防治奶牛乳房炎中药组方的筛选及其抑菌杀菌作用研究

试验根据中兽医治疗奶牛乳房炎的辨证施治原则,筛选出抑制引起奶牛乳房炎主要病原菌（金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）的最佳中药组方,为其临床防治提供新的途径与方法。选用蒲公英、马齿苋、金银花、紫花地丁、赤芍、白芍、菊花、黄芩、漏芦、红花10味中药,通过L₁₂（2¹¹）正交试验初步筛选抗菌中药组方中的最佳优选因素,再通过L₁₆（4⁵）正交试验进一步筛选药物组方配比;采用牛津杯法测定中药组方对奶牛乳房炎主要致病菌的体外抑菌效果;采用二倍稀释法和平板计数法分别测定中药组方对奶牛乳房炎主要致病菌最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果显示,通过L₁₂（2¹¹）正交试验初步筛选出了抗菌中药组方最佳优选因素：赤芍、黄芩、红花、菊花和白芍;L₁₆（4⁵）正交试验进一步筛选药物组方最佳配比为黄芩：赤芍：菊花：白芍：红花=3：3：3：1：2;新药组方对大肠杆菌的抑菌直径为17.39 mm,MIC和MBC分别为62.50、125.00 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的抑菌直径为25.44 mm,MIC和MBC均为31.25 mg/mL。本研究成功筛选出了一种对奶牛乳房炎主要致病菌具有良好抑菌、杀菌作用的中药新配比组方。     

正交法筛选治疗奶牛乳房炎的中药组方

为筛选最佳抑菌效果的中药组方,对从奶牛乳房炎中分离出的3种主要致病菌,采用琼脂平板打孔法对25味中药进行体外抑菌试验,选出8味对3种致病菌较敏感的清热类中药和5味抑菌效果较好的活血、补益类中药,共13味中药,通过正交试验,筛选出最佳抑菌效果的药物组方。结果发现,最佳组方为黄柏、黄芩、当归、车前草、蒲公英、赤芍、甘草、白芍、丹参。     

抗马链球菌马亚种组方加味优选及其体内抑菌作用研究

【目的】筛选可抑制马腺疫主要致病菌——马链球菌马亚种的最优中药组方,为临床马腺疫的防治提供参考。【方法】选用赤芍、大黄、山豆根等27种中药,首先通过体外抑菌试验(牛津杯法、最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)、联合药敏试验)结合L₈(2⁶)正交试验初步筛选抗马链球菌马亚种中药组方的最佳优选因素,再通过L₁₈(3⁶)正交试验进一步筛选基础组方最佳配比;最后在基础组方的基础上,根据中兽医方剂配伍理论,添加黄芪和当归2味补虚药,通过马腺疫小鼠模型体内抑菌试验筛选加味组方配比,结合组方保护率结果及组织脏器病理变化验证加味组方的体内抑菌作用。【结果】试验筛选出了马链球菌马亚种超敏和高敏的7味中药:浙贝母、赤芍、甘草、大黄、雪白睡莲、山豆根和苦参。大黄、雪白睡莲、山豆根、甘草、苦参和浙贝母的MIC分别为0.078、0.078、0.125、0.156、0.156和0.250 mg/mL。雪白睡莲、赤芍、山豆根、甘草、大黄、苦参和浙贝母的MBC分别为0.078、0.125、0.125、0.156、0.156、0.156和0.250 g/mL。根据各单味药物的MIC和两两联合后的MIC计算得出浙贝母与雪白睡莲联合药敏指数＞2,二者存在颉颃作用,故剔删浙贝母。通过2次正交试验得出基础组方最佳配比为:赤芍∶甘草∶大黄∶雪白睡莲∶山豆根∶苦参＝4∶2∶2∶4∶4∶1;结合加味组方体内抑菌试验可知,黄芪∶当归=1∶1、配伍浓度为0.5 g/mL时,保护率可达87.5%,且中药组方对马链球菌马亚种所致的小鼠肺脏炎性损伤修复良好。【结论】本试验成功优选出1种对马腺疫主要致病菌——马链球菌马亚种具有良好抑菌、组织保护作用的中药组方,配比为:赤芍∶甘草∶大黄∶雪白睡莲∶山豆根∶苦参∶黄芪当归(1∶1)=4∶2∶2∶4∶4∶1∶1。     

