当归多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生IFN-γ的影响

目的研究当归多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生IFN-γ的影响。方法用4种不同浓度乙醇将当归总多糖(AP)进行分级沉淀,获得AP-I,AP-II,AP-III和AP-IV 4个部分多糖。用［³H］-TdR参入法检测当归部分多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖作用;结晶紫染色法测定IFN-γ的生物活性;ELISA法测定IFN-γ的含量。结果AP-I和AP-II能明显促进体内外小鼠脾淋巴细胞增殖,体外显著诱导脾淋巴细胞分泌IFN-γ,增强IFN-γ的生物活性;特别是AP-II体外诱生较高含量的IFN-γ,AP-I体内诱生的IFN-γ生物活性较强。结论AP-I和AP-II是免疫活性较强的部分。     

分枝杆菌多糖的制备及对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的:制备分枝杆菌多糖并考察其对小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法:用苏通培养基培养分枝杆菌,菌体脱脂后,用5种方法提取,比较多糖得率,并用正交试验优化超声提取工艺,再用稀碱提取残渣,粗多糖经Sevag法除蛋白、DEAE-Sepharose Fast Flow层析柱纯化后得到分枝杆菌多糖;用MTT法检测分枝杆菌多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果:超声后热水提取多糖得率最高,超声提取的优化工艺是提取时间40 min,固液比为1∶150,超声功率600 W;单因素试验优化的Sevag法除蛋白条件为体积比1∶5,萃取时间为20 min,萃取6次;提取得到的4种多糖组分在6.25~50 mg.L-1范围内均能显著促进脾淋巴细胞的增殖。结论:用本实验工艺成功制备了分枝杆菌多糖,制备物具有刺激小鼠脾淋巴细胞增殖的作用。     

灵芝菌丝体多糖对K562细胞的抑制作用及免疫调节作用研究

目的研究灵芝菌丝体多糖（ganoderma lucidum mycelia polysaccharides,GLMP）对K562白血病细胞及小鼠体外脾淋巴细胞增殖的影响。方法 MTT法检测不同浓度GLMP对K562白血病细胞增殖及对小鼠体外脾淋巴细胞增殖的作用;血细胞计数方法绘制生长曲线。结果不同浓度的GLMP处理K562细胞48h后,50mg/L及以上浓度抑制率与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,而且随浓度的增加抑制率增加。作用48h的IC50为270.2mg/L。生长曲线也表明随时间的延长和浓度的增加,细胞增殖能力下降。GLMP作用小鼠体外脾淋巴细胞48h后,在多糖浓度为50、100mg/L和25、50、100mg/L时能显著刺激静止性和激活型细胞的增殖。结论 GLMP可以抑制K562白血病细胞增殖而且具有免疫调节能力。     

板蓝根多糖抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的实验研究

目的 研究板蓝根多糖抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的作用.方法 用MTT法和小鼠阴道HSV-Ⅱ感染模型分别进行体外和体内抗HSV-Ⅱ实验.结果 MTT法测得的板蓝根多糖LC50为3.97 mg· mL-1,EC50为0.05 mg· mL-1,治疗指数TI为79.4.与无环鸟苷相比,抑制HSV-Ⅱ的作用无显著差异;小鼠阴道HSV-Ⅱ感染模型研究表明:板蓝根多糖治疗组(1、0.5 mg·d-1)均明显降低小鼠的发病率、死亡率,延长其平均存活天数.小鼠外周血CD4+、CD8+细胞略有升高,但CD4+/CD8+比值维持在正常水平.结论 板蓝根多糖具有良好的抗HSV-Ⅱ感染的作用,可能通过调节机体免疫功能提高小鼠抗HSV-Ⅱ感染的能力.     

螺旋藻多糖硫酸酯化修饰前后抗肿瘤及免疫活性的研究

比较螺旋藻多糖硫酸酯化修饰前后体内外抗肿瘤及免疫活性.采用MTT比色法研究药物在体外对人肿瘤细胞株的抑制作用,促进正常小鼠脾淋巴细胞的增殖活性以及对荷瘤小鼠NK和CTL细胞活性的影响.采用移植性肿瘤实验方法考察了药物对小鼠S180肉瘤的抑制作用.结果显示,螺旋藻多糖（NPSP）对肿瘤细胞株几乎无细胞毒作用,硫酸酯化螺旋藻多糖（SNPSP）对肿瘤细胞株具有显著的细胞毒作用,其中对SMMC-7721人肝癌细胞株抑制率最高达50%.NPSP50 mg/kg对小鼠S180肉瘤无抑制,相同剂量的SNPSP对小鼠S180肉瘤的抑制率达35.42%.NPSP具有促进脾淋巴细胞增殖作用,但对ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖反应无促进作用,SNPSP促进脾淋巴细胞增殖作用较NPSP增强,同时对ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖反应也具有明显的促进作用.NPSP和SNPSP均能促进荷瘤小鼠NK细胞和CTL细胞活性,其中SNPSP促进CTL细胞活性较NPSP增强.     

