Th17、Treg细胞在儿童哮喘中的表达及平衡的意义

目的 检测哮喘儿童外周血中Th17细胞（辅助性T细胞17型）、Treg细胞（调节性T细胞）及其相关细胞因子IL-17、IL-10的表达水平,分析并探讨Th17/Treg平衡参与儿童哮喘发病机制中的作用,为儿童哮喘的防治提供新的治疗靶点.方法 收集轻、中、重度哮喘患儿各15例,健康志愿者10例作为对照组,检测外周血Th17细胞及其胞内细胞因子IL-17,Treg细胞及其胞内细胞因子IL-10的表达、比例,进行统计学分析及相关性分析.结果 （1）Th17细胞表达率与IL-17的表达水平,重度、中度哮喘患儿明显高于对照组（均P＜0.05）.（2）Treg细胞表达率与IL-10的表达水平,重度患儿较轻度患儿、对照组高表达（均P＜0.05）,中度、轻度哮喘患儿间差异无统计学意义（均P＞0.05）.（3）Th17细胞、IL-17水平与哮喘患儿的严重程度呈正相关（r=0.753,P＜0.05）,Treg细胞、IL-10水平与哮喘患儿的严重程度呈负相关（r=0.895,P＜0.05）,Th17细胞与Treg细胞在哮喘患儿的严重程度上呈显著负相关（r=0.632,P＜0.01）.结论 在儿童支气管哮喘的发病中,Treg/Th17免疫应答失衡,在一定程度上影响哮喘的严重程度及症状控制.     

原发性干燥综合征患者外周血中 IL-10和 TGF-β1的表达水平及其临床意义

目的：探讨白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β1（TGF-β1）在原发性干燥综合征（pSS）发病中的作用。方法酶联免疫吸附试验（ELISA）测定56例 pSS 患者（pSS 组）及39例健康体检者（正常对照组）血清中 IL-10和 TGF-β1的表达水平,比较治疗前、后 pSS 患者与正常健康对照组血清 IL-10和 TGF-β1表达水平之间的差异及相关性,并比较其与 ESR、Ig、C3、C4之间的相关性。结果 pSS 患者血清 IL-10和 TGF-β1表达水平在 pSS 患者中血清的表达水平显著高于健康对照组正常人（P ＜0．05）,经治疗后,其血清 IL-10和 TGF-β1表达水平较治疗前均显著减低,差异有统计学意义（P ＜0．05）,血清 IL-10和 TGF-β1表达水平呈正相关性（r＝0．613,P ＜0．05）;血清IL-10和 TGF-β1表达水平与 ESR 呈正相关性（r＝0．592,P ＜0．05;r＝0．316,P ＜0．05）。结论 IL-10和 TGF-β1参与 pSS 的发病过程且与疾病活动性相关。     

IL-35 Th17/Treg失衡在系统性红斑狼疮中的表达与意义

目的 分析系统性红斑狼疮（SLE）患者血清白细胞介素-35（IL-35）水平、外周血辅助性T细胞17（Th17）和调节性T细胞（Treg）的变化,探讨IL-35及Th17/Treg失衡在SLE发展中的作用。方法 选取2019年1月至4月在南京鼓楼医院就诊的54例新发SLE患者为研究对象,根据SLE疾病活动度（SLEDAI）分为轻度活动组,26例;中度活动组,10例;重度活动组,18例。另外选择同时期体检中心健康体检者30例作为对照组。用酶联免疫吸附法（ELISA）检测4组研究对象血清IL-35水平,流式细胞术检测外周血Th17与Treg细胞占T细胞的比例,比较4组血清IL-35及外周血Treg、Th17、Th17/Treg表达水平,并采用Pearson相关性分析IL-35与Treg、Th17、Th17/Treg和SLEDAI的相关性。结果 SLE组患者Th17细胞百分比、Th17/Treg比值均高于对照组,IL-35水平、Treg细胞百分比均低于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。重度活动组Th17细胞百分比高于中度活动组,中度活动组高于轻度活动组,差异均有统计学意义（P<0.05）;3组SLE患者Treg细胞百分比比较,差异无统计学意义（P>0.05）;中度活动组IL-35水平低于轻度活动组,而Th17/Treg高于轻度活动组,差异均有统计学意义（P<0.05）,重度活动组与中度活动组IL-35、Th17/Treg表达比较,差异无统计学意义（P>0.05）。Pearson相关性分析显示,SLE患者IL-35水平与Treg呈显著正相关（r=0.373,P=0.006）,与Th17、Th17/Treg和SLEDAI呈负相关（r=-0.563,-0.480,-0.686,P<0.001）。SLE患者经过短暂治疗后IL-35与Treg表达较治疗前升高,Th17与Th17/Treg的表达较治疗前降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 SLE患者体内血清IL-35水平降低,并与SLE患者病情活动相关;低表达的IL-35可能参与了Th17/Treg的失衡,促进SLE的形成。     

