肾移植术后T淋巴细胞亚群和NK细胞百分比参考范围的研究

目的初步建立肾移植患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的百分比参考范围。方法 67例健康对照组、169例肾移植患者于肾移植手术后1周清晨采集外周血,用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群和NK细胞百分比。同时按年龄段划分为3组进行统计:≤30岁(青年组)、31~49岁(中年组)、≥50岁(老年组)。结果 (1)建立了肾移植术后T淋巴细胞亚群和NK细胞百分比的参考范围:CD3+56.80%~64.54%;CD4+30.82%~36.43%;CD8+23.45%~27.32%;CD3+CD4+/CD3+CD8+1.35~1.68;NK 6.04%~8.35%。(2)肾移植术后不同性别间的T淋巴细胞亚群和NK细胞差异无统计学意义(P0.05)。(3)肾移植术后不同年龄间的T淋巴细胞亚群和NK细胞差异有统计学意义(P0.05):与老年组比较,青年组和中年组肾移植术后CD8+细胞百分比明显升高,差异有统计学意义(P0.01),CD3+CD4+/CD3+CD8+明显降低,差异有统计学意义(P0.01)。结论初步建立了肾移植术后的T淋巴细胞亚群和NK细胞的参考范围,同时发现肾移植术后随年龄增长CD8+细胞百分比降低,而CD3+CD4+/CD3+CD8+升高。     

应用流式细胞仪研究HIV/AIDS患者的免疫状况

目的　探讨人类免疫缺陷病毒 ( human immunodeficiency virus,HIV)感染者和艾滋病 ( acquired immunodefi-ciency syndrome,AIDS)患者的免疫状况。方法　应用流式细胞仪 ( flow cytometer,FCM)四色荧光计数 ( CD4 5 +、CD3+、CD4 + 、CD8+ )检测 2 0例正常人、38例 HIV无症状感染者、2 4例 HIV有症状感染者和 2 1例 AIDS患者的外周血 CD4 + 、CD8+ 淋巴细胞 ,结合临床进行分析。　结果　 HIV无症状感染者、HIV有症状感染者和 AIDS患者的外周血 CD4 + 细胞数( 45 6± 99.8、2 87± 85 .3、4 5± 4 1 .9)及 CD4 + / CD8+比值 ( 0 .4 6± 0 .1 4、0 .39± 0 .1 5、0 .1 1± 0 .0 9)均明显低于正常人群的CD4 + 细胞数 ( 84 2± 2 64.1 ) ( P<0 .0 1 )及 CD4 + / CD8+ 比值 ( 1 .79± 0 .5 1 ) ( P<0 .0 1 ) ;二者随病程进展不断下降 ,且不同病程间差异明显。结论　CD4 +细胞绝对数和 CD4 + / CD8+比值可作为检测 HIV感染临床分期的重要指标     

多聚甲醛固定对流式细胞术检测人外周血淋巴细胞亚群的影响

摘要：目的?考察多聚甲醛(PFA)浓度和固定时间对流式细胞术检测人外周血T、B、NK淋巴细胞亚群百分比和平均荧光强度的影响。方法?以健康人外周血为研究对象,将六色荧光抗体标记后溶血处理的细胞分别用PBS、1% PFA(10 g/L)和4% PFA(40 g/L)进行重悬或固定,用流式细胞仪在固定0、4、8、12、24、48和72 h后检测CD19-CD3+T、CD3+CD4+T、CD3+CD8+T、CD3-CD19+B、CD3-CD56+NK细胞占淋巴细胞百分比,及CD45、CD3、CD4、CD8、CD19、CD56的平均荧光强度。结果?与PBS对照组相比,72 h内,PFA浓度及固定时间对外周血T、B、NK淋巴细胞亚群百分比均没有影响(P均>0.05);固定8 h内,PBS对各淋巴细胞亚群平均荧光强度均无影响,1% PFA组CD4平均荧光强度下降,4% PFA组CD45、CD3、CD4、CD8平均荧光强度均下降;固定24 h后,各淋巴细胞亚群平均荧光强度均下降,同时4% PFA固定后平均荧光强度均低于1% PFA(P<0.05)。结论?使用流式细胞术检测人外周血淋巴细胞亚群,细胞染色后若8 h内检测用PBS进行细胞重悬检测效果最好,PFA固定不应超过12 h,1% PFA固定效果优于4% PFA。     

