氟伐他汀、苯那普利对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞L型钙通道α1C表达的影响

背景在血管平滑肌细胞(VSMC)中,L 型钙通道是提高细胞内游离钙离子浓度的主要途径,L 型钙通道中的α1亚单位(LTCCα1C)是决定 L 型钙通道电压依赖性和药物敏感性的重要部位。目的通过比较LTCCα1C亚基在正常大鼠和自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉 VSMC 表达的差异,以及经苯那普利和氟伐他汀干预后的变化.来阐明氟伐他汀、苯那普利抗高血压血管重构的分子机制。方法 12周龄雄性 SHR 24只,随机分为空白对照组(SHRc 组,n=8)、氟伐他汀治疗组[SHRf 组:20 mg/(kg·d),n=8]、苯那普利组[SHRb 组:10 mg/(kg·d),n=8],年龄和体质量匹配的 Wistar-Kyoto(WKY)大鼠为正常对照组(n=8)。灌胃法给药18周后苏木精一伊红染色计算胸主动脉血管壁/腔面积,RT-PCR 法、免疫组织化学法、Western blotting 法比较各组大鼠胸主动脉 LTCCα1C 的表达。结果 SHRc 组的胸主动脉壁腔面积比(壁/腔)与 WKY 组比较显著增高(0.30±0.01比WKY:0.1 9±0.02,P<0.05)。氟伐他汀和苯那普利降低大鼠胸主动脉的壁/...     

苯那普利与氟伐他汀单用及联用对阿霉素肾病大鼠血清脂联素的影响

目的探讨苯那普利与氟伐他汀单用及联用对阿霉素肾病大鼠脂联素的影响。方法雄性SD大鼠120只,适应性饲养2周后,随机抽取18只为正常对照组,另外102只制作阿霉素肾病模型。84只造模成功大鼠随机分为四组:模型组(等容积生理盐水,n=21)、苯那普利组[苯那普利3.5mg/(kg.d),n=21],氟伐他汀组[氟伐他汀10mg/(kg.d),n=21]和苯那普利与氟伐他汀联合治疗组[苯那普利3.5mg/(kg.d)+氟伐他汀10mg/(kg.d),n=21]。分别于2、6及10周末,遵循随机化原则,按n=6分层抽取各组样本,收集24h尿液、血液标本待测。结果与模型组相比,苯那普利组、氟伐他汀组及联合治疗组血清甘油三酯、总胆固醇、脂联素浓度均降低,24h尿蛋白减少;联合治疗组更为明显;相关分析表明,蛋白尿、甘油三酯和总胆固醇分别与血脂联素浓度呈明显正相关关系(P<0.01)。结论苯那普利与氟伐他汀可减轻阿霉素肾病大鼠蛋白尿、降低血清甘油三酯、总胆固醇及脂联素浓度,联用时疗效更明显。提示苯那普利与氟伐他汀至少部分通过降低脂联素水平而减轻肾脏损害。     

阿托伐他汀改善自发性高血压大鼠的心肌脂质代谢和抑制心肌肥厚

目的通过研究阿托伐他汀对自发性高血压大鼠(SHR)心肌中PPARα、CPTⅠ表达和心肌脂质代谢变化及心肌肥厚指标的影响,探讨阿托伐他汀对SHR心肌肥厚的改善作用及其机理。方法观察阿托伐他汀灌胃10周的SHR心肌肥厚指标、血清和心肌游离脂肪酸含量及心肌PPARα、CPTⅠmRNA表达的改变。结果与WKY(n=6)比较,SHR(n=6)心肌中PPARαmRNA(0.285±0.062比WKY:0.478±0.093,P<0.01)与CPTⅠmRNA(0.795±0.139比WKY:1.115±0.109,P<0.01)表达减少,血清及心肌中游离脂肪酸含量增加,分别为[(798.2±38.0比WKY:354.7±27.7)nmol/L,P<0.01]和[(635.0±77.4比WKY:245.3±47.3)nmol/L,P<0.01],心室质量指数增加(VWI)[(3.16±0.08比WKY:2.99±0.10)g/kg,P<0.05],心肌细胞直径增加(TDM)[(21.3±1.3比WKY:18.18±0.75)μm,P<0.01];阿托伐他汀50mg/kg·d治疗10周后(n=6),心肌中PPARα、CPTⅠmRNA表达增加,心肌中游离脂肪酸含量明显降低、VWI降低,TDM降低。结论阿托伐他汀能够增加心肌中PPARα、CPTⅠmRNA表达,降低心肌中游离脂肪酸含量,改善心肌脂质代谢障碍,可能是其抑制心肌肥厚发生与发展的机制之一。     