药物流产出血模型小鼠雌、孕激素水平与Th17/Treg亚群的关系#br#

摘要：目的　研究药物流产出血模型小鼠的雌、孕激素水平与Th17/Treg亚群的关系。方法　选取清洁级Balb/c雌性小鼠32只,通过随机数字表法分为正常妊娠组（A组）、小剂量米非司酮组（B组）、大剂量米非司酮组（C组）、米非司酮+宫清颗粒组（D组）,每组8只。B、C、D组小鼠于妊娠第6天时分别使用米非司酮0.88 mg·kg-1·d-1、1.5 mg·kg-1·d-1及米非司酮（1.5 mg·kg-1·d-1）+宫清颗粒组（308.16 mg·kg-1·d-1）灌胃。采用改良碱性正铁血红素法检测子宫出血量;采用放射免疫法检测血清雌二醇（E2）、孕酮（P）水平;采用流式细胞术双染色法检测子宫组织Th17（CD3+CD4+IL-17A+）、Treg（CD4+CD25+Foxp3+）及Th17/Treg亚群比值;采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测子宫组织白细胞介素（IL）-17A、IL-10、转化生长因子（TGF）-β mRNA水平。结果　B、C、D组子宫出血量依次减少。药物流产后,A、B、C、D组小鼠E2水平依次升高,而P水平依次降低。Th17亚群依次升高,Treg亚群依次降低,Th17/Treg亚群比值依次升高（均P＜0.05）。IL-17A mRNA相对表达量依次升高,而IL-10、TGF-β mRNA相对表达量依次降低（均P＜0.05）。血清E2与Th17、Th17/Treg和IL-17A水平呈正相关,与Treg、IL-10和TGF-β水平呈负相关;血清P与Treg、IL-10和TGF-β水平呈正相关,与Th17、Th17/Treg和IL-17A水平呈负相关（均P＜0.05）。结论　药物流产后的异常子宫出血血清E2、P水平变化与Th17/Treg亚群比值变化关系密切,诱导Th17/Treg亚群向Th17偏移有助于减少子宫出血。     

慢性阻塞性肺病稳定期患者外周血Th17/Treg失衡情况及与预后的关系

目的：观察慢性阻塞性肺病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）稳定期患者外周血中Th17与Treg细胞的水平.方法：选取本院2010年1月-2012年12月间确诊的40例COPD稳定期患者,选取同期40例健康体检健康人群作为对照组,收集两组人群的外周血后采用流式细胞术检测各个人群Th17与Treg细胞亚群的比例,采用ELISA法检测血清中的IL-17、TGF-β水平,采用RT-PCR检测转录因子RORγT与Foxp3 mRNA水平.结果：COPD稳定期患者外周血中Th17比例为（3.14±0.31）％,显著高于对照组人群的（1.23±0.24）％,差异有统计学意义（P＜0.05）;COPD稳定期患者外周血中Treg比例为（6.27±0.32）％,显著高于对照组人群的（3.43±0.32）％,差异有统计学意义（P＜0.01）;COPD稳定期患者外周血中IL-17水平为（89.36±4.13） pg/mL,显著高于对照组的（30.35±2.53） pg/mL,差异有统计学意义（P＜0.05）;COPD稳定期患者外周血中TGF-β水平为（681.45±41.65） pg/mL,显著高于对照组人群的（519.36±30.43） pg/mL,差异有统计学意义（P＜0.01）;COPD稳定期患者外周血转录因子Foxp3与RORγT mRNA水平均显著高于对照组人群,差异有统计学意义（均P＜0.01）.COPD稳定期患者Th17、Treg比例高水平的住院天数和病死率均高于对应低水平亚组（P＜0.05）.结论：Th17、Treg细胞及IL-17、TGF-β水平在COPD稳定期患者外周血表达增加,且转录因子Foxp3与RORγT mRNA水平表达增加,提示其与COPD患者的预后有关,其外周血中Th17与Treg细胞的不平衡可能参与了COPD发病和病程的进展.     

