雷公藤抗炎免疫及抗生育活性成分的筛选Ⅴ.7个环氧二萜内…

以有丝分裂原ＣｏｎＡ或ＬＰＳ诱导的小鼠脾细胞增殖为模型，检测从雷公藤中分离的７个环氧二萜内酯化合物体外对Ｔ、Ｂ淋巴细胞的作用和效价。实验结果表明，６个化合物（Ｔ４、Ｔ７、Ｔ８、Ｔ９、Ｔ１０、Ｌ２）和ＴⅡ组份均显著抑制ＣｏｎＡ或ＬＰＳ诱导的淋巴细胞增殖，这些化合物对两者的抑制效价在１０＾－５～１０＾－９μｇ／ｍｌ间，ＴⅡ组份则分别为３．５及４．２μｇ／ｍｌ。其ＩＣ５０值由小至大依次是Ｔ１０、Ｔ４、Ｔ     

钩吻碱类提取物对小鼠脾细胞增殖反应的影响

钩吻碱类提取物在浓度大于１．２５μｇ／ｍｌ以上时对混合淋巴细胞培养反应（ＭＬＲ）均有不同程度的抑制作用，具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）的最低抑制浓度为２．５μｇ／ｍｌ，抑制率为１８．３％。单独采用Ｃ５７ＢＬ／６ｊ小鼠脾细胞进行实验，促有丝分裂剂为细菌脂多糟（ＬＰＳ５μｇ／ｍｌ），在钩吻碱类提取物浓度为４０μｇ／ｍｌ才出现抑制作用（Ｐ＜０．０５），抑制率为１８％，改用刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ２μｇ／ｍｌ）刺激，钩吻碱类提取物最低抑制浓度为２０μｇ／ｍｌ，抑制率为１２．４％（Ｐ＜０．０５）．脾细胞先经ＣｏｎＡ活化．后用白细胞介素２（５ｕ／ｍｌ）维持培养，此时钩吻碱类提取物的最低抑制浓度为４０μｇ／ｍｌ．抑制率为１７．１％（Ｐ＜０．０５）。     

葡萄球菌肠毒素A的细胞增殖诱导能力

目的：观察葡萄球菌肠毒素Ａ的细胞增殖诱导能力及其抗肿瘤作用。方法：ＭＴＴ微量酶反应比色法。结果：纯化ＳＥＡ在１０＾－１２￣１０＾－１５ｇ／ｍｌ浓度范围对体外培养的ＢＡＬＢ／Ｃ鼠脾细胞表现了细胞增殖诱导能力,并呈剂量依赖关系,其中１０＾－７￣１０＾０５ｇ／ｍｌＳＥＡ的作用强于最适量（２５μｇ／ｍｌ）ＰＨＡ。在Ｅ／Ｔ为５￣２０：１条件下,１０＾－５ｇ／ｍｌＳＥＡ活化４８小时的ＢＡＬＢ／Ｃ鼠脾细胞对Ｙａｃ－１细胞的杀伤活性高于ＮＫ细胞,但ＳＥＡ未能增强ＢＡＬＢ／Ｃ鼠脾细胞对Ｂ１６细胞的杀伤活性。结论：葡萄球菌肠毒素Ａ具有较强的细胞增殖诱导能力,据此超抗原特性可应用于肿瘤的生物治疗。     

胎儿胸腺细胞对PWM和PHA反应性比较

比较了ＰＷＭ和ＰＨＡ对胎儿胸腺细胞及Ｔｈｙ－Ｌ（比重≤１．０７４）和Ｔｈｙ－Ｈ（比重〉１．０７４）两亚群的增殖效应。研究结果表明：ＰＷＭ在较大浓度范围内（０．２￣２０μｇ／ｍｌ）对胎儿胸腺细胞尤其是Ｔｈｙ－Ｌ有强烈诱导增殖作用，ＰＨＡ的诱导增殖作用呈明显剂量依赖关系；ＩＬ－２对ＰＨＡ的协同作用远较对ＰＷＭ的协同作用强；多聚甲醛处理的Ｕ细胞对ＰＷＭ和ＰＨＡ诱导的增殖均有辅助作用；Ｔｈｙ－１为胸腺细胞     