清热燥湿化瘀法对高脂血症大鼠IL-1β及TNF-α水平的影响

目的观察清热燥湿化瘀中药复方预防性给药对实验性高脂血症大鼠胸主动脉白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达的影响,探讨清热燥湿化瘀法防治动脉粥样硬化的可能机制。方法50只大鼠随机分为正常组、模型组、氟伐他汀对照组、清热燥湿化瘀中药复方组。高脂饲料造模,于第5周同时预防性给予氟伐他汀及中药复方,12周后测定各组大鼠胸主动脉IL-1β、TNF-α蛋白表达。结果与正常组比较,模型组IL-1β、TNF-α表达明显升高(P<0.01),中药组和西药组均能显著性降低TNF-α蛋白表达,但两组间无统计学意义(P>0.05);而对于IL-1β表达的影响,中药组较模型组明显降低(P<0.01),中药组和西药组组间有统计学意义(P<0.05)。结论清热燥湿化瘀法及其组方能有效调节实验大鼠血清脂质代谢紊乱,抑制炎症因子的表达,改善血管内皮细胞功能,而发挥抑制AS的作用。     

阿托伐他汀对家兔动脉粥样硬化VSMC凋亡的影响及其相关分子机制

目的分析家兔动脉硬化时大电导钙激活钾通道(BKCa)的表达以及阿托伐他汀干预后的变化,探讨阿托伐他汀对家兔动脉硬化血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的影响及其相关分子机制。方法家兔分为正常组、动脉粥样硬化组、阿托伐他汀组,HE染色观察家兔动脉粥样硬化病变,TUNEL检测VSMC凋亡并计算凋亡指数(AI),原位杂交法检测兔胸主动脉BKCaβ亚单位KCNMB1基因的表达,蛋白印迹法检测磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)的表达。结果动脉粥样硬化组胸主动脉内膜显著增厚,呈较典型的动脉粥样硬化病变;阿托伐他汀组VSMC凋亡指数较正常组、动脉粥样硬化组明显升高(36.51%±1.53%比6.80%±1.08%、27.83%±1.36%,P0.01);动脉粥样硬化组KCNMB1基因的表达较正常组明显下调(105.12±5.50比147.33±5.76,P0.01),而阿托伐他汀组KCNMB1基因的表达较动脉粥样硬化组明显增加(116.43±6.92比105.12±5.50,P0.01);阿托伐他汀组p-ERK1/2表达量低于动脉粥样硬化组(0.90±0.14比3.48±0.91,P0.01)。结论阿托伐他汀诱导动脉粥样硬化VSMC凋亡,该现象可能与其上调BKCa的KCNMB1基因表达及抑制ERK信号途径磷酸化有关。     

阿托伐他汀对高血压大鼠动脉血压和血管平滑肌细胞离子泵活性的影响

目的探讨阿托伐他汀对自发性高血压大鼠的动脉血压及血管平滑肌细胞离子泵活性的影响。方法选用12周龄自发性高血压大鼠12只,随机分为阿托伐他汀治疗组(简称阿托伐他汀组,n=6)和蒸馏水组(n=6),并以正常血压大鼠作为对照组。阿托伐他汀组大鼠给以阿托伐他汀[50mg(kg·d)]加适量蒸馏水灌胃12周。观察给药前后大鼠尾动脉血压的变化,测定大鼠血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇浓度,以及胸主动脉平滑肌细胞Na K ATP酶和Ca2 Mg2 ATP酶活性。结果阿托伐他汀组动脉血压显著低于蒸馏水组(161.8±9.9比192.9±10.4,P<0.05);阿托伐他汀组大鼠胸主动脉平滑肌细胞Na K ATP酶和Ca2 Mg2 ATP酶活性明显高于蒸馏水组(5.20±0.54比3.06±0.42,P<0.01;4.62±0.35比2.98±0.17,P<0.05),略低于对照组,而蒸馏水组则显著低于对照组(3.06±0.42比5.92±0.31,P<0.01;2.98±0.17比4.86±0.26,P<0.01)。Na K ATP酶活性、Ca2 Mg2 ATP酶活性与血压呈显著负相关(r=-0.426、r=-0.359,P<0.01)。结论长期应用阿托伐他汀可以显著降低自发性高血压大鼠血压。阿托伐他汀可能通过增高血管平滑肌细胞离子泵活性而影响血压形成的过程。     