原因不明复发性流产患者外周血NK细胞亚群及细胞因子水平的研究

目的分析原因不明复发性流产患者调节性T(Treg)细胞分泌的细胞因子、外周血自然杀伤(NK)细胞亚群及辅助性T(Th)相关细胞因子水平。方法选取该院2018年2月至2019年2月收治的41例原因不明复发性流产患者作为实验组;选取同期于该院进行检查的41例健康早孕者作为对照组。检测两组人群Treg细胞分泌的细胞因子(TGF-β、IL-10)、NK细胞亚群(CD56~+CD16~-、CD56~+CD16~+、CD56~-CD16~+)及Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ,Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平。结果实验组Treg细胞分泌的TGF-β、IL-10水平显著低于对照组(P0.05)。实验组CD56~+CD16~-、CD56~-CD16~+NK细胞亚群百分比显著低于对照组(P0.05),CD56~+CD16~+NK细胞亚群百分比显著高于对照组(P0.05)。实验组外周血IL-2、IFN-γ细胞因子水平显著高于对照组(P0.05);实验组IL-4、IL-10等细胞因子水平显著低于对照组(P0.05)。结论外周血Treg细胞分泌的细胞因子、NK细胞亚群及Th相关细胞因子水平可作为诊断原因不明复发性流产患者的重要参考指标。     

HIV感染者脑脊液淋巴细胞亚群分析

目的了解HIV感染者脑脊液淋巴细胞亚群分布,探讨脑脊液淋巴细胞亚群在HIV中枢神经系统并发症发生中的意义。方法选取HIV感染者34例,其中20例无神经系统症状(单纯HIV组),14例伴有神经系统症状(神经系统HIV组),另选取15例健康人(健康对照组)。使用流式细胞术检测脑脊液淋巴细胞亚群,采用免疫比浊法检测IgG水平,并进行比较分析。结果单纯HIV组和神经系统HIV组脑脊液CD8~+T淋巴细胞百分率高于健康对照组,CD4~+T淋巴细胞百分率低于健康对照组,HIV感染者IgG水平高于健康对照组,差异均有统计学意义(P0.01);而B淋巴细胞、NK细胞百分率差异均无统计学意义(P0.05);单纯HIV组和神经系统HIV组间脑脊液各淋巴细胞亚群百分率差异无统计学意义(P0.05)。结论 HIV感染者在早期未发生神经系统并发症时就出现脑脊液免疫功能紊乱,淋巴细胞亚群变化趋势与外周血中一致,T淋巴细胞亚群可能与HIV神经系统症状相关。     

HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴细胞亚群的变化分析

探讨HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴细胞亚群的变化,为临床诊治提供参考。收集2015年1月~2016年12月间,我院收治的,获得明确诊断的HIV感染者、艾滋病患者以及同期健康体检人群各54例作为研究对象,采集抗凝血标本,采用流式细胞仪技术对外周血CD3~+CD4~+以及CD3~+CD8~+T淋巴细胞进行检测,计算CD4~+/CD8~+比值,并对检测结果进行统计分析。通过对比发现,三组受试者外周血CD4~+CD8~+细胞计数比较存在明显差异,表现为正常对照组CD4~+细胞计数高于HIV组和AIDS组(P0.05),HIV组CD4~+细胞计数高于AIDS组(P0.05);CD8~+细胞计数为HIV组高于对照组和AIDS组(P0.05),AIDS组高于对照组(P0.05);CD4~+/CD8~+比值对照组明显高于HIV组和AIDS组(P0.05),HIV组和AIDS组比值倒置。HIV感染者与艾滋病患者以及健康人群的T淋巴细胞亚群存在明显差异,这对于临床疾病的诊断、免疫受损情况评估以及病情判断等均具有重要意义,值得关注。     