对甲氧基肉桂酸乙酯的免疫药理研究

目的：对甲氧基肉桂酸乙酯（ＥＭＣ）的免疫药理研究。方法：通过３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察该药对正常人外周血淋巴细胞及小鼠脾脏淋巴细胞转化的影响；通过小鼠同种异位心脏移植物存活时间，观察该药对移植物排斥反应的影响。结果：ＥＭＣ（３０μｇ·ｍｌ１～１００μｇ·ｍｌ１）对植物血凝素（ＰＨＡ）诱导的正常人外周血淋巴细胞转化有显著的抑制作用。体内给予ＥＭＣ（５ｍｇ·ｋｇ１×６ｄ，ｉｐ）对ＰＨＡ诱导的Ｔ淋巴细胞转化有显著的抑制作用（Ｐ＜０．０５），对脂多糖（ＬＰＳ）诱导的Ｂ淋巴细胞转化与对照组没有显著性差异。ＥＭＣ（５ｍｇ，２５ｍｇ·ｋｇ１×６ｄ，ｉｐ）未见延长小鼠异体心肌组织移植物的存活期。结论：ＥＭＣ可抑制ＰＨＡ诱导的正常人外周血及小鼠脾脏淋巴细胞转化。     

胎儿胸腺细胞对PWM和PHA反应性比较

比较了ＰＷＭ和ＰＨＡ对胎儿胸腺细胞及Ｔｈｙ－Ｌ（比重≤１．０７４）和Ｔｈｙ－Ｈ（比重＞１．０７４）两亚群的增殖效应。研究结果表明：ＰＷＭ在较大浓度范围内（０．２～２０μｇ／ｍｌ）对胎儿胸腺细胞尤其是Ｔｈｙ－Ｌ有强烈诱导增殖作用，ＰＨＡ的诱导增殖作用呈明显剂量依赖关系，ＩＬ－２对ＰＨＡ的协同作用远较对ＰＷＭ的协同作用强；多聚甲醛处理的Ｕ细胞对ＰＷＭ和ＰＨＡ诱导的增殖均有辅助作用；Ｔｈｙ－Ｌ为胸腺细胞中对刺激敏感的亚群，而Ｔｈｙ－Ｈ对刺激不敏感。     

雷公藤抗炎免疫及抗生育活性成分的筛选V．7个环氧二萜内酯化合物体外对T、B淋巴细胞增殖的影响

以有丝分裂原ＣｏｎＡ或ＬＰＳ诱导的小鼠脾细胞增殖为模型，检测从雷公藤中分离的７个环氧二萜内酯化合物体外对Ｔ、Ｂ淋巴细胞的作用和效价。实验结果表明，６个化合物（Ｔ_４、Ｔ_７、Ｔ_８、Ｔ_９、Ｔ_１０、Ｌ_２）和ＴⅡ组份均显著抑制ＣｏｎＡ或ＬＰＳ诱导的淋巴细胞增殖，这些化合物对两者的抑制效价在１０~（－５）～１０~（－９）μｇ／ｍｌ间，Ｔ_Ⅱ组份则分别为３．５及４．２μｇ／ｍｌ。其ＩＣ５０值由小至大依次是Ｔ_１０、Ｔ_４、Ｔ_８、Ｌ_２、Ｔ_７、Ｔ_９和Ｔ_Ⅱ，在剂量─效应坐标图上ＬＰＳ诱导曲线在ＣｏｎＡ诱导曲线的右侧，两曲线基本平行，ＩＣ５０大小次序一致，结果非常接近。另一个化合物Ｔ_（１１）在浓度达５０μｇ／ｍｌ时对两者均无抑制作用，体外定性结果与体内完全一致。提示雷公藤免疫活性化合物在体外对Ｔ、Ｂ细胞增殖的抑制作用是明确的、直接的和无选择性的。     

