弥漫增生型狼疮肾炎患者趋化因子及其受体的表达

目的 了解弥漫增生型狼疮肾炎(LN)患者趋化因子MCP-1、CCL19、CXCL9、CXCL10和趋化因子受体CCR2、CCR7、CXCR3的表达,探讨趋化因子及其受体在LN发病中的作用.方法 ①同步收集12例弥漫增生型LN患者肾组织和外周血,抽提总RNA并反转录为cDNA,以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法 检测趋化因子基因MCP-1、CCL19、CXCL9、CXCL10和趋化因子受体基因CCR2、CCR7、CXCR3的表达水平.②应用免疫荧光抗体标记、激光扫描共聚焦显微镜技术观察患者肾组织趋化因子MCP-1、CCL19、CXCL9和CXCL10的表达.结果 弥漫增生型LN患者趋化因子基因MCP-1、CCL19、CXCL9和CXCL10 mRNA在肾脏组织和外周血的表达呈同步增高趋势,4种趋化因子蛋白在肾小球的表达显著增高.趋化因子受体CCR2和CXCR3在LN患者外周血高表达.结论 趋化因子MCP-1、CCL19、CXCL9和CXCL10外周血表达水平可能做为评估狼疮患者肾脏病变的生物学标记.阻断趋化因子与其相应受体的结合将可能减轻患者的临床症状、改善预后.     

CXCR3 CCR5及其配体在类风湿关节炎患者滑液和外周血中的表达

目的 在单细胞水平上，研究类风湿关节炎（RA）患者滑液及外周血中单核/巨噬细胞，T淋巴细胞上趋化因子受体CCR5及ＣＸＣＲ３的表达。并测定CCR5的配体MIP-1β。激活正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）及T细胞亚群，探讨其在RA发病中的作用机制。方法 分离RA患者滑液单个核细胞（SFMC），外周血单个核细胞（PBMC）及正常人PBMC（对照），以三色荧光素标记物进行流式细胞术分析CD14^ ,CD3^ 细胞膜表面趋化因子受体CCR5，CCR3及细胞内趋化因子MIP-1β，RANTES和细胞因子白细胞介素（IL）-4，干扰素（IFN）-γ的表达率。结果 与PBMC相比，RA患者SFMC中的单核/巨噬细胞，T细胞上趋化因子受体CCR4及CEXR3表达显著增高；且单核/巨噬细胞分泌趋化因子MIP-1β，RANTES的百分比较高；SFMC中Th1细胞亚群（即IFN-γ^ T细胞）的表达率与滑液及外周血中T淋巴细胞上趋化因子受体CCR4及CXCR3的表达率显著相关。结论 趋化因子受体CCR5^ ,CXCR3^ 的单核/巨噬细胞，T细胞积聚在RA患者的病变关节内，且单核/巨噬细胞分泌较多趋化因子；CCR5，CXCR3可能参与调节细胞移动。与Th1细胞亚群及其“伙伴”细胞在RA关节内积聚有关；可能与RA的发病相关。     

干扰素对慢性HBV感染者T淋巴细胞趋化因子受体及血清趋化因子表达水平的影响

目的探讨抗病毒治疗对慢性HBV感染者T淋巴细胞趋化因子受体及血清趋化因子表达水平的影响。方法选取成都市公共卫生临床医疗中心于2012年5月至2012年12月收治的肝炎患者100例,其中男68例,女32例,年龄34~72岁,平均年龄为(54.6±4.3)岁,分为慢性乙型肝炎(CHB)组60例,重型慢性肝炎组40例。选取同期于本院接受健康检查的正常人群20例为健康对照组。检测干扰素治疗前、治疗后4周、12周、24周、48周时外周血T淋巴细胞趋化因子受体(CXCR3、CCR6)及血清趋化因子水平(CXCL9、CXCL11、CCL20)、HBs Ag、HBV DNA和ALT水平。结果 CHB组、慢性重型肝炎组及健康对照组间CXCR3、CCR6、CXCL9、CXCL11、CCL20表达差异有统计学意义(F值分别为2.067、2.914、4.791、2.582、3.802,P值分别为0.043、0.031、0.011、0.034、0.024)。干扰素治疗12周、24周、48周后CHB患者血清HBV DNA、HBs Ag、ALT均有不同程度下降,T细胞趋化因子受体及血清趋化因子的表达下调,与治疗前比较差异有统计学意义(P均0.05),但治疗4周时与治疗前比较差异无显著统计学意义(t值分别为1.23、0.74、1.64,P值分别为0.063、0.481、0.051)。结论CXCR3、CCR6及其配体(CXCL9、CXCL11、CCL20)参与了HBV感染后肝脏损伤,干扰素治疗可以影响CXCR3、CCR6及其配体(CXCL9、CXCL11、CCL20)的表达水平。     

