血液系统肿瘤多药耐药研究进展

多药耐药是血液肿瘤化疗失败的重要原因，其发生是多种因素共同作用的结果。多药耐药基因1型（MDR1基因）单独或与其它耐药蛋白联合表达是血液系统肿瘤耐药的主要原因，此外，还有酶介导（TOPOⅡ，GST等）、凋亡调控基因介导多药耐药等机制。     

消化道恶性肿瘤多药耐药的临床研究

目的 研究消化道恶性肿瘤化疗耐药与多药耐药基因MDR（p-gP）、谷胱甘肽转移酶（GST）、拓扑异构酶（TOPOⅡ）之间关系。方法 用免疫组化单克隆技术，定量分析P-gp、GST、TOPOⅡ在肿瘤组织中的阳性及阴性表达。结果 P-gp在恶性肿瘤中阳性表达率为39．6％，化疗耐药中占55．9％；GST在恶性肿瘤中阳性表达率为64．0％，化疗耐药中占76．5％；TOPOⅡ在恶性肿瘤中阳性表达率为54．0％，化疗耐药中占35．3％。结论 P-gp、GST、TOPOⅡ参与肿瘤耐药机制的形成。     

鸦胆子油乳具有多药耐药逆转和拓扑异构酶Ⅱ抑制作用

目的　研究鸦胆子油乳体外对多药耐药细胞株的作用和对拓扑异构酶 (topoisomerase ,TOPO)活性的影响。 方法　MTT法测定鸦胆子油乳体外对敏感和耐药细胞株的杀伤作用 ;TOPOⅠ介导的负超螺旋 pBR3 2 2解旋反应和TOPOⅡ介导的kDNA去连环反应检测鸦胆子油乳对TOPOⅠ和TOPOⅡ催化活性的影响。结果　鸦胆子油乳浓度为 0 0 2 5g·L-1时能在一定程度上逆转K5 62 /A0 2、MCF 7/ADM和KB/VCR等细胞的耐药性。鸦胆子油乳能抑制TOPOⅡ介导的kDNA去连环作用 ,浓度为 0 3 1g·L-1时鸦胆子油乳可部分抑制TOPOⅡ酶活力 ,浓度为 2 5g·L-1则完全抑制TOPOⅡ酶活力 ;对TOPOⅠ介导的pBR3 2 2解旋作用无影响 ,对DNA也无直接作用。结论　鸦胆子油乳对多药耐药有一定的逆转作用 ,并能明显抑制TOPOⅡ的活性。     

RNAi逆转淋巴瘤LRP和P-gp介导的多药耐药研究

目的 应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术逆转淋巴瘤中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)介导的多药耐药(multidrug resistance,MDR).方法 采用细胞毒性试验、荧光定量PCR、Western blot等方法观测双靶向干扰载体对P-gp和LRP介导的MDR的逆转作用.结果 采用干扰质粒转染耐药淋巴瘤细胞后,该细胞的耐药指数降低,外排米托蒽醌的能力降低,细胞中P-gp、LRP的mRNA和蛋白表达水平也显著降低,且差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 构建的双靶向干扰载体能在体外逆转淋巴瘤细胞中P-gp和LRP介导的非典型性多药耐药.     

多药耐药相关基因表达的研究现状

多药耐药（MDR）指癌细胞发生对许多结构不相关的化疗药物交叉抵抗的现象，是有效化疗的主要障碍之一。据美国癌症协会估计，９０％以上肿瘤患者死亡在不同程度上受耐药的影响。多药耐药是１９７０年Bicdler等用中国仓鼠肺细胞系和骨髓纤维母细胞系与放线菌素D（ACTD）接触培养诱导耐药时首次发现的，后被称为多药耐药性（MDR）。MDR的形成机制可分为：①多药耐药基因及其所编码的细胞膜蛋白过度表达；②谷胱甘肽转移酶（GST）活性增强；③DNA拓扑异构酶Ⅱ（TOPOⅡ）含量减少或性质改变；④DNA修复能力增强等。如何及早发现耐药…     

多药耐药相关蛋白与药物耐受性

药物耐受性是导致多种疾病治疗失败的主要原因,而多药耐药(MDR)的产生是发生耐药的主要形式,MDR包括三种形式:(1)典型MDR,即多药耐药基因(MDRI)及其编码的细胞膜P-糖蛋白(PgP)表达增强所致;(2)非典型MDR,由谷胱甘肽解毒酶系统(GST)活性增高,DNA拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)活性降低或结构异常,DNA操作修复能力增强组成;(3)多药耐药相关蛋白(MRP)基因的扩增或过度表达。近年来,对多药耐药相关蛋白的研究较多,获得了大量成功,综述如下:     

