HDAC1过表达诱导胶质瘤细胞产生耐药性

目的:构建组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase 1,HDAC1)过表达胶质瘤U87细胞系,探讨HDAC1过表达对胶质瘤细胞化疗药耐药性的影响.方法:分别用HDAC1重组过表达慢病毒载体pCDH-CMV-MCS-HDAC1-EF1-Puro和阴性空载体病毒pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro转染U87MG细胞,通过嘌呤梯度浓度筛选出HDAC1稳定过表达细胞系U87MG-HDAC1和空载体对照细胞系U87 MG-Control,经Western Blotting鉴定,用不同浓度替尼泊苷(VM-26)和顺铂(cisplatin,DDP)对两种细胞进行处理,MTT法检测存活率,Hoechst/PI双染法检测细胞凋亡,Western Blotting检测Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白表达.结果:成功构建U87MG-HDAC1稳定过表达细胞系.与U87 MG-Control组相比,U87MG-HDAC1组中U87MG-HDAC1蛋白的表达显著升高[(1.148 ±0.024) vs (0.580 ±0.003),P＜0.01];药物处理后,U87MG-HDAC1细胞存活率显著升高[0.1μg/ml VM-26:(95.57±0.45)％ vs (68.8±1.49)％,P＜0.01],[0.08 μg/ml DDP:(99.20±7.4)％vs(72.48±2.03)％,P＜0.01];凋亡细胞个数比例明显下降(均P ＜0.05),Caspase-3蛋白表达量显著降低(P＜0.01),Bcl-2/Bax蛋白表达量比值明显升高(P＜0.01).结论:胶质瘤U87MG细胞中HDAC1过表达明显增强细胞对化疗药耐药性与Caspase-3和Bcl-2/Bax表达有关.     

Caspase-8和Bcl-2在PIG11诱导HepG2细胞凋亡中的作用

目的:利用本实验室已建立PIG11蛋白稳定低表达的HepG2细胞株和PIG11蛋白稳定高表达HepG2细胞株,研究Caspase-8和Bcl-2在PIG11诱导HepG2细胞凋亡中的作用,进一步探讨PIG11基因表达对HepG2细胞凋亡的机制。方法:细胞培养,分组:HepG2细胞、pLXSN-PIG11-HepG2(pLXSN-PIG11转染建立PIG11蛋白高表达HepG2细胞)、pLXSN-HepG2(pLXSN空载体转染HepG2细胞)、miR-PIG11-HepG2(miRNA干扰PIG11蛋白低表达HepG2细胞)、miR-HepG2(干扰空载体HepG2细胞)。Hoechst33342染色荧光和PI染色流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。Western blot检测Caspase-8蛋白、Bcl-2蛋白的表达情况。结果:Hoechst 33342染色荧光显微镜下pLXSN-PIG11-HepG2细胞组可见核染色质浓缩,核碎片,荧光增强,以及凋亡小体。PI染色流式细胞仪检测结果显示:HepG2细胞、miR-PIG11-HepG2细胞、miR-HepG2细胞、pLXSN-PIG11-HepG2细胞、pLXSN-HepG2细胞的凋亡率分别为5.72%±0.81%、1.34%±0.71%、5.10%±0.40%、34.83%±2.29%、5.34%±0.60%。PIG11高表达的pLXSN-PIG11-HepG2细胞组凋亡率比其它各组增高(P<0.01),PIG11低表达的miR-PIG11-HepG2细胞组凋亡率降低(P<0.01)。Western blot检测结果显示PIG11高表达的pLXSN-PIG11-HepG2细胞Caspase-8蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调(P<0.01),PIG11低表达的miR-PIG11-HepG2细胞Caspase-8蛋白的表达下调,Bcl-2蛋白表达上调(P<0.01)。结论:PIG11蛋白高表达能诱导HepG2细胞凋亡,其机制可能与Caspase-8蛋白及Bcl-2蛋白表达相关。     