复方丹参滴丸对自发性高血压大鼠血管重构的影响

目的 探讨复方丹参滴丸(DSP)对自发性高血压大鼠(SHR)血管重构的影响.方法 将32只8周龄雄性SHR随机分为4组,DSP小剂量组、DSP大剂量组、福辛普利组、SHRc组.另选8周龄雄性Wistar大鼠为正常对照组.5组分别用灌胃法给药或给蒸馏水8周,测定大鼠尾动脉收缩压、胸主动脉与肠系膜动脉中层壁厚(M)、管腔内径(L)及二者的比值(M/L).结果 与Wistar组比,SHRc组主动脉中层壁[Wistar组:(85±10) μm比SHRc组(120±7) μm]与肠系膜动脉中层壁[Wistar组:(61±8) μm比SHR模型组(84±8) μm]显著增厚(P<0.05),中层壁厚与管腔内径比值(M /L)也显著增大(P<0.05);与SHRc组比,DSP大剂量组[肠系膜动脉M:(65±5) μm;主动脉M:(94±7) μm]、小剂量组[肠系膜动脉M:(70±3) μm;主动脉M:(97±9) μm]与福辛普利组[肠系膜动脉M:(64±7) μm;主动脉M:(93±6) μm]SHR主动脉与肠系膜动脉的M及M /L均明显减轻(P<0.05),而各治疗组间无统计学意义(P>0.05).结论 复方丹参滴丸可抑制SHR的血管壁重构.     

依折麦布和瑞舒伐他汀通过肝X受体α-三磷酸腺苷结合盒转运体A1对胆固醇的影响

目的研究瑞舒伐他汀、依折麦布及两者联合是否通过肝X受体α(LXRα)-三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)信号通路影响血管平滑肌细胞(VSMC)来源的泡沫细胞胆固醇水平。方法取大鼠胸主动脉3~5代VSMC进行实验,分为9组:对照组,不干预,仅单独培养VSMC 48h;模型组,用氧化型LDL(ox-LDL 50μg/ml)诱导VSMC,单独培养48h;依折麦布A组(3.0μmol/L)、依折麦布B组(10.0μmol/L)、依折麦布C组(30.0μmol/L)、瑞舒伐他汀A组(0.1μmol/L)、瑞舒伐他汀B组(1.0μmol/L)及瑞舒伐他汀C组(5.0μmol/L)在用ox-LDL 50μg/ml诱导VSMC基础上,分别加入不同剂量的依折麦布或瑞舒伐他汀培养24h;联合组,在用ox-LDL 50μg/ml诱导VSMC基础上,加入依折麦布30.0μmol/L和瑞舒伐他汀5.0μmol/L,培养24h。检测各组TC、游离胆固醇(FC)及胆固醇酯(CE)水平及各组细胞LXRα、ABCA1 mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组TC、FC、CE水平显著升高,LXRα、ABCA1mRNA及蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,瑞舒伐他汀C组、依折麦布C组及联合组TC、FC、CE水平显著减少,LXRα、ABCA1mRNA及蛋白表达显著增加(P0.05);且联合组LXRα、ABCA1mRNA及蛋白表达水平明显高于依折麦布各组及瑞舒伐他汀各组(P0.05)。结论瑞舒伐他汀、依折麦布及2个最适浓度的联合均可以通过上调LXRα、ABCA1表达,促进泡沫细胞中ABCA1介导的胆固醇的逆转运,减少胆固醇在细胞中蓄积,且联合组较单药组效果更显著。     