外周血单个核细胞miR-214与急性心肌梗死患者免疫趋化因子表达的相关性

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者外周血单个核细胞miR-214水平变化以及与免疫趋化因子表达的相关性。方法前瞻性选择2019年1月至2019年12月因急性胸闷胸痛于宜昌市第一人民医院(三峡大学人民医院)心血管内科就诊患者174例,其中排除冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)者45例(CAG正常组)和AMI患者129例(AMI组)。分别采用实时定量荧光PCR法、ELISA法和Western blot法检测两组外周血单个核细胞mi R-214、血浆单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和外周血单个核细胞趋化因子功能性受体2(CCR2)水平,并采用Pearson法分析其相关性。结果 AMI组患者外周血单个核细胞miR-214表达量低于CAG正常组[(1.00±0.13)vs.(0.81±0.28),P0.05],同时血浆MCP-1浓度[(97.85±23.86)pg/ml vs.(133.90±47.48)pg/ml]和外周血单个核细胞CCR2蛋白水平[(0.48±0.16)vs.(0.67±0.29)]高于CAG正常组(P0.05)。经Pearson相关性分析,AMI组患者外周血单个核细胞miR-214水平和血浆MCP-1浓度、外周血单个核细胞CCR2蛋白水平均呈负相关性(r=-0.590,-0.433,P0.05)。随着冠状动脉SYNTAX评分增加,患者外周血单个核细胞miR-214水平降低,同时外周血单个核细胞CCR2蛋白水平和血浆MCP-1浓度逐渐升高(P0.05);经多重线性回归分析,miR-214、MCP-1及CCR2与SYNTAX评分均存在线性回归关系(P0.05)。结论 AMI患者外周单个核细胞miR-214表达量降低,且与MCP-1/CCR2传导通路的激活存在负向调控关系,可能是加重AMI疾病进展的重要机制之一。     

人类免疫缺陷病毒-1感染者血清趋化因子的检测及克隆构建

目的 探讨调节活化正常T细胞表达与分泌趋化因子(RANTES)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在HIV-1感染中的作用.方法 以ELISA检测HIV-1感染者(治疗组和未治疗组)和健康对照组人群外周血清RANTES及MCP-1的浓度;构建hRANTES-pcDNA3.1,hMCP-pcDNA3.1及hMCP/hRANTES-pcDNA3.1重组质粒,在CHO细胞中体外高效表达,获得重组蛋白,并研究三者对人外周血单个核细胞的趋化功能.结果 RANTES在健康对照组为(164.3±21.3)pg/mL,未治疗组为(1 224.1±62.0)pg/mL,治疗组为(475.3±36.2)pg/mL;MCP-1分别为(90.6±28.5)、(335.0±30.3)和(807.2±62.6)pg/mL.HIV-1感染后RANTES和MCP-1均升高,有效抗病毒治疗后RANTES有所下降,而MCP-1则明显上升.重组蛋白经Western印迹鉴定,能与各自单克隆抗体结合,且三者对人外周血单个核细胞都有趋化作用,MCP/RANTES融合蛋白的趋化作用更强.在重组蛋白浓度为50、200、400和800 pg/mL时,MCP/RANTES融合蛋白趋化外周血单个核细胞数分别为52×104/mL、102×104/mL、132×104/mL和184×104/mL;RANTES趋化外周血单个核细胞数分别为27×104/mL、51×104/mL、65×104/mL和96×104/mL;MCP-1趋化外周血单个核细胞数分别为18×104/mL、44×104/mL、54×104/mL和74×104/mL.结论 RANTES和MCP-1可能都参与了HIV-1的感染和机体对HIV-1的免疫反应.     