不同种类石斛多糖成分对小鼠脾脏免疫功能的影响

目的:研究不同种属石斛多糖对小鼠免疫功能的调节作用。方法:培养小鼠脾淋巴细胞,观察不同浓度铁皮石斛、齿瓣石斛、兜唇石斛、晶帽石斛中多糖成分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;研究口服给药不同剂量石斛多糖,对小鼠碳粒廓清能力、脾脏指数的影响。结果:齿瓣石斛多糖可以刺激脾淋巴细胞的增殖,增加小鼠碳粒廓清能力和脾脏指数,与铁皮石斛具有类似的作用,而其他种类石斛中的多糖成分的增强免疫活性较差。结论:齿瓣石斛多糖具有增强脾脏免疫的作用。     

金银花多糖对脾淋巴细胞的增殖作用

目的研究金银花多糖对脾淋巴细胞的增殖作用。方法用MTT法体外观察金银花多糖在不同浓度对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果金银花多糖在浓度10～250μg／ml时可显著促进小鼠脾淋巴细胞的增殖,以浓度100μg／ml时作用最为明显。结论金银花多糖体外具有免疫促进作用。     

姬松茸多糖ABP-AW1对免疫功能低下小鼠的免疫增强作用

目的探讨低分子质量姬松茸多糖ABP-AW1对免疫功能低下小鼠的免疫增强作用。方法 ICR小鼠ip给予环磷酰胺80 mg·kg~(-1),连续3 d,制备免疫功能低下小鼠模型;随后分别ig给予ABP-AW1 125,250和500 mg·kg~(-1),每天1次,连续7 d。治疗结束后处死小鼠,检测小鼠胸腺指数和脾指数,碳廓清实验检测小鼠巨噬细胞吞噬功能,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖反应,ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞分泌白细胞介素2(IL-2)和干扰素γ(IFN-γ)水平,流式细胞术检测小鼠脾T淋巴细胞亚群CD4~+/CD8~+比值。结果与正常对照组比较,免疫低下模型小鼠胸腺指数和脾指数以及巨噬细胞吞噬指数均降低(P<0.05);ABPAW1 250和500 mg·kg~(-1)可显著提高免疫低下模型小鼠胸腺指数和脾指数(P<0.05),升高巨噬细胞吞噬指数(P<0.05)。与正常对照组比较,模型小鼠伴刀豆凝集素A(Con A)和脂多糖(LPS)分别诱导的T淋巴细胞增殖反应和B淋巴细胞增殖反应降低,脾细胞分泌IL-2和IFN-γ水平降低,脾细胞CD4~+/CD8~+比值下降(P<0.05);与模型组比较,ABP-AW1 250和500 mg·kg~(-1)可促进免疫低下模型小鼠Con A和LPS分别诱导的T淋巴细胞增殖反应和B淋巴细胞增殖反应(P<0.05),显著增加脾细胞IL-2和IFN-γ水平(P<0.05),明显逆转免疫低下小鼠脾细胞CD4~+/CD8~+比值的下降(P<0.05)。结论 ABP-AW1对免疫功能低下小鼠具有一定的免疫增强作用。     

新疆软紫草多糖对小鼠免疫功能的影响

目的:研究新疆软紫草多糖(ARPS)对环磷酰胺(CTX)致小鼠免疫功能低下的影响。方法:采用腹腔注射CTX制造小鼠免疫损伤模型,同时应用软紫草多糖100(低)、200(中)、300(高)mg·kg-1 3个剂量给小鼠连续灌胃7 d,观察其对小鼠胸腺指数、脾脏指数、巨噬细胞吞噬指数、血清溶血素水平和淋巴细胞增殖率等指标的影响。结果:ARPS可提高免疫低下小鼠的脏器指数、吞噬指数和血清溶血素水平,可以改善免疫抑制小鼠低下的脾淋巴细胞增殖反应,且以ARPS 200 mg·kg-1剂量组作用较为显著。结论:ARPS对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠具有一定免疫增强作用。     