妊娠合并HBV感染者外周血淋巴细胞亚群和NK细胞的改变

目的探讨孕妇妊娠早、中、晚期合并HBV感染者外周血淋巴细胞亚群和NK细胞表达水平的变化.方法流式细胞术检测孕妇怀孕10周、14周和27周HBV感染者外周血CD4+、CD8+T细胞和NK细胞的表达水平.结果与正常孕期比较,怀孕中期合并HBV感染者其CD4+和CD8+T细胞表达水平下降(t=29.451,t=16.183,均P＜0.05).孕晚期合并HBV感染者除上述指标外,CD4+/CD8+比例和NK细胞表达水平也下降(t=18.962,t=16.372,t=7.662,t=7.662,t=26.696,均P＜0.05).而孕早期合并HBV感染者组上述指标无明显差异(P＞0.05).早产2例(2/40),无死胎.结论妇女孕期合并HBV感染者,孕早期外周血淋巴细胞亚群和NK细胞表达水平无明显变化,而怀孕中期和晚期外周血淋巴细胞亚群和NK细胞表达水平有明显变化.     

膝关节骨性关节炎患者外周血自然杀伤细胞亚群比例变化临床分析

目的 研究自然杀伤(NK)细胞亚群比例变化与膝关节骨性关节炎(K-OA)的关系.方法 2010年1月至2011年6月在我院就诊的K-OA患者50例为K-OA组,无各种关节炎病史及自身免疫病史的健康人41名为对照组,补体裂解法分离研究对象的外周血.NK细胞,酶免疫标记技术测定两种不同NK细胞亚群比例.结果 K-OA组CD16- CD56+与CD16+ CD56+阳性率分别为(45.2±6.8)％和(27.5±3.8)％,而对照组分别为(56.1±8.2)％和(16.2±4.2)％.2组比较差异均有统计学意义(t值分别为6.27、9.32,P均＜0.05).结论 K-OA的发生与具有杀伤活性的CD16+ CD56+ NK细胞亚群比例上升有关.     

无症状神经梅毒患者外周血淋巴细胞亚群检测分析

目的 分析无症状神经梅毒患者外周血中淋巴细胞亚群的变化,从细胞免疫的角度探讨其与无症状神经梅毒发病的关系.方法 分别取健康人(20例,对照组)和无症状神经梅毒患者(14例,试验组)外周血,荧光标记经流式细胞仪检测CD3 T细胞、CD4 T细胞、CD8 T细胞及CD4 /CD8 比值、CD56 自然杀伤(NK)细胞.结果 无症状神经梅毒患者外周血中的CD3 T无明显改变,CD4 T细胞比例、CD4 /CD8 比值、CD56 NK细胞比例均低于正常对照组(P＜0.05);CD8 T高于正常对照组(P＜0.05).结论 无症状神经梅毒患者细胞免疫功能受抑,其细胞免疫功能失调可能是影响疾病预后的重要因素之一.     

肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞比例检测的临床意义

目的 探讨肿瘤患者外周血淋巴细胞亚群和NK细胞表达水平检测的临床意义。方法 选取621例肿瘤患者(包括肺癌、肝癌、乳腺癌、胃癌和鼻咽癌)为肿瘤组,同期115名健康人为健康组,采用流式细胞术检测外周血中T淋巴细胞亚群、CD19~+B细胞和NK细胞的细胞免疫表达水平并进行对比分析。结果 肿瘤组外周血的CD3~+、CD4~+、CD19~+细胞比例及CD4~+/CD8~+比值均低于健康组,NK细胞比例高于健康组,差异均有统计学意义(P0.05)。亚组分析结果显示,不同肿瘤间的CD8~+细胞比例差异无统计学意义(P0.05),CD3~+、CD4~+、CD19~+、NK细胞比例及CD4~+/CD8~+比值差异均有统计学意义(P0.05)。结论 肿瘤患者外周血中不同淋巴细胞亚群及NK细胞的变化对早期发现和早期诊断具有指导意义,同时也可作为临床监测肿瘤患者细胞免疫功能状态的指标之一。