自身免疫性肝炎患者血清IL-21和趋化因子水平变化及其临床意义探讨

目的探讨自身免疫性肝炎(AIH)患者血清白介素-21(IL-21)和趋化因子水平变化及其临床意义。方法2015年3月～2017年3月我院收治的21例AIH患者,采用ELISA法检测血清IL-21及趋化因子C-C-基元配体20(CCL20)、趋化因子配体9(CXCL9)、趋化因子C-C-基元受体6(CCR6)、趋化因子C-X-C-基元受体3(CXCR3)水平,常规行肝活检。应用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)分析血清IL-21水平预测AIH患者病情和判断肝组织炎症活动分级的效能。结果 5例重症AIH患者血清ALB、ALT、AST、INR、TBIL、CCL20、CCR6和IL-21水平分别为(2.6±0.2) g/dL、(716.8±363.2) U/L、(632.6±334.9) U/L、(1.4±0.7)、(96.1±4.2)μmol/L、(263.2±123.8) pg/mL、(162.4±70.3) pg/mL和(400.2±102.3) pg/mL,与16例轻中症组[分别为(3.7±0.4) g/dL、(384.5±143.7) U/L、(327.1±98.6) U/L、(1.2±0.3)、(25.8±4.3)μmol/L、(147.5±63.7) pg/mL、(63.8±25.3) pg/mL和(256.3±122.6) pg/mL]比,差异显著(均P0.05),而外周血PLT计数为(110.4±2.8)×10~9/L,显著低于轻中症组的(170.4±5.3)×10~9/L(P0.05);单因素分析显示,7例肝组织G3～4级患者上述指标与14例G1～2级组比,差异有统计学意义(P0.05),而两组患者外周血WBC、血清CXCL9、CXCR3和IgG水平比较差异无统计学意义(P0.05);以血清IL-21水平大于380 pg/mL为截断点,预测AIH患者临床病情严重的AUC为0.900(95%CI:0.690～0.987),其敏感性为80.0%,特异性为100.0%;以血清IL-21水平405.7 pg/mL为截断点,判断AIH患者肝组织炎症分级S3的AUC为0.857(95%CI:0.605～0.976),其敏感性为100.0%,特异性为70.0%;多因素Logistic回归分析结果显示,血清IL-21≥405.7 ng/mL为判断AIH患者肝组织重度炎症活动的独立因子(OR为5.673,95%CI为2.952～9.118,P=0.000)。结论检测血清IL-21水平可能有助于判断AIH患者病情和肝组织炎症活动度,对评估病情有一定的临床意义。     

树突状细胞在黏膜免疫模型鼠体内的分布及趋化因子的表达

目的:研究小鼠树突状细胞(DC)在体内的迁移、分布、形态特征及趋化因子的表达情况,探讨趋化因子在黏膜免疫模型鼠体内的表达及其在DC迁移过程中的调控作用.方法:采用光镜、免疫组织化学和原位杂交染色方法,观察肿瘤模型鼠中DC的分布和形态学特征;分析S-100蛋白、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、T细胞特异性趋化因子(Rantes)、巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)和趋化因子受体7(CCR7)的表达情况,并与对照组进行比较.结果:在黏膜免疫模型小鼠体内的DC主要分布于肠系膜淋巴结(MLN)、集合淋巴小结(PP)和胃肠(GUT),与对照组数量比较有显著差异,(35.32±3.17vs15.03±1.81,29.14±2.03vs11.35±0.97,27.96±1.97vs9.86±0.82,P<0.01)其MCP-1,Rantes,MIP-1β和CCR7表达明显增高,分别与对照组数密度和面密度比较有显著差异.结论:在黏膜免疫模型小鼠体内的DC可向肠系膜淋巴结、集合淋巴小结和胃肠等器官迁移和聚集;MCP-1,Rantes,MIP-1β和CCR7表达均明显升高.     