牛膝多糖衍生物对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生IL-2和TNF-α的影响

目的研究牛膝多糖硫酸酯(S-AbP)和磷酸酯(P-AbP)衍生物对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生IL-2和TNF-α的影响。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测淋巴细胞增殖,ELISA法测定培养上清液中IL-2和TNF-α的含量。结果S-AbP和P-AbP均能剂量依赖性地促进小鼠脾淋巴细胞增殖,S-AbP和P-AbP的促增殖活性较AbP强。P-AbP显著诱导脾淋巴细胞分泌TNF-α,对IL-2的分泌无明显影响。S-AbP能诱生较高含量的IL-2,而对TNF-α的分泌无明显影响。结论S-AbP和P-AbP较牛膝多糖能更有效地促进淋巴细胞增殖,还可以分别通过IL-2和TNF-α发挥免疫调节作用。     

板蓝根化学成分研究

目的从板蓝根中分离化学成分。方法板蓝根95%乙醇提取物经硅胶吸附,不同溶剂洗脱部分经硅胶柱层析反复分离纯化,测定所得化合物的理化常数和波谱数据,鉴定其化学结构。结果从氯仿及正丁醇部位分离得5个化合物,分别鉴定为4—(1,2,3—三羟基丙基)—2,6—二甲氧基苯—1—O—β—D—葡萄糖苷(Ⅰ)、香草醛(Ⅱ)、甘露醇(Ⅲ)、琥珀酸(Ⅳ)、苯甲酸(Ⅴ)。结论化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ为首次从板蓝根药材中分离,具有一定的参考价值。     

褪黑素和哌替啶的耐受性及对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响

采用热板法测定小鼠痛阈，发现ｉｐ褪黑素（ＭＴ）４０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１连续６ｄ，镇痛作用持续、明显；ｉｐ哌替啶４０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１连续６ｄ，镇痛作用逐渐减弱，至ｄ６时已无镇痛作用。ｄ７ｉｐＭＴ和哌替啶同上剂量１ｈ时测定小鼠ＣｏｎＡ诱导的脾淋巴细胞增殖反应，发现ＭＴ能明显提高淋巴细胞增殖反应，而哌替啶对小鼠脾淋巴细胞增殖反应有抑制趋向。结果提示：ＭＴ不同于哌替啶无耐受性，且能促进脾淋巴细胞功能。     

炎琥宁大鼠在体肠吸收实验研究

目的考察炎琥宁在大鼠小肠中的吸收状况,为炎琥宁口服肠溶制剂的制备提供理论依据。方法采用大鼠在体肠循环法,通过测定各时间点炎琥宁的剩余药量计算吸收速率。结果低、中、高(6μg.mL-1、1 mg.mL-1和1.4mg.mL-1)三种浓度炎琥宁溶液在小肠的吸收速率(Ka)分别为1.64×10-2、5.87×10-3和8.26×10-3;吸收率分别为89%、55%和69%。1 mg.mL-1炎琥宁溶液在小肠的不同部位(十二指肠、空肠、回肠)吸收速率分别为1.11×10-2、1.20×10-2和0,吸收率分别为86%、0.86%和0。结论炎琥宁在小肠有较好的吸收,低浓度吸收优于高浓度,因此,该药适合制备小肠定位释放的缓控释制剂。     

大孔吸附树脂分离纯化大青叶有机酸部位的实验研究

目的:应用大孔吸附树脂分离纯化大青叶有机酸部位。方法:大青叶以70%乙醇(pH=2)索氏提取,以邻氨基苯甲酸为考察指标,优选最佳吸附树脂并采用正交试验优化影响树脂吸附的重要因素,确定其合理工艺流程。结果:以HPD100型树脂对大青叶中有机酸组分的吸附与解吸性能较好,采用3BV(树脂床体积)60%乙醇易于洗脱;正交试验结果表明以药液中邻氨基苯甲酸浓度为0.18mg.mL-1、pH3.5及洗脱流速为2BV.h-1的参数组合应用效果良好,经济省时。结论:应用HPD100型大孔吸附树脂分离纯化大青叶中有机酸活性部位,其综合性能良好,具有一定的药用前景。     

白芍总甙、芍药甙和白芍总甙去除芍药甙对佐剂性关节炎大鼠的免疫调节作用

福氏完全佐剂致炎后ｄ１８，佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠刀豆素Ａ（３ｍｇ·Ｌ－１）诱导的脾淋巴细胞增殖反应显著低于正常对照水平，脂多糖（６ｍｇ·Ｌ－１）诱导的大鼠腹腔巨噬细胞（ＰＭΦｓ）产生ＩＬ－１显著高于正常对照大鼠。０．５～３１２．５ｍｇ·Ｌ－１白芍总甙（ＴＧＰ）、芍药甙（ＰＦ）和白芍总甙去除芍药甙（ＴＧＰ－ＰＦ）均能浓度依赖性地增强ＡＡ大鼠低下的脾淋巴细胞增殖反应（量效曲线均呈钟罩形），降低ＡＡ大鼠ＰＭΦｓ过度产生ＩＬ－１（量效曲线均呈倒钟罩形）。其中，２．５～６２．５ｍｇ·Ｌ－１ＴＧＰ的调节作用显著强于ＰＦ和ＴＧＰ－ＰＦ各等剂量组。这些结果表明，上述三种药物均具有浓度和机能依赖性的双向免疫调节作用，ＴＧＰ的作用最强。     

