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相似文献
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1.
以铍试剂Ⅱ为底物电化学法测定辣根过氧化物酶   总被引:1,自引:0,他引:1  
提出了以铍试剂 作为辣根过氧化物酶 ( HRP)底物伏安法测定辣根过氧化物酶活性的新方法。铍试剂 本身为偶氮结构 ,具有电化学活性 ,能够在汞电极上发生还原反应而产生一个灵敏的二阶导数还原峰 ;以 H2 O2 为氧化剂 ,加入 HRP催化 H2 O2 氧化铍试剂 反应的进行 ,使底物被氧化分解 ,其平衡浓度降低 ,对应的还原峰电流降低 ,峰电流的降低值同 HRP的加入量在 8.0× 1 0 - 7~ 8.0× 1 0 - 6 g·m L- 1之间呈线性关系 ;对酶催化反应和测定条件进行了详细的研究  相似文献   

2.
提出酚红 H2 O2 辣根过氧化物酶 (HRP)伏安酶联免疫分析体系。酚红具有醌式结构 ,在滴汞电极上于 - 0 62V(vs .SCE)左右产生伏安还原峰。HRP催化H2 O2 氧化酚红生成非电活性产物 ,使酚红的峰高降低。利用酚红的伏安还原峰的峰高降低 ,可以测定HRP及其标记物 ,并进而可用于酶联免疫分析。以线性扫描二阶导数伏安技术测定HRP的活性 ,其线性范围为 1 .0× 1 0 - 6 ~ 1 .0× 1 0 - 4 g·L- 1 HRP ,检测限为 7.3× 1 0 - 7g·L- 1 HRP。并将该体系应用于烟草花叶病毒的测定。  相似文献   

3.
制备了十八烷基胺六方介孔二氧化硅(0DA—HMS)/辣根过氧化物酶(HRP)聚乙烯醇凝胶膜化学修饰电极,考察了HRP在裸玻碳电极上和ODA—HMS聚乙烯醇凝胶膜修饰电极上的直接电化学行为,探讨了不同修饰方法包埋HRP对其直接电化学行为的影响。实验结果表明:HRP在裸玻碳电极上和滴涂法所制备ODA—HMS聚乙烯醇凝胶膜中的直接电化学行为较差,只呈现一不可逆的还原峰,且峰电流随着扫描次数的增加不断减小,无法达到稳定。而通过吸附包埋法所制备的ODA—HMS/HRP化学修饰电极上,HRP可以呈现出良好的,可逆的直接电化学行为,其氧化峰和还原峰的峰电流在数次扫描后能达到稳定。探讨了该修饰电极对双氧水的电催化还原作用。  相似文献   

4.
提出龙胆酸-H202-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析体系。以线性扫描二阶导数伏安法测定HRP催化H2O2氧化龙胆酸的产物,从而可以测定HRP的活性,进而可应用于免疫分析。在BR缓冲溶液中,龙胆酸的氧化产物在-O.58V(vs·SCE)左右产生灵敏的伏安峰。应用此峰测定HRP的检测限为1.4×10-8g·L-l,线性范围为5.0×10-8~1.0×10-5g·L-1测定了酶标记物羊抗免IgG—HRP。  相似文献   

5.
以循环伏安法在玻碳电极表面电化学聚合天青 A的同时实现了辣根过氧化物酶 ( HRP)的固定化 ,制备了聚天青 A/辣根过氧化物酶 ( PAA/HRP)电极。该电极对 H2 O2有很好的生物电催化还原作用 ,可在没有电子传递体的情况下催化 H2 O2 的还原 ,催化电流与 H2 O2 浓度在 1 .0× 1 0 - 6~ 6.0× 1 0 - 3mol· L- 1的范围内呈良好的线性关系 ,相关系数 r=0 .9993( n=1 6)。该酶电极制备简单 ,重现性良好 ,用于 H2 O2 的测定 ,可使用 60次以上。  相似文献   

6.
用线性扫描伏安法 (LSV)、循环伏安法 (CV)和微分脉冲伏安法 (DPV)等电化学手段研究了 2 ,4,6 三氨基嘧啶 (TAP)的电化学行为。结果表明 :该化合物在玻碳电极表面存在吸附特性 ,在 0 .1 0mol·L- 1 的 pH 5 .0Britton Robinson (B R)缓冲溶液中于1 .2 0V(vs.Ag/AgCl)处有一灵敏的氧化峰。在选定的最佳条件下 ,其浓度在 8.0× 1 0 - 6~ 3.2×1 0 - 4 mol·L- 1 范围内与氧化峰电流有良好的线性关系 ,检测限为 6.5× 1 0 - 6mol·L- 1 。  相似文献   

7.
本文提出了邻氨基酚 (OAP) -H2 O2 -辣根过氧化物酶 (HRP)伏安酶联免疫分析体系并用于烟草花叶病毒 (TMV)的测定。本方法以线性扫描二阶导数伏安法检测HRP催化H2 O2 氧化OAP的产物 ,用于HRP测定的检出限为 1 5× 1 0 - 1 mU·L- 1 ,线性范围为 2 5× 1 0 - 1 ~ 1 .0× 1 0 3mU·L- 1 。本法对TMV测定的检测限为 2 .0ng·mL- 1 。用所建立的方法测定病毒感染病叶澄清液的最高稀释比为 1∶3.9× 1 0 6  相似文献   