三氯乙烯对CYP1A2 高表达肝细胞株凋亡基因和癌基因的影响

目的： 构建CYP1A2基因高表达载体,转染到L02肝细胞,建立CYP1A2高表达细胞株并检测三氯乙烯对该细胞株凋亡基因和癌基因的影响。方法：根据GenBank提供的CYP1A2基因cDNA序列设计引物,PCR扩增该基因并将其克隆到慢病毒高表达载体pLVX-acGFP1-C1中,将已经构建的慢病毒载体对293FT细胞进行转染,收集病毒上清,感染正常L02肝细胞。用嘌呤霉素进行筛选得到CYP1A2高表达L02细胞株,通过荧光定量PCR和Western blot对细胞株进行鉴定。用不同剂量三氯乙烯对正常L02肝细胞和CYP1A2高表达细胞进行染毒12 h,采用PCR方法检测凋亡基因 (Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)和癌基因 (c-fos、c-myc、K-ras、p53)mRNA表达的变化。结果：测序证明重组慢病毒高表达载体CYP1A2基因序列与GenBank提供的CYP1A2序列一致,荧光定量PCR检测显示CYP1A2高表达细胞株CYP1A2 mRNA表达比正常L02肝细胞提高317倍,Western blot结果显示CYP1A2高表达细胞株CYP1A2蛋白表达水平比正常L02肝细胞高3.41倍。三氯乙烯染毒后,CYP1A2高表达细胞中凋亡基因Bcl-2 mRNA表达水平与正常肝细胞无显著性差异(P>0.05),而Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9 mRNA表达水平高于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01)。CYP1A2高表达细胞中癌基因c-myc和p53 mRNA表达水平低于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01),而c-fos和K-ras mRNA则高于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01)。结论：三氯乙烯对CYP1A2高表达细胞凋亡基因和癌基因表达有显著影响,提示CYP1A2是三氯乙烯在体内代谢的重要因素,与三氯乙烯毒性存在一定关系。     

集落刺激因子1 受体介导Bax 和Bcl-2 表达对人鼻咽癌6-10B细胞凋亡的影响

目的: 研究过表达集落刺激因子1 受体（colony stimulating factor-1 receptor,CSF-1R）对人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)6-10B细胞凋亡的抑制作用及其与Bax和Bcl-2 表达之间的关系。方法: 体外利用慢病毒构建的CSF-1R过表达载体LV-CSF1R(16957-1)转染到人鼻咽癌6-10B细胞中,实验分转染组和对照组;采用实时荧光定量PCR 及Western blotting 检测转染后两组细胞中CSF-1R、Bcl-2、Bax的表达情况;CCK-8 法检测两组细胞的增殖;流式细胞术检测两组细胞的凋亡情况。结果:转染组的6-10B细胞中其CSF-1 mRNA表达水平明显高于对照组(7.01±0.23 vs 0.09±0.03,P<0.01); Bax mRNA表达水平显著下调(P<0.01),而Bcl-2 mRNA表达水平显著上调(P<0.01)。转染组的6-10B细胞中CSF-1 蛋白表达水平明显高于对照组;Bax蛋白表达水平显著下调,而Bcl-2 蛋白表达水平稍上调。与对照组相比,转染组6-10B细胞的增殖活力明显提高(P<0.01);凋亡率显著降低[(10.82±0.75) % vs (17.11 ±0.46)%,P<0.05]。结论:过表达CSF-1R 可以通过调节Bax/Bcl-2 之间的比例关系来促进鼻咽癌6-10B细胞的恶性增殖,并抑制细胞凋亡。     