恶性淋巴瘤多药耐药对比探讨

目的：了解恶性淋巴瘤多药耐药基因表达与耐药的关系，为个体化选药提供依据。方法：选择已病理确诊的手术切除的标本，采用免疫组化S-P法，分别检测原发于鼻腔、鼻咽部淋巴瘤与淋巴结淋巴瘤P-gp、LRP、GST-π、ToPoⅡ，4项指标及其阳性和阴性表达与耐药的关系各37例，将其所得结果采用卡方检验进行对比分析。结果：鼻腔、鼻咽部与淋巴结淋巴瘤检测阳性结果对比，P-gp前者明显高于后者，差异有极显著性（P〈0．01），LRP、GST-π、ToPoⅡ两者无显著性差异（P〉0．05）；P-gP、LRP、GST-π在74例恶性淋巴瘤阳性表达耐药与阴性表达耐药对比研究结果，检测阳性患者的耐药发生率、程度均高于阴性患者，两者差异均具极显著性（P〈0．01）。结论：本研究结果为临床医生在恶性淋巴瘤化疗前检测多药耐药蛋白基因，对调整化疗药物、正确估计预后提供了科学的依据。     

温下方逆转A549/DDP细胞的多药耐药及对膜表面蛋白表达的影响

目的运用血清药理学方法,体外研究温下方对A549/DDP细胞多药耐药的逆转作用及机制。方法正常血清及不同浓度的温下方含药血清作用于A549/DDP细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测温下方含药血清对A549/DDP细胞的逆转作用;运用免疫荧光技术,激光共聚焦显微镜及流式细胞仪检测肺耐药相关蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)和P-糖蛋白(P-gp)的表达。结果温下方含药血清能明显逆转A549/DDP细胞的多药耐药,增敏倍数为2～2.5倍。并可明显降低P-gp、LRP、MRP蛋白表达。结论温下方通过降低P-gp、LRP、MRP的表达以增强A549/DDP对化疗药的敏感性,逆转肺腺癌细胞的多药耐药。     

骨肉瘤组织中P-qp及LRP的表达与临床病理特点关系的研究

目的 研究P-糖蛋白(P-gp)及肺耐药相关蛋白(LRP)在骨肉瘤(OS)中的表达及与临床病理特点的关系.方法 38例OS及10例正常骨组织的石蜡切片,以P-gp单克隆抗体C219及LRP单克隆抗体LRP56用SABC法进行免疫组化染色,并对有关临床及病理指标综合分析.结果 OS中P-gp及LRP阳性表达率分别为55.26%和42.11%,而正常骨组织均为阴性表达,两组间比较差异有显著意义(P＜0.05).此外,P-gp在转移组及外科分期较高组中的表达率高于未转移组及外科分期较低的病例组(P＜O.05);LRP在＜12岁或＞30岁年龄组中明显高于12～30岁病例组(P＜O.05).崧?1)P-gp与LRP均介导OS的多药耐药(MDR).(2)人OS对化疗不敏感、预后差与OS组织中存在P-gp及LRP有关.(3)P-gp与LRP的表达不相关,分别以独立机制介导OS的MDR.(4)用免疫组化法检测OS的P-gp和LRP,可作为临床常规筛选检测,并为指导制定合理的治疗方案和预后评估提供依据.     

金丝桃苷对小鼠S180肿瘤细胞获得性多药耐药相关因子表达的影响

目的:探讨金丝桃苷干预化疗诱导的肿瘤多药耐药(MDR)的分子机制,以指导临床应用金丝桃苷来逆转肿瘤多药耐药的产生.方法:建立小鼠S₁₈₀肿瘤细胞多药耐药模型,随机分为模型组、环磷酰胺(CTX)组、CTX+金丝桃苷组、金丝桃苷组,连续给药2周,观察各组瘤体大小,计算抑瘤率.流式细胞仪观察各组细胞凋亡率、P-糖蛋白(P-gp)、肺耐药相关蛋白(LRP)、凋亡促进因子Fas及抗凋亡因子bcl-2的表达.结果:CTX+金丝桃苷组抑瘤率、细胞凋亡率、Fas表达率均较CTX组显著增高,而P-gp、LRP、bcl-2表达率均较CTX组显著降低,差异均有统计学意义(P <0.01).结论:金丝桃苷有逆转小鼠S₁₈₀肿瘤获得性多药耐药的作用与降低P-gp、LRP、bcl-2表达,提高Fas表达有关.     

