亚低温对缺血新生鼠脑远近期保护作用

目的　研究亚低温对缺氧缺血脑损害 (HIBD)新生大鼠的远近期脑保护作用。方法　新生 7天的SD大鼠制作HIBD模型 ,31℃亚低温在HIBD后即刻开始干预 ,干预 6小时 ,采用原位末端标记技术检测脑组织中凋亡细胞数 ,并进行行为观察等 ,研究HIBD新生大鼠近斯脑细胞死亡和远期行为改变 ,以及亚低温对脑的远近期保护作用。结果　新生大鼠HIBD后 ,近期由坏死和凋亡导致神经元死亡 ;远期行为学无统计学意义的改变 (P >0 .1 ) ,但在饥饿诱发下 ,行为能力显著差于假手术组 (P<0 .0 5 ) ;亚低温可使近期凋亡细胞减少 ,8日龄时凋亡细胞数由皮质 47 8± 6 8,海马 37 4± 2 2 4降为皮质 3 0± 2 1 ,海马 3 3± 2 0 (P <0 .0 1 ) ,远期行为学能力改善     

Nogo-66受体特异性小干扰RNA对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠神经再生功能的影响

目的探讨化学合成Nogo-66受体(NgR)特异性小干扰RNA(siRNA)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经再生和功能的影响。方法建立新生大鼠HIBD模型50只,随机分为si NgR治疗组和生理盐水(NS)对照组各20只,HIBD组10只,si NgR治疗组脑室内注射si NgR及转染试剂10μl,NS对照组脑室内注射NS及转染试剂10μl,HIBD组不做脑室内注射;另外选择10只新生大鼠为假手术组,只分离颈总动脉,不结扎,不做缺氧缺血处理和脑室内注射。应用水迷宫实验分析大鼠逃生时间,并用免疫组化法结合图像分析大鼠脑组织NgR及生长相关蛋白(GAP)-43蛋白表达水平。结果 RT-PCR凝胶电泳结果显示,si NgR治疗组NgR c DNA条带不明显,NS对照组NgR c DNA条带清晰,两组管家基因GAPHD c DNA条带均清晰。免疫组化显示NS对照组可见较多NgR免疫反应产物阳性颗粒;si NgR治疗组NgR免疫反应产物阳性颗粒明显减少。假手术组、HIBD组、NS对照组和si NgR治疗组GAP-43免疫组化阳性细胞数分别为(33.2±1.3)、(20.1±1.2)、(18.7±1.4)和(28.1±1.8)个,假手术组和si NgR治疗组高于HIBD组和NS对照组(P<0.05),假手术组和si NgR治疗组差异无统计学意义(P>0.05)。水迷宫实验结果显示,HIBD组新生大鼠3天平均逃生时间[(58.1±10.3)、(47.2±10.1)、(42.5±7.6)s]较假手术组[(34.2±5.6)、(25.7±6.2)、(21.2±8.1)s]明显延长(P<0.05);si NgR治疗组[(37.5±9.8)、(29.1±9.8)、(27.2±9.3)s]较HIBD组和NS对照组[(60.7±5.2)、(49.1±9.9)、(45.3±9.3)s]明显缩短(P<0.05)。结论化学合成特异性siRNA能够干扰新生大鼠脑组织NgR表达,并在一定程度上促进大鼠神经再生和神经功能恢复。     

亚低温对缺血新生鼠脑远近期保护作用

目的研究亚低温对缺氧缺血脑损害(HIBD)新生大鼠的远近期脑保护作用.方法新生7天的SD大鼠制作HIBD模型,31℃亚低温在HIBD后即刻开始干预,干预6小时,采用原位末端标记技术检测脑组织中凋亡细胞数,并进行行为观察等,研究HIBD新生大鼠近斯脑细胞死亡和远期行为改变,以及亚低温对脑的远近期保护作用.结果新生大鼠HIBD后,近期由坏死和凋亡导致神经元死亡;远期行为学无统计学意义的改变(P＞0.1),但在饥饿诱发下,行为能力显著差于假手术组(P＜0.05);亚低温可使近期凋亡细胞减少,8日龄时凋亡细胞数由皮质47.8±6.8,海马37.4±22.4降为皮质3.0±2.1,海马3.3±2.0(P＜0.01),远期行为学能力改善.     