MiR-21下调SPRY2表达对多发性骨髓瘤细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制研究

目的:探讨miR-21下调SPRY2基因表达在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)发生发展以及转移过程中的作用。方法:构建miR-21表达载体LV-anti-miR-21及脂质体转染法筛选稳定沉默SPRY2的MM细胞系。应用实时定量PCR和Western blot检测miR-21表达和SPRY2蛋白表达水平。四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)检测细胞增殖能力;流式细胞仪分析细胞周期;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果:实时定量PCR及Western blot检测结果表明:转染U266细胞后,U266/LV-anti-miR-21慢病毒MOI 20组和MOI 40组miR-21表达量较U266/un组差异明显下降(P<0.05);转染miR-21 mimics组的U266细胞SPRY2的蛋白表达量较无转染组(untreated)和阴性对照组(siRNA)明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.01)。与无转染组、阴性对照组相比:MTT法显示转染组48、72、96h细胞的生长速度明显减慢,增殖率明显下降(P<0.01);流式细胞术表明miR-21 mimics转染U266细胞48、72h后,细胞凋亡率分别为U266组[(24.7±1.97)%、(38.6±1.56)%]、siRNA组[(27.3±1.72)%、(37.3±1.59)%]和U266/miR-21组[(12.7±1.27)%、(22.1±1.63)%],与两对照组比较,U266/miR-21组细胞凋亡率明显降低,G0/G1期细胞明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。划痕实验显示转染组24、48h细胞迁移的能力明显减弱(P<0.05);Transwell实验证实转染组48、72h细胞穿过聚磷酸酯膜的U266细胞数明显减少,细胞穿膜能力明显降低(P<0.05)。结论:MiR-21下调SPRY2基因表达能够在体外条件下促进MM细胞的增殖和侵袭作用,揭示其在MM的发生、发展及转移过程中的作用及可能的机制,为确立新分子靶向治疗提供可靠的研究依据。     

生长分化因子15 对人肺腺癌SPCA1 细胞增殖与迁移的影响

目的：探讨靶向生长分化因子15（growth differentiation factor 15,GDF15）基因siRNA 对人肺腺癌SPCA1 细胞增殖和迁移的影响。方法：根据基因数据库（GenBank）设计并合成3 条人GDF15 基因siRNA（GDF15-siRNA161、GDF15-siRNA290 和GDF15-siRNA860）和阴性对照NC-siRNA 序列,采用qPCR法测定转染不同GDF15-siRNA 的SPCA1 细胞中GDF15 mRNA表达水平,筛选有效抑制GDF15 基因表达的siRNA。CCK-8 法和划痕实验分别检测转染有效GDF15-siRNA 和NC-siRNA 的SPCA1 细胞增殖和迁移能力。结果：3 条GDF15-siRNA 对SPCA1 细胞GDF15 mRNA表达均有明显抑制（P<0.01）,其中GDF15-siRNA161抑制最为明显。和转染NC-siRNA 的SPCA1 细胞相比,转染GDF15-siRNA161的SPCA1 细胞增殖明显减慢[ （0.46±0.03）vs（0.52±0.01）,P<0.01],转染GDF15-siRNA161的SPCA1 细胞迁移速度明显低于转染NC-siRNA的SPCA1 细胞（P<0.01）。结论：有效沉默人肺腺癌SPCA1 细胞GDF15基因表达能抑制肺腺癌细胞的增殖和迁移,GDF15 可能成为人肺腺癌基因治疗的候选靶点。     

AEG-1表达下调对脑胶质瘤U373细胞的放射增敏效应

目的:探讨AEG-1基因表达下调对人脑胶质瘤细胞U373放射敏感性的影响。方法:以人MTDH/AEG-1（NM-178812）为靶标设计shRNA序列,慢病毒介导将AEG-1 shRNA转染至胶质瘤U373细胞中。荧光定量PCR及Western blot测定转染前后AEG-1 mRNA及蛋白的表达;克隆形成实验评估AEG-1基因下调后U373细胞放射敏感性;流式细胞术检测AEG-1下调后U373细胞凋亡及细胞周期分布。结果:通过慢病毒介导的shRNA转染,构建了AEG-1表达稳定下调的U373-shAEG-1细胞系,有效抑制了胶质瘤U373细胞中AEG-1的表达(抑制率84%,P<0.05),增加了凋亡细胞的比例（13.07%±0.28%,P<0.05）,并提高细胞周期中S期细胞比例（58.18％,P<0.01）,且AEG-1基因表达下调后U373细胞的D0值 （1.60Gy） 和Dq值 （1.06Gy）均明显低于空白对照组及阴性对照组细胞（P<0.05）。结论:下调AEG-1可以增强人脑胶质瘤U373细胞的放射敏感性,其机制与诱导细胞凋亡及干预细胞周期分布有关。     

