弓形虫RH强毒株对大白鼠中枢神经系统影响的研究

目的 探讨弓形虫感染对中枢神经系统的影响.方法 对不同孕期的大鼠腹腔感染弓形虫,观察其产仔及仔鼠生长存活情况,用迷宫实验检测仔鼠学习分辨及记忆能力,并对死亡的仔鼠大脑进行病理切片. 结果 早期感染弓形虫者其仔鼠在迷宫测试中,学习分辨能力及记忆能力显著低于对照组(P＜0.001);不同孕期感染各组学习成绩超过对照组算术均数3.21天的仔鼠数中,早期感染组所产仔鼠与对照组差异有显著性(P＜0.05);早期、中期感染组所产仔鼠在学习中的电击次数超过对照组算术均数4.41次的仔鼠数与对照组差异呈显著性(P＜0.05);晚期感染组其仔鼠6～7周死亡数显著高于对照组(P＜0.01)且大脑病理切片结果显示:大脑皮质空洞,大量嗜酸性细胞增生、集聚,提示寄生虫感染.结论 不同孕期感染弓形虫均可导致胎儿的先天性感染,造成中枢神经系统的损害.     

双向电泳分析叶酸对神经干细胞蛋白表达的影响

目的:探讨叶酸缺乏对胚胎大鼠神经干细胞(NSCs)蛋白质表达的影响。方法:采用无血清体外细胞培养方法,培养胚胎大鼠NSCs并进行鉴定,采用叶酸缺乏培养基培养NSCs,根据叶酸添加终浓度将细胞分为对照(Con?trol)组、叶酸缺乏(Folate-D)组、叶酸补充(Folate-L)组,各组叶酸终浓度分别为4、0.6、8mg/L。应用双向电泳(2-DE)技术分析各组蛋白质表达的差异。结果:建立了稳定可重复的NSCs2-DE图谱,与Control组相比,Folate-D组2个蛋白点表达量降低,4个蛋白点表达量升高;Folate-L组2个蛋白点表达量降低,1个蛋白点表达量升高。结论:叶酸缺乏或补充叶酸影响NSCs蛋白表达,差异蛋白分离为进一步研究叶酸对NSCs增殖分化调控机制奠定了基础。     

低砷染毒大鼠肾脏蛋白质组学研究

目的对低剂量砷暴露大鼠肾脏进行蛋白质组学研究,探讨早期砷暴露的生物学标志物。方法选取健康雄性SD大鼠48只,按体质量随机分为4组,每组12只,即对照组(0μg/L),低剂量染毒组(50μg/L),中剂量染毒组(150μg/L),高剂量染毒组(450μg/L)。染毒4周后处死大鼠,取其肾脏运用蛋白质组学技术(双向凝胶电泳)分离蛋白,凝胶经扫描后用Pdquest图形分析软件对2-DE图谱进行了分析,鉴定染毒SD大鼠和正常SD大鼠肾脏蛋白质的差异表达。结果定性分析发现,与对照组比较,低剂量组新出现了2个蛋白质点,消失了4个蛋白质点;中剂量组新出现了4个蛋白质点,消失了3个蛋白质点;高剂量组新出现了3个蛋白质点,消失了7个蛋白质点。定量分析发现,与对照组比较,低剂量组表达量升高的蛋白质点有4个,降低的有4个;中剂量组表达量升高的蛋白质点有11个,降低的有2个;高剂量组表达量升高的蛋白质点有3个,降低的有4个。结论低砷染毒导致大鼠肾组织中蛋白质差异表达,这些蛋白质可能与砷暴露的毒性作用有关。     

肺癌与肺良性疾病血清蛋白质双向电泳差异分析

目的:分析肺癌与肺良性疾病差异表达的血清蛋白质.方法:以肺癌和肺良性疾病患者血清标本为研究对象,利用双向电泳(2-DE)分离2组血清蛋白质,银染显色,Umax扫描仪获取图像,Melanie4软件分析图像,寻找肺癌相关差异蛋白质.结果:建立了较稳定的肺癌和肺良性疾病血清蛋白质2-DE图谱,平均蛋白质点数约400个.软件分析显示2组共有6个差异蛋白质点,肺癌组量上调的差异点5个,量下调的差异点1个.结论:差异蛋白质的分离为进一步的肺癌相关血清蛋白质的鉴定和其他肿瘤血清蛋白质组学研究奠定了良好的工作基础.     