糖尿病足患者外周血T细胞的分化

目的探讨糖尿病足(DFU)患者外周血中T细胞分化情况及其功能。方法采用流式细胞术分析DFU患者外周血中CD4~+、CD8~+T细胞亚群分布情况,包括初始T细胞、活化T细胞及效应T细胞;分析DFU患者外周血CD4~+、CD8~+T细胞迁移分子CC趋化因子受体(CCR)5、CCR4、CXC趋化因子受体(CXCR)3的表达情况;分析DFU患者外周血CD4~+、CD8~+T细胞分泌炎症因子干扰素(IFN)γ,白细胞介素(IL)2,肿瘤坏死因子(TNF)-α情况。结果与对照组比较,DFU患者外周血初始CD4~+、CD8~+T细胞比例显著降低,活化与效应T细胞比例显著升高(P<0.05);迁移分子受体CCR4表达无显著差异(P>0.05),CCR5与CXCR3表达在DFU患者中显著降低(P<0.05);DFU患者中,炎症因子IFNγ在活化T细胞中高表达,在效应T细胞中几乎不表达,而IFNγ与TNF-α在效应T细胞中高表达,在初始T细胞中几乎不表达。结论DFU患者外周血T细胞亚群发生变化,其分泌的炎症因子影响了T细胞的免疫功能发挥。     

阿托伐他汀对冠心病患者血中趋化因子水平的影响

目的观察冠心病患者血浆中趋化因子的变化,并进一步探讨阿托伐汀对趋化因子的影响。方法健康对照组25例,血脂正常的冠心病70例,随机将冠心病患者分为常规治疗组和阿托伐汀组,检测血浆中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattract protein-1,MCP-1)、T细胞表达和分泌活化蛋白(regulated upon activation normal T cell expressed and secreted,RANTES)及白介素-8(interleukin-8,IL-8)水平。结果与健康对照组相比,冠心病患者血浆中MCP-1、RANTES、IL-8水平明显升高(P<0.01)。常规治疗组和阿托伐汀组治疗4周后MCP-1、RANTES、IL-8水平均有下降(P<0.05,P<0.01),阿托伐汀治疗组较常规治疗组降趋化因子的作用更明显(P<0.05)。结论阿托伐汀降低冠心病患者血浆中趋化因子水平,可能起到稳定粥样斑块的作用。     

趋化因子受体6及其配体CCL20对系统性硬化病伴肺纤维化小鼠Th17的趋化作用

 近来研究证实，炎症在系统性硬化病(SSc)病理生理过程中有至关重要的作用。Th17是重要的促炎性细胞，主要分泌IL17等炎症前细胞因子，其在SSc患者及动物模型外周血中高表达^［1］,但机制尚未完全阐明。Th17特异性表达趋化因子受体6（CCR6）、趋化因子受体4（CCR4），同时病变组织局部则表达了其配体CCL20及CCL22，可直接通过CCR6/CCL20和CCR4/CCL22趋化作用，诱导Th17浸润至病变局部，继而启动炎症反应^［2］。本研究通过检测SSc小鼠Th17及CCR6/CCL20等表达，探讨CCR6/CCL20的趋化作用是否导致Th17高表达。     