再生障碍性贫血患者Treg细胞及血清IL-10、IL-35、TGF-β的表达及意义

目的 研究再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)患者调节性T细胞(Treg细胞)及血清白介素-10(IL-10)、IL-35、转化生长因子-β(TGF-β)的表达及意义.方法 选取2014年1月-2016年2月收治的40例AA患者为再生障碍组,40例造血恢复的AA患者为造血恢复组,另选取同时期40例体检的正常人为正常组.观察3组被检者外周血T淋巴细胞与其相关因子IL-10、IL-35、TGF-β表达情况.结果 再生障碍组CD4+、Treg细胞含量低于造血恢复组与正常组(P＜0.05),造血恢复组低于正常组(P＜0.05).再生障碍组CD8+细胞含量高于造血恢复组与正常组(P＜0.05),造血恢复组高于正常组(P＜0.05).再生障碍组血清IL-10、IL-35和TGF-β水平低于造血恢复组与正常组(P＜0.05).结论 Treg细胞及其相关因子IL-10、IL-35、TGF-β可能直接参与AA的发生和发展,在AA发病机制中起着重要作用,可作为检测AA临床疗效的指标.     

膝骨性关节炎患者血清白细胞介素-1、6和转化生长因子-β1水平的变化及意义

目的：探讨血清IL-1、IL-6和TGF-β1水平在膝骨性关节炎患者中的变化及临床意义。方法应用酶联免疫吸附法检测80例膝骨性关节炎患者血清IL-1、IL-6和TGF-β1水平,并以80例健康体检者作对照。结果膝骨性关节炎患者血清中IL-1和IL-6水平均高于对照组（t＝71.132、78．503,均P＜0.01）,而TGF-β1水平则低于对照组（t＝36．165,P＜0．01）;随着病变程度加重,血清中IL-1和IL-6水平显著增加,而TGF-β1水平则显著降低;血清IL-1、IL-6水平与血清TGF-β1水平呈显著负相关（ r＝-0．633,r＝-0．615;均P＜0．05）,IL-1与IL-6呈显著正相关（r＝0．730,P＜0．01）。结论膝骨性关节炎患者血清IL-1、IL-6和TGF-β1水平反映了病情轻重及关节损伤程度,对病情和预后判断有重要价值。     

IL-4、IFN-γ和TGF-β_1与系统性红斑狼疮的关系

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)与白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、生长转化因子β1(TGF-β1)的关系.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定36例SLE患者和17例健康对照组的外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中IL-4、IFN-γ、TGF-β1的含量.结果 Th1/Th2升高组的IFN-γ测值高(P＜0.05),IL-4与健康对照组相比无显著差异(P＞0.05);Th1/Th2降低组的IFN-γ测值低(P＜0.05),IL-4测值高(P＜0.05);Th1/Th2降低组的TGF-β1高于Th1/Th2升高组,但两组相比无显著差异(P＞0.05).结论 Th1和Th2细胞极化增强均参与了SLE的发病,TGF-β1可能与SLE患者的Th1、Th2细胞极化异常有关.     

CD4+CD25+调节性T细胞及Th17细胞与Graves病机制研究

目的：探讨CD4+CD25+调节性T细胞以及Th17细胞与Graves病的关系。方法：检测GD患者和对照组外周血单个核细胞CD4+CD25+Tregs、Th17细胞的数量,PBMC中TGF-β、IL-10和FoxP3 mRNA的表达水平以及血清TGF-β、IL-10和IL-17水平。结果：GD组外周血Th17数量高于对照组,血清中IL-17水平也高于对照组（P＜0.05）;而CD4+CD25+Tregs的数量低于对照组,而且TGF-β、FoxP3表达水平低于对照组（P＜0.05）;GD组血清中TGF-β、IL-10水平高于对照组（P＜0.05）。结论：CD4+CD25+Tregs数量的减少或功能障碍以及Th17细胞数量的升高,可能参与GD的发病过程。     