8.
运用电化学方法研究了灿烂甲酚蓝(BCB)与DNA的相互作用,并提出了以其为电化学探针测定DNA的方法。在pH 6 5的B- R缓冲溶液中,BCB在玻碳电极上有一对氧化还原峰,加DNA到BCB溶液中并在 27℃恒温反应 70min后,溶液中没有新的氧化还原峰出现,而原有的BCB氧化还原峰电流降低,峰电位稍有负移,表明两者在该条件下生成一种非电化学活性的超分子化合物,导致溶液中游离BCB浓度降低,相应的峰电流降低。对结合反应的条件和电化学测定条件进行了优化,在最佳条件下,峰电流减小的程度与DNA浓度呈分段线性关系,由此建立了一种测定DNA的电化学分析方法,该方法的线性范围为 8 00×10-7 ~ 6 00×10-5 mol·L-1,应用于微量核酸试样的分析,结果令人满意。  相似文献   

9.
制备了壳聚糖(CHIT)-多壁碳纳米管(MWNTs)纳米复合物,并将其作为固定化酶的材料,将辣根过氧化物酶(HRP)修饰在玻碳电极(GCE)表面,制备HRP修饰电极(CHIT-MWNTs-HRP/GCE).电化学研究表明:该修饰电极在磷酸缓冲溶液中的循环伏安图上出现一对峰形良好的氧化还原峰,式量电位为-0.328 V(vs.SCE),说明包埋在CHIT-MWNTs中的HRP与电极之间发生了直接电子传递.HRP修饰电极对过氧化氢的还原具有电催化作用,其表观Michaelis-Menten常数Km为3.1×10-5mol·L-1,催化电流与过氧化氢浓度在2.5×10-5~1.25×10-4mol·L-1范围内呈线性关系.该研究为生物电化学传感器的构筑探索了一个新途径.  相似文献   

10.
提出了邻氨基酚(OAP)-H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析新体系并用于测定HRP及HRP标注物。HRP催化H2O2氧化OAP生成的中间产物邻苯醌亚胺在BR缓冲液中,在-0.87V(vs.SCE)处产生灵敏的极谱波。应用此极谱波测定HRP的检出限达到3.5×10-12g/mL,线性范围为6.0×10-12~4.0×10-9g/mL。对此酶催化反应产物的电极还原过程也进行了详细的探讨。  相似文献   

11.
提出了间苯二胺 H2O2 HRP伏安酶联免疫分析新体系测定HRP的方法。通过测定HRP催化H2O2氧化间苯二胺的产物从而间接地测定HRP的浓度。偶合反应产物在pH90的BR缓冲溶液中,在-048V(SCE)左右产生一灵敏的极谱波,在选定的最佳条件下,测定HRP的线性范围是60×10-10~80×10-8g·mL-1,检出限可达10×10-10g·mL-1。用于测定游离的HRP及HRP标记物,灵敏度较经典的ELISA法高。  相似文献   

12.
首次提出了N,N-二氯二甲基对苯二胺一H2O2-HRP光度法测定HRP的方法。HRP催化H2O2氧化N,N-二氯二甲基对苯二胺生成有色化合物,通过测定有色化合物在λmax=553.6nm处的吸光光度值,间接测定HRP的含量。在所选定的实验条件下,HRP的线性范围为1.0×10-10~1.0×10-8g/mL,本法用于游离HRP的测定,与经典的ELISA显色光度法相比,灵敏度提高了一个数量级。HRP的检测限为5.1×10-11g/mL。  相似文献   

13.
提出了高香草酸-H2O2-HRP荧光酶联免疫分析测定HRP的新方法。该法基于HRP催化H2O2氧化高香草酸生成能产生荧光的物质,该物质在Ex=317nm激发光作用下产生荧光,通过测定在Em=421nm处的荧光强度,间接测定HRP的含量。在所选定的实验条件下,对HRP测定线性范围为1.0×10(-10)~1.0×10(-8)g/mL,检测限为1.0×10(-10)g/mL。  相似文献   

14.
首次提出了3,4-二羟基苯甲醛-H2O2-HRP伏安酶联免疫分析新体系,并用于HRP的测定。该方法是将HRP催化H2O2氧化3,4-二羟基苯甲醛的酶催化反应与3,4-二羟基苯甲醛的氧化产物的电极还原反应相偶合,在-1.03V(SCE)附近产生一灵敏的示波极谱波,测定HRP的检测限为1.0×10-10g/mL,线性范围为1.0×10-10~9.0×10-9g/mL。  相似文献   

15.
提出了硫酸对氨基二乙基苯胺-H2O2-HRP催化动力学光度法测定HRP的新方法。HRP催化H2O2氧化硫酸对氨基二乙基苯胺生成有色化合物,通过测定此有色化合物在λmax=552.8nm处的吸光度值间接测定催化剂HRP的含量。在所选定的实验条件下,对HRP测定的线性范围为1.0×10-10~4.0×10-9g/mL,检测限为5.7×10-11g/mL。  相似文献   

16.
以φ50μm的银丝为模板,利用恒电位电化学沉积方法制备了一种新型的纳米铂/金管状电极,利用纳米金和铂对过氧化氢的催化氧化,制备无酶过氧化氢传感器。应用场发射扫描电镜(SEM)和X射线能谱(XPS)对其形貌进行了表征,并对制备条件进行了优化。利用微分脉冲伏安法(DPV)对过氧化氢浓度进行了检测,在2.0×10-6~2.0×10-5 mol.L-1范围内氧化峰电流与过氧化氢浓度成线性关系,线性回归方程为I(μA)=1.262 1c(mol.L-1)+8.160 5(n=6,r=0.995),信噪比为3σ时,检测限为9.04×10-7 mol.L-1。  相似文献   

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