产前给予地塞米松对仔鼠肺泡上皮细胞基底膜的影响

目的　观察产前注射地塞米松对仔鼠肺泡发育的影响。方法　SD孕大鼠于孕18,19,2 0dim地塞米松0 .8mg·kg- 1·d- 1,出生后4和10d仔鼠取肺,做组织切片免疫组化染色,图像分析Ⅳ型胶原的分布和表达强度。电镜观察仔鼠肺泡上皮细胞基底膜。结果　电镜下,正常4d仔鼠外周肺组织上皮细胞基底膜变薄,不连续,胞浆伸出伪足进入间质,与成纤维细胞靠近、接触。地塞米松组4d仔鼠外周肺组织上皮细胞的基底膜的不连续现象较少,上皮间质的直接接触较少。正常仔鼠肺泡上皮细胞基底膜Ⅳ型胶原的表达呈不连续线状,间有缺损,量较少,色较浅;地塞米松组仔鼠肺泡上皮细胞基底膜的Ⅳ型胶原表达较多、色较深、呈连续线状,阳性强度明显上调。结论　孕后期用地塞米松影响仔鼠肺泡上皮细胞基底膜Ⅳ型胶原表达,抑制基底膜发育,从而影响肺泡正常发育。     

钙、锌对铅致大鼠记忆障碍的保护机制探讨

目的　主要探讨饲料钙、锌干预对脑发育期低水平铅暴露致大鼠仔鼠学习记忆障碍保护作用的可能机制。方法　大鼠孕 14d至仔鼠出生 40d饮 10 0mg L含铅水 ,进食加钙 (1 2 5 % )和加锌 (10 0mg kg)配方饲料组 ,观察仔鼠生长发育情况 ,仔鼠 40d取股动脉血分析全血铅含量 ;取右半侧大脑分析脑铅含量 ;取左侧海马和小脑分析NO含量 ,右侧海马分析蛋白激酶C(PKC)活性。结果　两干预组仔鼠脑铅平均值分别为 3 0 5和 0 62 μg g ,明显低于进食普通配方饲料组 ,而加钙组血铅平均值为 0 2 9μmol L,明显低于加锌和普通配方组 ;两干预组海马和小脑一氧化氮 (NO)平均值分别为 2 7 68和 13 82 μmol g组织蛋白 ,均高于普通配方组 ,而海马细胞胞浆蛋白激酶C活性平均值分别为 0 3 3和 0 3 8pmol (min .μg组织蛋白 ) ,均低于普通配方组。结论　饲料中钙、锌干预对低水平铅暴露致大鼠学习记忆障碍的保护作用可能与降低其体内血、脑中铅蓄积水平 ,升高海马和小脑NO含量以及降低海马细胞胞浆内PKC活性有关     

吗啡成瘾和正常大鼠的前额叶皮质表达蛋白质组变化的初步研究

目的建立和比较吗啡成瘾与正常大鼠前额叶皮质(PFC)蛋白质双向电泳图谱,寻找和鉴定吗啡成瘾大鼠PFC中的差异蛋白表达谱。方法以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直SDS-PAGE为第二向,分别对正常对照大鼠和吗啡成瘾大鼠的PFC蛋白质样品进行二维分离,2-DE图谱经ImageMaster 2D Platinumv5.0软件分析,选取4个差异蛋白点用基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果通过对2-DE图谱蛋白斑点的匹配及对比分析,与吗啡成瘾相关的差异表达蛋白斑点为87个;经质谱鉴定出2个有意义的差异表达的蛋白斑点:Snap25亚型β-Snap25突触相关蛋白25、β-肌动蛋白。结论吗啡成瘾组与正常对照组大鼠PFC蛋白表达存在差异;初步鉴定了大鼠前额叶皮质中与吗啡成瘾相关的差异蛋白,其表达的变化可能通过多种途经影响PFC神经元功能,为我们研究阿片类物质依赖作用机制提出了新的思路和方向。     