延迟高压氧治疗对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的远期影响

目的　探讨延迟高压氧 (hyperbaricoxygen,HBO)治疗对缺氧缺血性脑损伤 (hypoxic-ischemicbraininjury,HIBD)新生大鼠的远期影响。方法　7日龄大鼠随机分为对照组(n=18,假手术处理)、HIBD组(n=17)和HBO组(n=17,制备HIBD模型后 48~72h开始 2个绝对大气压HBO治疗,稳压 30min/次,间隔 24h,连续 5次),以大鼠 37~41日龄的学习记忆功能 (Morris水迷宫实验 )和 42日龄的脑形态组织学(脑损伤程度、脑重量、海马CA1区存活神经元数、AchE纤维面积百分比和NOS神经元数)来判断干预效果。结果　HBO组、HIBD组的空间学习记忆功能严重不良,脑形态组织学也明显缺损。水迷宫平均逃逸潜伏期HBO组 [ (56±23)s]、HIBD组 [ (56±22)s]较对照组[ (23±16)s]延长(P<0 05);平台象限搜索时间HBO组[ (30±5)s]、HIBD组[ (29±6)s]较对照组[ (51±5)s]缩短 (P<0.05);平台象限搜索距离HBO组 [ (572±92)cm]、HIBD组 [ (548±92 )cm]较对照组[ (989±101)cm]缩短(P<0.05);左脑重量HBO组[ (598±46)mg]、HIBD组[ (601±59)mg]较对照组[ (984±18)mg]减轻 (P<0 05 );海马CA1区存活神经元数HBO组 [ ( 97±27 )个 /mm]、HIBD组[ (100±27)个 /mm]较对照组 [ ( 183±8 )个 /mm]减少 (P<0 05 );AchE纤维面积百分比HBO组 [ (18.4±2.2)% ]、     

低温对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用及其机制

目的　探讨全身低温对缺氧缺血性脑损伤的保护作用及其机理。方法　结扎 7日龄Wistar大鼠左侧颈总动脉后吸入 7 7%氧气 6 0min制成脑缺氧缺血 (HI)模型 ,随机分成低温组(30℃ ,n =18)和常温组 (36℃ ,n =18)给予维持恒定目标温度 10h。在HI后 2 4h ,每组 8只取脑进行匀浆用于半胱天冬酶 2 ,3(caspase 2 ,3)活性测定和Western蛋白印迹检查 ,其余每组 10只在HI后 72h处死 ,取脑进行石蜡包埋 ,冠状切片 10 μm用于活性caspase 3,凋亡诱导因子 (AIF) ,发夹寡核苷酸探针原位杂交 (HPP)检测凋亡及相关因子 ,微管相关蛋白 2 (MAP 2 )免疫组化染色用于计算脑梗塞体积和海马CA1神经元丢失 ,HE染色计算脑损伤积分。结果　常温组在HI后 2 4h损伤侧大脑半球caspase 2 ,3的活性 [(2 7 7± 14 7)、(94 9± 5 3 1) pmol/(min·mg蛋白 ) ]均明显高于正常对照组 [(7 6± 0 7)、(12 9± 0 5 ) pmol/(min·mg蛋白 ) ]和低温干预组 [(7 9± 3 4 )、(2 1 1± 18 7)pmol/(min·mg蛋白 ) ],P <0 0 1;而低温组与正常对照组相比无明显差异。Western蛋白印迹结果显示低温组caspase 3的激活受到明显抑制。免疫组化显示常温组活性caspase 3及AIF的阳性细胞数(中位数 14 8 5 ;2 2 /视野 )明显高于低温组 (中位数 4 8 5 ;9/视     