高龄乳腺癌患者外周血细胞因子和临床预后的相关性

目的探讨高龄乳腺癌患者外周血细胞因子和临床预后的关联性。方法前瞻性收集高龄(≥65岁)患者50例作为研究组,同时收集50例健康成人作为对照组。观察两组研究对象外周血白细胞介素(IL)-2、IL-10、IL-25、IL-27和IL-35水平差异,同时收集乳腺癌患者临床预后,分析IL-2、IL-10、IL-25、IL-27和IL-35与患者临床预后的关联性。结果与对照组比较,研究组IL-2水平显著降低〔(8.37±2.38)vs(32.48±4.71)ng/ml,P=0.000〕;IL-10显著升高〔(123.39±23.59)vs(23.40±5.39)ng/ml,P=0.000〕;IL-25显著降低〔(12.18±4.48)vs(28.39±6.97)ng/L,P=0.000〕;IL-27显著降低〔(18.39±6.57)vs(32.39±8.29)ng/L,P=0.000〕;IL-35显著升高〔(216.58±58.39)vs(178.03±56.59)ng/L,P=0.002〕。术后2年,共21例患者术后复发。与无复发患者比较,术后复发患者的IL-2水平显著降低〔(6.18±1.49)vs(9.96±2.94)ng/ml,P=0.000〕;IL-10显著升高〔(143.96±34.58)vs(108.49±18.75)ng/ml,P=0.000〕;IL-25显著降低〔(9.72±3.83)vs(13.96±4.82)ng/L,P=0.015〕;IL-27显著降低〔(15.74±5.39)vs(20.31±7.12)ng/L,P=0.000〕;IL-35显著升高〔(239.58±68.58)vs(199.92±49.83)ng/L,P=0.035〕。结论高龄乳腺癌患者存在一定程度的免疫抑制,可导致患者临床预后恶化。     

CCR9在非小细胞肺癌患者外周血CD4+ T淋巴细胞中的表达及其对趋化活性的影响

目的：探讨CC族趋化因子受体9（ CCR9）在非小细胞肺癌（ NSCLC ）肿瘤免疫机制中的作用。方法采用流式细胞术检测42例NSCLC患者和30名健康人手术前后T细胞亚群以及外周血中CD4＋T淋巴细胞表面CCR9的表达情况,计数各组细胞表达的百分率。免疫磁珠分选外周血CD4＋T淋巴细胞,采用transwell实验检测并分析CCL25/CCR9对CD4＋T淋巴细胞迁移的影响。结果 NSCLC患者外周血T淋巴细胞亚群均降低,术后外周血CD4＋T淋巴细胞、CD4＋/CD8＋比值均明显高于术前[（49.11±8.32） vs （46.17±8.71）,P＝0.031和（1.66±0.09） vs （1.44±0.06）,P＝0.001];术前CD4＋CCR9＋T淋巴细胞的百分率低于术后[（3.33±1.11） vs （6.57±1.92）,P＜0.05]和健康对照组[（3.33±1.11） vs （11.06±1.37）,P＜0.05]。在CCL25诱导下,NSCLC患者外周血CD4＋T淋巴细胞趋化指数（CI）为3.14,明显低于健康对照组的3.83（ P＜0.05）。经过anti-CCR9单抗处理后,CD4＋T淋巴细胞的CI为0.62,与未经anti-CCR9 mAb处理者相比明显降低（ P＜0.05）。结论 NSCLC患者外周血T淋巴细胞调节机制紊乱,CL25/CCR9相互作用可介导外周血CD4＋T淋巴细胞迁移,NSCLC患者外周血淋巴细胞中CCR9低表达,影响淋巴细胞迁移,可能与肿瘤逃避免疫监视的机制有关。手术可以逆转CD4＋T淋巴细胞表面CCR9的表达变化, CCR9可能作为评价肺癌治疗后免疫重建的指标。     

强直性脊柱炎患者附着端炎与外周血淋巴细胞趋化因子受体5及血浆白细胞介素1β的相关性

目的探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者附着端炎发生的可能机制。方法采用流式细胞仪检测36例AS患者外周血淋巴细胞趋化因子受体5(chemokine receptor 5,CCR5)的表达,同时用酶联免疫吸附法检测其血浆白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达,对比附着端炎指数MASES﹥0患者与MASES=0患者的CCR5及IL-1β表达的差异。并对附着端炎指数与趋化因子受体CCR5及IL-1β表达的相关性进行分析。结果(1)MASES﹥0组C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)为(42.54±42.59)mg/L,明显高于MASES=0组的(18.52±18.43)mg/L(P=0.026);MASES﹥0组CCR5为(24.70±9.39)%,高于MASES=0组的(16.57±13.32)%,但两组比较差异无显著性意义(P=0.119);MASES﹥0组白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)为(2.98±1.74)pg/ml,明显高于MASES=0组的(1.22±0.73)pg/ml(P0.05)。(2)附着端炎指数MASES与CCR5和IL-1β成正相关(分别r=0.684,P0.001;r=0.448,P0.05)。结论CCR5、IL-1β与AS附着端炎发生的分子免疫学机制有关。     