蟾酥不同溶剂萃取物对小鼠免疫细胞功能的影响

目的对蟾酥不同溶剂萃取物进行初步免疫活性筛选。方法用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖反应和腹腔巨噬细胞(M)能量代谢水平,中性红吞噬法测定腹腔M的吞噬功能,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群和S期细胞的百分率。结果蟾酥各萃取层中的水层(VB2)、乙酸乙酯层(VB4)及总水提蛋白层(VB6)分别在1.25～30、10～20和10～40mg.L-1浓度范围内增强刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应;其他3组(VB1,VB3和VB5)蟾酥提取物单独作用或与ConA联合作用对小鼠脾淋巴细胞增殖反应无明显影响;VB2,VB4和VB6在1.25～40mg.L-1浓度范围内可增强ConA诱导的小鼠腹腔M能量代谢水平和吞噬中性红的能力。在10mg.L-1时,VB2,VB4和VB6可协同ConA增加脾淋巴细胞中S期细胞百分率,并降低CD4+CD8-和CD4-CD8+、增加CD4+CD8+T淋巴细胞亚群百分率。结论蟾酥不同溶剂萃取物VB2,VB4和VB6体外可协同ConA促进脾淋巴细胞和腹腔M的免疫功能,其机制可能与协同ConA促进DNA合成并活化CD4+CD8-T细胞表达CD8a抗原、增加兼具辅助和细胞毒作用的CD4+CD8+T淋巴细胞亚群的数量有关。     

牛磺鹅去氧胆酸对小鼠免疫功能的调节作用

目的探讨牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)对体外培养的小鼠免疫细胞及其机体免疫功能的影响。方法实验中设计了0.043、0.065、0.1、0.153和0.189g.kg-15个体内给药的剂量梯度;体外设计了终浓度为0.01、0.05、0.1、1和10mg·L-15个浓度梯度。开展TCDCA对小鼠体外腹腔巨噬细胞、脾淋巴细胞、小鼠正常机体、免疫抑制模型以及神经-内分泌-免疫调节系统的影响研究。结果TCDCA对小鼠正常机体具有药物剂量依赖性的向下抛物线形式的双向免疫调节作用;0.1g·kg-1TCDCA对采用环孢菌素A和环磷酰胺制成的免疫抑制模型具有明显的恢复作用;TCDCA可以直接作用于体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞,并对这两种免疫细胞表现出了药物浓度依赖性的基本为向上抛物线形式的免疫调节作用;0.1g·kg-1TCDCA可以极显著地提高小鼠机体神经—内分泌—免疫调节系统皮质醇的含量。结论TCDCA对小鼠免疫功能具有明显的调节作用。     

板蓝根挥发油成分的GC/MS分析

目的:建立以气相色谱-质谱联用技术(GC/MS)分析鉴定板蓝根挥发油成分的方法。方法:采用水蒸气蒸馏法从板蓝根中提取挥发油,色谱柱为OV-1柱,流速为1.0mL.min-1,质谱采用EI离子源;通过NIS107数据系统分析鉴定板蓝根挥发油成分。结果:共分离得到22个色谱峰,鉴定出19个化合物,占总量的90.51%,其中含量最高的是十六酸,约占总量的38.52%。结论:本试验为板蓝根的综合利用提供了初步的试验数据。     

浒苔多糖的分离纯化及其对小鼠淋巴细胞活性的影响

为了探讨浒苔(Enteromorpha)多糖的免疫调节活性,采用Sevage法,Sephacryl-300 分子筛层析以及乙醇分级沉淀法获得四个浒苔多糖组分EP,EP1、EP2和EP3,比较四种多糖对体外培养的小鼠T、B淋巴细胞增殖影响;同时观察作用效果较强的EP2在T、B淋巴细胞中的分布及其对细胞RNA合成的影响。结果表明,EP、EP1、EP2和EP3中单糖、糖醛酸、硫酸根含量存在差异,均能促进对B淋巴细胞以及ConA或LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖,且EP2的作用效果最好;经EP2处理的T、B淋巴细胞或同时用EP2和丝裂原(ConA或LPS)处理的T、B淋巴细胞体积明显增大,RNA合成增加,B淋巴细胞有母细胞化趋势。由此可见,浒苔多糖能调节小鼠淋巴细胞活性,促进丝裂原诱导的淋巴细胞分化和免疫应答,有望成为一种新的动物免疫增强剂。