Urantide对实验性动脉粥样硬化大鼠白细胞介素-6表达的影响

目的 观察Urantide对大鼠动脉粥样硬化白细胞介素-6(IL-6)表达的影响.方法 采用高脂饲料喂养及腹腔注射VD3损伤动脉内膜的方法建立大鼠动脉粥样硬化模型,随机分为4组:对照组、模型组、氟伐他汀组、Urantide组,免疫组织化学法检测主动脉壁内IL-6的表达水平,以Introduction to Image-Proplus 6.0软件进行图像分析;体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC),随机分为4组:对照组、尾加压素Ⅱ组、氟伐他汀组、Urantide组,酶联免疫吸附法检测各组IL-6的浓度.结果 在胸主动脉内膜及中膜斑块内,模型组IL-6阳性颗粒较对照组微量表达,Urantide各实验组及氟伐他汀均可增加IL-6的表达;Urantide各浓度组对VSMC培养上清中IL-6的表达均有下调趋势.结论 IL-6在体内和体外的实验结果并不相一致,体内实验表现为抗炎症性,Urantide对其表达无下调作用;而体外实验其表现为致炎性,Urantide对IL-6表达有下调作用.     

阿托伐他汀改善自发性高血压大鼠的心肌脂质代谢和抑制心肌肥厚

目的 通过研究阿托伐他汀对自发性高血压大鼠(SHR)心肌中PPARα、CPT-Ⅰ表达和心肌脂质代谢变化及心肌肥厚指标的影响,探讨阿托伐他汀对SHR心肌肥厚的改善作用及其机理.方法 观察阿托伐他汀灌胃10周的SHR心肌肥厚指标、血清和心肌游离脂肪酸含量及心肌PPARα、CPT-ⅠmRNA表达的改变.结果 与WKY(n=6)比较,SHR(n=6)心肌中PPARα mRNA(0.285±0.062比WKY:0.478±0.093,P＜0.01)与CPT-Ⅰ mRNA(0.795±0.139比WKY:1.115±0.109,P＜0.01)表达减少,血清及心肌中游离脂肪酸含量增加,分别为[(798.2±38.0比WKY:354.7±27.7)nmol/L,P＜0.01]和[(635.0±77.4比WKY:245.3±47.3)nmol/L,P＜0.01],心室质量指数增加(VWI)[(3.16±0.08比WKY:2.99±0.10)g/kg,P＜0.05],心肌细胞直径增加(TDM)[(21.3±1.3比WKY:18.18±0.75)μm,P＜0.01];阿托伐他汀50 mg/kg·d治疗10周后(n=6),心肌中PPARα、CPT-Ⅰ mRNA表达增加,心肌中游离脂肪酸含量明显降低、VWI降低,TDM降低.结论 阿托伐他汀能够增加心肌中PPARα、CPT-Ⅰ mRNA表达,降低心肌中游离脂肪酸含量,改善心肌脂质代谢障碍,可能是其抑制心肌肥厚发生与发展的机制之一.     

氟伐他汀对动脉粥样硬化大鼠胸主动脉肾上腺髓质素受体表达的影响

目的探讨肾上腺髓质素受体（ADMR）在动脉粥样硬化（AS）大鼠胸主动脉病变时的变化及氟伐他汀对ADMR表达的影响。方法将SD大鼠随机分为3组:正常对照组、AS模型组和氟伐他汀干预组。采用喂养高脂饲料（正常饲料基础上加入30g/kg胆固醇、5g/kg胆酸钠、2g/kg丙基硫氧嘧啶、50g/kg精制糖、100g/kg猪油）加维生素D3制备AS动物模型,氟伐他汀20mg/（kg·d）灌胃12周。用RT-PCR和Western印记法分别检测各组胸主动脉中ADMR mRNA和蛋白的表达情况。结果氟伐他汀干预组大鼠与AS组比较,体质量差异无统计学意义;与AS组相比,干预组三酰甘油（TG）、总胆固醇（CHOL）显著下降（P<0.01）;与正常对照组相比,模型组TG、CHOL明显升高（P<0.05）;与正常对照组相比,模型组、干预组血钙均明显升高（P<0.05）。氟伐他汀干预组大鼠胸主动脉中ADMR mRNA及蛋白的表达均显著高于AS组（P<0.05）。结论氟伐他汀可上调AS大鼠胸主动脉ADMR基因和蛋白的表达,ADMR可能参与了氟伐他汀抗动脉粥样硬化的作用。     