糖尿病结肠动力障碍近端结肠平滑肌细胞相关凋亡基因表达的研究

目的:探讨糖尿病(DM)结肠动力障碍近端结肠平滑肌细胞的凋亡变化。方法:雄性SD大鼠36只随机分为正常对照6周组、正常对照10周组、DM6周组和DM10周组,每组9只。检测空腹血糖(FBG)、胃肠推进率、血清胰岛素(FINS),HE染色观察近端结肠平滑肌的变化,应用荧光实时定量PCR(Realtime-qPCR)检测大鼠近端结肠平滑肌细胞的bax、bcl-2及caspase-3的mRNA表达情况。结果:(1)DM组大鼠较同时间点正常对照组大鼠空腹血糖增高,胃肠推进率及血清胰岛素降低,近端结肠平滑肌变薄,bax及caspase-3的mRNA表达增强,bcl-2的mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)DM10周组大鼠较DM6周组大鼠的空腹血糖增高,胃肠推进率及血清胰岛素降低,近端结肠平滑肌变薄,bax及caspase-3的mRNA表达增强,bcl-2的mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:DM结肠动力障碍与近端结肠平滑肌细胞的凋亡密切相关,且细胞凋亡随病程发展而加重。     

膳食钙对饮水型氟暴露致子代肝脏损伤的干预作用

目的探讨膳食钙对氟暴露致子代肝脏损伤的分子机制。方法取初断乳SD大鼠雌鼠100只,雄鼠50只。雌鼠随机分成对照、染氟、低钙、低钙染氟、高钙染氟5组。3个月后合笼,取14和28日龄仔鼠进行相关实验。结果与对照组相比,其他各组仔鼠肝细胞的凋亡数量明显增多,28日龄仔鼠低钙染氟组Bcl-2蛋白表达降低(P0.05),染氟组和低钙染氟组14日龄雄性、28日龄雌雄仔鼠肝组织Caspase12蛋白表达水平升高(P0.01);与染氟组相比,低钙染氟组的细胞凋亡数量明显增多,高钙染氟组的细胞凋亡数量有所下降,各日龄仔鼠低钙染氟组Bcl-2蛋白表达降低(P0.05),28日龄雄性仔鼠高钙染氟组Caspase12蛋白表达降低(P0.05),低钙组降低(P0.01)。结论氟中毒致子代肝损伤的机制可能是氟暴露导致子代肝组织上调内质网途径凋亡通路中Caspase12表达,下调Bcl-2的表达,低钙与染氟表现出协同作用,高钙则能缓解氟中毒症状。     

慢性铅暴露对仔鼠脑海马NMDAR受体蛋白表达的影响

目的探讨发育期慢性铅暴露对仔鼠空间学习记忆及海马细胞NMDAR受体亚单位ε1、ε2蛋白表达的影响。方法小鼠按雌、雄随机分为3个实验组,1个对照组,每组6只。其染毒剂量为1,48,14.4mmolL醋酸铅水溶液。用水迷宫检测仔鼠空间学习能力,用免疫蛋白印迹法检测慢性铅暴露时仔鼠海马细胞的NMDAR受体亚单位ε1蛋白、ε2蛋白表达水平。结果慢性铅暴露可致仔鼠空间学习记忆能力下降,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);海马细胞的NMDAR受体亚单位ε1(NR2A)蛋白表达水平下降(2～4W),ε2(NR2B)蛋白表达水平基本不变。结论铅致仔鼠空间学习能力下降,与其致海马细胞的NMDAR受体亚单位ε1蛋白表达水平下降有关。     

Evidence of Altered Polyamine Concentrations in Cerebral Cortex of Suicide Completers

Recent studies have implicated alterations in the expression of polyamine-related genes in the brains of suicide completers including widespread downregulation of spermidine/spermine N1-acetyltransferase, the key enzyme in polyamine catabolism, suggesting compensatory mechanisms attempting to increase brain levels of polyamines. Given the complexity of the polyamine system, quantification of the levels of the polyamines is an essential step in understanding the downstream effects of dysregulated gene expression. We developed a method using high-resolution capillary gas chromatography (GC) in combination with mass spectrometry (MS) for quantitation of polyamines from post-mortem brain tissue, which allowed us to accurately measure spermidine and putrescine concentrations in post-mortem brain tissues. Using this method, we analyzed putrescine and spermidine levels in a total of 126 samples from Brodmann areas 4, 8/9, and 11, from 42 subjects, comprising 16 suicide completers with major depression, 13 non-depressed suicide completers, and 13 control subjects. Both putrescine and spermidine levels fell within the expected nanomolar ranges and were significantly elevated in the brain of suicide completers with a history of major depression as compared with controls. These results were not accounted by possible confounders. This is the first GC–MS study to analyze the expression of putrescine and spermidine from post-mortem brain tissue and confirms the hypothesis raised by previous studies indicating alterations in putrescine and spermidine levels in suicide/major depression.     