22味中草药对3种奶牛乳腺炎病原菌的体外抑菌试验

本研究采用平板挖洞灌药法,选择连翘、黄柏、蒲公英等22味中草药对奶牛乳腺炎3种主要致病菌进行体外抑菌试验,并测定所筛选的4味中药的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。试验结果表明,黄芩、桉叶、蒲公英、丹参4味中药对奶牛乳腺炎3种病原菌的综合效果较好,从而为研制治疗奶牛乳房炎的方剂提供理论依据。     

22味中草药对3种奶牛乳腺炎病原菌的体外抑菌试验

为研制治疗奶牛乳房炎的方剂采用平板挖洞灌药法,选择连翘、黄柏、蒲公英草等22味中草药对奶牛乳腺炎3种主要致病菌进行了体外抑菌试验,并进一步测定了所筛选的4味中药的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。试验结果表明,黄芩、桉叶、蒲公英、丹参4味中药对奶牛乳腺炎3种病原菌茵的综合效果较好。     

奶牛隐性乳房炎敏感性中草药组方随机区组筛选试验

为了选取效果最佳的中草药组方,试验采用水提醇沉法制备7组以红花、黄连、紫花地丁、蒲公英、连翘、野菊花、浙贝母、当归、柴胡、黄芪、黄柏、黄芩、金银花等中草药为基础的制剂,用7组中草药组方制剂对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、停乳链球菌进行体外最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)试验。结果表明:中草药组方Ⅱ对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、停乳链球菌的抑菌及杀菌效果最好,与其他中草药组方相比差异显著(P<0.05)。说明中草药组方Ⅱ(黄连、红花、连翘、黄芩)是防治奶牛隐性乳房炎的最佳中草药组方。     

治疗奶牛乳房炎蒙药复方中最佳抑菌成分复方的筛选研究

为了筛选治疗奶牛乳房炎的最佳抑菌组方,试验采用牛津杯法从乳房炎患牛乳样中分离出致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,再从治疗奶牛乳房炎蒙药复方的9种有效成分中筛选出4种对这2种细菌均有最佳抑菌效果的成分;根据抑菌圈直径,结合L8(24)正交试验设计,筛选出最佳成分组方,再根据L9(34)正交试验优化用药剂量,进行体内抑菌试验,选出保护率最佳的抑菌组方。结果表明:抑菌组方与盐酸环丙沙星的抗菌保护率均为62.5%。说明抑菌组方体内抑菌效果与盐酸环丙沙星相当,并且获得了治疗奶牛乳房炎纯天然蒙药抑菌成分复方。     

24种中药及复方制剂对奶牛隐性乳房炎主要致病菌的抑菌试验

选取蒲公英、黄芪等24味中药及组成的两个复方制剂进行浸液制备。分别利用单味中药和两个复方制剂对致奶牛乳房炎的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌等进行体外抑菌试验,测定各种中药的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明蒲公英、复方制剂一、复方制剂二对奶牛乳房炎主要致病菌具有很好的抑菌和杀菌作用。     

22味中药及其复方对奶牛乳房炎病原菌金黄色葡萄球菌的体外抑菌试验研究

为了筛选有效中药抑制奶牛乳房炎病原菌金黄色葡萄球菌，采用药敏片法测定黄芩等22味中药的体外抑菌效果。采用水提法制备中药药液，浓缩为生药1 g?mL-1，测定22味中药对金黄色葡萄球菌的体外抑菌圈直径、最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果表明：黄芩和地榆对金黄色葡萄球菌呈高度敏感，白术、丹皮等5味中药均属中度敏感。选取体外抑菌效果最好的黄芩和地榆加上白术、丹皮组成不同比例复方进行抑菌实验，结果表明：复方Ⅱ和复方Ⅶ的抑菌和杀菌效果最佳，其MIC和MBC均为31.25 mg?mL-1。     