类风湿关节炎患者外周血CD4 T细胞关节局部趋化机制

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血CD4 T细胞比例变化情况及其对关节局部趋化的机制。方法流式细胞术分析RA患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4 T细胞的比例,并分析CD4 T细胞比例与RA疾病活动性评分系统(DAS28)评分间的关系。激光共聚焦方法检测RA患者滑膜局部浸润CD4 T细胞情况。流式细胞术分析RA患者CD4 T细胞表面趋化因子受体表达情况。结果与对照组相比,RA患者外周血PBMC中CD4 T细胞的比例显著降低(P0.01),且RA患者外周血CD4 T细胞比例与DAS28评分呈明显负相关(r=-0.753 0,P=0.001 2)。关节局部CD4 T细胞浸润的激光共聚焦结果显示,与对照组相比,RA患者滑膜中具有更多的CD4 T细胞浸润。趋化因子受体分析结果显示,RA患者外周血CD4 T细胞表面CCR5、CXCR1和CXCR3的表达显著升高(P0.01)。结论 RA患者外周血CD4 T细胞表面表达升高的CCR5、CXCR1和CXCR3可能参与外周血CD4 T细胞向滑膜局部的趋化。     

红曲对胶原诱导性关节炎大鼠血清趋化因子的影响

目的 观察红曲对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠血清中趋化因子的影响.方法 利用牛Ⅱ型胶原建立Wistar大鼠CIA模型,造模成功后随机分为空白对照组、生理盐水CIA模型对照组、布洛芬阳性药物对照组和红曲大剂量、中剂量及小剂量组并灌胃给药.免疫后第48天处死大鼠,抽取静脉血,取血清.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)观察各组对血清中细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和趋化因子IL-8、单核细胞趋化因子(MCP)-1、调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)和干扰素γ诱导蛋白10(IP-10)的影响.结果 红曲大、中、小剂量组能显著降低血清中细胞因子TNF-α[(67.4±1.7)pg/ml、(64.3±12.8)pg/ml和(61.2±9.9)pg/ml]、IL-6[(144±21)pg/ml、(133±29)pg/ml和(115±31)pg/ml]的水平,与模型组[分别为(91.4±9.4)pg/ml和(180±14)pg,ml]比较差异有统计学意义(P＜0.05);红曲大剂量,中剂量可降低IL-8[(62±7)pg/ml和(61±11)pg/ml]的水平,与模型组[(87±18)pg/ml]比较差异有统计学意义(P＜0.05);红曲各剂量组能显著降低血清中炎性趋化因子MCP-1、RANTES和IP-10的表达,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 红曲抗炎作用可能是和抑制炎症因子相关.     

类风湿关节炎患者CD4~+CD25~+调节性T细胞和趋化因子受体表达及相关性

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血中CD4+CD25+表达率及调节性T细胞上趋化因子受体表达水平及相关性。方法检测活动期RA组和健康对照组调节性T细胞的表达频率;判断T细胞表达率、T细胞上趋化因子受体CCR4的表达水平与RA疾病活动性指标的相关性;判断血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-10、IL-17及干扰素(IFN)-γ等与CD4+上趋化因子受体CCR4+表达水平的相关性。结果活动期RA患者T细胞表达率与趋化因子受体表达水平较健康对照组低;T细胞表达率和趋化因子受体表达水平与RA疾病活动度存在显著相关;与血清IL-10、IL-17水平呈显著正相关,与IFN-γ呈显著负相关,而与血清TNF-α则无明显相关。结论 T细胞表达率和趋化因子受体表达水平与RA疾病活动度存在显著相关,CD4+CD25+T细胞上趋化因子受体表达参与RA发病过程。     