人单核细胞白血病细胞系SHI-1的多药耐药和耐药蛋白的表达

目的 探讨人单核细胞白血病细胞系SHI-1多药耐药谱及其机制.方法 噻唑蓝(MTT)检测SHI-1细胞对柔红霉素、鬼臼乙叉甙、高三尖杉酯碱、紫杉醇和长春新碱的敏感性;流式细胞术(FCM)检测SHI-1细胞中P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药相关蛋白(LRP)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)等耐药蛋白的表达.结果 MTT药敏实验结果显示SHI-1细胞存在着多药耐药,尤其对VP-16最为明显.FCM检测显示SHI-1细胞中P-gp阳性比例10.78%,相对荧光强度(RFI)为1.02;GST-π阳性率93.52%,RFI 6.91;LRP阳性率92.86%,RFI 8.00;MRP阳性率4.54%,RFI 1.38;BCRP阳性率3.84%,RFI 1.06.结论 SHI-1细胞存在多药耐药,以对VP-16最为明显,其耐药机制可能与LRP和GST-π的高表达有关.     

上皮性卵巢癌中耐药相关基因的表达及临床意义

目的 通过测定多药耐药基因( MDR1)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药相关蛋白(LRP)在上皮性卵巢癌中的表达,了解其在上皮性卵巢癌化疗耐药中的作用.方法 采用逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)测定42例上皮性卵巢癌、40例良性卵巢肿瘤和30例正常卵巢组织中上述3项指标的表达,分析其临床分期、病理特征、化疗疗效等的关系.结果 ①在正常卵巢、良性卵巢肿瘤和卵巢癌组织中,MDR1 的阳性表达分别为:0％、0％、30.95％; MRP阳性表达率分别为:13.3％、12.5％、66.7％; LRP阳性表达率分别为:26.7％、52.5％、83.3％.卵巢癌组织中上述3项指标均明显高于正常卵巢和良性卵巢肿瘤,差异有显著性(P＜0.05),而正常卵巢和良性卵巢肿瘤比较,差异无显著性(P＞0.05).②MDR1和MRP在Ⅲ～Ⅳ期的阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期,LRP在Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期的阳性表达率无明显差异.③浆液囊腺癌的MDR1阳性表达率明显低于其他类型卵巢癌,差异有显著性(P＜0.05).低分化卵巢癌的MDR1、MRP和LRP的阳性表达率分别为47.4％、78.9％和84.2％,明显高于中高分化卵巢癌的17.4％、56.5％和82.6％,差异均有显著性(P＜0.05).④16例化疗有效者的MDR1、MRP和LRP的阳性表达率分别为6.25％、25％和75％,12例化疗无效者的阳性表达率分别为58.3％、83.3％和91.7％,两者相比,MDRI和LRP的差异均有显著性(P＜ 0.05).⑤与正常卵巢和良性卵巢肿瘤组织相比,卵巢癌组织中耐药相关基因的共同表达明显增加,差异有显著性(P＜0.05).14例化疗无效者的耐药相关基因共同表达率明显高于24例化疗有效者.结论 MDR1、MRP和LRP在上皮性卵巢癌组织的表达明显增高,同表达现象普遍,并与患者的临床分期、分化程度有关,MDR1和LRP还与化疗疗效有关.     

乳腺癌组织中GST—π、TOPOⅡ的表达及临床意义

目的 从细胞水平对乳腺癌耐药机制进行探讨，以期为选择化疗方案提供参考，获得更有效的化疗效果。方法 应用免疫组化S－P法，对乳腺癌的主要耐药指标GST－π、TOPOⅡ进行检测，并结合临床分期进行研究。结果 乳腺癌中GST－π的表达为63．6％（28／44）,临床Ⅲ期表达显高于临床Ⅰ、Ⅱ期。TOPOⅡ表达为47．7％（21／44），临床Ⅲ期表达显低于Ⅰ、Ⅱ期。TOPOⅡ与GST－π表达关系间无明显相关性，说明它们各自的表达从不同方面对肿瘤耐药起作用。结论 在乳腺癌化疗药物选择时，通过联合检测GST－π、TOPOⅡ的表达具有指导作用，对判断预后有参考价值。     