新生大鼠缺氧缺血损伤后行为变化和海马结构突触素的表达

目的 探讨缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后学习记忆行为功能与突触可塑性之间的关系。方法 7日龄Wistar大鼠36只随机分为缺氧缺血(HI)组21只和正常对照组15只。HI组大鼠通过结扎左侧颈总动脉后吸入8％的氮氧混合气体2h,制成缺氧缺血性脑病(HIE)模型。饲养至80d左右时,采用Y-迷宫实验检测分辨学习和记忆能力,免疫组织化学方法对海马结构突触素的表达进行分析。结果 HI组大鼠分辨学习能力和记忆保持百分数分别为33±8和(59±21)％,显著低于正常对照组27±7和(80±19)％(P<0.01,P<0.05);海马、齿状回突触素免疫染色出现明显的免疫板层分布,HIE组海马CAI区始层、辐射层、腔隙分子层及齿状回分子层突触素免疫产物校正光密度(COD)值均较对照组明显降低(P<0.01),分别降至41.2％,27.2％,10.5％和38.9％。结论 HIBD后大鼠学习和记忆能力明显下降,可能与海马结构突触素减少有密切关系。     

亚低温治疗对窒息新生儿消化系统功能的影响

目的　研究亚低温治疗对窒息后缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)新生儿消化系统功能的影响。方法　将 5 0例重度窒息足月新生儿分为治疗组 2 3例和对照组 2 7例。两组均采用相同常规基础对症治疗。治疗组同时采用选择性头部降温方法 ,维持鼻咽温度 34± 0 .5℃ ,持续 72h ;对照组不进行亚低温治疗。检测肝功能、胆红素及临床胃肠动力学改变等指标。结果　两组肝功能异常人数比较无差异 ,生后 6 8～ 79h血清胆红素治疗组为 136± 2 7μmol/L ,对照组为 15 9±2 2 μmol/L,两组差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　选择性头部降温并未加重HIBD新生儿肝脏功能损伤 ,但可能对胃肠动力存在一定影响。     

亚低温干预对缺氧缺血新生鼠脑源性神经营养因子mRNA表达的影响

目的 探讨亚低温对缺氧缺血脑损伤(HIBD)新生大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达的影响.方法 新生7日龄Wistar大鼠84只,随机分为:假手术组(n=6),31 ℃亚低温干预组(n=36),非亚低温干预组(对照组,n=36)及正常对照组(n=6).于分组后6、12、24、48、72、96 h用原位杂交技术测定BDNF mRNA.用Tunel染色和免疫组化技术检测神经元凋亡数.结果 HIBD缺血再灌注后脑组织BDNFmRNA表达增加,亚低温组HIBD脑组织BDNFmRNA表达与未干预组比较差异有统计学意义,亚低温组脑组织海马、皮层区细胞凋亡数与未干预组比较差异有统计学意义.结论 亚低温可通过增加HIBD后脑组织海马、皮层BDNFmRNA的表达水平,抑制细胞凋亡而发挥脑保护作用.     

营养不良对幼鼠癫癎持续状态后海马神经发生影响的研究

目的　探讨发育期营养不良伴发癫持续状态对海马神经发生的影响。方法　采用5 溴脱氧尿苷 (BrdU)标记新生细胞 ,β微管蛋白Ⅲ ( βⅢtubulin ,TuJ1)和胶质原纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP)分别标记早期神经元和胶质细胞的单、双标免疫组织化学染色 ,观察幼鼠海马的神经发生。结果　营养良好 (N)组和营养不良 (M)组幼鼠癫发作的潜伏时间差异无显著性 [( 12 4± 2 6)min与 ( 11 9± 2 9)min ,P >0 0 5 ]。组织学染色示各组幼鼠海马部位均无明显的神经元丢失。各组幼鼠齿状回BrdU阳性细胞数 ,营养不良 +惊厥组 (MS组 ,3 74± 18)和营养良好 +惊厥组 (NS组 ,3 12± 2 4)分别明显高于营养不良组 (M组 ,3 0 3± 2 0 )和营养良好组 (N组 ,2 69± 18) (P均 <0 0 1) ,而M组和MS组分别明显高于N组和NS组 (P均 <0 0 1)。BrdU阳性细胞中 ,约有 60 %的BrdU阳性细胞同时表达神经元特异性标记物TuJ1,5 %～ 10 %的BrdU阳性细胞同时表达神经胶质特异性标记物GFAP。结论　早期营养不良没有改变幼鼠在海藻酸致过程中惊厥的易感性和行为表现。营养不良和癫持续状态均可促进幼鼠海马齿状回新生细胞的增殖 ,营养不良伴发癫持续状态时这种增殖将进一步加强 ,而且大多数新生细胞分化为早期     