人脑胶质瘤高表达Snail促进肿瘤细胞的侵袭

目的:观察Snail蛋白在人脑胶质瘤组织中的表达情况,探讨Snail表达对人脑胶质瘤U251细胞侵袭的影响。方法:收集首都医科大学附属北京天坛医院及北京安贞医院神经外科手术切除的脑胶质瘤组织65例,应用免疫组织化学S-P法检测人脑胶质瘤组织中Snail的表达。体外化学合成Snail序列特异性小干扰RNA(Snail-siRNA),应用脂质体介导转染U251细胞;RT-PCR、Western blotting检测转染后U251细胞中Snail mRNA和蛋白、E-cadherin蛋白表达水平变化,并采用Transwell小室检测转染后U251细胞侵袭能力的变化。结果:与正常脑组织相比,人脑胶质瘤组织中Snail蛋白阳性表达率明显增强(66.2%vs0,P<0.01),并且Ⅰ～Ⅱ级的胶质瘤组织阳性Snail阳性率明显低于Ⅲ～Ⅳ级(44.8%vs83.3%,P<0.01)。Snail-siRNA转染抑制U251细胞中Snail mRNA和蛋白的表达。Snail-siRNA转染组U251细胞中E-cadherin蛋白的表达明显高于Ctrl-siRNA组与未转染组(0.64±0.21vs0.15±0.16,0.21±0.19,P<0.01)。Snail-siRNA转染显著抑制U251细胞的侵袭(87.0±2.4vs140.0±4.9,136.0±5.3;P<0.05)。结论:人脑胶质瘤组织高表达Snail蛋白,siRNA干扰Snail蛋白的表达可抑制胶质瘤U251细胞的侵袭。     

人端粒酶逆转录酶siRNA诱导宫颈鳞癌耐药细胞株SiHa/DDP凋亡的分子机制研究

目的研究人端粒酶逆转录酶siRNA(h TERT SiRNA)诱导宫颈鳞癌耐药细胞株Si Ha/DDP凋亡的可能机制。方法每毫升培养液中加顺铂2μg常规培养Si Ha/DDP细胞,实验分为4组,空白对照组(A组):仅用细胞培养液培养的Si Ha/DDP组;脂质体对照组(B组):仅添加转染试剂的Si Ha/DDP组;不针对任何基因的Negative Control siRNA对照组(C组);转染组(D组):h TERT SiRNA与脂质体混合液转染Si Ha/DDP细胞。按要求转染细胞后常规培养,于转染后24 h、48 h、72 h分别收集各组细胞进行相关检测,各组均应用实时荧光定量技术检测细胞h TERT mRNA表达、应用Annexin-V/PI双染流式细胞术检测Si Ha/DDP细胞凋亡率、应用MTT法检测h TERT SiRNA转染后Si Ha/DDP细胞增殖情况。结果 1转染后24 h、48 h、72 h各组细胞相对A组的TERT mRNA含量分别为:D组(0.249±0.019)、(0.138±0.009)、(0.174±0.016);C组(0.931±0.036)、(0.940±0.025)、(0.901±0.042);B组(0.956±0.052)、(0.961±0.037)、(0.943±0.28);各时间点siRNA-1组h TERT mRNA相对表达量与各对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2转染后SiRNA-1组早期细胞凋亡率[(86.48±7.25)%]明显高于C组[(0.11±0.08)%]、B组[(5.23±1.22)%]和A组[(0.09±0.08)%],差异有统计学意义(P<0.05)。3转染后各时间点各组细胞OD490值比较差异有显著统计学意义(P<0.01),生长曲线显示SiRNA-1组慢于对照组。结论 h TERT siRNA转染Si Ha/DDP细胞可降低h TERT mRNA表达,抑制细胞增殖,促进细胞的凋亡。     