前列地尔对局灶性脑缺血模型大鼠大脑皮层中iNOS和eNOS表达的影响

目的:探讨前列地尔对局灶性脑缺血模型大鼠大脑皮层中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。方法:取大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照(尼莫地平1mg.kg-1)组和前列地尔低、中、高剂量(1.25、2.50、5.00μg.kg-1)组,每组10只,腹腔注射相应药物6d,每日1次,末次给药后建立局灶性脑缺血模型,大鼠清醒后进行神经功能缺损评分,采用免疫组化法和免疫印迹法检测各组大鼠建模2h后iNOS、eNOS的表达。结果:与假手术组比较,其余各组神经功能缺损评分均明显增加,iNOS阳性细胞数和表达量均明显增加,除模型组外其余各组eNOS阳性表达量均增加(P均<0.05);与模型组比较,阳性对照组和前列地尔中、高剂量组神经功能缺损评分均明显降低,阳性对照组和前列地尔3个剂量组iNOS阳性细胞数和表达量均明显降低、eNOS阳性细胞数和表达量均明显增加(P均<0.05)。结论:前列地尔预处理对局灶性脑缺血模型大鼠具有保护作用,其机制可能与下调大脑皮层iNOS、上调eNOS的表达有关。     

黄连解毒汤对快速老化小鼠皮层基因表达的影响

目的研究黄连解毒汤（HL）对快速老化小鼠亚系SAMP8皮层差异表达基因的影响，揭示HL对认知功能障碍的改善作用的分子机制。方法应用快速老化小鼠亚系SAMP8和SAMR1海马差异表达eDNA芯片，比较了以石杉碱甲或HL处理的SAMP8皮层基因表达谱，以及HL的药物反应基因，同时采用实时荧光定量PCR技术对芯片结果进行了验证。结果HL对SAMP8皮层基因表达具有明显的调节作用。差异表达基因有信号转导基因Dusp12，Rps6ka1，Rab26，Tat2，Phb，Syde1，Def8，Ihpk1，Pik3e2a，蛋白质代谢相关基因Tte3，Amfr，Prr6，核酸代谢基因Fhit，Itm2e，Cstf2t，能量代谢基因Stub1，Uqer，Nsf，免疫反应相关基因Clqb，转录调节基因D1ertd161e，细胞生长相关基因Ngm，Dip3b，Acrbp，递质转运相关基因skl7a7，神经系统发育相关基因Trim3，神经胶质细胞分化相关基因Tspan2，电子传递相关基因mt-Col，以及15个功能未知基因。结论HL可能是通过调节信号转导、突触传递、蛋白质和能量代谢、细胞增殖分化等途径发挥认知功能改善作用的；研究中发现的HL的药物反应基因可能是改善学习记忆的潜在靶标。     

神经外科术中脑皮层温度监测及其影响因素

目的：监测开颅术中局部脑皮层温度，并与食道及胃咽部温度比较，探讨影响脑局部温度的因素。方法：28例ASA1－2级，择期神经外科手术患者分为亚低温组（n=10)与非亚低温组（n=18)，术中持续监测食道，术野局部脑皮层温度，术中剪开硬膜后，将针状脑皮层温度探头插入脑皮质1cm，直至硬膜缝合前取出，同时记录出入量，室温及冲洗液温度，结果：（1）在同一时间点，两组脑皮层局部温度均明显低于食道温度，亚低温组最大温度差可达2．7℃，非亚低温组最大温度差可达3．2℃。（2）亚低温组与非亚低温组局部脑皮层温度与食道温度的相关系 系数分别为0．935，0．942（均P＜0．01），（3）经多元回归分析，食道温度，室温，体表面积是影响局部脑皮层温度的主要原因，术后观察24h病人未见与温度测量相关并发症发生。结论：开颅术中食道温度不能准确反映局部脑皮层温度，但两者存在明显相关性。     