促红细胞生成素对缺氧缺血新生鼠脑损伤学习记忆能力的影响

目的 研究促红细胞生成素(EPO)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD) 新生大鼠海马的近期病理改变和远期学习记忆功能的影响.方法 新生7 d大鼠随机分3组假手术组、HIBD模型组和HIBD+EPO组.HIBD术后72 h观察脑组织病理改变、海马CA1区凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,术后28 d评估海马学习记忆功能.结果 EPO治疗能显著减轻缺氧缺血侧大脑半球水肿、梗死和出血等病理学改变.免疫组化结果显示HIBD后72 h缺血侧海马CA1区Bcl-2蛋白表达量均为HIBD+EPO组＞HIBD组＞假手术组,3者间比较差异有统计学意义.Morris水迷宫定位航行实验结果显示,5 d总平均逃逸潜伏期HIBD组(67.93±7.29) s, HIBD+EPO组(42.95±7.29) s, 假手术组(29.67±6.95) s,平均逃逸潜伏期在不同时段和不同实验组之间的差异有统计学意义;空间探索实验示HIBD组站台周边区域I搜索时间和搜索路程与HIBD+EPO组、假手术组间差异均有统计学意义,而HIBD+EPO组和假手术组间差异无统计学意义,提示HIBD鼠学习记忆能力下降, EPO干预能减轻HIBD对海马学习记忆功能的损害.结论 EPO对新生鼠缺氧缺血性脑损伤具有近期病理和远期功能保护作用,其机制与抑制细胞凋亡的发生有关.     

新生儿缺氧缺血性脑病脑血流动力学变化与血浆内皮素-1、一氧化氮的关系

目的　探讨一氧化氮 (NO)、内皮素 1 (ET 1 )在新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE)脑血流动力学变化中的作用。方法　HIE各组均在生后 48～ 72h采用经颅多谱勒超声 (TCD)检测双侧大脑前、中、后动脉收缩峰流速 (Vs)、舒张末期流速 (Vd)、搏动指数 (PI)和阻力指数 (RI) ,同时用硝酸还原酶法和放射免疫法分别测定血浆NO和ET 1水平。对照组同期进行上述检测。结果　 1 .脑血流于轻度组Vd、Vs局部降低 ;中、重度组Vd广泛降低 ,Vs呈局部降低 ,重度组尤为显著 (P均 <0 .0 5)。 2 .PI、RI轻度组与对照组无显著性差异 ;中度组局部增高 ;重度组双侧大脑动脉PI、RI普遍增高 (P均 <0 .0 5)。 3 .HIE各组NO、ET 1水平均高于对照组 ,且与病变程度成正比。但NO/ET 1比值低于对照组 (P均 <0 .0 1 ) ,且重度组 <中度组 <轻度组。结论　HIE患儿脑血流灌注减少与NO、ET 1过量合成、功能失调有关。     

Giant cerebral arterial aneurysm in an infant: Report of a case and review of 42 previous cases in infants with cerebral arterial aneurysm

A giant cerebral aneurysm with subarachnoidal hemorrhage in a 4-month-old female infant is reported. The clinical course was complicated by an electrolyte imbalance and unexpected intoxication by phenobarbital. She died as a result of the third episode of rerupture of the aneurysm on the 16th day after onset. Histological findings showed that the aneurysm was of the saccular type, 35 × 20 × 22 mm in size, arising from the basilar artery. The aneurysmal wall consisted microscopically of fibrous tissue with partial absence or fragmentation of the internal elastic lamina and muscular lamina. Forty-three cases of cerebral aneurysms during the first year of life including the present case were summarized and it was found that they could be characterized as follows: (i) a high incidence of onset in early infancy; (ii) larger than 10 mm; (iii) a large number arose from the posterior circulation of the circle of Willis; and (iv) a poor prognosis of non-operated groups, especially in the posterior circulation.     

