-OE）组（BMAL1 稳定过表达 H9C2 细胞）、BMAL1 过表达+H2O2（BMAL1-OE+H2O2）组 （0.2 mmol/L的H2O2处理BMAL1稳定过表达H9C2细胞24 h）。（2）实验2。H2O2组、BMAL1-OE+H2O2组、BMAL1过表 达+抑制 NRF2+H2O2（BMAL1-OE+ML385+H2O2）组（NRF2 抑制剂 2 μmol/L 的 ML385 预处理 BMAL1 稳定过表达 H9C2 细胞 24 h,再用 0.2 mmol/L 的 H2O2处理 24 h）、BMAL1 过表达+抑制 HO-1+H2O2（BMAL1-OE+Znpp+H2O2）组 （HO-1抑制剂5 μmol/L的Znpp预处理BMAL1稳定过表达H9C2细胞24 h,再用0.2 mmol/L的H2O2处理24 h）。CCK-8 法检测细胞活力,羟胺法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性、TBA 法检测丙二醛（MDA）含量,Western blot 法检测 BMAL1、核因子 E2 相关因子 2（NRF2）和血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达水平。结果 （1）与 Control 组相比, BMAL1-OE组BMAL1 mRNA表达水平升高,H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活性下降、MDA含量增加,BMAL1、 NRF2和HO-1蛋白相对表达水平降低（P＜0.05）;与H2O2组相比,BMAL1-OE+H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活 性增加,MDA 含量减少,而 BMAL1、NRF2 和 HO-1 蛋白相对表达水平升高（P＜0.05）;（2）与 BMAL1-OE+H2O2组相 比,BMAL1-OE+ML385+H2O2组和BMAL1-OE+Znpp+H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活性降低,MDA含量增加 （P＜0.05）。结论 BMAL1可能通过上调NRF2/HO-1信号轴,减轻H2O2诱导的大鼠心肌细胞氧化应激损伤。     

人参皂苷Rg3对H2O2诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤的保护作用#br#

摘要：目的　探讨人参皂苷Rg3对过氧化氢（H2O2）诱导人卵巢颗粒细胞（KGN）损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法　体外培养KGN,采用不同剂量H2O2孵育细胞2 h,建立H2O2刺激的KGN损伤模型。人参皂苷Rg3预处理24 h,H2O2刺激KGN后,CCK-8检测细胞活力,筛选有效的干预剂量,随后将KGN分为空白组、H2O2模型组、H2O2+Rg3组和Rg3组,采用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）水平;AnnexinⅤ/PI双染,流式细胞术检测人参皂苷Rg3对H2O2诱导KGN凋亡的影响;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、BAX及细胞色素C的表达。结果　与空白组相比,H2O2模型组细胞活力下降,凋亡比例升高（P＜0.01）,ROS水平增高,细胞色素C水平显著升高,Bcl-2/BAX降低（均P＜0.05）。与模型组相比,H2O2+Rg3组能够明显提高细胞活力,减少ROS的产生,降低凋亡细胞比例,降低细胞色素C水平,提高Bcl-2/BAX（均P＜0.05）。与空白组相比,Rg3组无明显差异。结论　人参皂苷Rg3预处理对H2O2诱导的KGN氧化损伤具有保护作用,其机制与减缓ROS过量累积以及抑制线粒体凋亡途径有关。     

人参皂苷保护小鼠精原细胞氧化损伤的研究

目的观察人参皂苷对活性氧引起的小鼠睾丸生殖细胞氧化损伤的保护作用。方法利用体外培养的小鼠精原细胞建立氧化应激模型,通过检测生殖细胞活性、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)生成、超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽(GSH)水平评价人参皂苷对精原细胞氧化损伤的缓解作用。结果次黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶(HX/XO)体系产生的活性氧可引起生殖细胞活性降低、MDA的生成量增加、SOD活性和GSH水平降低,而添加人参皂苷(10mg·L-1)能恢复HX/XO引起的生殖细胞活性、SOD活性和GSH水平的下降以及MDA生成的增加。结论人参皂苷可通过抗氧化作用保护活性氧引起的小鼠精原细胞氧化损伤。     

咯利普兰对H_2O_2致PC12细胞氧化应激损伤的保护作用

目的探讨PDE4抑制剂咯利普兰(rolipram)对H2O2致PC12细胞氧化应激损伤的保护作用及其作用机制。方法以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤模型,MTT法检测细胞存活率;碘化丙啶(Propidium iodide,PI)染色流式细胞术检测细胞周期变化;化学比色法测定细胞清除羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2·)的能力;以及培养上清液中的丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。Western blot和Real-time RT-PCR检测细胞内硫氧还蛋白(Trx)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。结果咯利普兰能明显提高H2O2损伤的PC12细胞存活率,恢复细胞增殖;提高细胞清除·OH和O2·的能力;降低MDA和NO含量,提高GSH含量和SOD活性;使Trx蛋白和mRNA表达增加,同时下调iNOS蛋白和mRNA表达。结论咯利普兰对H2O2致PC12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高PC12细胞的抗氧化能力相关。     

