ILK/PI3K/PKB转导通路与肿瘤

整合素连接激酶(ILK)以依赖于磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)方式激活,通过磷酸化下游底物蛋白激酶B(PKB)等使细胞外信号向下游传递,对细胞的生长、分化及细胞凋亡、细胞周期、细胞黏附等进行调控,在肿瘤的发生、发展中发挥着重要的作用。本文综述ILK/PI3K/PKB传导通路中一些酶类或基因在肿瘤中的表达及其与肿瘤发生、发展及治疗的研究进展。     

整合素连接激酶（ILK）参与肿瘤的形成和转移的研究进展

整合素连接激酶（ILK）是一个具有Ser／Thr蛋白激酶活性的细胞内蛋白，可被整合素或生长因子以依赖于PI-3K的方式激活，并通过磷酸化激活下游底物PKB／Akt和抑制GSK-3等使细胞外信号得以向下游传递，对细胞的生长、分化、迁移等进行调控。在多种肿瘤中ILK表达和活性都上调，对肿瘤的诊断也有一定价值。由于抑制ILK的活性能够导致细胞周期阻滞和细胞凋亡，使其成为肿瘤基因治疗和肿瘤药物的理想靶点。本综述总结了ILK在多种肿瘤中的表达情况，ILK在肿瘤形成和侵袭转移中的作用以及它在肿瘤诊断治疗上的新进展。     

整合素连接激酶及抑癌基因PTEN在人喉鳞状细胞癌中的表达

整合素连接激酶（integrin-linked kinase．ILK）是一种新近发现的丝氨酸／苏氨酸（Ser／Thr）蛋白激酶。它能通过与整合素81和p3亚单位的结合介导细胞与细胞外基质的连接，以依赖于P13K的方式激活，整合素B3能够通过激活血管内皮生长因子受体-3，而使血管内皮生长因子发挥刺激内皮细胞增生和毛细血管形成的作用。国外研究表明，ILK的表达增高与包括前列腺癌、大肠癌、胃癌等人类肿瘤的发生、发展密切相关，[编者按]     

罗格列酮对人脐静脉内皮细胞NO和P13K／PKB／eNOS信号通路的影响

目的：观察罗格列酮对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）一氧化氮（nitric oxide，NO）浓度和内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）、磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，P13K）和蛋白激酶B（protein kinaseB，PKB）表达的影响，探讨罗格列酮改善内皮功能的信号转导机制。方法：首先观察罗格列酮对内皮细胞NO影响的时效和量效关系，然后加用eNOS和PKB信号阻断剂进行干预。用Griess重氮化反应法检测NO浓度，RT-PCR方法检测P13K，PKB及eNOSmRNA的表达，Western免疫印迹方法检测PKB，eNOS总蛋白和PKB丝氨酸473（PKB-Ser473），eNOS丝氨酸1177（eNOS-Ser1177）的磷酸化表达。结果：罗格列酮呈剂量和时间依赖性地升高内皮细胞NO浓度，不同浓度的罗格列酮培养内皮细胞均能升高P13K mRNA表达和PKB-Ser473，eNOS-Ser1177磷酸化，但对PKB和eNOS表达均无影响；eNOS阻断剂L-NAME能完全阻断罗格列酮培养的内皮细胞NO浓度的升高，P13K阻断剂LY294002能阻断罗格列酮诱导的NO产生和PKB，eNOS的磷酸化。结论：罗格列酮能通过激活P13K／PKB／eNOS信号通路而增强内皮细胞NO的浓度，改善内皮功能。     

整合素连接激酶(ILK)参与肿瘤的形成和转移的研究进展

整合素连接激酶(ILK)是一个具有 Ser/Thr 蛋白激酶活性的细胞内蛋白,可被整合素或生长因子以依赖于 PI-3K 的方式激活,并通过磷酸化激活下游底物 PKB/Akt 和抑制 GSK-3等使细胞外信号得以向下游传递,对细胞的生长、分化、迁移等进行调控。在多种肿瘤中 ILK 表达和活性都上调,对肿瘤的诊断也有一定价值。由于抑制 ILK 的活性能够导致细胞周期阻滞和细胞凋亡,使其成为肿瘤基因治疗和肿瘤药物的理想靶点。本综述总结了 ILK 在多种肿瘤中的表达情况,ILK 在肿瘤形成和侵袭转移中的作用以及它在肿瘤诊断治疗上的新进展。     