新生儿缺氧缺血性脑病血浆神经肽Y与催乳素水平变化的研究

目的 探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)血浆神经肽Y(NPY)与催乳素(PRL)水平的变化。方法应用放射免疫分析法测定32例新生儿HIE及12例对照组血浆NPY与PRL水平变化。结果 HIE组急性期血浆NPY与PRL水平均显著高于对照组(P均<0.01),中、重度HIE急性期血浆NPY与PRL水平均显著高于恢复期(P均<0.01);HIE惊厥组急性期血浆NPY与PRL水平显著高于非惊厥组(P均<0.01)。病程中NPY与PRL水平变化呈正相关。结论 血浆NPY和PRL水平与HIE脑损伤及其程度密切相关,并与HIE惊厥发作有关,可作为判断新生儿脑损伤程度及惊厥是否发作的指标之一。     

黄体酮对缺氧小鼠脑损伤的影响

目的观察小鼠缺氧后脑组织水、钾、钠含量的变化,探讨黄体酮(PROG)在脑缺氧中的神经保护作用。方法32只雄性小鼠随机分为正常对照组、单纯缺氧组、低PROG组和高PROG组,后两组于缺氧前30min腹腔注射.PROG4mg/kg或8mg/kg。小鼠缺氧24h断头取脑.测脑组织的水、钾、钠含量。结果缺氧24h后,缺氧组脑组织水、钾、钠含量均明显高于正常对照组(P<0.01)。经PROG预处理的两组与单纯缺氧组相比,脑组织水、钾、钠含量均有所下降,低PROG(4mg/k)组的疗效尤为明显.水下降4.95%(P<0.01),钾下降24.6%(P<0.01).钠下降17.6%(P<0.01);高PROG(8mg/kg)组水含量下降有显著差异(P<0.01),但钾、钠下降不显著(P>0.05)。结论小鼠缺氧24h后脑组织水、钾、钠含量明显升高.PROG可抑制缺氧脑内水、钾、钠的升高,产生一定的神经保护作用。     

实验性新生儿缺氧缺血脑损伤模型鼠脑细胞凋亡动态变化

目的 探讨新生儿缺氧缺血脑损伤（ＨＩＥ）后皮质、海马细胞凋亡现象和动态过程。方法 制作标准化ＨＩＥ实验模型,应用ＤＮＡ原位末端标记（ＴＵＮＥＬ）、ＨＥ染色、电镜方法,对凋亡出现时间和强度进行观察和比较。结果 缺氧缺血后新生鼠脑细胞死亡具有典型凋亡特征,光镜、电镜观察到核膜皱缩、染色质凝聚,阳性ＴＵＮＥＬ着色细胞核。随着缺血时间的增加,细胞凋亡数逐渐增加,皮质约在１８小时点、海马４０小时点达高峰。结     