苯乙双胍通过影响线粒体功能促进A549/DDP细胞凋亡

目的 探究苯乙双胍抑制 A549/DDP细胞增殖并促进其凋亡的可能机制。方法 MTS法检测顺铂（顺铂 组）和苯乙双胍（苯乙双胍组）对 A549/DDP 细胞和 A549 细胞的细胞活力（24 h 和 48 h）的影响。苯乙双胍组以 2.5 mmol/L苯乙双胍处理,对照组采用PBS处理,MTS法检测苯乙双胍对A549/DDP细胞增殖的影响,克隆形成实验检测 苯乙双胍对 A549/DDP细胞克隆形成能力的影响,流式细胞术检测苯乙双胍对 A549/DDP细胞凋亡和活性氧（ROS） 胞内线粒体质量（Mitotracker）、钙离子（Rhod-2）的影响,实时荧光定量PCR检测线粒体DNA（mtDNA）变化,三磷酸腺 苷（ATP）试剂盒检测 ATP的变化,Western blot检测苯乙双胍对线粒体氧化磷酸化复合物表达的影响。结果 与顺 铂组比较,苯乙双胍组A549/DDP细胞在24 h和48 h的细胞活力降低（P＜0.05）,而2组间A549细胞24 h和48 h活力 差异无统计学意义。顺铂处理48 h时A549/DDP细胞活力均高于A549细胞（P＜0.05）,而24 h间差异无统计学意义; 苯乙双胍处理的A549/DDP细胞活力低于A549细胞（P＜0.05）。与PBS组相比,苯乙双胍组A549/DDP细胞的24 h和 48 h 增殖率、集落形成数减低,而凋亡率升高,ROS 水平增高,Mitotracker、Rhod-2、mtDNA 及 ATP 水平降低（P＜ 0.05）,线粒体氧化磷酸化复合物Ⅰ中的NDUFB8蛋白、复合物Ⅱ中的SDHB蛋白和复合物Ⅳ中的MTCO1蛋白表达明 显降低（P＜0.05）。结论 （1）A549/DDP细胞较 A549细胞对苯乙双胍更为敏感,但对顺铂耐受性较 A549细胞强。 （2）苯乙双胍通过增加细胞内 ROS、减少线粒体质量、钙离子和 mtDNA、抑制线粒体氧化磷酸化复合物表达,减少 ATP生成,从而抑制A549/DDP细胞增殖并促进其凋亡。     

TMPDP, a tetramethylpyrazine derivative, protects vascular endothelial cells from oxidation damage by hydrogen peroxide

A novel ligustrazine derivative, tetramethylpyrazine diphenylmethyl piperazidine (TMPDP), prepared by hybridization and bioisosteric replacement of the molecular structure of TMP, was studied for its protective effects on oxidative damage of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) in response to hydrogen peroxide (H2O2). The antioxidative effect of TMPDP was assessed by the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical (DPPH) test. Cell viability was measured using a 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay. The activity of lactate dehydrogenase (LDH), superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH) and the content of malondialdehyde (MDA) in cells were determined by commercial kits. The intracellular formation of reactive oxygen species (ROS) and the concentration of free intracellular calcium ([Ca2+]i) were determined using DCFH-DA assay and with fura-2/AM fluorimetry, respectively. Results showed that TMPDP had a moderate antioxidative effect against DPPH. Cell viability was decreased markedly by exposure to H2O2. Introduction of TMPDP, however, significantly increased cell viability, markedly reduced LDH release from cells and decreased lipid peroxidation in response to H2O2 treatment. These effects of TMPDP were accompanied by increased activity of the endogenous antioxidant enzymes, SOD and GSH, reduced production of ROS and reduced intracellular concentration of Ca2+. These results suggest that TMPDP protects HUVECs against oxidative damage by scavenging ROS and regulates intracellular calcium concentration. This might have important implications for the development of new agents for the effective treatment of vascular disease.     

艾塞那肽预处理对过氧化氢损伤的H9c2心肌细胞的保护作用研究

目的:研究胰高血糖素样肽1(GLP-1)类似物艾塞那肽(EX)预处理对过氧化氢损伤的H9c2心肌细胞的保护作用。方法:取体外培养的H9c2心肌细胞,分为正常对照组、模型组和0·01、0·1、1、10nmol·L-1EX预处理组。除正常对照组外,其余各组用过氧化氢诱导H9c2心肌细胞建立氧化应激损伤模型,EX预处理组建模前30min加入相应浓度EX,共培养6·5h后,检测各组细胞细胞活力和培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:与正常对照组比较,模型组H9c2细胞活力、SOD活性明显降低,LDH、CK-MB活性和MDA含量明显升高(P<0·05)。与模型组比较,0·1、1、10nmol·L-1EX预处理组细胞活力、SOD活性明显升高,LDH、CK-MB活性和MDA含量明显降低(P<0·05),并与剂量成正相关。结论:EX预处理对H9c2心肌细胞的氧化应激损伤有保护作用,并与剂量呈正相关。