高效液相色谱荧光检测法测定尿雌三醇

报告用高效液相色谱测定孕妇尿内总雌三醇的方法，尿标本在酸水解后用乙醚提取Ｅ３，蒸于乙醚，残留物用流动相重组，标本成分用Ｃ８柱分离，以２８５ｎｍ波长激发，在６１０ｎｍ测定Ｅ３的自然荧光。本法批内ＣＶ为１．２％－１．５％批间ＣＶ分别为２．３％和４．０％本法在４．３３－１３８．７１μｍｏｌ／Ｌ（１．２５－４０．００ｍｇ／Ｌ）间呈线性，最低检出１．８μｍｏｌ／Ｌ（０．５２ｍｇ／Ｌ，信号／噪声比为３）。     

偶氮胂Ⅲ比色法测定血清（浆）钙

对偶氮肿Ⅲ（ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ）比色法测定血清（浆）钙的方法学作了系统研究。结果表明：反应混合液的吸收光谱呈Ｍ型，两个吸收峰分别为６００ｎｍ和６５０～６６０ｎｍ，但以６６０ｎｍ为适。试剂中ＡｒｓｅｎａｚｏＩＩＩ的最适浓度为１５０μｎｏｌ／Ｌ，试剂空白Ａ（吸光度曾称光密度ＯＤ）受ｐＨ的影响，当ｐＨ为７．０　时Ａ值最低。本法批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．８％～２．９６％、３．１５％～３．３７％，平均回收率为９９．３％，线性高达６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，灵敏度为１ｍｍｏｌ／Ｌ＝０．１７Ａ。本法Ｙ与ＥＤＴＡ自动滴定法Ｘ比较：Ｙ＝１．００５９Ｘ－０．０１４１，ｒ＝０．９９８５、Ｐ＜０．００１、ｎ＝２０。Ｍｇ￣（２＋）、Ｃｕ￣（２＋）、Ｆｅ￣（２＋）、Ｚｎ￣（２＋），Ｈｂ、Ｂｉｌ均不干扰测定。     

血浆血红蛋白的分光光度法直接测定

用分光光度计直接测定血浆血红蛋白浓度，操作简单，试剂单一稳定，具有较好的精密度和准确度，批内变异为ＣＶ１．８％（Ｘ＝７８．６ｍｇ／Ｌ），ＣＶ０．７９％（Ｘ＝７７４．６ｍｇ／Ｌ），批间变异为ＣＶ５．０８％（Ｘ＝６７．７５ｍｇ／Ｌ），ＣＶ３．３７％（Ｘ＝４０４．９ｍｇ／Ｌ），线性范围至少可达２０００ｍｇ／Ｌ。本法与ＨＩＣＮ法及Ｃｒｏｓｂｙ法平行对比测定，显示三者结果具有良好的一致性。     

偶氮胂III比色法测定血清（浆）钙

对偶氮肿ＩＩＩ（Ａｒｓｅｎａｚｏ ＩＩＩ）比色法测定血清（浆）钙的方法学作了系统研究。结果表明：反应混合液的吸收光谱呈Ｍ型，两个吸收峰分别为６００ｎｍ和６５０～６６０ｎｍ，但以６６０ｎｍ为适。试剂中ＡｒｓｅｎａｚｏＩＩＩ的最适浓度为１５０μｎｏｌ／Ｌ，试剂空白Ａ（吸光度曾称光密度ＯＤ）受ｐＨ的影响，当ｐＨ为７．０时Ａ值最低。本法批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．８％～２．９６％、３．     

考马民斯亮蓝显以法测定精浆蛋白水解酶

用酪蛋白作底物，考马斯亮蓝显色，建立了精浆蛋白水解酶的测定方法。本法以０．０５ｍｍｏｌ／Ｌ ｐＨ７．６Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ作缓冲液，底物浓度为１ｍｇ／ｍｌ，线性范围在５３５￣４２８０Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ为２．６％，批间ＣＶ３．３％。健康人精浆蛋白水解酶活力为１４２０￣２８７０Ｕ／Ｌ，不育患者（精液液化正常，ｎ＝４０）精浆蛋白水解酶活力为１３２６￣２６２８Ｕ／Ｌ，液化异常或粘稠度增高的不育患者精浆蛋白水解酶     