Frequency of sub-clinical cerebral edema in children with diabetic ketoacidosis

Symptomatic cerebral edema occurs in approximately 1% of children with diabetic ketoacidosis (DKA). However, asymptomatic or subclinical cerebral edema is thought to occur more frequently. Some small studies have found narrowing of the cerebral ventricles indicating cerebral edema in most or all children with DKA, but other studies have not detected narrowing in ventricle size. In this study, we measured the intercaudate width of the frontal horns of the lateral ventricles using magnetic resonance imaging (MRI) in children with DKA during treatment and after recovery from the DKA episode. We determined the frequency of ventricular narrowing and compared clinical and biochemical data for children with and without ventricular narrowing. Forty-one children completed the study protocol. The lateral ventricles were significantly smaller during DKA treatment (mean width, 9.3 +/- 0.3 vs. 10.2 +/- 0.3 mm after recovery from DKA, p < 0.001). Children with ventricular narrowing during DKA treatment (22 children, 54%) were more likely to have mental status abnormalities than those without narrowing [12/22 vs. 4/19 with Glasgow Coma Scale (GCS) scores below 15 during therapy, p = 0.03]. Multiple logistic regression analysis revealed that a lower initial PCO2 level was significantly associated with ventricular narrowing [odds ratio (OR) = 0.88, 95% confidence interval (95% CI) = 0.78-0.99, p = 0.047). No other variables analyzed were associated with ventricular narrowing in the multivariate analysis. We conclude that narrowing of the lateral ventricles is evident in just over half of children being treated for DKA. Although children with ventricular narrowing did not exhibit neurological abnormalities sufficient for a diagnosis of 'symptomatic cerebral edema', mild mental status abnormalities occurred frequently, suggesting that clinical evidence of cerebral edema in children with DKA may be more common than previously reported.     

Cerebral palsy in Victoria, Australia: mortality and causes of death

OBJECTIVE: To study the causes of death and the characteristics of children with cerebral palsy that had died over a 25-year period in Victoria, Australia. METHODOLOGY: Names of children that had died were collected from the Victorian Cerebral Palsy Register. Their hospital records were studied and information was gathered about age of death, motor impairment, the presence or absence of associated disabilities and cause of death. RESULTS: One hundred and fifty-five children had died during the period 1970-95. The majority of children had severe spastic quadriplegia, intellectual disability and epilepsy. The predominant cause of death was pneumonia, although for many children who died at home the cause was unknown. CONCLUSIONS: Children with cerebral palsy are a diverse group and those with a severe motor deficit have a reduced life expectancy. Lung disease remains an important cause of morbidity and mortality for this group. Further information about the causes of death is needed, particularly for those children that die at home.     

儿童脑型疟128例的诊断和治疗

目的了解儿童脑型疟临床特征和降低其病死率。 方法对1996～1997年住院128例儿童脑型疟的临床特征、诊断治疗、病死原因进行分析。 结果1～5a儿童发生率66％,痊愈113例,后遗症4例,死亡11例,死亡率8．6％。临床特征有发热、咳嗽、吐泻、惊厥、意识障碍等。血片见疟原虫可确诊,首次阴性应反复多次检查。惊厥、意识障碍者应排除其他疾患。 结论及时正确诊断,尽早抗疟治疗,对抗药性及有并发症等治疗是降低儿童脑型疟病死率的关键。     

低温对新生大鼠缺氧缺血后脑组织硝基酪氨酸形成及细胞骨架蛋白降解影响

目的 探讨低温对新生大鼠脑缺氧缺血(HI)后硝基酪氨酸形成及细胞骨架蛋白(微管相关蛋白-2和胞衬蛋白)降解影响。方法 结扎7日龄Wistar大鼠左侧颈总动脉后吸入7.8％氧气60 min制成HI模型,随机分成低温组(30℃,n=18)和常温组(36℃,n=18),均予维持恒定目标温度10 h。每组8只,在HI后24 h处死,脑组织匀浆用于Western蛋白印迹检查,余每组10只在HI后72 h处死,进行硝基酪氨酸免疫组织化学染色。结果 正常脑组织有少量硝基酪氨酸形成,在HI后24 h硝基酪氨酸生成明显增加,低温干预后硝基酪氨酸生成减少,HI后72 h皮层及海马齿状回的硝基酪氨酸的阳性细胞数低温组明显低于常温组(P<0.02,P<0.01)。微管相关蛋白-2的相对分子质量820、70条带在低温组降解明显低于常温组,胞衬蛋白在HI后降解为相对分子质量150、120两条带,低温组胞衬蛋白降解明显减少。结论 低温能抑制硝基酪氨酸生成和细胞骨架蛋白的降解,对缺氧缺血性脑损伤的保护作用可能与抑制一氧化氮合酶、钙离子蛋白酶和半胱天冬酶的活性有关。