增龄和高血压经PI3K/Akt和MAPK信号通路间平衡介导调控血管平滑肌细胞的表型转换

目的探究增龄和高血压对胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)表型转换的影响及磷脂酰肌醇激酶(PI3K/Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对VSMC表型的调控。方法选取1、3、9、16月龄的雄性Wistar Kyoto大鼠(WKY)和自发性高血压大鼠(SHR)各12只,尾动脉无创测定血压,取各组大鼠的胸主动脉进行实验。HE染色测量胸主动脉的管壁厚度;免疫组织化学染色检测VSMC表型标志蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMactin)、调宁蛋白、骨桥蛋白(OPN)的表达和分布;Western blot检测VSMC表型标志蛋白α-SM-actin、调宁蛋白、OPN及信号蛋白p-Akt、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、p-42/44ERK、p-p38MAPK的表达量。结果 HE染色结果显示,增龄导致管壁厚度增加,且在9月龄时WKY和SHR出现显著差异(P0.01)。免疫组织化学染色和Western blot结果表明,3月龄后,WKY和SHR的α-SM-actin、调宁蛋白表达量随月龄增加出现下调,而OPN出现上调;p-Akt、eNOS的蛋白表达量随月龄增加逐渐下调,p-42/44ERK、p-p38MAPK蛋白表达量随月龄增长逐渐上调,且3月龄时两组已有显著差异(P0.01)。结论增龄和高血压均导致大鼠胸主动脉VSMC收缩表型标志蛋白α-SM-actin、调宁蛋白的表达下调,合成表型标志蛋白OPN的表达上调,二者的交互作用更显著。VSMC的表型转换可能是通过PI3K/Akt和MAPK信号通路间的平衡作用进行调控的。     

镁离子对高磷诱导的大鼠胸主动脉血管环钙化的影响

目的探讨不同浓度镁离子对高磷诱导的大鼠胸主动脉血管环钙化的影响。方法体外分离大鼠胸主动脉血管环,将其随机分为正常对照组(含10%胎牛血清DMEM培养基)、高磷组(含10 mmol/Lβ-甘油磷酸高磷培养基)和镁干预组(高磷培养基加不同浓度硫酸镁,使镁离子终浓度分别为1、2、3 mmol/L,镁干预组Ⅰ~Ⅲ)。给予14天干预后,采用von Kossa染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测胸主动脉血管环钙化情况;免疫组织化学方法检测胸主动脉血管环L型钙通道α1c(LTCCα1c)、LTCCβ3亚基、Runt相关转录因子2(Runx2)和平滑肌22α(SM22α)表达情况。结果与正常对照组比较,高磷组钙沉积增加,镁干预组随镁离子浓度增大棕黑色颗粒沉积逐渐减少,钙含量测定结果与之相一致(P0.05)。Runx2、LTCCα1c、LTCCβ3亚基的表达除镁干预组Ⅲ与正常对照组差异无统计学意义外,其余各组均高于正常对照组(P0.05);镁干预组随镁离子浓度增大,Runx2、LTCCα1c、LTCCβ3亚基的表达水平均逐渐降低,且均低于高磷组(P0.05)。SM22α表达除镁干预组Ⅲ与正常对照组差异无统计学意义外,其余各组均低于正常对照组(P0.05)。相关性分析显示,LTCCβ3、LTCCα1c亚基均与Runx2表达呈正相关(r=0.692,P0.001;r=0.716,P0.001),Runx2与SM22α表达呈负相关(r=-0.671,P=0.001)。结论镁离子在一定程度上可以抑制高磷诱导的大鼠胸主动脉血管环钙化,其可能通过下调LTCCα1c、LTCCβ3亚基表达,抑制VSMCs向成骨/成软骨表型转化,进而抑制血管环钙化的发生。     