偶氮氯磷Ⅲ比色法测定血清钙的实验研究

本文对偶氮氯磷Ⅲ（ＣｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈｏｎａｚｏⅢ）比色法测定血清钙的实验方法作了系统性研究。结果表明：显色剂中偶氮氯磷Ⅲ浓度以１２０μｍｏｌ／Ｌ为宜，反应最适ｐＨ为２．８～３．２，最佳检测波长为６２０ｎｍ，灵敏度为１ｍｍｏｌ／Ｌ＝０．１６４Ａ，线性为４．５ｍｍｏｌ／Ｌ，批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．０８％和２．２６％，平均回收率为１００．２％。本法（Ｙ）与ＡＡＳ法（Ｘ１）及ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ法（Ｘ２）结果比较：Ｙ＝０．９８５６Ｘ１＋０．０３７０、ｒ＝０．９９１２，Ｙ＝０．９５４０Ｘ２＋０．１３６５、ｒ＝０．９８８７．溶血、脂血、黄疸不干扰测定，当标本中Ｍｇ２＋、Ｃｕ２＋、Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋分别达５ｍｍｏｌ／Ｌ、２ｍｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ时也不影响测定结果。     

全血2，3－二磷酸甘油酸比色测定法

本文介绍了用磷酸甘油酸变位酶测定２，３－二磷酸甘油酸的比色法。探讨了该法的最适反应条件，最适ｐＨ７．５～７．６。线性范围可达６．０ｍｍｏｌ／Ｌ。三份不同浓度标本批内ＣＶ１．１％～２．１％，批间ＣＶ２．５％～３．９％。６０例南京地区健康成人２．３－二磷酸甘油酸含量为１．６～２．７ｍｍｏｌ／Ｌ，平均回收率９４％，与Ｓｉｇｍａ试剂盒比较测定结果无显著性差异（Ｐ＞０．０５），相关性良好，ｒ＝０．９８２。     

抗载脂蛋白（a）单克隆抗体的制备及其应用

为建立特异有效的脂蛋白（ａ）检测方法，应用杂交瘤技术，制备出４株抗载脂蛋白（ａ）单克隆抗体，分别命名为Ｍ＿１、Ｍ＿２、Ｍ＿３、Ｍ＿４。各株单克隆抗体与纤溶酶原和载脂蛋白Ｂ等无交叉反应。单抗相加试验及竞争抑制试验结果表明：Ｍ＿１、Ｍ＿４识别同一抗原位点，Ｍ＿２、Ｍ＿３识别另一位点。选用Ｍ＿１、Ｍ＿２、Ｍ＿４３株单克隆抗体建立了测定血清脂蛋白（ａ）浓度的双抗体夹心酶联免疫测定法。样品稀释后测定范围为０．０５～１．６０ｍｇ／Ｌ，批内平均变异系数（ＣＶ）４．２％，批间平均ＣＶ８．７％。测定了１０３２例中老年临床血清标本，脂蛋白（ａ）浓度为１７９，１±１７９．３ｍｇ／Ｌ（ｘ±ｓ）。与多克隆抗体的酶联免疫测定法同时测定了３８份临床标本，结果相似。此法可满足临床脂蛋白（３）浓度检测的需要。     

高密度脂蛋白胆固醇的直接测定法

基于选择性抑制法的原理，通过对聚阴离子和表面活性剂的筛选实验，以及试剂配方和实验条件优化实验，建立了直接测定高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）的方法。本法的线性范围达３．９ｍｍｏｌ／Ｌ，批内ＣＶ为１．４５％～２．０２％；总ＣＶＯ １．７１％～３．１４％，和ＴＰＡ法比较：Ｙ＝０．９９２３Ｘ＋０．０５２，ｒ＝０．０９８３４，ｎ＝６６。加入ＨＤＬ组份的回收率为１００．１％，本法的特异性好，加入ＬＤＬ－Ｃ达     

导数—同步荧光光谱法测定尿液肾上腺素和去甲肾上腺素

为了解决肾上腺素（Ｅ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）氧化产物的荧光光谱严重重叠难题，将同步荧光与导数光谱两种技术结合起来用于尿液Ｅ、ＮＥ测定。结果发现，在激发波长与发射波长相差Δλ＝４０ｎｍ时获得的Ｅ、ＮＥ二阶导数－同步荧光光谱中，４５０ｎｍ处Ｅ的荧光强度的导数信号不受ＮＥ的干扰；４３２ｎｍ处，ＮＥ的荧光强度的导数信号不受Ｅ的干扰，Ｅ、ＮＥ含量在１～２００ｎｇ／ｍｌ范围内成线性关系；最低检测限为０．５ｎｇ／ｍｌ；批内ＣＶ３．２１％～３．９５％，批间ＣＶ４．２６％～５．１０％，Ｅ和ＮＥ的回收率分别为９４．９％～９５．４％、９４．７％～９６．３％；该法操作简单、快速、成本低廉，适合于％批量测定，是测定尿液Ｅ、ＮＥ较为理想的常规方法。