ILK 介导 TGF-β／Smad 通路诱导肾小球内皮细胞-间充质细胞转分化的研究

目的：观察 TGF‐β1在肾小球内皮细胞‐间充质细胞转分化（EndM T ）中的作用,探讨 ILK 介导 TGF‐β／Smad 信号通路在 EndM T 过程中的作用。方法以体外培养人肾小球内皮细胞为研究对象,分为空白对照组、TGF‐β112．5、25．0、50．0 ng／mL 组、TGF‐β150．0 ng／mL ＋Ⅰ型受体抑制剂（LY364749）5．0μmol／L 组和 ILK 抑制剂（QLT‐0267）5．0μmol／L 组,各组细胞在上述处理因素下培养48、72 h ,以 RT‐PCR 测定 P‐Smad2／3和 ILK mRNA 的表达水平,以 Western blot 测定 P‐Smad2／3、ILK 及E‐cadherin 、CD31、α‐SMA 和 FSP‐1蛋白的表达水平。结果（1）TGF‐β1可剂量依赖性诱导 HGEnCP‐Smad2／3和 ILK mRNA 水平显著升高（P＜0．01）以及 P‐Smad2／3、ILK 、α‐SMA 和 FSP‐1蛋白水平显著升高（P＜0．01）,但是剂量依赖性诱导 E‐cadherin 和CD31蛋白水平显著降低（P＜0．01）;（2）TGF‐β1Ⅰ型受体抑制剂和 ILK 抑制剂可显著抑制 TGF‐β1诱导 ILK mRNA 水平的升高（P＜0．01）以及 ILK 、α‐SMA 和 FSP‐1蛋白水平的升高（P ＜0．01）,抑制 E‐cadherin 和 CD31蛋白水平的降低（P＜0．01）;（3） TGF‐β1Ⅰ型受体抑制剂可显著抑制 TGF‐β1诱导 P‐Smad2／3 mRNA 和蛋白水平的升高（P ＜0．01）,但是 ILK 抑制剂对 P‐Smad2／3 mRNA 和蛋白无显著影响（P＞0．05）。结论 TGF‐β1可促进肾小球内皮‐间充质细胞转分化,ILK 作为下游效应因子介导 TGF‐β／Smad 信号通路参与了该过程,可能在肾脏纤维化过程中发挥重要作用。     

PI3K、α-SMA蛋白在特发性肺纤维化肺组织的表达及意义

目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinase，P13K）、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscleactin，α-SMA）蛋白在特发性肺纤维化（Idiopathic pulmonary fibrosis，IPF）患者肺组织中的表达及其关系。方法IPF组19例标本来自我院胸外科行开胸肺活检的IPF患者；正常对照组18例标本来自河南省胸科医院因肺部病变行肺叶切除术，所取组织距病变至少5cm且病理证实为正常肺组织。应用免疫组化方法检测P13K、α-SMA在肺组织中的表达。结果IPF组P13K、α-SMA在肺组织的表达高于对照组（统计数值分别为U=23．000，P〈0．01；U=9．000，P〈0．01）。相关性分析表明肺组织P13K蛋白的表达与α-SMA的表达，两者呈正相关（r=0．823，P〈0．01）。结论在IPF患者肺组织中通过激活磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinase，P13K）／蛋白激酶B（proteinkinaseB，PKB／AKT）途径，肺肌成纤维细胞获得抗凋亡的基因表型，从而促进肺纤维化的发生及进展。     

蛋白激酶B在糖代谢中的作用及药物干预

蛋白激酶B（protein kinase B，PKB）为原癌基因c-Akt的表达产物．是细胞内外磷脂酰肌醇3激酶（phosphoinositide 3 kinase，PI3K）信号通路中重要的激酶之一，具有调节葡萄糖转运、参与糖原合成、促进蛋白质合成及抗细胞凋亡等多种作用。     