NDV-HN致人肺腺癌A549细胞凋亡的实验研究

摘 要：［目的］ 探讨NDV-HN诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的相关机制。［方法］ （1）构建包含绿色荧光素蛋白（GFP）及NDV-HN的慢病毒sfGFP-HN载体,用293V细胞包装慢病毒Lv-sfGFP-HN,用293V细胞进行空载质粒转染组（空载组）慢病毒包装,命名为Lv-sfGFP;（2）以空载组A549-sfGFP细胞和空白组A549为对照,用慢病毒转染方法建立稳定表达NDV-HN蛋白的A549细胞株,即A549-sfGFP-HN细胞株,RT-PCR、Western blot检测A549细胞NDV-HN蛋白的表达;（3）分别在A549-sfGFP-HN和A549两组细胞中加入顺铂,流式细胞术检测细胞凋亡;（4）在基因水平和蛋白水平上分别用RT-PCR和Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。［结果］ （1）Lv-sfGFP-HN和Lv-sfGFP慢病毒分别转染A549细胞后,只在转染组A549-sfGFP-HN细胞检测到NDV-HN蛋白。（2）转染组A549-sfGFP-HN细胞凋亡率明显高于空白组A549细胞 (P＜0.01),转染组A549-sfGFP-HN细胞加入顺铂后,其细胞凋亡率明显增加。（3）转染组A549-sfGFP-HN细胞与空载质粒转染组A549细胞和空白组A549细胞相比,凋亡相关蛋白Bcl-2表达量明显下调(P＜0.01)。［结论］ 慢病毒转染NDV-HN到A549细胞后导致A549-sfGFP-HN细胞出现凋亡,且与Bcl-2下调有关。转染NDV-HN的肺癌细胞联合使用抗癌药物顺铂,增加了肺癌细胞凋亡率。     

STK15在肺鳞癌、腺癌中的表达及意义

背景与目的 丝氨酸／苏氨酸激酶15（serlnethreoninekinase15，STK15）是一种有丝分裂激酶。它的过表达出现在许多恶性肿瘤中，并与肿瘤的发生、发展有关，但其在肺癌组织中的表达和意义尚不清楚。本研究的目的是探讨STK15在肺鳞癌、腺癌中的表达及其与各临床病理特征的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测80例肺鳞癌、腺癌及20例癌旁肺组织标本中STK15的蛋白表达，采用Westernblot和RT-PCR方法检测40例新鲜肺鳞癌、腺癌及癌旁肺组织标本中STK15蛋白及STK15mRNA的表达。结果免疫组化结果显示STK15蛋白在肺癌中的表达率为68．75％（55／80），明显高于癌旁肺组织（0／20）（P〈0．001）；STK15表达与肺癌的分化程度有密切关系（P=0．011），而与肺癌的TNM分期、组织学类型、淋巴结转移等均无明显关系（P〉0．05）。肺癌组织中STK15蛋白（P〈0．001）和STK15mRNA（P〈0．001）的相对表达量明显高于癌旁肺组织。结论STK15蛋白及STK15mRNA在肺鳞癌、腺癌中的表达明显高于癌旁肺组织。STK15蛋白的表达与肺癌的分化程度有密切关系，高分化者明显低于低分化者。     

趋化因子CCL15在肝细胞肝癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究趋化因子CCL15在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达及其临床意义,并对CCL15与肝癌的恶性行为之间关系进行研宄.方法:80例HCC、80例癌旁组织和50例正常肝组织标本常规制作石蜡包埋切片,CCL15染色为SP免疫组化法.结果:HCC组织中的CCL15表达阳性率及其评分明显高于癌旁组织和正常肝组织(P＜0.05),在癌旁组织和正常肝组织之间没有差异;CCL15的蛋白表达与患者的性别、年龄、肝硬化、病理学分级、术前AFP浓度无明显关系(P＞0.05),而与肿瘤的大小、癌栓、有无包膜以及TNM分期等有显著关系.结论:CCL15的表达与HCC的一些恶性临床病理特征密切相关,提示CCL15可能是反映HCC发生发展、侵袭、转移的一个重要的生物学指标.     