治疗奶牛子宫内膜炎中药泡腾栓的筛选及研制

为治疗奶牛子宫内膜炎筛选合适的中药组方,制备成中药泡腾栓,试验采用正交方法和试管二倍稀释法,选取蒲公英、当归、川芎等11味中药提取物颗粒,对奶牛子宫内膜炎主要致病菌进行抑菌试验,筛选合适的中药组方并确定组方的抑菌效果;采用正交试验筛选泡腾栓基质最佳配比,制备成中药泡腾栓剂,并确定中药泡腾栓剂的抑菌效果。结果表明:筛选的中药组方对奶牛子宫内膜炎主要致病菌有明显的抑制作用;泡腾栓优选配比为PEG-6000 1.40 g,碳酸氢钠0.26 g,柠檬酸0.24 g,吐温-80 0.03 g,主药含量0.404 g,中药泡腾栓质量检查符合中国药典的规定,并且对奶牛子宫内膜炎主要致病菌的抑制效果和原药相近。制备的中药泡腾栓符合临床用药标准,可初步用于临床中试来治疗奶牛子宫内膜炎。     

17味中药及其复方对奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的体外抑菌试验研究

[目的]探索17味中药及其复方对奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果。[方法]本试验以山东省某奶牛场患乳房炎奶牛乳样中分离和保存的金黄色葡萄球菌作为研究对象,采用药敏试验和试管二倍稀释法,分别确定金黄葡萄球菌对17味中药的药物敏感性,测定最低抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）,以此选取对金黄色葡萄球菌高度敏感的中药两两组合制成双联中药复方,并采用微量肉汤稀释棋盘法测定双联中药复方对金黄色葡萄球菌的MIC,计算双联中药复方的分级抑菌浓度（FIC）。[结果]黄芩、连翘和五倍子3味中药对金黄色葡萄球菌的抑菌表现为高度敏感;黄芩对金黄色葡萄球菌MIC和MBC的检测结果分别为7.813 mg/mL和15.625 mg/mL;连翘和五倍子2味中药对金黄色葡萄球菌MIC和MBC的检测结果分别为15.625 mg/mL和31.25 mg/mL;黄芩+连翘、黄芩+五倍子、连翘+五倍子3种双联中药复方对金黄色葡萄球菌MIC的检测结果均为15.625 mg/mL,且双联中药间均表现无关作用。[结论]对奶牛乳房炎金黄色葡萄球抑菌效果较好的单味中药组成复方后,其抑菌效果未必增强。     

20味中草药对3种奶牛乳腺炎致病菌的体外抑菌试验

本试验采用琼脂平板打孔灌药法,根据中兽医理论选择当归、川芎、金银花等20味中草药对奶牛乳腺炎3种主要致病菌进行体外抑菌试验。并测定所筛选的11味中药的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。试验结果表明,当归、川芎、蒲公英、川红花、白术、金银花6味中药对奶牛乳腺炎3种病原菌的综合抑菌效果较好,此结果为进一步研制治疗奶牛乳腺炎复方中药制剂提供实验数据。     

常用中药防治奶牛乳房炎病原菌效果研究

选择蒲公英、连翘、黄连、黄芩、红花等8种具有清热解毒功效的常用中药，针对自奶牛临床型乳房炎分离的金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌。进行体外抑菌试验。结果表明，所选择药物对分离的乳房炎致病菌具有良好的抑制作用。     

常用中药防治奶牛乳房炎病原菌效果研究

选择蒲公英、连翘、黄连、黄芩、红花等8种具有清热解毒功效的常用中药，针对自奶牛临床型乳房炎分离的金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌，进行体外抑菌试验。结果表明．所选择药物对分离的乳房炎致病菌具有良好的抑制作用。     