PI3K／AKT及MEK／ERK信号通路在肿瘤血管内皮细胞迁移中的作用

目的：研究磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）／丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（AKT）及丝裂原细胞外信号调节激酶（MEK）／细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路在肿瘤血管内皮细胞迁移中的作用及机制。方法用不同浓度的PI3K／AKT信号通路抑制剂LY294002（2．50、7．50、15．00μmol／L）;MEK／ERK信号通路抑制剂PD98059（2．50、7．50、15．00μmol／L）分别处理肿瘤血管内皮细胞,以DMEM‐F12培养基,加入0．10％二甲基亚砜（DMSO）的培养基分别作为对照,通过细胞划痕试验,定向迁移试验和Transwell试验来检测不同的信号通路抑制剂对肿瘤血管内皮细胞的水平、垂直和定向迁移能力的影响。结果0．1％DMSO对内皮细胞的迁移无明显影响,其作用后内皮细胞的迁移能力与DMEM‐F12单独作用无明显区别,说明小剂量DMSO作为LY294002、PD98059的溶剂不影响肿瘤血管内皮细胞的迁移功能;应用信号通路抑制剂LY294002、PD98059处理后,内皮细胞迁移能力受抑制,且随着抑制剂浓度增高而增大;LY294002与PD98059组比较,前者迁移距离更小,细胞迁移数较后者少,二者比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论抑制PI3K／AKT和MEK／ERK信号通路均能抑制肿瘤血管内皮细胞的水平、垂直和定向迁移,且与抑制剂浓度呈正相关;PI3K／AKT信号通路对内皮细胞迁移的影响比MEK／ERK信号通路明显。     

药物干预PKB靶点改善糖代谢的研究进展

蛋白激酶B（protein kinaseB，PKB）为原癌基因C—Akt的表达产物，是细胞内外磷脂诜酰醇3激酶（phosphoinositide 3 kinase，PI3K）信号通路中重要的激酶之一，在胰岛素刺激的葡萄糖摄取中起重要作用。PKB可诱导葡萄糖转运因子4（GLUT4）易位，促进肌肉和脂肪组织摄取葡萄糖，失活葡萄糖激酶3（GSK3），刺激糖原的合成，影响糖酵解和糖异生。从而维持血糖的稳定。本文就药物干预PKB靶点改善糖代谢的研究进展做一综述。     

整合蛋白连接激酶:抗肿瘤药物作用的新靶点

整合蛋白连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)是一个Ser/Thr蛋白激酶.它能介导细胞与胞外基质的相互作用,并通过下游底物蛋白激酶B和糖原合成酶激酶3将胞外信号向下游传递.从而增强细胞的侵袭能力、促进细胞周期循环的进行并抑制细胞凋亡.一些蛋白磷酸酶如PTEN和ILKAP能够对ILK的活性或其信号传导途径进行抑制,一些小分子的ILK拮抗剂也能抑制ILK的活性.抑制ILK可使细胞恶性度和成瘤能力下降,导致细胞凋亡和G1到S期细胞周期循环的停滞.这些结果显示,抑制ILK的活性将对某些肿瘤的治疗有着非常重要的意义.近来一些研究显示,某些非甾体类抗炎药、神经节苷酯在体内的作用位点就是ILK或其介导的相关途径.     

LY294002抑制PI3K/Akt信号通路对人胃癌SGC-7901细胞的影响

目的探讨低氧环境下PI3K抑制剂2-（4-吗啉基）-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4-酮（LY294002）对人胃癌SGC-7901细胞中磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）／丝氨酸苏氨酸激酶（Akt）信号通路、细胞生长、细胞凋亡及低氧诱导因子-1α（HIF-1α）mRNA表达的影响。方法应用LY294002作用于低氧环境中的人胃癌SGC-7901细胞（低氧＋LY294002组）,采用CCK-8试剂盒检测SGC-7901细胞生长;流式细胞仪检测细胞凋亡百分比;Western blotting检测P13K和p-Akt蛋白表达;RT—PCR检测HIF-1α mRNA表达。以低氧环境中未加LY294002的细胞作为对照（低氧组）。结果LY294002能抑制低氧环境中SGC-7901细胞增殖,抑制效果在药物作用后第2～6天时最为明显（P〈0．05）,低氧＋LY294002组中细胞凋亡百分比明显高于低氧组（P〈0．01）。LY294002能明显抑制PI3K、p-Akt蛋白以及HIF-1α mRNA的表达,与低氧组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论LY294002能抑制低氧环境中人胃癌SGC-7901细胞生长,促进细胞凋亡,抑制PI3K／Akt信号通路及其下游HIF-1α mRNA的表达。     