CMP对HPBL的促诱生IL—6效应及IL—6中间体制备

用羧甲基茯苓多糖（ＣＭＰ）预处理人外周血淋巴细胞（ＨＰＢＬ）后经ＰＨＡ或ＣｏｎＡ刺激的促诱生组ＩＬ－６效价，结果比无ＣＭＰ的ＰＨＡ或ＣｏｎＡ刺激的常规诱生组高０．５－０．８倍，尤以ＣＭＰ＋ＰＨＡ＋ＣｏｎＡ促诱生ＩＬ－６效果最中达生物制剂的药用标准，经临床试验验证明安全有效。     

银耳孢糖对离体小鼠免疫细胞功能的影响

银耳孢糖在体外能明显促进ＬＰＳ对小鼠脾细胞的增殖反应，药物本身对脾细胞具有丝裂原作用，能明显增强ＮＫ细胞和ＡＤＣＣ活性。浓度为２５～２５０μｇ／ｍｌ时，能提高ＣｏｎＡ诱导脾细胞产生ＩＬ－２；当浓度大于２５μｇ／ｍｌ时，它可抑制ＣｏｎＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖反应及胸腺细胞￣３Ｈ－ＴｄＲ自发掺入率，抑制程度随药量增加而更明显。     

川芎嗪对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响

川芎嗪对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响与剂量有关。在１００￣１０００μｇ／ｍｌ时，川芎嗪对正常小鼠和荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖反应有明显的抑制作用，在亚适浓度Ｃｏｎ Ａ（２μｇ／ｍｌ）作用下，正常小鼠和荷瘤小鼠脾淋巴细胞对川芎嗪的反应性不同，荷瘤小鼠灌川芎嗪后，其淋巴细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量明显增加，对ＰＨＡ刺激的反应性不因荷瘤而降低，提示川芎嗪具有免疫调整作用。     

PHA、ConA、PWM对血内淋巴细胞的激活效应研究

实验用不同浓度的PHA、ConA、PWM研究了对正常人血内淋巴细胞的激活效应,观察了PHA、ConA及PWM激活后的增殖特性。其增殖高峰分别出现在第5、4、6天。可见不同丝裂原激活的淋巴细胞各具不同的代谢活力及增殖状态。分别反映着血中不同淋巴细胞群的特性。     

Graves病患者外周血淋巴细胞功能的临床实验研究

作者以~3H-TdR掺入淋巴细胞转化法为观察指标,研究了正常人和Graves病(GD)患者外周血淋巴细胞对不同致有丝分裂原的反应性,并使用非特异性酯酶染色法对GD患者外周血T淋巴细胞(Tc)进行了检测。结果表明:正常人、GD患者Tc对PHA的反应性显著大于ConA;GD患者对PHA、ConA的反应性与正常人无明显差异;GD患者外周血Tc数目也未见有异常;GD患者初发组B淋巴细胞(Bc)对SPA菌体的反应能力明显高于正常对照组,且与GD临庆转归具有一定规律性。本研究提示:Graves病患者外周血Bc功能存在免疫学异常,而Tc从功能、数量上均未见有明显异常改变。     

手术前动脉介入化疗对胃癌患者外周血淋巴细胞化学发光的影响

目的 :研究手术前动脉介入化疗对胃癌患者外周血淋巴细胞化学发光的影响。　方法 :选择 70例胃癌患者 ,分别在术前动脉介入化疗前和化疗后 1、3、5、7天抽取患者外周静脉血 ,分离淋巴细胞进行化学发光 (Ly CL)和细胞周期动力学检测 ,观察其化疗前、后的变化。　结果 :胃癌患者化疗后 2 4hLy CL迅速降低 (P <0 .0 1) ,最低值一般出现在化疗后 3～ 5天 ,然后逐渐上升 ,第 7天时基本恢复至化疗前的水平 (P >0 .0 5 )。同时淋巴细胞增生指数也有相同的变化 ,与Ly CL呈明显的正相关 (r =0 .6 1,P <0 .0 1)。　结论 :测定Ly CL强度变化可反映胃癌患者在术前动脉介入化疗过程中淋巴细胞免疫功能的变化 ,可作为患者免疫功能改变的动态观察指标 ,指导诊断和治疗。     