细胞黏附分子CD15在乳腺癌的表达及与C-erbB-2、nm23、cath-D的关系

目的研究细胞黏附分子CD15在乳腺癌表达的临床病理意义及其与C-erbB-2、nm23、cath-D相互关系.方法应用了微波修复免疫组化技术S-P法检测了84例乳腺癌及20例乳腺良性病变中CD15的表达.结果 CD15主要在肿瘤细胞膜及细胞浆内表达;在乳腺良性病变阳性率低(20%),在乳腺癌中阳性率为57.14%(48/84),其表达与乳腺癌组织学分级高、淋巴结有转移、C-erbB-2表达、cath-D间质表达呈正相关;而与nm23表达负相关.结论细胞黏附分子CD15在乳腺癌细胞增殖、分化及转移过程中发挥重要作用,其表达可作为反映乳腺癌低分化及易转移的有用指标.     

Interferon Stimulated Gene - ISG15 is a Potential DiagnosticBiomarker in Oral Squamous Cell Carcinomas

Background: Cancer diagnostic biomarkers have a wide range of applications that include early detectionof oral precancerous lesions and oral squamous cell carcinomas, and assessing the metastatic status of lesions.The interferon stimulated ISG15 gene encodes an ubiquitin-like protein, which conjugates to stabilize activationstatus of associated proteins. Hence a deregulated expression of ISG15 may promote carcinogenesis. Indeedoverexpression of ISG15 has been observed in several cancers and hence it has been proposed as a strongcandidate cancer diagnostic biomarker. Given the emerging relationship between malignant transformationand ISG15, we sought to examine the expression pattern of this gene in tumor biopsies of oral squamous cellcarcinoma (OSCC) tissues collected from Indian patients. Materials and Methods: Total RNA isolated fromthirty oral squamous cell carcinoma tissue biopsy samples were subjected to semi-quantitative RT-PCR withISG15 specific primers to elucidate the expression level. Results: Of the thirty oral squamous cell carcinomasthat were analyzed, ISG15 expression was found in twenty four samples (80%). Twelve samples expressed lowlevel of ISG15, six of them expressed moderately, while the rest of them expressed very high level of ISG15.Conclusions: To the best of our knowledge, the results show for the first time an overexpression of ISG15 in upto 80% of oral squamous cell carcinoma tissues collected from Indian patients. Hence ISG15 may be exploredfor the possibility of use as a high confidence diagnostic biomarker in oral cancers.     

非小细胞肺癌组织p53蛋白Ser15磷酸化表达的研究

[目的]探讨人非小细胞肺癌组织中突变型p53蛋白15位丝氨酸位点（p53Ser15）的磷酸化状况,p53Ser15磷酸化、p53蛋白和血清p53抗体水平之间的关联以及与非小细胞肺癌临床病理特征和预后的关系。[方法]应用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测40例非小细胞肺癌组织、相应正常肺组织及10例肺良性疾病组织中p53Ser15磷酸化、p53蛋白以及血清p53抗体水平。随访观察40例非小细胞肺癌组的转移复发情况。[结果]p53Ser15磷酸化、p53蛋白水平在非小细胞肺癌组高于正常肺组织组和肺部良性疾病组,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。非小细胞肺癌组p53Ser15磷酸化、p53蛋白及血清p53抗体水平两两之间均有正相关性（P〈0.05）。非小细胞肺癌组中p53抗体阳性率为42.5%,在鳞癌中的阳性率高于腺癌和腺鳞癌（P〈0.05）。随访期内5例出现复发或远处转移的病例p53Ser15磷酸化、p53蛋白表达水平高于未复发转移病例（P〈0.05）。[结论]突变型p53蛋白在人体内也可如野生型p53一样被磷酸化,而且这种磷酸化有助于突变型p53蛋白的稳定。p53Ser15磷酸化及p53蛋白高水平表达可能会有助于肿瘤进展更快。     