API-2靶向抑制P13K／Akt信号通路干预胃癌细胞生长的研究

目的研究蛋白激酶B抑制剂-2（API-2）靶向抑制P13K／Akt信号通路中Akt位点,从而对胃癌细胞生长的影响。方法使用API-2处理人胃癌细胞株SGC7901。MTT法检测0,2,4,6,8μmol／LAPI-2作用不同时间对细胞增殖的影响;荧光染料A0／EB染色观察不同浓度API-2作用24h后细胞凋亡情况;流式细胞仪检测细胞周期变化;Westernblot法检测P—AKT蛋白以及下游蛋白NF-κB表达情况。结果API-2可抑制SGC7901细胞的增殖,并呈浓度和时间依赖性;不同浓度API-2作用24h后,对细胞的部分周期有明显的影响,也可直接导致肿瘤细胞凋亡、坏死,并且p-AKT蛋白及下游蛋白NF-κB表达均减少。结论API-2有效地抑制P13K／Akt信号通路中Akt位点,影响SGC7901细胞的周期．减少NF-κB的表达,具有增殖抑制及诱导凋亡作用。     

镉诱导肾细胞凋亡及其对P13K／Akt和ERK1／2信号通路的影响

目的镉（cd）诱导猪肾近曲小管上皮细胞（LLC-PK）凋亡及其对胞内蛋白激酶B（P13K／Akt）和胞外信号调节激酶（ERKI／2）表达的影响。方法应用不同浓度Cd（0、10、20、40、50μmol／L）作用LLC-PK：12h和40μmol／Lcd作用LLC-PK。不同时间（0、3、6、12、24h）,采用蛋白免疫印迹法检测细胞内蛋白激酶B（P13K／Akt）和胞外信号调节激酶（ERKl／2）及其磷酸化蛋白表达水平。结果镉可上调P13K／Akt和ERKl／2的表达：当加入N-乙酰半胱氨酸（NAC）预处理后对镉引起的ERKl／2上调具有抑制作用,但对镉引起的P13K／Akt上调的抑制作用不明显。结论镉诱导肾细胞凋亡可能与活化P13K／Akt和ERKI／2通路有关。NAC拮抗镉性肾细胞凋亡的机制可能与抑制镉引起的ERKl／2表达上调有关。     

缺氧诱导因子-1a和整合素连接激酶在外阴鳞状细胞癌中的表达与临床意义

目的探讨缺氧诱导因子-la（HIF-la）与整合素连接激酶（ILK）在外阴鳞状细胞癌（VSCC）中的表达及其相互关系。方法用免疫组化SP法检查43例VSCC中HIF-la、ILK蛋白表达。结果VSCC中HIF-la与ILK阳性表达率分别为72.09%（31/43）,76.74%（33/43）,均明显高于外阴正常表皮（P〈0.01）。随着病理分级、临床分期的增加及淋巴结转移的发生,HIF-la与ILK阳性表达率也随之增加,差异有统计学意义（P〈0.05）,HIF-1a与ILK表达呈正相关（rS=0.866,P〈0.01）。结论HIF-la、ILK是反映VSCC浸润转移等生物学行为的重要指标,HIF-la诱导ILK表达,可能参与VSCC的进展。     

整合素连接激酶与肿瘤转移

整合素连接激酶(ILK)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,可以同整合素b1、b3亚基胞浆域结合,参与多种信号转导,包括整合素、生长因子及Wnt信号转导通路,在调节细胞黏附、凋亡、转移、生长、细胞周期、肿瘤形成等过程中起重要作用。如果细胞中ILK表达异常,将引发病理变化,其中ILK表达异常与肿瘤转移的关系已引起人们的广泛关注。该文就ILK与肿瘤转移关系研究进展进行综述。     