IL-2-PE66~(4Glu)融合蛋白生物学活性测定

ＩＬ－２－ＰＥ６６４Ｇｌｕ是由白介素２同改构的绿脓杆菌外毒素通过基因融合构成的嵌合蛋白。我们研究了它对ＣｏｎＡ诱导的小鼠脾母细胞和ＰＨＡ激活的人外周血淋巴细胞的细胞毒活性，结果显示其半数抑制剂量（ＬＤ５０）分别是５０ｎｇ／ｍｌ和２０ｎｇ／ｍｌ，而对ＩＬ－２Ｒ细胞则无明显的作用；同时，探讨了ＩＬ－２的浓度、ＭＴＴ浓度及作用时间对实验结果的影响     

Immunomodulation of musk-moxa-string therapy in patients with scrofula

The effects of musk-moxa-string therapy on the immune system in man were investigated in 39 patients with scrofula. Before treatment, the numbers of peripheral blood (PB) CD3⁺ and DC4⁺ cells and the ratio CD4⁺/ CD8⁺ were found to be lower in patients with scrofula than in normal subjects, while those of B cells and DR⁺ cells were higher. Response of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) to phytohemagglutinin (PHA) diminished in patients with scrofula. At month 2–6 of musk-moxa-string therapy the number of PB CD8⁺ cells showed slight diminution along with significant increaes in CD3⁺ and CD4⁺ cells and CD4⁺/CD8⁺ ratio in total lymphocytes (P<0.001). In vitro a marked increased blastogenic response to mitogen stimulation with PHA was observed in PBMC of patients with scrofula after treatment (P<0.001). In contrast, B lymphocytes, monocytes, DR⁺ cells and blastogenic response to concanavalin A and pokeweed mitogen were not influenced by musk-moxa-string therapy.     

乙型肝炎患者外周血单个核细胞产生TNF活性的研究

本文对70例不同类型乙型肝炎患者,包括重症肝炎26例、急性肝炎19例、慢性活动性肝炎13例、以及慢性迁延性肝炎12例的外周血单个核细胞的TNF活性及其在肝细胞坏死中的可能作用进行了研究。研究中采用微量全血体外刺激,即以LPS刺激单个核细胞产生TNF_α、以PHA刺激淋巴细胞产生TNF_β,然后用国际通用的L_(929)细胞标准法检测TNF的活性。研究发现重症肝炎患者的TNF活性(TNF_α为15.76 U/ml;TNF_β20.13 U/ml)明显高于正常人(TNF_α为3.10U/ml;TNF_β为0.21 U/ml)与急性肝炎患者(TNF_α为3.44U/ml;TNF_β为0.24 U/ml)。又慢活肝患者的TNF活性(TNF_α为11.42U/ml;TNF_β为7.54 U/ml)明显高于慢辽肝(TNF_α活性为5.92U/ml;TNF_β为0.41 U/ml)。结果表明TNF活性的增高与肝损害的程度与肝炎的活动性呈正相关。     