腹腔注射三氧化二砷对胶原诱导关节炎大鼠血清炎性趋化因子的影响

目的评估腹腔注射三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对胶原诱导关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠关节症状的改善程度,并观察其对CIA大鼠血清趋化因子的影响并探讨其可能作用机制。方法将28只体质量及鼠龄相当的Wistar大鼠随机分成3组,A组为空白对照组(8只),B、C组(各10只)用牛Ⅱ型胶原和弗氏完全佐剂乳化液2次免疫动物,建立CIA大鼠模型,造模成功后随机分为CIA模型对照组8只(B组)、ATO治疗组8只(C组);ATO治疗组在分组3 d后通过腹腔注射ATO液1周,剂量为每天4 mg/kg,最后l d给8 mg/kg,观察3 d取材,对照组以同样方法给予等容量的0.9%氯化钠注射液。对各组大鼠定期进行关节炎指数(arthritis index,AI)评定、容积法(排水法)测量双后肢的足肿胀度以及四肢关节X线摄片评估关节破坏程度。各组老鼠干预结束后内眦静脉取血,用流式细胞术对各组大鼠血清正常T细胞表达分泌的活性调节蛋白(regulated upon activation,normal T cell expressed and secreted,RANTES)、单核细胞趋化因子(monocyte chemotactic factor,MCP)-1、干扰素γ诱导蛋白10(interferon gamma induced protein 10,IP-10)等趋化因子进行定量测定。应用t检验或对各组应用Kruskl-Wallis H检验进行组间比较。结果腹腔注射ATO液1周后大鼠足肿胀度较同期CIA模型对照组明显改善,差异有统计学意义[(5.13±0.10)ml vs.(8.12±0.15)ml,t=8.73,P=0.000)];关节炎指数显著降低,差异有统计学意义[(2.63±0.92)vs.(6.62±0.91),t=5.21,P=0.020];X线检查显示关节破坏程度减轻。CIA模型对照组血清中RANTES、MCP-1、IP-10均明显高于同期空白对照组,差异有统计学意义[(8 118.89±2 836.14)pg/ml vs.(5 390.24±629.08)pg/ml,χ2=6.35,P=0.012;22 048.2(6 092.53,40 457.13)pg/ml vs.1 211.77(532.35,1 506.94)pg/ml,χ2=11.29,P=0.001;(282.48±273.93)pg/ml vs.(31.96±17.50)pg/ml,χ2=5.84,P=0.016]。ATO治疗组与同期CIA模型组相比上述因子均明显降低,差异有统计学意义[(6 134.76±548.15)pg/ml vs.(8 118.89±2 836.14)pg/ml,χ2=6.79,P=0.033;2 946.08(1 749.84,4 600.94)pg/ml vs.22048.23(6 092.53,4 0457.13)pg/ml,χ2=14.64,P=0.001;(41.60±15.86)pg/ml vs.(282.48±273.93)pg/ml,χ2=7.72,P=0.021]。结论:CIA大鼠存在免疫功能紊乱,血清中趋化因子显著升高;腹腔注射ATO可以改善CIA大鼠的关节炎程度,其作用机制可能通过下调趋化因子MCP-1、RANTES、IP-10水平的表达来发挥作用。     

急性心肌梗死患者CCL2/CCR2与血小板聚集率的关系

目的:研究急性心肌梗死(AMI)患者CC类趋化因子配体2 (CCL2)及其受体(CCR2)表达与血小板聚集率的关系。方法:选择我院冠心病监护病房收治的60例AMI患者作为AMI组,另60例体检健康者作为正常对照组。检测两组血浆CCL2水平,及冠脉血栓组织中血小板CCL2和CCR2蛋白表达和定位情况,比较正常对照组CCL2刺激前后活化的糖蛋白Ⅱb/Ⅲa复合物(PAC-1)和CD62p水平变化,及不同CCL2水平对血小板聚集率的影响。结果:与正常对照组比较,AMI组血浆CCL2 [(159.63±54.32)pg/ml比(218.79±76.34)pg/ml]、血小板CCL2 [(0.86±0.38)比(2.05±0.59)]和CCR2 [(0.93±0.42)比(2.67±0.51)]蛋白表达均显著升高(P均=0.001),CCL2/CCR2与CD62p在AMI患者中存在共定位表达关系。与CCL2刺激前比较,正常对照组经CCL2刺激后PAC-1 [(9.83±3.14)%比(18.96±4.25)%]和CD62p[(5.08±1.16)%比(8.33±1.89)%]表达均显著升高(P均=0.001)。当CCL2浓度≥100ng/ml时起,血小板最大聚集率均显著高于CCL2浓度为0时水平(P均=0.001)。结论:急性心肌梗死患者CCL2/CCR2表达与血小板聚集率关系密切,CCL2/CCR2可能通过影响血小板聚集率,参与疾病进展。     