前列地尔对局灶性脑缺血模型大鼠大脑皮层基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9表达的影响

目的:探讨前列地尔对局灶性脑缺血模型大鼠大脑皮层基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP-9表达的影响。方法:取SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照(尼莫地平1 mg.kg-1)组和前列地尔低、中、高剂量(1.25、2.50、5.00μg.kg-1)组,每组5只,连续给予相应药物6 d,每日1次,末次给药后建立局灶性脑缺血模型,于大鼠清醒后进行神经功能缺损评分,缺血24 h后检测各组大鼠大脑皮层MMP-2、MMP-9的表达情况。结果:与假手术组比较,模型组神经功能缺损评分明显更高,MMP-2、MMP-9表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组和前列地尔中、高剂量组神经功能缺损评分明显较低,MMP-2、MMP-9表达明显降低(P<0.05)。结论:前列地尔预处理对局灶性脑缺血模型大鼠具有神经保护作用,其机制可能与抑制大脑皮层MMP-2、MMP-9的表达有关。     

神经生长因子对一氧化氮介导的大鼠脑皮质神经元毒性的影响

研究神经生长因子（ＮＧＦ）对一氧化氮（ＮＯ）介导的大鼠脑皮质神经无毒性的影响。方法：用原代培养的大鼠胎鼠脑皮质神经细胞，测定ＮＯ含量及原生型一氧化氮合酶（ｃＮＯＳ）基因表达，并研究ＮＧＦ对细胞缺氧／缺糖损伤的影响。结果：细胞缺氧／缺糖培养 ２４ ｈ后，细胞死亡率明显增高，ＮＯ大量释放。 ＮＧＦ １００ μｇ／Ｌ显著提高细胞生存力，降低ＮＯ释放，但其对硝普钠（ＳＮＰ）３００ μｍｏｌ／Ｌ引起的ＮＯ大量释放及细胞死亡率升高无明显影响。 ＮＧＦ５０、１００ μｇ／Ｌ显著降低细胞缺氧／缺糖引起的 ｃＮＯＳ ｍＲＮＡ的高表达。结论：ＮＯ介导了细胞缺氧／缺糖损伤，ＮＧＦ通过抑制ｃＮＯＳ活性，降低ＮＯ释放来保护神经元免受缺氧／缺糖损伤。     

Forskolin-stimulated Adenylate Cyclase Activity in Rat Cerebral Cortex Following Chronic Treatment with Psychotropic Drugs

Abstract: Rats were treated with lithium, imipramine, reserpine, and lithium combined with imipramine or reserpine. Lithium was given in the diet (40 mmol/kg) resulting in a serum-Li⁺ level of 0.5–0.6 mmol/1. Other drugs were dissolved in 0.9% saline and given intraperitoneally once or twice daily. After 3 weeks of treatment, forskolin-stimulated adenylate cyclase activity was measured in cerebral cortex homogenates. Reserpine did not affect the forskolin stimulation, while both imipramine and lithium caused a decrease in this activity. The combined treatments lithium-imipramine and lithium-reserpine also exhibited a clear decrease in forskolin stimulation, but the effect of concomitant lithium and imipramine treatment did not differ from the effect seen after any of the treatments alone. The unstimulated activity was unaltered by all treatments. The inhibition of lithium and imipramine on the forskolin stimulation indicates an interference of these two drugs with the forskolin-mediated activation of the adenylate cyclase.     

市售五加皮掺伪情况分析

目的：对市场上新出现的五加皮掺伪情况进行分析鉴定,并建立五加皮及其掺伪品的性状及显微鉴别方法。方法：在与标本比对的基础上,对五加皮的掺伪品牡丹皮及桑白皮进行鉴定,使用性状与显微的研究方法,对市场上收集的五加皮样品进行分析。结果与结论：通过性状及显微特征的观察,能够快速准确地发现并鉴定五加皮中的掺伪情况,五加皮及其掺伪品牡丹皮、桑白皮可以通过性状、显微特征进行区分,为保障群众用药安全提供保证。