人肝再生增强因子对体外单个核细胞PKCα-NF-κB及IL-2的影响

目的 观察人肝再生增强因子(human augmenter of liver regeneration,hALR)对人外周血单个核细胞(periph-eral blood mononuclear cell,PBMC)PKCα-NF-κB及IL-2的影响,探讨hALR免疫抑制机制.方法 用梯度离心法分离正常人PBMC,分成正常对照组、刀豆蛋白A(ConA)刺激组(ConA组)和hALR干预组(ConA+hALR组).ConA组用5μg/mlConA刺激细胞增殖和分泌细胞因子IL-2;ConA+hALR组用30μg/ml hALR对ConA刺激进行干预.于细胞培养0、8、16、32、40 h时,用MTT法测定细胞增殖程度,Weston blot检测细胞内信号通路PKCα-NF-κB表达含量,Fluo-3AM装载检测胞内钙离子浓度,用双抗夹心酶联法检测上清细胞因子IL-2含量.结果 ConA组细胞增殖逐渐加强,16 h时与正常对照组比较具有统计学意义(P<0.05);PKCα、NF-κB表达上调及上清IL-2含量增加趋势一致,在16 h达到高峰(P<0.05).ConA+hALR组细胞没有增殖,PKCα-NF-κB表达及上清IL-2含量最高峰后移至32 h.每个时间点各组细胞内Ca2+浓度没有差别.结论 hALR可能通过抑制PKCα-NF-κB通路阻碍IL-2的产生速度进而抑制免疫.     

T调节细胞对EB病毒感染B细胞的影响

本文应用细胞培养、免疫酶标和放射免疫测定方法,探讨了鼻咽癌(NPC)病人、EB病毒壳抗原IeA(IgA/VCA)血清学阳性和阴性健康成人的外周血单个核细胞(PBMC),经PHA和ConA诱导产生的调节细胞对EB病毒(EBV)感染B细胞的影响。结果表明:PHA诱导细胞对EBV感染PBMC的EBV核抗原(EBNA)阳性细胞和~3H-TdR掺入量均有抑制作用,而ConA诱导细胞的作用则相反,具有促进作用。上述影响作用可分别被T_4或T_8单克隆抗体(McAb)所阻断,提示诱导细胞对EBV感染PBMC的促进或抑制作用主要与T_4或T_8细胞有关。     

Graves 病患者外周血淋巴细胞亚群及其增殖反应的检测分析

采用单克隆抗体间接免疫荧光法检测40例不同病期的 Graves 病(GD)患者外周血淋巴细胞亚群。结果表明:GD 患者发病期,外周血 CD_3~+、CD_8~+细胞百分率均明显低于正常人(P<0.05,<0.01),CD_4~+/CD_8~+比值和 B 细胞百分率明显增高(P<0.01);具有 GD 家族史的缓解病人,异常持续存在,而无 GD 家族史的缓解病人 T 淋巴细胞亚群恢复正常。此外,GD 患者外周血单个核细胞对PHA 增殖应答能力低下。说明 GD 患者外周血淋巴细胞数目和功能均存在异常。提示患者的细胞免疫和体液免疫改变与发病机理有关。     

Release of colony-stimulating activity by resting and activated monocytes, T cells and B cells

Purified populations of monocyte, T lymphocyte, and B lymphocyte from normal human peripheral blood were used for the investigation of elaboration/release of granulocyte-macrophage colony-stimulating activity (GM-CSA). Cell separation was performed by a series of techniques including density-cut centrifugation, adhering incubation, carbonyl iron ingestion and E rosette formation. The purity of the isolated cell population was over 95% with a mean viability of 98%. After collection, the cells were resuspended at a concentration of 1 x 10(6)/ml in RPMI-1640 medium containing 5% fetal calf serum and incubated for 7 days at 37 degrees C to prepare conditioned media (CM) for assay of GM-CSA. The results showed that the monocytes could constitutively secrete a considerable amount of GM-CSA, whereas no CSA was produced by T cells or B cells under normal conditions. All the three cell populations released GM-CSA when activated by mitogen stimulation. Monocyte-derived GM-CSA production was greatly enhanced by zymosan (Zym), lipopolysaccharide (LPS) and concanavalin A (Con A), resulting in an augmentation approaching 3 to 4 times the untreated control. For T lymphocytes, the most contributive stimulants to induce GM-CSA release were phytohemagglutinin (PHA) and Con A, while Zym and LPS were not effective. B lymphocytes, after treatment with pokeweed mitogen (PWM) or PHA, were also capable of releasing large amounts of GM-CSA with a peak level near to PHA-stimulated T lymphocytes. The finding suggested that, when activated, B cells may participate in the inflammatory response and in the regulation of granulopoiesis.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)