阿托伐他汀改善自发性高血压大鼠心室重构的机制

目的 研究阿托伐他汀(Ato)对自发性高血压大鼠(SHR)心室重构的作用,并探讨其作用机制.方法 16周龄雄性SHR 40只,随机分为4组,即SHR组、阿托伐他汀10 mg组(Ato-1组)、25 mg组(Ato-2组)和50 mg组(Ato-3组).Wistar-Kyoto(WKY)大鼠10只作为正常对照组(WKY组).Ato-1组、Ato-2组和Ato-3组每日分别用阿托伐他汀10、25、50 mg/kg灌胃.实验8周后,测定血液动力学指标,左室质量指数(LVMI),RT-PCR检测心肌转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA、Smad3 mRNA和Smad7 mRNA.结果 SHR组心室功能障碍,LVMI明显增高[(3.20±0.21)mg/g比WKY:(2.10±0.14)mg/g](P＜0.01),心肌TGFβ1 mRNA(125.4±3.2比WKY:73.6±2.1,P＜0.01)、Smad3 mRNA(6.40±0.43比WKY:3.10±0.75,P＜0.01)增加,心肌Smad7 mRNA(2.30±0.86比WKY:4.10±1.23,P＜0.01)降低.Ato呈剂量依赖性改善左室功能,降低SHRLVMI,降低心肌TGFβ1 mRNA、Smad3 mRNA,增加心肌Smad7 mRNA.结论 阿托伐他汀可能通过下调心肌TGFβ1 mRNA、Smad3 mRNA和上调心肌Smad7 mRNA,改善SHR心室重构.     

基于Nrf2通路研究丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠血压及血管活性物质的影响

目的探讨丹参酮ⅡA通过转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)通路对自发性高血压大鼠(SHR)的疗效及血管活性物质的影响。方法15只健康雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠为空白对照组,60只雄性自发性高血压大鼠随机分为自发性高血压组、丹参酮ⅡA低剂量组(25 mg/kg)、丹参酮ⅡA高剂量组(50 mg/kg)和苯那普利组(10 mg/kg)。连续灌胃8周,在1周、5周、8周时测量各组大鼠收缩压情况;苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠胸主动脉形态学;眼底观察各组大鼠视网膜动脉变化;酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠血清中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素(ET)、去甲肾上腺素(NE)和血栓素B₂(TXB₂)的含量变化;免疫组化检测各组大鼠胸主动脉中AT1R的阳性表达;免疫印迹法(Western Blot)检测各组大鼠胸主动脉中Nrf2、血红素氧合酶1(HO-1)、依赖还原型辅酶/Ⅱ醌氧化还原酶Ⅰ(NQO1)蛋白表达水平。结果与自发性高血压组相比,丹参酮ⅡA低剂量组、丹参酮ⅡA高剂量和苯那普利组均能降低大鼠收缩压(P<0.05);丹参酮ⅡA低剂量组、丹参酮ⅡA高剂量和苯那普利组均能改善血管内皮损伤和提高血管弹性;与空白对照组比较,自发性高血压组大鼠视网膜动脉直径略窄,丹参酮ⅡA低剂量组、丹参酮ⅡA高剂量组和苯那普利组均能使大鼠视网膜动脉直径变宽;自发性高血压组大鼠血清中AngⅡ、ET、NE和TXB₂的含量均明显增加(均P<0.01),丹参酮ⅡA低剂量、丹参酮ⅡA高剂量和苯那普利能降低AngⅡ、ET、NE和TXB₂的含量(均P<0.05或P<0.01);AngⅡ的受体(ATIR)在自发性高血压大鼠胸主动脉中呈阳性表达,在丹参酮ⅡA低剂量组、丹参酮ⅡA高剂量组和苯那普利组中阳性表达降低;自发性高血压组大鼠胸主动脉中Nrf2、HO-1和NQO1的蛋白表达量降低(均P<0.01),丹参酮ⅡA低剂量、丹参酮ⅡA高剂量和苯那普利能提高大鼠胸主动脉中Nrf2、HO-1和NQO1的蛋白表达量(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠具有明显的降压作用,其机制可能与抑制血管活性物质的表达和激活Nrf2通路有关。     

酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响及机制研究

目的探讨酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响及可能机制。方法体外分离培养大鼠VSMCs,采用免疫细胞化学方法鉴定。将VSMCs按随机数字表法分为正常对照组、高磷+p H7.4、高磷+p H7.1和高磷+p H6.8(在高磷培养基的基础上调整p H值为6.8、7.1和7.4三个亚组)。刺激4 d后,采用RT-PCR检测L型钙通道(LTCC)α_(1C)、β_2和β_3亚基,Runt相关转录因子2(Runx2)及Smad1基因的表达;应用钙离子探针Fluo-3/AM检测VSMCs胞外钙离子内流的效应变化。刺激14 d后,对各组细胞进行钙化染色、钙含量和碱性磷酸酶(ALP)活性测定。结果与正常对照组比较,高磷+p H7.4组钙含量、ALP活性、Runx2和Smad1mRNA的表达明显增高(88.26±6.43比22.39±3.19、94.33±3.08比20.39±1.18、0.37±0.02比0.01±0.00、0.65±0.05比0.07±0.01,均为P<0.05);与高磷+p H7.4组比较,高磷+p H7.1组和高磷+p H6.8组的钙含量、ALP活性、Runx2和Smad1mRNA的表达均降低(69.95±1.72和50.74±3.29、51.11±2.05和34.62±1.13、0.25±0.02和0.09±0.01、0.44±0.04和0.23±0.01,均为P<0.05)。与正常对照组比较,高磷+p H7.4组的LTCCβ_3亚基mRNA表达水平增加(0.80±0.01比0.34±0.13,P<0.01),高磷+p H7.1组和高磷+p H6.8组的LTCCβ_3亚基mRNA表达水平均下降(0.64±0.11和0.43±0.01,均为P<0.01)。各组之间LTCCα_(1C)和β_2亚基mRNA的表达差异无统计学意义(P=0.08和0.74)。与正常对照组比较,高磷+p H7.4组的VSMCs胞内钙离子浓度增加(438.33±7.50比149.54±20.89,P<0.05);高磷+p H7.1组和高磷+p H6.8组的VSMCs胞内钙离子浓度均降低(329.66±16.64和234.00±17.43,均为P<0.01)。结论酸性环境可以抑制高磷诱导的大鼠VSMCs钙化,其可能是通过抑制LTCCβ_3亚基表达,降低VSMCs钙离子内流,阻滞VSMCs发生表型转化来实现的。     

缬沙坦、苯那普利对自发性高血压大鼠心脏和肾脏AT1受体、AT2受体表达的影响

目的 观察缬沙坦、苯那普利对自发性高血压大鼠(SHR)心脏和肾脏AT1受体(AT1R),AT2受体(AT2R)表达的影响.方法 12周龄雄性SHR 24只,随机分为空白对照组(蒸馏水灌胃,SHRc)、苯那普利组(10 mg·kg-1·d-1,SHRb)、小剂量缬沙坦组(10 mg·kg-1·d-1,SHRsv)和大剂量缬沙坦组(30 mg·kg-1·d-1,SHmv),每组6只.采用免疫组织化学方法.结果 苯那普利、缬沙坦干预明显降低SHR的血压、心体比和LVMT(P＜0.05),苯那普利干预3个月后SHR心脏、肾脏AT1R的表达均有轻度下降,但不如缬沙坦组明显,其中sHRlv组更显著,缬沙坦干预3个月后明显提高了AT2R在SHR心脏、肾脏中的表达水平(P＜0.05),SHRlv组较sHRsv组更显著,sHRb组无明显改变.结论 苯那普利治疗可下调SHR心脏和肾脏AT1R的表达水平,而对AT2R的表达无明显影响.缬沙坦治疗降低了上述器官组织中AT1R的表达水平,增加了ARR的表达水平,且AT2R表达的上调与血压下降及靶器官保护有关.     