自身免疫性肝炎患者血清趋化因子和GP73水平变化及其临床意义研究

目的 探讨自身免疫性肝炎(AIH)患者血清趋化因子和高尔基体糖蛋白73(GP73)水平的变化及其临床意义。方法 2018年3月～2019年3月我院就诊的46例自身免疫性肝炎患者和46例同期健康人群,采用ELIS法检测血清趋化因子C-C-基元受体6和20(CCR6、CCL20)、血清趋化因子配体10(CXCL10)和GP73水平。AIH患者接受肝活检,并将肝炎程度分为轻中重度。结果 AIH血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平分别为(112.4±59.3)pg/mL、(186.5±71.8)pg/mL、(81.5±42.0)pg/mL和(171.4±62.5)ng/mL,均显著高于健康人【分别为(75.8±32.6)pg/mL、(123.7±42.2)pg/mL、(53.9±28.1)pg/mL和(83.1±35.2)ng/mL,P<0.05】;10例重度患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平分别为(174.2±81.4)pg/mL、(271.5±99.7)pg/mL、(162.7±83.1)pg/mL和(278.3±91.5)ng/mL,,显著高于14例中度组【分别为(124.5±55.3)pg/mL、(198.6±66.9)pg/mL、(88.4±46.8)pg/mL和(186.2±75.8)ng/mL,P<0.05】或22例轻度组【分别为(83.5±34.5)pg/mL、(155.6±51.0)pg/mL、(42.6±22.7)pg/mL和(123.9±58.9)ng/mL,P<0.05】;26例肝组织G3～4级患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平分别为(154.5±28.1)pg/mL、(201.6±56.3)pg/mL、(98.4±56.1)pg/mL和(196.2±59.78)ng/mL,显著高于20例G1～2级组【分别为(73.5±34.8)pg/mL、(135.6±41.7)pg/mL、(62.5±20.1)p g/mL和(93.9±33.9)ng/mL,P<0.05】。结论 AIH患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平升高,且随着疾病程度和肝组织炎症活动度加重而升高。检测自身免疫性肝炎患者血清趋化因子和GP73水平可能有助于评估患者病情的变化。     

迷走神经电刺激对DSS诱导的结肠炎大鼠炎性因子与趋化因子及其受体的影响研究

目的观察迷走神经电刺激(vagus nerve stimulation,VNS)对结肠炎大鼠体内炎性因子、趋化因子及其受体的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组(不作任何处理)和DSS组(饮用5%DSS诱导构建结肠炎模型),造模后随机分为DSS+VNS组(给予VNS)和DSS+Sham组(给予假迷走神经电刺激)。酶联免疫吸附试验检测大鼠血清中炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-17、IL-22)、趋化因子(CCL28、ITAC)及对应受体(CCR10、CXCR3)的含量。HE染色检测大鼠结肠组织病理学变化情况。免疫组织化学染色检测结肠组织中趋化因子及趋化因子受体的阳性表达情况。实时荧光定量PCR检测结肠组织中炎性因子、趋化因子及趋化因子受体mRNA的表达水平。结果与DSS组和DSS+Sham组比较,DSS+VNS组大鼠血清中炎性因子含量减少,结肠形态明显改善,炎性因子mRNA表达水平下降;血清中趋化因子及对应受体的含量减少,结肠组织中mRNA的表达水平降低,趋化因子CCL28及其受体CCR10的阳性表达率也降低,差异均有统计学意义(P0.01)。结论 VNS能减轻DSS诱导的结肠炎症反应,其作用可能与抑制炎性细胞因子的分泌,降低趋化因子及趋化因子受体的表达水平有关。