多药耐药基因在大肠癌组织中的表达和临床研究

目的探讨大肠癌组织中7种多药耐药因子的表达、共表达及与患者临床病理特征的相关性。方法采用微波EnVision免疫组织化学法联合检测63例大肠癌患者癌组织中P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S转移酶-π(GST-π)、DNA拓扑异构酶(TopoⅡ)、胸苷酸合成酶(TS)、甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)、肺耐药蛋白(LRP)及多药耐药相关蛋白(MRP)的表达水平。结果P-gp、GST-π、TopoⅡ、TS、MGMT、LRP和MRP在大肠癌组织中的阳性表达率分别为54%(34例)、71%(34例)、62%(39例)、67%(42例)、57%(36例)、79%(50例)和30%(19例)。所有的多药耐药因子表达均与患者的年龄、性别无相关。MGMT、LRP的表达与淋巴结转移相关;P-gp、GST-π、TopoⅡ、MRP的表达与组织学分级相关;TS、MGMT、LRP的表达与临床分期相关;P-gp、MGMT的表达与生存期明显相关。结论大肠癌组织表达多种耐药因子,各耐药因子间共表达具有明显相关性。大肠癌耐药由多种耐药基因共同参与,联合检测多项耐药因子有重要的临床意义。     

乳腺浸润性导管癌性激素受体与耐药因子的相关性研究

目的探讨非特殊性乳腺浸润性导管癌雌、孕激素受体（ER、PR）、癌基因（CerbB-2）表达与常用化疗药物耐药因子的相关性及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法观察65例乳腺浸润性导管癌性激素受体ER、PR、CerbB-2及耐药因子P-糖蛋白（P—gp）、谷胱甘肽-S-转移酶-π（GST-Ⅱ）、DNA拓扑异构酶Ⅱ（TOPOⅡ）表达,并进一步对不同治疗前提分组中各耐药因子表达进行比较分析。结果患者大都存在多药耐药现象（81．6％）,耐药情况与肿瘤分化程度无关,与是否绝经无关,但与癌肿的临床分期有关;不同治疗前提分组中ER（-）,CerbB-2低表达纽TOPOⅡ的表达与其它组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论联合检测乳腺浸润性导管癌组织中ER、CerbB-2和耐药因子TOPOⅡ的表达,对乳腺浸润性导管癌治疗方案的制定和预后判断有重要的参考价值。     

以膜转运蛋白为靶点的胃癌多药耐药研究进展

胃癌是我国病死率最高的常见恶性肿瘤,肿瘤多药耐药（MDR）严重影响临床化疗的效果,而膜转运蛋白如P－糖蛋白（P－gp）、MDR相关蛋白（MRP）、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和肺耐药相关蛋白(LRP)的异常表达是引起肿瘤多药耐药的重要机制之一. 简述上述4种膜转运蛋白在胃癌中的异常表达、耐药机制、临床意义及其逆转药.     

肺癌组织及外周血多药耐药基因相关蛋白的表达及其相关性研究

目的 检测多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药蛋白(LRP)在肺癌组织及外周血中的表达及其相关性,探讨其临床意义.方法 采用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测47例患者肺癌组织及外周血的MRP、LRP mRNA的表达水平.结果 肺癌组织及外周血,MRP mRNA的阳性表达率分别为74.5％(35/47)和70.2％...     

骨肉瘤组织中P—gp及LRP的表达与临床病理特点关系的研究

目的：研究P－糖蛋白（P-gp）及肺耐药相关蛋白（LRP）在骨肉瘤（OS）中的表达及与临床病理特点的关系。方法：38例OS及10例正常骨组织的石蜡切片，以P－gp单克隆抗体C219及LRP单克隆抗体LRP56用SABC法进行免疫组化染色，并对有关临床及病理指标综合分析。结果：OS中P－gp及LRP阳性表达率分别为55．26％和42．11％，而正常骨组织均为阴性表达，两组间比较差异有显著意义（P＜0．05）。此外，P－gp在转移组及外科分期较高组中的表达率高于未转移组及外科分期较低的病例组（P＜0．05）；LRP在＜12岁或＞30岁年龄组中明显高于12－30岁病例组（P＜0．05）。结论：（1）P－gp与LRP均介导OS的多药耐药（MDR）。（2）人OS对化疗不敏感、预后差与OS组织中存在P-gp及LRP有关。（3）P-gp与LRP的表达不相关，分别以独立机制介导OS的MDR。（4）用免疫组化法检测OS的P-gp和LRP，可作为临床常规筛选检测，并为指导制定合理的治疗方案和预后评估提供依据。     