Urantide对实验性动脉粥样硬化大鼠C反应蛋白表达的影响

目的观察urantide对动脉粥样硬化大鼠C反应蛋白表达的影响,探讨其防治动脉粥样硬化的作用机制。方法采用高脂饲料喂养及腹腔注射维生素D3损伤动脉内膜的方法建立大鼠动脉粥样硬化模型,随机分为四组:对照组、模型组、氟伐他汀组、urantide组,免疫组织化学法检测主动脉壁内C反应蛋白的表达水平。体外培养血管平滑肌细胞,随机分为四组:对照组、尾加压素Ⅱ组、氟伐他汀组、urantide组,酶联免疫吸附法检测各组培养上清中C反应蛋白浓度。结果在胸主动脉内膜及中膜斑块内,模型组C反应蛋白阳性颗粒较对照组表达明显增加,urantide组及氟伐他汀组C反应蛋白的表达减少;urantide各浓度组对血管平滑肌细胞培养上清中C反应蛋白的表达均有下调趋势,其中10-6mol/L urantide下调作用最强(P<0.01)。结论尾加压素Ⅱ在动脉粥样硬化中能促进炎症反应标志因子C反应蛋白的大量表达,而这种促进作用可以被尾加压素Ⅱ受体拮抗剂urantide抑制,该研究为临床应用urantide治疗动脉粥样硬化提供新的视角和实验依据。     

血管紧张素Ⅱ1a型受体在不同周龄自发性高血压大鼠血管组织中的表达及其甲基化状态的研究

目的通过对比观察不同周龄自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压对照大鼠(WKY)胸主动脉和肠系膜动脉中血管紧张素Ⅱ1a型受体(AT1aR)的mRNA和蛋白质表达及其甲基化水平的差异,探讨DNA甲基化与AT1aR表达及血压状态的内在联系。方法以同龄WKY大鼠为正常对照,分别从转录和翻译水平检测处于高血压前期(4周龄)、高血压发展期(10周龄)和高血压稳定形成期(20周龄)SHR胸主动脉和肠系膜动脉内AT1aR的表达变化,同时应用重亚硫酸盐修饰测序法评估AT1aR基因启动子区的甲基化状况。结果 SHR和WKY大鼠胸主动脉和肠系膜动脉内AT1aR的mRNA和蛋白质表达水平均随周龄增长而递增;自10周龄起,SHR胸主动脉和肠系膜动脉内AT1aR的mRNA和蛋白质表达水平高于同周龄的WKY大鼠,20周龄时差异有统计学意义(mRNA:胸主动脉为1.607±0.084比1.227±0.079,肠系膜动脉为1.713±0.103比1.327±0.066;蛋白:胸主动脉为1.594±0.071比1.237±0.064,肠系膜动脉为2.103±0.115比1.300±0.089;均P0.01);SHR胸主动脉和肠系膜动脉内AT1aR基因启动子区两个CpG岛随着周龄的增长和血压的升高均发生去甲基化,自10周龄起SHR AT1aR基因启动子区甲基化水平已经开始低于同周龄的WKY大鼠,20周龄时差异有统计学意义(胸主动脉总甲基化率:1.4%比10.9%;肠系膜动脉总甲基化率:0.3%比8.0%;均P0.01)。结论 SHR动脉血管中AT1aR基因启动子区随着年龄的增加去甲基化,可能在影响AT1aR的表达和原发性高血压的发病机制中起到一定作用。     

苯那普利对糖尿病肾病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的调节作用

目的研究苯那普利对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏结缔组织生长因子(CTGF)表达的调节。方法 Wistar大鼠34只,随机分为:对照组、DN、苯那普利组。DN组及苯那普利组大鼠经腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立DN模型。于实验第12周末处死大鼠测量大鼠体质量、空腹血糖、肾功能、尿白蛋白排泄率(UAER)及24 h尿总蛋白。应用免疫组化方法检测肾脏CTGF蛋白表达,并进行半定量分析。结果与对照组相比,DN组大鼠空腹血糖、血尿素氮、血清肌酐、UAER及24h尿总蛋白显著升高(P<0.05或P<0.01);肾脏CTGF表达增加(P<0.05)。DN大鼠苯那普利组各项检测指标均较模型组显著改善(P<0.05或P<0.01)。结论苯那普利可下调DN苯那普利肾组织CTGF的表达,降低蛋白尿,保护肾功能。