犀角地黄汤合方含药血清调节ITP患者Teff/Treg分化及功能的研究#br#

目的　探究犀角地黄汤合方含药血清对免疫性血小板减少症（ITP）患者效应性T细胞（Teff）/调节性T细胞（Treg）分化的影响,并探讨磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路在其中的作用机制。方法　采用随机数字表法将20只大鼠分为含药血清组和空白血清组,每组10只,分别使用犀角地黄汤合方颗粒和蒸馏水连续灌胃3 d,收取2组大鼠全血制备含药血清和空白血清。收集健康志愿者和ITP患者外周血,提取外周血单个核细胞（PBMC）,磁珠分选CD4+ T细胞,抗CD3/CD28抗体培养体系活化后,分为对照组、模型组和实验组。对照组为健康志愿者CD4+ T细胞,模型组及实验组为ITP患者CD4+ T细胞,实验组采用含药血清干预72 h,对照组及模型组采用大鼠空白血清干预72 h。流式细胞术检测各组CD4+ T细胞中Teff/Treg比例;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组培养上清液中白细胞介素（IL）-2、干扰素（IFN）-γ、肿瘤坏死因子（TNF）-α、IL-6、IL-17及Treg细胞因子转化生长因子（TGF）-β、IL-10水平;Western blot检测PI3K、Akt、mTOR蛋白及磷酸化蛋白水平。结果　CD4阳性率为（99.44±0.01）%。与对照组相比,模型组CD4+ T细胞中Teff细胞比例明显升高,Treg比例明显降低,Teff/Treg比值增大,IL-2、IL-6、IL-17、IFN-γ、TNF-α水平以及PI3K、p-PI3K、mTOR、p-mTOR蛋白水平升高,TGF-β、IL-10、p-Akt蛋白水平降低（P＜0.05）;与模型组相比,实验组CD4+ T细胞中Teff细胞比例降低,Treg细胞比例升高,Teff/Treg比值减小,IL-2、IL-6、IL-17、IFN-γ、TNF-α水平以及PI3K、p-PI3K、mTOR、p-mTOR蛋白水平降低,TGF-β、IL-10水平升高（P＜0.05）。结论　犀角地黄汤合方含药血清能够调节ITP患者Teff/Treg的分化及细胞因子的分泌,可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路PI3K、mTOR蛋白表达及其磷酸化水平有关。     

细胞因子IL-33对肿瘤微环境的影响及其抗肿瘤作用

目的 探讨细胞因子IL-33对肿瘤微环境的影响及其抗肿瘤作用.方法 将70只小鼠分为对照组10只、干预组30只、模型组30只,其中干预组和模型组皮下接种H22细胞,造模饲养一周后干预组给予重组小鼠IL-33蛋白皮下注射,干预两周后比较小鼠肿瘤大小、血清IL-2、IL-4、IL-I0、IL-12p40、IFN-γ浓度、肿瘤微环境当中Th1型免疫应答以及瘤体OPN、TGF-β表达情况.结果 采用IL-33干预后,干预组小鼠肿瘤体积显著小于模型组,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比较,模型组IL-2、IL-12p40、IFN-γ显著降低(P＜0.05),IL-4显著升高(P＜0.05);干预组IL-2、IL-12p40、IFN-γ显著升高(P＜0.05),IL-4以及IL-10显著降低(P＜0.05);模型组与干预组各项血清指标比较差异有统计学意义(P＜0.05);干预组小鼠肿瘤肿瘤中浸润的CD45+免疫细胞百分比显著高于模型组小鼠(P＜0.05);干预组小鼠肿瘤肿瘤中浸润的CD45+免疫细胞百分比显著高于模型组小鼠(P＜0.05),且干预组小鼠肿瘤中CD8+T、NK细胞百分比均显著高于对照组(P＜0.05);干预组小鼠瘤体组织中OPN、TGF-β蛋白表达均较模型组有所降低.结论 细胞因子IL-33可明显抑制肿瘤的生长,调节肿瘤微环境中Th1/Th2免疫应答,且抑制肿瘤中TGF-β、OPN蛋白的表达,具有着潜的抗肿瘤作用,为肿瘤的免疫治疗提供了新的方向.     