九味中药及其复方对奶牛乳房炎病原菌的体外抑菌试验

针对导致奶牛乳房炎的主要病原菌(大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌),用平板法测定了9味中药和4种复方中药的体外抑菌效果。结果表明,方剂1及方剂2的综合效果较好,对于葡萄球菌以黄芩、黄连、红花、鱼腥草的抑菌效果明显,对大肠埃希菌以黄芩、鱼腥草、蒲公英和黄连的效果好。为防治奶牛乳房炎的中药配方科学筛选提供了理论依据。     

抗犬细菌性皮肤病中药的筛选

为筛选最佳抑菌效果的中药组方,对从犬皮肤和毛发中分离出的2种主要致病菌,采用琼脂平板抑菌试验法研究19味中药体外抑菌效果,选出对致病菌较敏感的中药,合理组方后再次进行体外抑菌试验,从而筛选出最佳抑菌效果的药物组方。试验结果表明,3种中药组方对葡萄球菌和链球菌混合感染的皮肤病均有效,但最佳组方为五倍子、黄芩、防风、姜黄、百部、小茴香、蒲公英。     

苦参生物碱提取物对奶牛乳房炎病原菌的体外抗菌活性研究

为了研究苦参生物碱提取物对奶牛乳房炎病原菌的体外抗菌活性,试验采用浓度系列稀释法,应用苦参生物碱提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌和停乳链球菌进行体外抗菌活性研究。结果表明:苦参生物碱提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌和停乳链球菌最低抑菌浓度(MIC)分别为12.50,3.13,1.56,0.78 mg/m L,最低杀菌浓度(MBC)分别为12.50,6.25,1.56,1.56 mg/m L。说明苦参生物碱提取物对引起奶牛乳房炎常见的4种致病菌均有良好的抑菌和杀菌效果,为防治奶牛乳房炎中药有效成分的开发提供理论依据。     

肉桂醛防治奶牛乳房炎的安全性评价

为了解天然化合物肉桂醛作为防治奶牛乳房炎药物的安全性,试验采用试管二倍稀释法测定肉桂醛抑制奶牛乳房炎主要致病菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);采用小鼠急性毒性试验和家兔皮肤刺激性试验评价肉桂醛的安全性;通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验了解其抗炎作用。结果表明:在适当浓度下肉桂醛对奶牛乳房炎体外主要致病菌有抑菌和杀菌能力;小鼠急性毒性试验结果表明肉桂醛的半数致死量(LD_(50))为2.03 mg/kg(95%的置信范围为1.95~2.11 mg/kg),属无毒药物;抗炎试验结果表明肉桂醛对急性炎症有明显的抗炎作用;皮肤刺激性试验结果表明肉桂醛不会刺激皮肤,对皮肤是安全的。说明肉桂醛具有抑菌和抗炎作用,属于无毒、无刺激药物。     

利用体外抑菌试验确立奶牛乳腺炎抗菌蒙药组方

为使治疗奶牛乳腺炎的抗菌蒙药组方达到最佳抑菌效果,针对从乳房炎牛奶中分离出的大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌,采用牛津杯法对23味蒙药进行体外抑菌试验,筛选出对这两种致病菌均敏感的12味蒙药.根据部分药物抑菌浓度试验选取其中7味蒙药,结合体外抑菌试验,通过L8(27)正交试验设计,筛选出最佳抑菌药物组合,并通过L9(34)正交试验设计优化用药剂量.结果表明,结合正交设计和体外抑菌试验所确立的抗菌蒙药组方的抗菌效果显著强于各单药抑菌效果.     

21种中药对奶牛乳房炎3种病原菌的体外抑菌试验

采用琼脂平板扩散法 (打孔法 ) ,选择连翘、金银花、黄芩、黄柏、鱼腥草等 2 1种中草药对从奶牛乳房炎分离出的 3种主要致病菌进行了体外抑菌试验。结果发现 ,诃子、黄芩、石榴皮等的综合效果好 ,从而为中草药防治奶牛乳房炎的科学配方筛选提供了依据