不同危险分组ALL细胞PI3K／AKT磷酸化激活的初步研究

目的观察磷脂酰肌醇-3激酶／蛋白激酶通路(P13K／AKT)在不同危险分组的白血病细胞中磷酸化激活的程度，初步了解急性白血病细胞P13K／AKT激活与急淋白血病危险分组的关系。方法使用蛋白印记分析法(Western Blot)检测正常健康儿童、初发白血病患儿、缓解后患儿以及难治性白血病患儿白血病骨髓细胞中PI3K／AKT磷酸化激活程度。结果正常健康儿童骨髓单个核细胞中无PI3K／AKT磷酸化激活，10例初发患儿中3例、10例缓解后患儿1例有PI3K／AKT磷酸化激活，6例难治患儿中4例有PI3K磷酸化激活。结论PI-3K/AKT信号传导通路激活与否在淋巴细胞白血病危险分组和疾病转归的生物学过程中可能起着较重要作用，需进一步深入研究。     

PI3K/Akt/mTOR信号通路在非小细胞肺癌中作用的研究进展

肺癌是当今世界上严重威胁人类健康与生命的恶性肿瘤，每年有超过100万人死于肺癌。P13K／Akt通路在肿瘤治疗方面已经有了比较广泛的研究，活化受体酪氨酸激酶和它们下游信号递质的研究也已经为肺癌的治疗打开了一个非常有前号的领域。由于P13K／Akt通路在下游多点活化受体酪氨酸激酶，因此被广泛地研究并开发新的抗肿瘤制剂。mTOR已经被确定是P13K／Akt的下游靶点。雷帕霉素及其衍生物具有高度选择性，mTOR的抑制剂对于多种肿瘤的治疗效果已取得了很好的研究结果。在此我们将对肺癌中P13K／Akt／mTOR信号通路的分子基础做一综述，并进一步讨论有关肺癌的多靶点治疗策略。     

核糖核酸酶抑制因子与整合素连接激酶对 膀胱癌上皮- 间质转化与转移的影响

目的 研究核糖核酸酶抑制因子（RI）与整合素连接激酶（ILK）相互作用对膀胱癌上皮- 间质转 化（EMT）与转移的影响。方法 构建过表达RI 或ILK 的膀胱癌EJ 细胞系,免疫荧光检测RI 与ILK 在EJ 细胞 中的表达及共定位,倒置相差显微镜下观察细胞形态,Western blot 检测细胞中RI、ILK 及EMT 标志物的表达, 复制膀胱癌裸鼠移植瘤模型,免疫组织化学分析瘤组织中RI、ILK 及EMT 标志物的表达,HE 染色观察裸鼠肺 转移。结果 EJ 细胞中RI 与ILK 存在共定位的现象,RI 与ILK 存在相互作用。Western blot 结果显示,EJ-RI 组E- 钙黏蛋白（E-cadherin）表达高于EJ 组（P <0.05）,EJ-ILK 组基质金属蛋白酶2（MMP2）、基质金属蛋白 酶9（MMP9）、N- 钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、扭转蛋白（Twist）、核转录因子（Snail） 与重组人S100 钙结合蛋白A4（S100A4）表达高于EJ 组（P <0.05）。过表达RI 抑制膀胱癌体内外EMT 及移 植瘤自发性肺转移,而过表达ILK 促进EMT 发生及膀胱癌转移。结论 RI 与ILK 相互作用调节膀胱癌EMT 与 转移。     

乳腺肿瘤中整合素连接激酶(ILK)的表达及临床意义

目的：检测整合素连接激酶（ILK）在乳腺良、恶性病变中的表达,旨在探讨其在乳腺癌发生和发展中的作用与意义。方法：应用免疫组化SP法检测103例乳腺良、恶性肿瘤中ILK的表达情况。结果：ILK在乳腺癌、癌前病变及良性肿瘤中的阳性表达率分别为81．4％、93．3％和66．7％,各组间有显著性差异（P〈O．05）,且ILK蛋白在乳腺癌组织中的表达与淋巴结转移及组织学分级有相关性（P〈0．01）。结论：ILK过表达在乳腺组织恶性转化中起重要作用。