T辅助细胞亚型细胞相关因子在类风湿关节炎发病中的作用

目的探讨T辅助细胞(Th)1、Th2、Th17、调节性细胞(Treg)相关细胞因子在类风湿关节炎(RA)发病中的作用。方法选取71例RA患者作为研究对象,并根据DAS28评分,分为高、中、低活动组,采集试验对象及健康对照组(18名)外周血,采用微量样本多指标流式蛋白定量技术(CBA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α和转化生长因子(TGF)-β8种细胞因子血清浓度。结果 RA患者IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、IFN-γ、TNF-α血清浓度与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);TGF-β血清浓度与健康对照组比较差异无统计学意义(P=0.078);并且随着DAS28的不同其血清浓度也不同。结论推测Th1、Th2、Th17、Treg细胞的相关因子均参与了RA的致病过程,并且在不同的发病阶段发挥不同的作用。     

急性白血病患者血清IFN-γ、TGF-β、IL-6和IL-17水平及临床意义

目的 研究急性白血病患者血清干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)、白介素-6(IL-6)和IL-17表达情况以及临床意义.方法 选取2014年4月-2016年3月收治的96例急性白血病患者为观察对象,按FAB分型标准分为急性淋巴细胞白血病(ALL)组35例,急性髓细胞白血病(AML)组61例.另选同期健康体检者96例为对照组.采用酶联免疫吸附法检测急性白血病患者治疗前后及对照组血清IFN-γ、TGF-β、IL-6和IL-17的表达情况.结果 治疗前,ALL组与AML组血清IFN-γ水平明显低于对照组(P＜0.05),TGF-β、IL-6、IL-17水平明显高于对照组(P＜0.05).ALL组血清IFN-γ与IL-6水平高于AML组(P＜0.05).ALL组和AML组治疗后,完全缓解患者血清IFN-γ水平高于未缓解患者(P＜0.05),TGF-β、IL-6和IL-17水平低于未缓解患者(P＜0.05).ALL组和AML组中,IFN-γ与TGF-β、IL-6和IL-17呈负相关(P＜0.05),TGF-β与IL-6和IL-17呈正相关(P＜0.05),IL-6与IL-17呈正相关(P＜0.05).结论血清IFN-γ 、TGF-β、IL-6和IL-17与急性白血病的发生、发展有关,可作为临床诊断急性白血病与评价其预后的重要指标.     

Th17/Treg平衡在类风湿关节炎中作用的研究进展

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性多关节滑膜炎为主要特征的自身免疫性疾病。虽然目前对于RA的确切发病机制尚不明确,但一般认为和T细胞相关。最近研究发现调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)和Th17细胞在RA的发生发展中发挥重要作用。Th17细胞能够分泌促炎症因子IL-17,通过诱导基质金属蛋白酶(ma-trix metallo proteinases,MMPs)和破骨细胞生成,促进骨滑膜炎症、骨和关节损伤;而Treg则通过释放抑制性细胞因子IL-10和TGF-β发挥免疫效应,调控RA中的炎症性免疫应答过程。单独TGF-β作用下诱导初始T细胞分化为Treg,而在TGF-β和IL-6共同作用下诱导初始T细胞分化为Th17细胞,因此,Th17和Treg细胞在特定的细胞因子微环境下可以相互转化。调节Th17/Treg之间的平衡可能成为治疗RA的新方法。该文将对Th17/Treg平衡在RA发生发展中的调节作用作一综述。     

ITP中IFN-γ和IL-4 mRNA表达与其甲基化水平的相关性研究

目的:检测免疫性血小板减少症(ITP)患者的干扰素(IFN)-γ和白细胞介素(IL)-4的mRNA表达水平及其各自基因启动子区DNA甲基化的水平.方法:取36例ITP患者(ITP组)和36例正常对照(对照组)外周血,采用实时定量PCR方法检测IFN-γ和IL-4的mRNA水平;随机抽取2组中的各10例,采用DNA甲基化修饰后测序的方法检测IFN-γ和IL-4基因启动子区的甲基化水平,并计算IFN-γ和IL-4基因的mRNA水平与其基因启动子区DNA甲基化水平的相关性.结果:与对照组相比,ITP组IFN-γ的mRNA水平增高(1.86±0.29 vs 0.83±0.14,P＜0.05),而IL-4的mRNA水平降低(0.78±0.22 vs 1.45±0.40,P＜0.05),Th1/Th2(IFN-γ/IL-4)比值升高(7.11±0.60vs 3.12±1.88,P＜0.01).2组IFN-γ和IL-4基因CpG岛的位点甲基化水平和整体甲基化水平差异均无统计学意义(P＞0.05).ITP组中IFN-γ和IL-4的mRNA表达水平与基因启动子区甲基化水平不存在相关性(均P＞0.05).结论:ITP患者处于Th1极化状态,IFN-γ和IL-4的基因启动子区的甲基化水平对各自基因mRNA水平的表达不起调控作用.