肺癌中多药耐药因子的表达相关性及临床意义的研究

目的 探讨多药耐药因子在肺癌中表达与共表达的水平、相关性及临床意义.方法 采用免疫组化SP技术检测60例肺癌患者组织芯片中P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)、谷胱苷肽-S转移酶-π(GST-π)等多药耐药因子的表达水平.结果 ①P-gp、MRP、LRP、GST-π阳性表达率分别为53.3%(32/60)、63.3%(38/60)、70.0%(42/60)、80.0%(48/60).②耐药因子在不同病理类型中表达差异有统计学意义(P＜0.05),在NSCLC中表达高于SCLC;在不同TNM分期、不同分化程度间表达差异无统计学意义(P＞0.05).③各耐药因子之间阳性共表达的结果分别为P-gp+MRP:41.6%,P-gp+LRP:35.0%,MRP+LRP:53.3%,MRP+GST-π:50.0%,LRP+GST-π:58.3%,P-gp+GST-π:45.0%,P-gp +MRP+LRP+GST-π:20.0%.其中P-gp与MRP间具有相关性(r=0.756,P＜0.01),P-gp与LRP间具有相关性(r=0.689,P＜0.01),MRP与LRP间具有相关性(r=0.669,P＜0.01),MRP与GST-π间具有相关性(r=0.546,P＜0.01),LRP与GST-π间具有相关性(r=0.848,P＜0.01),P-gp与GST-π具有相关性(r=0.535,P＜0.01).结论 肺癌的多药耐药现象是由多个耐药因子共同参与作用的结果,肺癌多药耐药的发生在肿瘤细胞的病理分型间有差异性,在不同分化程度、不同TNM分期间无差异性.

Abstract：

Objective To study the expression,co-expression, and clinical significance of four multi-drug resistance factors in lung cancer. Methods The P-glycoprotein (P-gp), mullidrug resistance-associated protein ( MRP, lung resistance protein ( LRP), glutathione-S-transferase (GST-π) of 60 lung cancer patients were detected by immunohistochemical methods. Results The positive drug resistance rate of P-gp, MRP, LRP, GST-π was 53.3% (32/60) ,63.3% (38/60) ,70.0% (42/60) ,80.0% (48/60) respectively. Patients with NSCLC had significantly higher expression of the drug resistance factors than those with SCLC. No relation was observed among the expression of drug resistance factors and TNM stage and cell differentiation. The-expression rate was as follows: Pgp + MRP :41.6%, P-gp + LRP :35.0%, MRP + LRP :53.3%, MRP + GST-π:50.0%, LRP + GST-π: 58.3%, Pgp + GST-π:45.0%. P-gp + MRP + LRP + GST-π:20.0%. Among them, significant relation was detected between P-gp and MRP ( rs = 0.756, P ＜ 0. 0 ), between P-gp and LRP ( rs = 0.689, P ＜ 0.01 ), between MRP and LRP (rs = 0.669, P ＜ 0.01 ), between MRP and GST-π( rs = 0.546, P ＜ 0.01 ), between LRP and GST-π ( rs = 0.848, P ＜0.01 ), between P-gp and LRP( rs =0.535 ,P ＜0.01 ). Conclusions The Multi-drug resistance in lung cancer patients is affected by various multidrug resistance factors. The drug resistance factors' expression is related to histology, but not to TNM stage end cell differentiation.     

外排型转运体介导的抗肿瘤药物多药耐药的研究进展

多药耐药（MDR）是指肿瘤细胞接触一种抗肿瘤药物后,也对其他多种结构不同、功能不同的抗肿瘤药物产生耐药性,其中外排型转运体所介导的MDR是其中至关重要的一部分。外排型转运体是指位于肿瘤细胞生物膜上的具有将抗肿瘤药物从细胞内外排到细胞外的转运体。已知的具有外排作用的转运体有P糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白（MRP）、乳腺癌耐药蛋白（BCRP）和肺耐药蛋白（LRP）。综述这几种外排型转运体的一般性质并着重于阐述逆转这些转运体介导的多药耐药的药物及方法。