P-selectin 和CD15在肝癌中的表达及其

目的检测P-selectin、CD15在肝癌中的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系。方法应用免疫组化SABC法检测肝癌中P-selectin、CD15的表达。结果P-selectin、CD15在肝癌组织中的阳性表达率显著高于对照组,且与肝癌的侵袭转移相关(P<0.05);P-selectin、CD15表达存在相关关系(P<0.05)。结论P-selectin、CD15与肝细胞癌侵袭转移关系密切,可能成为肿瘤治疗的理想靶分子。     

含IL-15基因佐剂的肿瘤疫苗对肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞功能的影响

目的:研究含有小鼠IL-15基因佐剂的肿瘤疫苗对肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的功能影响。方法:构建含有小鼠IL-15基因佐剂的肿瘤疫苗,免疫小鼠后,分离脾脏淋巴细胞,分析CTL的表面分子,分泌细胞因子能力,细胞毒功能和抗凋亡能力。结果:含有小鼠IL-15基因佐剂的肿瘤疫苗能上调CTL的CD8和CD44分子表达,促进IFN-γ分泌,增强细胞毒功能,提高抗凋亡能力。结论:IL-15能发挥很好的佐剂效应,增强CTL的功能,有望在抗肿瘤研究中得到很好的应用。     

转化生长因子-β1对人卵巢癌细胞增殖的抑制作用

目的:探讨转化生长因子(TGF)-β1对人卵巢癌细胞系HO-8910增殖的影响及其作用机制.方法:采用MTT及流式细胞术检测TGF-β1对HO-8910细胞增殖的抑制作用,同时采用半定量RT-PCR和Western blot方法分别检测TGF-β1作用不同时相细胞中Smad7、p15、p21和c-myc基因mRNA及蛋白表达水平的变化.结果:TGF-β1明显抑制HO-8910细胞的增殖;在TGF-β1(10ng/ml)刺激下,细胞中p15和Smad7的表达上调而c-myc的表达明显降低,p21的表达无明显变化.结论:TGF-β1可能通过上调p15、下调c-myc基因表达水平影响细胞周期调控,从而抑制卵巢癌细胞的增殖.     

15-LOX-1和PPARγ间的相互作用及其与肿瘤的关系

15-脂加氧酶1(15-LOX-1)表达于人的多种组织细胞中,是催化不饱和脂肪酸代谢的关键酶之一,可以将亚油酸、花生四烯酸分别代谢为13-羟基十八碳二烯酸和15-羟基二十碳四烷酸,这些不饱和脂肪酸及其代谢衍生物是过氧化物酶增殖激活受体γ(PPARγ)的天然配体.研究发现,PPARγ以非活性状态在多种肿瘤组织中高表达,其与配体结合活化后,可诱导肿瘤细胞凋亡或者分化,发挥潜在的抗肿瘤作用.以15-LOX-1和PPARγ/为靶向的肿瘤防治及其临床应用具有广阔前景.     

血清CA15-3对乳腺癌、肺癌转移的诊断价值分析

[目的]探讨血清CA15—3对预测乳腺癌、肺癌转移的临床应用价值。[方法]应用化学发光免疫分析技术检测了3995例乳腺癌、1269例肺癌患者血清CA15-3水平。[结果]3995例乳腺癌患者中,未转移患者CA15-3中位数为10．1U／ml;转移患者CA15-3中位数为32．4U／ml。1269例肺癌患者中,未转移患者CA15-3中位数为12．9U／ml;转移患者CA15-3中位数为19．7U／ml。两组肿瘤患者中,转移患者血清CA15—3显著高于未转移的肿瘤患者。[结论]血清CA15—3检测对乳腺癌、肺癌转移的预测有重要参考价值。